细胞生物学常用研究方法
举例说明细胞生物学的研究方法的种类
举例说明细胞生物学的研究方法的种类细胞生物学是研究细胞结构、功能和生理过程的学科，它使用多种方法来进行研究。
下面列举了十种常见的细胞生物学研究方法。
1. 光学显微镜观察：光学显微镜是一种常用的工具，用于观察细胞的形态、结构和功能。
通过调节镜头和使用染色剂，可以更清晰地观察细胞的细节。
2. 电子显微镜观察：电子显微镜是一种高分辨率的显微镜，可以观察到更小的细胞结构，如细胞器、细胞膜等。
它可以提供细胞的高分辨率图像。
3. 细胞培养：细胞培养是将细胞从生物体中分离出来，在含有营养物质的培养基中进行培养的过程。
这种方法可以研究细胞的生长、增殖和功能。
4. 免疫细胞化学：免疫细胞化学是通过使用抗体来标记和检测特定蛋白质的方法。
这种方法可以帮助研究人员了解细胞内不同蛋白质的位置和功能。
5. 细胞分离和纯化：细胞分离和纯化是将特定类型的细胞从混合细胞群中分离出来的方法。
这种方法可以帮助研究人员研究特定细胞类型的功能和特性。
6. 分子生物学技术：分子生物学技术包括PCR、DNA测序、基因克隆等，可以帮助研究人员了解细胞的基因组、基因表达和遗传变异。
7. 蛋白质分析：蛋白质分析是研究细胞内蛋白质的种类、结构和功能的方法。
常用的蛋白质分析方法包括SDS-PAGE、Western blot 等。
8. 细胞生物物理学：细胞生物物理学是研究细胞力学、细胞形态学和细胞力学等方面的学科。
常用的方法包括细胞变形实验、细胞力学模拟等。
9. 高通量筛选：高通量筛选是一种通过自动化实验系统进行大规模筛选的方法。
它可以帮助研究人员快速筛选和鉴定特定分子对细胞的影响。
10. 生物信息学分析：生物信息学分析是利用计算机和统计学方法对细胞数据进行分析的方法。
它可以帮助研究人员从大量数据中提取有用的信息，揭示细胞的复杂性。
细胞生物学的研究方法
细胞生物学的研究方法
细胞生物学是研究细胞的结构、功能和生理过程的科学。
在细胞生物学的研究中，有许多常用的方法。
以下是其中一些常见的研究方法：
1. 细胞培养：将细胞从其天然环境中分离出来，并在实验室中以适当的培养基中培养细胞。
细胞培养使得研究人员能够对细胞进行控制和观察。
2. 显微镜观察：使用光学显微镜或电子显微镜观察细胞的形态、结构和运动。
光学显微镜可以用来观察活细胞，而电子显微镜则能够提供更高分辨率的细胞图像。
3. 免疫细胞化学：使用特异性抗体与细胞中的特定蛋白质结合，然后通过染色或荧光探针，观察并分析这些蛋白质在细胞中的分布和表达水平。
4. 分子生物学技术：包括PCR、DNA克隆、基因测序和蛋白质表达等技术，可以用于研究细胞中的基因和蛋白质。
5. 细胞色素分析：利用生物化学检测方法，测定细胞内特定生物分子的含量和代谢活性，以研究细胞功能和代谢过程。
6. 分离和纯化细胞器：通过细胞破碎和离心技术，将细胞内不同的细胞器分离和纯化出来，以研究它们的结构和功能。
7. 基因编辑技术：如CRISPR/Cas9，可以对细胞中的基因进行精确编辑和改变，以研究基因对细胞功能的影响。
8. 活体成像：利用荧光探针或标记的蛋白质，观察和记录活细胞的动态变化，如细胞分裂、运动和细胞内信号传导等。
以上只是细胞生物学研究中的一些常见方法，实际研究中可能还会使用其他特定的技术和方法，具体取决于研究的目的和需要。
细胞生物学 第二章细胞生物学研究方法
§1 细胞形态结构的观察方法
三、扫描隧道显微镜 （Scanning tunneling microscope，STM）
• 于1981年发明，发明者获 1986年度诺贝尔物理学奖。
