猪大肠杆菌的分离鉴定与药物敏感试验3

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仔猪大肠杆菌分离鉴定及药敏试验

１材料与方法
各种药片贴于平板上，每个平板７张药
片，将贴好药片的平板置于３７ ℃ 的恒猪
肠道菌群失调、大肠杆菌过量繁殖是
温箱中培养２４ｈ后观察实验结果并测
其培养特性、形态、染色反应符合大肠杆菌的菌株确定为致病性大肠杆菌。
１－２．３药敏试验：将致病性大肠杆菌
采用世界卫生组织（ＷＨＯ）推荐的Ｋｉｒ－
ｂｙ．Ｂａｕｅｒ氏法ｆ即美国临床实验室标准
１．１．２主要试剂：培养基及细菌鉴定用的生化试剂等购自河南美凯生物科技有限公司。１．１．３供试药片：购自杭州微生物试剂责任有限公司。１．１．４试验动物：清洁级昆明系小白鼠雌雄各半，共２０只。１．１．５器材：蒸汽高压灭菌锅、培养
素，抗生素广泛使用对此病的预防与
控制取得了一定的效果。但由于养殖户的不合理用药．使动物长期服用大量抗菌药物，易破坏肠道正常菌群，增加反复感染和继发感染的几率．加速了猪大肠杆菌耐药性的产生和扩散，从而给该病的防治带了前所未有的困
睑或其它部位水肿、神经症状为主要特征的疾病。仔猪大肠杆菌病在集约

仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验程子兵1 董春霞2石国界3沙里塔那4 马长丽1（1. 塔城地区动物疾控与诊断中心新疆塔城834700；2. 重庆市武隆县畜牧兽医局重庆市武隆县408500；3. 塔城市畜牧兽医工作站新疆塔城834700；4. 额敏县兽医工作站新疆额敏县834600）摘要:对塔城地区一农户饲养猪群中仔猪发生的临床症状以水肿病、白痢、黄痢为特征的病例进行了样品采集，后经麦康凯、伊红美蓝分离培养，糖发酵生化试验、动物试验等结果显示均为大肠杆菌，同时通过药敏试验筛选出敏感抗生素。

关键词：仔猪；大肠杆菌；分离鉴定；药敏试验Abstract：Specimens with dropsy and dysentery clinical symptoms were isolated from one household raises pig group in Tacheng area. By bacteria culture, biochemical test and animal test, the results indicate the bacterium is pathogenic Escherichia Coli. Meanwhile, we ascertain sensitive antibiotics to this E coli by medicine test.Key words:pig; Escherichia Coli; isolate indentify; medicine test仔猪大肠杆菌病是由大肠杆菌引起的肠道传染病，主要表现为仔猪白痢、黄痢和水肿病，其中黄痢多发生于1周内哺乳仔猪，病猪主要表现为排黄色糊状粪便；白痢多发于10～30日龄，病猪主要表现为排乳白色或灰白色腥臭糊状粪便；水肿病多发于断奶仔猪，主要有神经症状、胃壁、肠黏膜等组织水肿，四季均可发生，发病率和致死率高低不等，严重者同窝仔猪中发病率可达90％以上，致死率可达100％，幸存者则影响生长，甚至成为僵猪【l】。

仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

试验研究
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验
廖娟，小春，萌，超，钢★ 任唐伍王
（四川乐山师范学院化学与生命科学学院，乐山６４０）１００
ＤＯ１０３６／．：．９９ＪＩ１ＳＳＮ．６１６２．０１．７０３１７－０７２２０。１
中草药包括天然的动植物类药和矿物质类药，不仅含有丰富的维生素、白质等营养物质，蛋还含有生物碱、甙类、鞣
消化吸收，还刺激动物的免疫机制，提高免疫能力。
１材料及方法
质等，在提高动物的抗病力保护动物健康的同时，高了动提
中草药对杂交肉牛育肥效果观察
何继红，张
摘
令
（贵州省盘县农业局，盘县５３３）５５７
要：试验选购了１￣６月龄，本４１活体重约３０ｇ西杂肉牛２头，据完全随机分组原则平均分成３组进行试验。０ｋ１根结
２染色镜检．２２３生化鉴定．
分离菌株革兰氏染色为阴性小杆菌，两端钝分离出的菌株均能发酵葡萄糖、糖、芽乳麦
圆，多单个存在，与大肠杆菌染色特性相符。糖、甘露醇，均能产酸产气，大多数菌株不利用蔗糖，少数缓
慢发酵，Ｐ实验、Ｖ枸橼酸盐试验均为阴性，吲哚试验、ＭＲ试表１分离菌株的药物敏感性试验结果
仔猪大肠杆菌病俗称白痢、黄痢，由致病性大肠杆菌是引起的急性肠道传染病 ຫໍສະໝຸດ 该疾病是常见且危害性极大的传染

仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性分析

仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性分析吴学敏;陈秋勇;陈如敬;王隆柏;车勇良;王晨燕;严山;刘玉涛;周伦江【摘要】为了研究福建省闽北地区某猪场猪大肠杆菌的耐药情况,通过采集32份发生仔猪黄、白痢的粪便,经麦康凯琼脂培养基分离培养,再经普通肉汤纯培养,用镜检方法、PCR扩增方法和生化试验进行鉴定,结果共分离到29株大肠杆菌.生化试验结果表明,分解甘露醇、葡萄糖、乳糖和麦芽糖产酸产气,V-P试验为阴性,M.R.试验呈阳性,硫化氢试验阴性,枸橼酸盐试验阴性,吲哚试验阳性,硝酸盐试验阳性.药敏试验结果显示,分离的大部分菌株对四环素、林可霉素、先锋霉素Ⅳ耐药;大多数菌株对多黏菌素B、复方新诺明和痢特灵高度敏感.该研究为当地猪场临床用药提供参考,为猪大肠杆菌病的预防控制提供理论依据.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2017(053)010【总页数】4页(P86-89)【关键词】大肠杆菌;分离;鉴定;敏感性【作者】吴学敏;陈秋勇;陈如敬;王隆柏;车勇良;王晨燕;严山;刘玉涛;周伦江【作者单位】福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013【正文语种】中文【中图分类】R378.2+1大肠杆菌是自然界中一种最常见的革兰阴性菌，普遍存在于环境中，在猪的肠道中与猪属于共生情况。

某猪场仔猪大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验

某猪场仔猪大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验鲁志平;庞璞;杨晓玲;孙霖;李云祝;吴显祥【摘要】采集大竹县某养猪合作社疑似发生黄、白痢的仔猪直肠拭子病料,通过病原分离、培养及生化鉴定,得出分离菌为致病性大肠杆菌,是引起该场仔猪腹泻的主要病原.采用E.coli标准抗O型血清凝集试验进行血清型鉴定,得出分离菌株的优势血清型分别为O20、O10l、O141；通过对30种抗生素类药物进行敏感性试验,得出分离的E.coli对复达欣(头孢他啶)、多粘霉素B高度敏感,对其余药物中度敏感或耐药.【期刊名称】《四川畜牧兽医》【年(卷),期】2013(040)006【总页数】3页(P24-26)【关键词】仔猪黄、白痢;大肠杆菌;分离鉴定;药物敏感性【作者】鲁志平;庞璞;杨晓玲;孙霖;李云祝;吴显祥【作者单位】四川省大竹县动物疫病预防控制中心,四川大竹635100;四川省大竹县动物疫病预防控制中心,四川大竹635100;四川省大竹县动物疫病预防控制中心,四川大竹635100;四川省大竹县动物疫病预防控制中心,四川大竹635100;四川省大竹县动物疫病预防控制中心,四川大竹635100;四川省大竹县动物疫病预防控制中心,四川大竹635100【正文语种】中文【中图分类】S858.285.12猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌（Escherichia coli，简写E.coli）某些血清型引起的一种猪肠道传染性疾病，临床上分为仔猪黄痢、仔猪白痢和仔猪水肿病。

随着规模化、集约化养猪业的发展，仔猪细菌性腹泻的发病率越来越高，危害也越来越严重。

为了掌握四川大竹县仔猪大肠杆菌病的流行情况，笔者在辖区内某一养猪合作社的猪场采集了疑似仔猪黄、白痢的病料，并进行了病原分离鉴定及药敏试验等相关研究，为该猪场制定防控措施提供有益参考。

现将有关结果报道如下：1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 病料选取大竹县某养猪合作社规模猪场疑似黄、白痢感染的腹泻仔猪，采用灭菌棉拭子从发病、濒死或死亡仔猪的直肠取样，共采集疑似病料20份，由大竹县动物疫病预防控制中心诊断室保存。