• 特点： ①具有原子尺度的高分辨力，
侧（横）分辨率为0.1-0.2nm， 纵分辨率0.001nm； ②除在真空外，还可在空气、 液体等条件下观察； ③非破坏性测量：不受电子 束的轰击、破坏。
• 因此，可用已知的抗体检测未知的抗原。
• 但多数抗原-抗体结合后不出现可见反应，即不能检测 到二者的这种特异性结合。如何检测抗原-抗体发生了 结合反应？
• 用一种可见的标记物标记抗体，通过检测标记物的存
在与否判断抗原-抗体是否发生了结合反应——免疫标
记技术。
抗原
标记物
抗体
二、特异蛋白抗原的定位与定性
s 将二次电子收集并经一系列 的处理在荧光屏上成像。
s 这样，可以得到样品表面的 立体图像。
二、电子显微镜
• 扫描电镜的样品制备：
s 取材； s 固定； s 脱水； s 临界点干燥； s 喷镀； s 电镜观察。
• 分辨本领：较低，一般 在3nm。
• 放大倍数：几万倍。
二、电子显微镜
• 特点：成像具有立体 感。
• 可见光的波长400700nm。
• 光学显微镜的最大分辨 率为0.2μm。
一、光学显微镜
• 光镜样品制备： 石蜡包埋切片， 苏木精-伊红染色。
一、光学显微镜
（二）相差显微镜和微分 干涉显微镜
• 原理：利用显微镜中的 特殊装置，使光线通过 样品时波长和振幅发生 变化，以增大样品明暗 的反差。
• 用途：这两种显微镜可 用于观察未染色的活细 胞的细胞结构及其动态 变化。
细胞生物学的研究方法及其应用
细胞生物学的研究方法及其应用细胞生物学是一门研究生物体最基本单位——细胞的科学，它的研究对象是细胞的形态、结构、功能及其相互作用等。
随着科技的发展，细胞生物学的研究手段也在不断更新，使我们对细胞的了解更加深入。
本文将介绍细胞生物学的几种研究方法及其应用。
一、细胞培养技术细胞培养技术是细胞生物学中比较基础的研究手段，它是将组织和细胞移植到含有营养物质和生长因子的培养基中进行培养和繁殖，使其在体外长期存活和生长。
通过细胞培养，研究人员可以从难以获得的生物材料中获得大量的细胞，进行多种实验和研究。
细胞培养技术在药物筛选、细胞变异、细菌感染等方面都有广泛的应用。
例如，在肿瘤治疗中，通过培养患者的肿瘤细胞，可以对其进行敏感性测试，筛选出最佳的治疗方案。
此外，还可以通过细胞培养的方法提取细胞内的 mRNA 或 DNA 进行一系列的分子生物学实验。
二、细胞分离技术细胞分离技术是指将复杂的细胞混合物中的不同类型的细胞分离出来，以便进一步研究。
细胞分离技术有多种方法，比较常用的有洗涤法、筛选法和离心法等。
细胞分离技术的应用十分广泛，如在干细胞移植中，为了避免移植的细胞类型过于复杂，需要先将干细胞分离出来。
此外，在癌症研究中，通过分离出癌细胞和正常细胞，可以更好地研究其生长机理和治疗方法。
三、光学显微镜技术光学显微镜技术是最基础的细胞观察手段，通过光学显微镜可以观察到细胞的形态、结构和运动等。
随着测量技术和计算机视觉的不断发展，现在研究人员可以对细胞及其内部结构进行三维成像和动态观察。
光学显微镜技术可用于对细胞的形态、生理学特征、代谢和运动等状态进行观察。
例如，在生长发育的研究中，光学显微镜可以被用来跟踪细胞分裂和发育过程的中间几个阶段，从而更好地理解细胞生长与分裂的机理。
四、电镜技术电镜技术是对细胞结构和形态的高级观察手段。
通过电镜技术可以观察细胞超微结构，如细胞核、内质网、线粒体和细胞膜等。
电子显微镜技术主要有透射电镜和扫描电镜两种。
细胞生物学 第2章 细胞生物学研究方法
PRA在散发性浸润性乳腺导管癌中 的表达