营口地区猪源性大肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性试验

关键词：大肠杆菌；生化试验；药敏试验
中图分类号：￥２．１８８８＋２２
文献标识码：Ａ
文章编号：１７－０１２１）０—０２一ｏ６１５７（０１３ｏ７２
采用牛津杯法对分离出的大肠杆菌做药物敏感仔猪腹泻，患病仔猪排出黄、白色痢疾，后躯污性试验，选择重泻康、复方磺胺甲恶唑、乙酰螺
按照《伯杰氏细菌鉴定手丹
列项目进行生化检测。１７药物敏感性试验－
收稿日期：２１ —０ —１Ｏ１４Ｏ
（第八版）所
试剂枸橼酸
结果一
ＨＳ２
一
ＭＲ
＋
ｖ —Ｐ
一
吲哚尿素酶
＋一
注：＋表示阳性。一表示阴性。
３讨论样品分离结果表明，引起该猪场断奶仔猪腹泻的病原菌为大肠杆菌。药物敏感性表明，该大肠杆菌对目前常用西药不敏感。
大肠杆菌是引起仔猪腹泻最重要的原因之一，
物肠道内大量繁殖，通过抑制有害微生物的定居和繁殖，使有益菌的数量增加、潜在的致病菌数
２１０１年３月，辽宁营口地区某猪场发生断奶
旋霉素、土霉素、黄芪多糖，以上药物均为市售猪场管理人员于发病后３日来我院求诊，经病原常用中、西药物，均按照使用说明配制溶液。药菌鉴定及药物敏感性试验后，采取针对性治疗措物敏感性试验结果以抑菌圈直径大小判断，抑菌施，病情得到有效控制。现将情况报告如下：圈直径＞２ｍ０ｍ为极敏感，抑菌圈直径１２ｍ５０ｍ

一株致仔猪腹泻大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

2021第2期 113一株致仔猪腹泻大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验于新友，李天芝（山东绿都生物科技有限公司，山东滨州 256600）中图分类号：S858.28 文献标志码：Ａ文章编号：1002-1957(2021)02-0113-03摘要从山东滨州某猪场采集腹泻仔猪病料样品，首先进行腹泻性病毒检测排查，后进行细菌分离与鉴定。

结果显示，常见猪群病毒性腹泻检测均为阴性。

病料镜检发现一种革兰氏阴性、两端钝圆、中等大小的杆菌。

分离菌纯化后进行生化试验，发现本菌符合大肠杆菌生化特征，结果表明仔猪腹泻病原为大肠杆菌，血清型鉴定为O149型。

药敏试验表明分离菌对头孢噻呋、恩诺沙星、复方新诺明和阿莫西林高度敏感。

致病性显示分离菌对昆明系小白鼠均具有一定的致病性。

该菌的分离鉴定为自家灭活菌苗的制备提供了候选菌株。

关键词猪；大肠杆菌；分离鉴定；药敏试验Isolation, Identification and Drug Sensitivity Test of an Escherichia Coli Strain from PigletDiarrhea DiseaseYU Xinyou, LI Tianzhi(Shandong Lvdu Bio-technology Co., Ltd., Binzhou 256600, China)Abstract Samples of diarrhea piglets were collected from a pig farm in Binzhou, Shandong Province, and the diarrhea virus was detected and tested. Then bacterial isolation and identification were carried out. The results showed that the detection of common swine viral diarrhea was negative. Microscopic examination of the diseased materials revealed a gram-negative, blunt round, medium-sized bacterium. The results showed that the pathogen of piglet diarrhea was Escherichia coli and the serotype was O149. Drug sensitivity tests showed that the isolated bacteria were highly sensitive to cephalosporine, enosa, compound neonomin and amoxicillin. The pathogenicity showed that the isolated bacteria were pathogenic to kunming mice. The isolation and identification of the bacteria provide a candidate strain for the preparation of inactivation vaccine.Key words pig; Escherichia coli ; isolation and identification; drug sensitivity test 收稿日期：2020-12-08基金项目：山东省现代农业产业技术体系生猪产业创新团队项目（SDAIT-08-17）作者简介：于新友（1983-），男，山东菏泽人，执业兽医师，硕士，主要从事猪病诊断及防控技术研究工作.E-mail：*********************大肠杆菌是自然界中一种常见的革兰氏阴性菌，也是猪只肠道常在菌[1]，血清型众多，致病性大肠杆菌能够产生毒素及黏附因子，可引起猪多种疾病[2]。

仔猪致病性大肠杆菌分离鉴定及药敏试验

仔猪致病性大肠杆菌分离鉴定及药敏试验彭贵青吴斌刘梦元(华中农业大学畜牧兽医学院武汉430070)摘要本试验从20多个猪场中采集腹泻仔猪粪便，进行大肠杆菌的分离培养，经生化鉴定和致病性检测，共获得276株致病性大肠杆菌；并从水肿病猪的水肿液中分离鉴定出4株水肿病致病性大肠杆菌。

对其中112株进行了药敏实验，发现对先锋V、呋喃妥因、痢特灵敏感性较高，对其他抗生素都有不同程度的耐药性；随机抽取10株分别进行了5种微量发酵管实验，发现全部都能发酵乳糖、甘露醇，不发酵肌醇和纤维二糖，部分利用半乳糖苷、酶；此外对广西某猪场分离出的致病性大肠杆菌进行了黏附素抗原鉴定，发现不含有K88、K99、987P黏附素抗原。

关键词：猪；致病性大肠杆菌；分离鉴定；药敏实验仔猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的不同类型的疾病的总称，在我国各地猪场均有发生。

按发病日龄可分为：仔猪黄痢，仔猪白痢，仔猪水肿病[1]。

仔猪黄痢，主要1~3日仔猪发病以排出黄色粪便和迅速死亡为特征，窝发病率高达90~95%，头发病率在30~60%之间，死亡率一般30%左右，有的高达80%以上乃至全窝死亡；仔猪白痢，10~30日龄发病，发病率可达80%，死亡率较低，影响仔猪场几乎无处不在，且有明显上升趋势；仔猪水肿病，断奶后发病，死亡率可达100%。

据统计，我国1997年1~6月猪大肠杆菌病发病数104511头，直接经济损失达5千万元。

[2] 仔猪黄、白痢是目前规模化猪场影响仔猪存活率的严重制约因素[3]。

大肠杆菌（Ecoli）在分类上属于肠杆菌科埃希氏属，通常认为该属只含大肠杆菌一个种，种以下一律为血清型[4]。

其抗原构造及血清型极为复杂，抗原主要有O、K、H抗原。

据最新报道O抗原有171种，引起仔猪发病的常见血清型为O101、O64、O138、O141、O147、O149、O157、O8、O9、O20；K抗原103种；H抗原53种[5]。

此外与仔猪水肿病有关的纤毛F抗原有K88、K99、987p、F107及F41[3]。

猪禽致病性大肠杆菌的分离鉴定与药敏分析

2020年第08期致病性大肠杆菌是医学和兽医学临床感染中最常见的病原菌之一。

由于养殖户持续和不规范的使用抗菌素，使大肠杆菌耐药谱不断扩大和耐药水平不断提高。

当然，这也与大肠杆菌对药物敏感却又容易产生耐药性的特性有密不可分的关系。

因此，了解致病性大肠杆菌的耐药情况，分析致病性大肠杆菌的耐药趋势，研究致病性大肠杆菌的耐药机理，对预防和治疗大肠杆菌病有着十分重要意义。

1材料与方法2017年11月～2018年1月从佛山市三水区乐平镇的养殖场收集患病动物脏器样品中分离大肠杆菌50株，其中来源于猪的大肠杆菌有22株，鸡有7株，鸭有14株以及鹅有7株。

阿莫西林克拉维酸钾、阿米卡星、头孢曲松、头孢吡肟、赛头孢、新头孢、林可霉素、大观霉素、氟苯尼考、新霉素、多西环素、复方间甲氧嘧啶、恩诺沙星、环丙沙星、泰乐菌素、丁胺：TMP=7:3、双头孢、阿奇霉素、替米考星、氨苄西林钠、头孢挫定、头孢噻呋钠、头孢唑林钠、青霉素钠、泰妙菌素、庆大霉素、卡那霉素。