王辛，赵彤，赵嘉佳，熊静波. 中华医学杂志 2010， 90（20）：1399-1402
（三）原位杂交技术
• 自学
三、 细胞分离技术
（一）离心分离技术
用离心力和沉降系数的差异进行分离、浓缩和提纯的方法。 是分离细胞器（如细胞核、线粒体、高尔基体）及各种大分子基
描电镜的有效放大倍率为0.2mm/10nm=20000X。
Scanning electron microscope（ SEM）
• 工作原理：是用一束极细的电子束扫描样品，在样品表面
激发出次级电子，次级电子的多少与样品表面结构有关，
次级电子由探测器收集，信号经放大用来调制荧光屏上电
子束的强度，显示出与电子束同步的扫描图像。
（四）暗视野显微镜 dark field microscope
• 用于观察活细胞等无色透明标 本 • 聚光镜中央有挡光片，照明光
线不直接进人物镜，只允许被
标本反射和衍射的光线进入物 镜，因而视野的背景是黑的， 物体的边缘是亮的。 • 可观察 4~200nm的微粒子，
分辨率比普通显微镜高50倍。
（五）相差显微镜
• dX/dt=[2r2 (ρp—ρM) /9η]· · g=s g
• 式中dX/dt为粒子的沉降速度，ρp:颗粒的密度；ρM：悬浮 介质的密度；η：介质粘度；r：为粒子的半径；g：为重 力加速度。 • S：沉降系数（sendimetation coefficient）， 与颗粒直 径、颗粒密度、介质密度、介质粘度有关； • S的单位：秒; • 习惯上把10-13s作为沉降系数的单位（svedberg unit）， 简称S（大写）
λ=光源波长，可见光0.5um N=介质折射率,空气为1,油为1.5 θ=物镜镜口张角的半角
细胞生物学研究方法
细胞生物学研究方法细胞生物学是研究细胞结构、功能和过程的科学学科，主要研究对象是细胞的组成、分裂、分化、代谢、运动、增殖和死亡等。
为了深入研究细胞相关问题，细胞生物学采用了多种研究方法。
第一，显微镜观察法。
显微镜是细胞生物学中最常用的工具之一。
通过显微镜观察，可以观察到细胞的形态、结构和各种细胞器的分布情况。
常用的显微镜有光学显微镜和电子显微镜。
光学显微镜适用于观察活细胞，电子显微镜适用于观察细胞内部细节，如细胞核、线粒体和内质网等。
第二，细胞培养法。
细胞培养是指将细胞在无菌条件下培养于含有营养物质的培养基中，使其持续生长和繁殖。
通过细胞培养，可以研究细胞的生长特性、分裂过程以及对外界刺激的反应。
常用的细胞培养方法有原代培养、细胞株培养和三维培养等。
第三，细胞分离和纯化法。
细胞分离和纯化是将不同类型的细胞从混合细胞群中分离出来，以便对某种细胞进行独立的研究。
常用的方法有细胞悬浮液经过离心分离、细胞表面标记技术以及细胞排序等。
第四，分子生物学技术。
分子生物学技术可以用于研究细胞的基因表达、代谢等分子机制。
其中，PCR技术可以复制DNA序列，用于检测细胞内特定基因的存在和表达水平。
原位杂交技术可以检测细胞内特定mRNA的定位和表达情况。
第五，蛋白质分析技术。
蛋白质分析技术主要用于研究细胞内蛋白质的分布、结构和功能。
常用的方法有蛋白质电泳、质谱分析、免疫印迹等。
第六，遗传学方法。
遗传学方法可以用于研究细胞的遗传特征和突变。
如基因敲除和基因敲入技术可以研究基因在细胞中的作用；细胞杂交技术可以研究细胞核酸的互补性和杂交情况。
细胞生物学研究方法的不断更新和发展，使我们对细胞的理解越来越深入。
这些方法的应用使得我们能够更好地揭示细胞的机制和功能，为解决许多重大疾病和生物学问题提供了有力的工具。
细胞生物学研究方法
细胞生物学研究方法细胞生物学是生物学的重要分支，它研究细胞的结构、功能和活动特征。
而现代细胞生物学的研究方法却是非常多样化的。
一、细胞培养技术细胞培养技术是现代细胞生物学最重要的实验手段之一。
它可以用来研究细胞的生长、分裂、分化和死亡等基本生物学过程，同时也可以用来筛选和测试新药物。
在细胞培养方面，流行的方法包括传统的水平指向法、悬浮式培养法、三维培养法等。
其中，三维培养法是比较新的技术，它可以用来模拟体内的三维环境，提高细胞培养的成功率。
二、显微镜技术显微镜是细胞生物学研究中必不可少的工具。
根据不同的研究目标，可以使用不同的显微镜。
光学显微镜用于观察细胞表面结构和细胞内分子分布，而电子显微镜用于观察细胞的内部结构和纳米级别的分子组成。
与传统显微镜相比，近年来兴起的超分辨率显微镜则更加革命性。
超分辨率显微镜可以在纳米级别下观察细胞内部的生物活动，这种技术又被称为“光学雷达”。
三、基因编辑技术基因编辑技术是一种能够修改基因的方法，它可以用于研究某些基因在细胞生物学中的作用。
最著名的一种基因编辑技术是CRISPR/Cas9，它可以精确地切割DNA序列，进而实现基因的精准编辑。
基因编辑技术的核心技术是分子生物学，分子生物学技术的快速发展促进了基因编辑技术的加速发展。
同时，这些技术也正在被用于战胜某些遗传疾病。
四、蛋白质组学技术蛋白质组学技术是一种研究细胞内蛋白质分布、结构和功能的技术。
目前，主要的蛋白质组学技术包括蛋白质电泳、蛋白质质谱和蛋白质芯片技术等。
在这些技术中，蛋白质质谱技术是一个较为常用的技术。
蛋白质质谱技术可以快速而准确地识别和定量细胞内蛋白质。
它可以被用作生物医学和生命科学的研究手段，推动蛋白质研究的发展。
总之，在现代细胞生物学研究中，许多方法都得到了迅速发展。
这些方法的应用广泛，它们推动着细胞生物学的不断前进。
未来，我们相信这些工具将继续提高我们对细胞结构、功能及疾病机制的认识。
细胞生物学实验方法与技术
细胞生物学实验方法与技术1. 光镜观察（Light Microscopy）光镜观察是一种常用的研究细胞形态和结构的方法。
通过使用光学显微镜，可以观察到细胞的外形、细胞器的位置和结构等特征。
该技术使用涂片制备技术，将细胞固定、染色、封装在玻璃片上，然后在显微镜下进行观察。
2. 电镜（Electron Microscopy）电镜是一种高分辨率的显微镜技术，它可以观察到细胞的微观结构和细胞器。
电镜利用电子束来代替光束，通过变焦电镜透射电子显微镜和扫描电子显微镜两种类型，可以观察到更高分辨率的细胞结构。
3. 组织培养（Tissue Culture）组织培养是一种将细胞或组织从活体中分离并培养在人造环境中的方法。
这种方法常用于研究细胞生长、增殖和发育过程。
组织培养可以通过使用培养基、细胞培养皿和细胞培养箱等设备来提供细胞所需的营养和环境。
4. 免疫染色（Immunostaining）免疫染色是一种用来检测和定位蛋白质或其他分子在细胞中的位置的方法。
这种方法利用抗体的特异性结合来检测蛋白质的位置。
首先，细胞固定并渗透，然后使用特定的抗体与目标分子结合，最后通过荧光标记或酶反应等方法来观察染色的细胞。
5. 荧光显微镜（Fluorescence Microscopy）荧光显微镜是利用荧光探针来观察样品的显微镜技术。
该技术可以用来检测和可视化特定分子或结构的位置和数量。
通过对样品进行荧光染色或利用荧光蛋白表达来标记细胞的特定结构或分子，可以在荧光显微镜下直接观察到。
6. 流式细胞术（Flow Cytometry）流式细胞术是一种高通量细胞分析技术，可以快速准确地分析和计数大量的单个细胞。