（以上药物均来售自市面药店）1.3.1细菌分离纯化将50块疑似大肠杆菌感染的猪禽的肝脏、十二指肠、淋巴结、心脏、脾脏分别剪成一小块。

用灼烧好的接种环分别蘸取病料，接种于血琼脂平板培养基，37℃培养24h 观察生长情况。

用划线分离的方法分别接种于营养琼脂培养基，37℃培养24h 观察生长情况。

分别在营养琼脂培养基挑取单个菌落划线于沙门氏菌显色培养基上，37℃培养24h 观察结果，其中大肠杆菌显蓝色。

取沙门氏菌显色培养基上的大肠杆菌菌落，用革兰氏染色法进行染色，镜检，根据染色情况和细菌形状判断是否有除大肠杆菌以外的杂菌，若没有，即视为纯种细菌。

分别将提纯成功的菌落挑到装有2mL 营养肉汤的EP 管增殖12～18h ，加等量的甘油进EP 管，-80℃冷冻保存。

1.3.2动物致死性实验分别从EP 管蘸取少量的纯种菌液接入装有2mL 营养肉汤的EP 管中增殖12～18h 以3只小鼠为一组，分别取0.1mL 上述培养物对小鼠进行腹腔注射，观察有没有发病死亡，记录小鼠死亡的时间和死亡的数量。

猪肠外致病性大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验

河南农业科学，０１４（）１０１３２１，０１：５ —５
ＪｕｎｌｆＨｅａｒｃｌｕａｃｅｃｓｏｒａｎｎＡｇｉｕｔｒｌＳｉｎｅｏ
猪肠外致病性大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验
徐引弟，治方，文豪，跃，成留王朱梁郭
１９ｅｔａｎｅｔｎｌａｈｇｎｃＥｓｈｒｃｉｏｉ（Ｐ４ｘｒｉｔｓｉａｔｏｅｉｃｅｉｈａｃｌＥｘＥＣ）ｓｒｉｓＭｉｅｖｒｌｎｅｅｕｔｐｎｐｔａｎ．ｃｉｕｅｃ，ｓｒｍｙｅａｄ
对小鼠均有毒力，ｏ１、６、、３、、０以ｌＯ１１０８０１８ｏ９０１１及０６最为流行，头孢噻肟、２对头孢他啶、头孢哌酮、米卡星肠杆菌；分离；定；药敏试验猪鉴
ＸＵｎｄ，ＡＮＧｉｆｎＺＨＵｅ－ｏ，ＡＮＧｅ，Ｙｉ — ｉＷＺｈ— ａｇ，ＷｎｈａＬＩＹｕＧＵｏＣｈｅ —ｉｎｇｌｕ
（ｎｉｉｕｅｆｒＡｎｍａＨｕｂｎｒｎｔｒｎｒｓａｃＨｅａａｍｙｏＩｓｓｔｔｏｉｌａａｄｙａｄＶｅｅｉａｙＲｅｅｒｈ，ｎｎＡｃｄｆ
中图分类号：￥５．１８２６２文献标识码：Ａ文章编号：１０３６（０１０ —０５０４— ２８２１）１１０—０４

方城县仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

Ｏ．０５），但对肉鸡的料肉比影响不明显（Ｐ＞０．０５）。２．２．１硒对肉鸡的生长性能的影响２１日龄２～７组与１组
（对照组）相对比：体重分别增加２．３２％、１２．８４％、１４．７４％、２６．７４％、３１．３７％和２２．５３％。４２日龄２～７组与１组
１．１．２主要试剂培养基及细菌鉴定用的生化试剂等方
城县畜牧局疫病测报站实验室提供。
１．１．３供试药片头孢噻肟、氟苯尼考、沙拉沙星、庆大霉素等含药纸片。
１．１．４试验动物清洁级昆明系小白鼠雌雄各半，共ｌ０
１．２．２茵体形态观察将上述培养基上所得的菌落进行涂片，革兰氏染色，镜检，观察细菌形态以及染色特
征，将符合大肠杆菌形态特征的进行生化试验，否则弃
之。
１材料与方法
１．１材料１．１．１病料的采集病料来自我县３５个养猪场，共６９份
１．２．３生化试验将上述分离出的纯培养物进行糖发酵
试验、吲哚试验、ＭＲ试验、ＶＰ试验、枸橼酸盐试验，观
察其变化并记录结果。ｒ０时，对生长性能、饲料转化率和成活
性，对沙拉沙星、阿奇霉素、头孢拉啶、福利平４种药物较为敏感，对其余的药物中度敏感。