该技术利用细胞标记剂和流动性流式细胞术仪器，通过激光照射细胞并检测细胞的荧光光谱，可以分析细胞表面分子的表达、细胞大小和复杂性等信息。
细胞生物学实验方法与技术
细胞生物学实验方法与技术1.细胞培养：细胞培养是细胞生物学研究中最基本的实验技术之一、它通过将细胞放入培养基中，在特定的环境条件下进行体外培养。
通过细胞培养，可以获得大量的细胞进行进一步的实验研究。
2.免疫荧光染色：免疫荧光染色是一种常用的细胞实验方法，通过此方法可以检测特定蛋白质或分子在细胞中的分布和定位。
该技术利用特异性的抗体与目标分子结合，并用荧光染料标记抗体，从而利用荧光显微镜观察染色结果。
3. 免疫印迹法（Western Blot）：免疫印迹法是一种用于检测特定蛋白质的定量和分析的方法。
该方法通过将细胞或组织中的蛋白质经过电泳分离，并转移到膜上，然后用特异性的抗体与目标蛋白质结合，最后通过酵素反应或荧光信号检测目标蛋白质的存在和表达水平。
4.转染技术：转染技术是将外源的DNA或RNA导入到目标细胞中的一种常用方法。
常见的转染技术包括植入病毒载体、使用质粒转染剂、电穿孔和化学转染等。
通过转染技术，可以实现基因过表达、基因沉默等实验研究。
5.索引技术：索引技术是一种分析和比较细胞中基因表达的实验方法。
通过索引技术，可以快速筛选出在不同生理状态下表达差异显著的基因，并进一步研究这些基因的功能和调控机制。
常见的索引技术包括差异显著性分析、基因芯片、RNA测序等。
6.荧光显微镜技术：荧光显微镜技术是一种使用荧光染料观察细胞结构和功能的方法。
荧光显微镜可以通过选择不同的染料和光源，实现对细胞核、细胞器等结构的观察。
此外，还可以利用特定的荧光探针，实现对细胞内的信号分子、离子和代谢产物的监测。
7.流式细胞术：流式细胞术是一种通过检测细胞的光学和物理特性，实现对单个细胞的定量分析和分选的方法。
该技术可以实现细胞表面标记物的检测、细胞周期分析、细胞凋亡检测等。
特别是流式细胞术结合细胞分类仪，可以实现高通量的细胞分析。
综上所述，细胞生物学实验方法与技术为研究细胞的结构、功能和特性提供了重要的工具。
随着科技的不断发展，细胞生物学实验方法与技术也在不断更新与创新，为我们更好地理解细胞的生命活动提供了强大的支持。
细胞生物学研究方法
细胞生物学研究方法细胞生物学是研究细胞结构、功能和行为的科学学科。
细胞是生物体的基本组成单位，研究细胞生物学可以帮助我们揭示生物体内部的复杂机制，并对疾病的发生和治疗提供重要的指导。
在细胞生物学的研究中，有许多重要的实验方法和技术。
下面将介绍几种主要的细胞生物学研究方法。
1. 细胞培养：细胞培养是一种最基本的细胞生物学实验方法。
它通过在培养基中提供适当的营养物质和条件，使细胞在体外生长和繁殖。
细胞培养可以用于研究细胞的生理功能、生长和分化等过程。
2. 细胞染色：细胞染色是观察和研究细胞结构和组成的重要方法。
常用的细胞染色方法包括荧光染色、核酸染色、蛋白质染色等。
例如，核酸染色可以使用荧光染料如荧光素染色DNA，观察细胞的染色体结构和DNA复制过程。
3. 细胞分离与纯化：细胞分离与纯化是将混合细胞群体中的细胞单独分离出来并获得纯净的细胞群体的方法。
常用的细胞分离与纯化方法包括离心、差速离心、密度梯度离心等。
这些方法可以帮助研究者获得纯净的细胞样本，便于后续的分析和实验。
4. 细胞显微镜观察：细胞显微镜观察是研究细胞结构和功能的主要方法之一。
通过使用显微镜，研究者可以观察到细胞的内部结构和细胞器。