不同规模猪场腹泻仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性检测

１．２．２细菌的分离与鉴定
采集的腹泻仔猪肛门拭子，接种于麦康凯平板划线培养，见每份样品中都有若干的红色单菌落。将已纯化的菌落进行涂片和革兰氏染色镜检，观察到分离菌为革兰氏阴性的小杆菌，且形态很单纯，代表性镜检涂片见图１。使用大肠杆菌特异性引物ＰＣＲ扩增鉴定分离的大肠杆菌可疑菌株，并进行０．９％的琼脂糖电泳
肠杆菌。并通过Ｋ－Ｂ法检测各猪场分离的大肠杆菌对５类抗生素（四环素类、磺胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、头孢类）
中的９种药物的耐药性。结果显示：各猪场分离的大肠杆茵群体上对头孢噻吩、头孢曲松、恩诺沙星、阿米卡星的耐药
Байду номын сангаас
性较低，对氧氟沙星、氟苯尼考、强力霉素、复方新诺明、链霉素的耐药性较高。
．
椭放墨逮
２０１７年第１期（总第１９７期）
不同规模猪场腹泻仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性检测
’
’
杨宇
（湖南省长沙市望城区动物疫病预防控制中心，湖南长沙４１０２００）
摘要：从湖南不同地区９个猪场采集腹泻仔猪的肛门拭子，利用麦康凯平板、革兰氏染色镜检和ＰＣＲ方法共鉴定４９９株大
ＨｕｎａｎＡｎｉｍａｌｓｃｉｅｎｃｅａｎｄＶｅ￣ｉｆｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎｏ．１，２０１，７．（ＴｏｔａｌＮｏ．１９７）２７

豪猪致病性大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验

豪猪致病性大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验作者：张保平来源：《江苏农业科学》2014年第09期摘要：从腹泻病死仔豪猪的心血、肝脏、脾脏和腹泻粪便中分离到2株细菌，染色镜检革兰氏阴性，细菌在麦康凯培养基上呈红色菌落。

生化试验结果显示分离到的2株细菌对葡萄糖、乳糖、麦芽糖产酸产气，不分解尿素，无硫化氢产生。

药敏试验结果表明，分离到的2株细菌对头孢噻吩、头孢曲松、先锋霉素、庆大霉素、卡那霉素、链霉素、万古霉素、复方新诺明等高度敏感。

动物致病性试验结果表明，分离到的2株细菌对小鼠有强致病性。

关键词：豪猪；大肠埃希菌；分离；鉴定中图分类号： S855.1+2文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）09-0189-021材料和方法1.1材料1.1.1药品麦康凯培养基，购于北京奥博星生物技术责任有限公司；普通营养肉汤培养基，自制；营养琼脂培养基，购于北京奥博星生物技术责任有限公司；细菌微量发酵管，杭州天和微生物试剂有限公司生产；药敏纸片，北京天坛药物生物技术开发公司生产。

1.1.2试验动物20～22 g小白鼠：购自湖南农业大学小动物房。

1.1.3病料来源湖南常德市桃源县堆金豪猪养殖基地发生仔豪猪黄痢的病死豪猪的心血、肝脏、脾脏和腹泻粪便。

1.2方法1.2.1细菌分离取病死仔豪猪的心血、肝、脾和粪便，分别接种于普通营养肉汤中，37 ℃培养24 h，取有细菌生长的普通营养肉汤接种于麦康凯琼脂平板，37 ℃培养24 h，观察并记录。

1.2.2细菌纯培养将以上麦康凯培养基中的红色菌落接种于普通营养肉汤中37 ℃培养24 h，再将肉汤接种于麦康凯琼脂37 ℃培养24 h，进行细菌纯化。

1.2.3油镜镜检取普通营养肉汤及麦康凯培养基中的细菌，涂片，革兰氏染色镜检。

1.2.4生化试验按文献[9]的方法进行，取分离菌接种于细菌微量发酵管中，37 ℃培养，每隔24 h观察1次，连续7 d，并做好记录。

1.2.5动物试验用20只20～22 g健康正常的小白鼠，进行致病性测定，将小鼠分为2组，实验组14只，对照组6只，实验组每只小白鼠腹腔注射分离菌肉汤培养物0.2 mL，对照组每只小白鼠腹腔注射灭菌肉汤培养物0.2 mL。

仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较

仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较仔猪大肠杆菌是引起仔猪肠道疾病的主要病原微生物之一，会导致仔猪腹泻、消化不良等问题，严重影响仔猪的生长和发育。