随着光学显微镜和电子显微镜技术的发展，观察细胞的分辨率和细节越来越高。
5. 免疫学技术：免疫学技术在细胞生物学研究中扮演了重要的角色。
常用的免疫学技术包括免疫组织化学、流式细胞术、免疫沉淀等。
这些技术可以用来检测和定量细胞表面标记物、细胞内蛋白质和核酸等，以研究细胞的功能和代谢过程。
6. 分子生物学技术：分子生物学技术是研究细胞基因表达和遗传信息的重要工具。
常用的分子生物学技术包括PCR、蛋白质电泳、蛋白质质谱等。
这些技术可以帮助研究者检测和分析细胞中的DNA、RNA和蛋白质等分子成分，以了解细胞基因表达和调控的机制。
7. 基因编辑技术：基因编辑技术如CRISPR-Cas9已经成为细胞生物学研究中的重要工具。
细胞生物学实验汇总
细胞生物学实验汇总1.细胞培养实验：细胞培养是一种将细胞在人造环境下生长和繁殖的方法。
这种实验可以用来研究细胞的生长和增殖，观察细胞的形态变化，评估细胞的功能和活性等。
培养的细胞可以来自动物组织、植物组织或微生物等。
2.免疫荧光染色实验：这种实验可以用来观察细胞内特定的蛋白质、细胞器或DNA分布。
研究人员可以利用荧光染料或标记的抗体与目标分子结合，在显微镜下观察细胞瞬态或持久性标记。
这种实验可以帮助我们研究细胞的结构和功能，探索细胞中不同分子的相互作用。
3.转染实验：转染是将外源DNA或RNA引入细胞内的过程。
这种实验可以用来研究基因在细胞中的功能，或将外源基因导入到细胞中来改变其表达。
常见的转染方法包括酵母转染、细菌转染、质粒转染和病毒转染等。
转染实验可以帮助我们了解基因调控机制和研究细胞行为的变化。
4. 测定细胞增殖实验：这种实验可以用来测定细胞增殖速度和细胞生长的影响因素。
常见的细胞增殖实验包括MTT（3-（4,5-二甲基-2-苯唑基）-2,5-二苯基四氮唑）实验、BrdU（5-溴脱氧尿苷）实验等。
这些实验可以帮助我们了解细胞增殖的分子机制和影响细胞增殖的因素。
5.测定细胞凋亡实验：细胞凋亡是一种编程性死亡的过程，是维持细胞内稳态的重要机制。
测定细胞凋亡的实验可以帮助我们研究细胞死亡的调控机制，并评估不同因素对细胞凋亡的影响。
常见的细胞凋亡检测方法包括DNA损伤、细胞膜破裂和细胞色素释放等。
6.蛋白质分离和电泳实验：这种实验可以用来分离和鉴定细胞中的蛋白质。
常见的蛋白质分离方法包括凝胶电泳、二维凝胶电泳和西方印迹等。
这些实验可以帮助我们研究细胞中不同蛋白质的表达和功能，了解蛋白质调控的机制。
7. 实时荧光定量PCR（polymerase chain reaction）实验：PCR是一种在体外合成DNA的技术。
实时荧光定量PCR可以用来定量检测靶基因在细胞中的表达水平。
这种实验可以帮助我们研究细胞基因表达的调控机制和研究基因在不同生物学过程中的功能。
第三章 细胞生物学研究方法
第三章细胞生物学研究方法一．名词解释1.福尔根反应：特异显示DNA分布的反应。
酸水解可除去RNA，仅保留DNA，冰出去DNA 上嘌呤脱氧核糖核苷键上的嘌呤，使脱氧核糖的醛基暴露。
所暴露的自由醛基与西夫试剂反应呈紫红色。
2.负染色：用重金属盐(如磷钨酸钠、醋酸铀等)对铺展在载网上的样品进行染色，使整个载网都铺上一层重金属盐，而有凸出颗粒的地方则没有染料沉积。
染色后，在电镜下观察时，被观察的对象为亮的，背景为暗的，反衬出样品中的生物大分子及其复合物的形态。
3.原位杂交：用标记的核酸探针通过分子杂交确定特意核苷酸序列在染色体上火细胞中的位置的方法。
4.原代培养：直接从动物体内获取细胞进行首次培养，称原代培养。