对仔猪大肠杆菌进行分离鉴定及市售药物比较，对于防控该疾病具有重要意义。

一、分离鉴定方法1. 样品采集：从患病仔猪的粪便、肠道内容物等样品中采集。

2. 分离培养：将样品接种于大肠杆菌选择培养基上，进行革兰氏染色、培养、生化试验等方法，分离纯培养的大肠杆菌菌株。

3. 血清鉴定：通过进行血清凝集试验，使用奥鲁氏O抗原血清以及H抗原血清进行鉴定，对大肠杆菌进行血清分型和鉴定。

4. 分子生物学鉴定：使用PCR技术，基于大肠杆菌特异基因（如16S rRNA基因），进行分子生物学鉴定和分型。

二、市售药物比较仔猪大肠杆菌感染的治疗通常使用抗生素药物进行控制，以下是几种常用的市售药物进行比较：1. 链霉素：链霉素是一种广谱抗生素，可有效抑制大肠杆菌的生长。

但长期使用链霉素容易导致抗药性的产生，并且对于某些耐药性强的大肠杆菌株无效。

2. 氧氟沙星：氧氟沙星是一种喹诺酮类抗生素，具有广谱的抗菌活性。

它能够通过抑制DNA旋转酶的活性，阻止细菌DNA的复制和转录过程。

氧氟沙星对大肠杆菌有很强的杀菌作用，但由于长期使用会出现耐药性的问题，因此需要谨慎使用。

3. 环丙沙星：环丙沙星是一种喹诺酮类抗生素，与氧氟沙星有类似的作用机制。

不同的是环丙沙星对大肠杆菌的抗菌活性较强，且在耐药性问题上相对较低，对大肠杆菌引起的仔猪肠道疾病治疗效果较好。

4. 卡那霉素：卡那霉素是一种广谱抗生素，属于多肽类抗生素。

它能有效抑制细菌的蛋白质合成过程，对大肠杆菌的抗菌作用较强。

卡那霉素在治疗仔猪肠道疾病方面表现良好，但存在耐药性问题。

虽然目前市售的抗生素药物可以对仔猪大肠杆菌感染进行治疗，但在使用过程中需要注意，应根据具体情况选择合适的药物，并在控制感染的同时减少抗药性的产生。

应注意合理使用抗生素，避免过量使用和滥用抗生素，以保障仔猪健康和人类食品安全。

猪大肠杆菌病病原鉴定及药敏试验

：无菌采集具有黄痢、白痢症状的仔猪粪便，接种于麦康凯培养基上，37℃温箱中培养24小时。挑取红色中等大小光滑菌落，接种于普通肉汤增菌，置37℃温箱培养16～18小时，然后将培养物分别划线接种于麦康凯琼脂平板和伊红美蓝琼脂平板进行细菌培养，24小时后挑取平板上可疑菌落抹片染色镜检，后将疑似菌落少许再接种于普通肉汤，供以后试验用。
（2）生化试验：糖发酵、M．R、硫化氢、V-P、吲哚试验等。③药敏试验：利用庆大霉素、丁胺卡那霉素、头孢噻肟、链霉素、环丙沙星、恩若沙星、红霉素等8种药物按常规纸片法进行。
2、观察结果
（1）病原菌的形态：观察到6个疑似菌株在麦康凯琼脂培养16小时后均为红色菌落，在伊红美蓝琼脂上培养16小时后均为紫黑色带金属光泽的中等大小圆形菌落，革兰氏染色镜检均为革兰氏阴性中等大小杆菌。
猪大肠杆菌病病原鉴定及药敏试验
猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的肠道传染病，主要表现为仔猪黄白痢和水肿病。随着养猪业规模化发展，该病呈上升趋势，致使仔猪成活率和断乳窝重降低，严重影响了养猪业的发展。由于致病性大肠杆菌存在广泛的耐药性，而且血清型多，抗原复杂，给防治带来了极大的困难。
针对某猪场提供的腹泻严重的仔猪黄白痢病料，我们进行了细菌分离鉴定和药敏试验，以期为仔猪大肠杆菌病的有效防治提供一些技术参考资料。

猪场排污沟中大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验

猪场排污沟中大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验摘要：从荆州市8家猪场的排污沟采样100份，通过分离培养、染色镜检及生化鉴定，得到90株大肠杆菌菌株。