5.传代培养：原代培养的细胞在一个容器中增殖到一定的密度后，将细胞分散到多个容器中继续培养的方式称传代培养。
6.细胞株：从原代培养细胞群中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群，一般可顺利地传40-50代次，它保持染色体二倍体的数量及接触抑制行为。
7．细胞系：从肿瘤组织培养建立的细胞群或培养过程中发生突变或转化的细胞，使其获得“不死性”特征，从而无限增殖，从正常组织或胚胎组织也可以建立细胞系，这是一个含有多个细胞谱系的混杂细胞群体。
8.探针：带有放射性同位素、生物素或其他活性物质标记的某种特定的DNA或RNA片段，用于核酸分子杂交技术以检出标本中待测核酸分子。
9.超薄切片：是一种主要的透射电子显微镜制样技术，利用超薄切片机将样品切成40-50nm 左右，穿透很弱的电子束才能透过。
其主要步骤为：固定、脱水、包埋、切片、染色。
二．填空1、细胞生物学常用的光镜有相差显微镜、微分干涉显微镜、和荧光显微镜。
2、利用超速离心机对细胞组分进行分级分离的常用方法有差速离心和密度梯度离心。
3、单克隆抗体技术是将B淋巴细胞与无限繁殖的肿瘤细胞杂交的技术。
4、对电镜观察的生物样品有_要求样品很薄和保持样品的精细结构5、贴壁生长的细胞具有三个特点：单侧生长、形态多变、接触抑制。
第三章细胞生物学研究方法
第三章细胞生物学研究方法一、是非判断1．提高显微镜的分辨率，可通过缩短波长，或给标本染色。
2．光学显微镜和电子显微镜的差别在于后者的放大倍数远远大于前者，所以能看到更小的细胞结构。
3．亚显微结构就是超微结构。
4．电子显微镜的镜筒中是真空的，其目镜与光学显微镜的目镜也有很大区别。
5．在电子显微镜下观察细胞核时用碱性品红染色，染色质被染成红色。
6．为了使光学显微镜或电子显微镜标本的反差增大，可用化学染料对标本进行染色。
7．生物样品的电子显微镜分辨率通常是超薄切片厚度的十分之一，因而切得越薄，照片中的反差越强，分辨率也越高。
8．透射或扫描电子显微镜不能用于观察活细胞，而相差或倒置显微镜可以用于观察活细胞。
9．CsCl密度梯度离心法分离纯化样品时，样品要和CsCl混匀后分装，离心时，样品中不同组分的重力不同，停留在不同区带中。
10．用免疫荧光技术可显示与酶解过程有关的酶是否结合在微管上。
11．用带有标记的特定核酸分子作探针，测定与之互补的染色体DNA区段的位置，称为原位杂交。
12．Western blotting是体外分析RNA的技术。
13．进行流式细胞术时，所用的细胞需染色，而且还需对组织块中的细胞进行分散处理。
二、选择1．要观察肝组织中的细胞类型及排列，应先制备该组织的( )。
A．滴片B．切片 C．涂片 D．印片2．小鼠骨髓细胞染色体标本一般制备成细胞的( )。
A．滴片B．切片 C．涂片 D．印片3．观察血细胞的种类和形态一般制备成血液( )。
A．滴片D．切片 C．涂片 D．印片4．提高一般光学显微镜的分辨能力，常用的方法有( )。
A．利用高折射率的介质(如甘油) B．调节聚光镜，加红色滤光片C．用荧光抗体示踪D．将标本染色5．下列( )与显微镜能达到的分辨率无关。
A．光波波长B．物镜的放大倍数C．标本和透镜之间的物质的折射率D．透镜的数值孔径6．适于观察培养瓶中活细胞的显微镜是( )。
A．扫描电镜B．荧光显微镜C．相差显微镜D．倒置显微镜7．用于观察活细胞的显微镜是( )。
第二章细胞生物学研究方法
第二章细胞生物学研究方法第四节细胞培养与细胞工程一、细胞培养高等生物是由多细胞构成的整体，在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内（in vivo）的功能活动是十分困难的。