对其进行药敏试验，试验结果表明大肠杆菌已经广泛存在耐药性，其中卡那霉素、庆大霉素、氨苄青霉素、青霉素、氯霉素、四环素、麦迪霉素和强力霉素的耐药率分别为54.44％、57.78％、66.67％、100.00％、53.33％、55.56％、41.11％和45.56％，其余的均在16％以上。

试验表明所采样的猪场排污沟中的大肠杆菌耐药性广泛并具有多重耐药性，为今后生产上合理使用药物提供了理论依据。

猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的猪的一种急性传染病。

主要表现为肠炎、肠毒血症等多种临床症状。

该病在世界各地均有发生，在我国特别是养猪业发达的南方地区造成新生仔猪大批死亡或生长发育不良，成为发展养猪业的严重障碍之一。

本研究以期掌握荆州市周边猪场的大肠杆菌耐药菌株的产生情况及扩散程度，为该地区的大肠杆菌病的防控提供依据。

1材料与方法1.1材料1.1.1仪器与设备手提式高压灭菌锅、恒温培养箱、超净工作台、天平等。

1.1.2培养基麦康凯琼脂、M-H、普通琼脂培养基等均按照参考文献的方法在实验室制备。

1.1.3药敏纸片购自杭州微生物试剂有限公司。

纸片法药敏试验抑菌圈直径判断标准以美国实验室标准化委员会(UCCLS)制定的NCCL5200为依据。

1.1.4采样来源于荆州周边的8家猪场的排污沟。

1.2方法1.2.1细菌的分离纯化将样品无菌接种于麦康凯琼脂平板上，37％培养18-24 h后观察菌落的生长情况。

1.2.4药敏试验1)细菌培养。

挑取普通琼脂平板上生长的纯培养菌落接种于普通琼脂培养基，培养16-18 h，观察细菌生长情况。

2)菌液的制备。

用接种环挑取细菌接种于普通琼脂平板。

37％培养18-24h，选择形态相同的菌落1-2个，用接种环挑起细菌接种到12 cm的培养皿中，用移液管吸取0.1 mL的无菌生理盐水滴入培养皿中。

猪源性大肠杆菌的分离鉴定及菌株耐药性分析

应该创建群众服务平台、意访信箱等方式，积极听取人民群众的意见与建议，了解个体畜牧养殖户的实际需求，从而全方面、多层次的确保乡镇畜牧兽医技术推广工作能够顺利的进行，并且具有一定的民主性与先进性。
3 结语
综上所述，要想使我国畜牧兽医技术能够在我国各地乡镇顺利开展推广工作，相关工作者就必须要了解所在乡镇地区的实际经济发展状况与工作需求，然后进行详细的分析研究并有针对性的制定推广实施方案，使国家和当地政府对畜牧产业的发展政策落到实处，满足乡镇当地的养殖户与人民群众的合理需求，从而使乡镇畜牧产业的经济效益得到最大程度的提升，促进我国农业经济全面迅速的发展。█ 参考文献： [1] 王世雄.浅析加强乡镇畜牧兽医新技术推广体系的建设[J].农业与技术, 2018,38(2):81-82. [2] 康卓吉.乡镇畜牧兽医技术推广体系中存在的问题及措施[J].今日畜牧兽医,2020,36(2):66. [3] 明冠勇.我国乡镇畜牧兽医技术推广中体系存在的问题及应对方案[J].吉林畜牧兽医,2019,40(6):53+55.
的大肠杆菌耐药性具有一定的差异。P1 菌株对环丙沙星抑菌圈直径为 19mm，提示对该药物高度敏感；而对氧氟沙星、头孢噻吩中度敏感，抑菌圈直径显示分别为 15mm 和 11mm；对四环素、磺胺嘧啶、庆大霉素具有耐药性，所测得的抑菌圈直径均在 10mm 以下。P2 菌株对抗菌药物的敏感度则有很大差异，表现出对萘啶酸和氧氟沙星中度敏感，抑菌圈直径分别为 15mm 和 13mm；而对四环素、环丙沙星和和氧氟沙星抑菌圈直径均在 8～ 9mm 之间，具有耐药性。
针对抗菌药物在铜仁市规模化养殖场耐药情况的相关研究报道较为少见。因此，为了初步了解铜仁市养殖场大肠杆菌耐药情况，本研究选取笔者服务的某猪场，分别采集成年猪和仔猪肛门拭子，从中分离大肠杆菌，并选取常见治疗用药物，进行耐药性分析，旨在为科学用药提供一定的指导。