但是如果把活细胞拿到体外（in vitro）培养进行观察和研究，则要方便得多。
活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动，特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格，稍有不适就要死亡。
所以细胞培养技术（cell culture）就是选用最佳生存条件对活细胞进行培养和研究的技术。
动物细胞的生存环境与植物细胞差别很大，因而二者的培养方法很不相同。
（一）动物细胞培养细胞培养方式大致可分为两种（图2-25）：一种是群体培养（mass culture），将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中，让细胞贴壁生长，汇合（confluence）后形成均匀的单细胞层；另一种是克隆培养（clonal culture），将高度稀释的游离细胞悬液加入培养瓶中，各个细胞贴壁后，彼此距离较远，经过生长增殖每一个细胞形成一个细胞集落，称为克隆（clone）。
一个细胞克隆中的所有细胞均来源于同一个祖先细胞。
此外，为了制取细胞产品而设计了转鼓培养法，使用大容量的圆培养瓶，在培养过程中不断地转动，使培养的细胞始终处于悬浮状态之中而不贴壁。
图2-25 群体培养（左）和克隆培养（右）表2-3 目前实验室中常用的几种细胞系正常细胞培养的世代数有限，只有癌细胞和发生转化的细胞才能无限生长下去。
所谓转化即是指正常细胞在某种因子的作用下发生突变而具有癌性的细胞。
目前世界上许多实验室所广泛传用的HeLa细胞系就是1951年从一位名叫Henrietta Lacks的妇女身上取下的宫颈癌细胞培养而成。
此细胞系一直延用至今。
1. 原代培养（primary culture）：从动物机体取出的进行培养的细胞群。
原代培养的细胞生长比较缓慢，而且繁殖一定的代数后（一般10代以内）停止生长，需要从更换培养基。
细胞生物学研究的方法和技术
细胞生物学研究的方法和技术细胞生物学是一个非常重要的领域，它关注的是生命的基本单位——细胞。
在细胞生物学中，有很多不同的方法和技术可以用来研究细胞。
以下是一些关于细胞生物学研究方法和技术的讨论。
1、显微镜显微镜是细胞生物学家最常用的工具。
它们可以使科学家们观察到微小的细胞结构和细胞功能。
有很多种类型的显微镜，如光学显微镜、透射电子显微镜和扫描电子显微镜。
每种显微镜都有其特定的用途，因此细胞生物学家可能会使用数个显微镜来观察细胞。
2、细胞培养为了处理细胞，细胞生物学家需要将它们培养在一种特定的培养基中。
培养基通常由营养物质和生长因子组成，可以促进细胞生存和生长。
细胞培养技术使细胞生物学家能够从细胞的分子水平到细胞的行为和功能水平来研究细胞。
3、流式细胞术流式细胞术是一种分析单个细胞与分离的蛋白质、RNA或DNA的技术。
通过流式细胞术，细胞生物学家可以确定一个细胞群体中不同类型的细胞数量，或者确定单个细胞中不同类型的蛋白质或RNA的相对浓度。
流式细胞术已被广泛用于各种细胞生物学研究中。
4、免疫学技术免疫学技术是一组工具和方法，用于分析和表征一种细胞的蛋白质或其他分子的存在和表达。
这些技术的应用范围包括抗体染色、免疫印迹、酶联免疫吸附试验（ELISA）以及免疫沉淀等。
5、基因编辑技术CRISPR-Cas9技术是一种用于编辑基因的技术。
它允许科学家精确地从细胞或生物体的基因组中删除、添加或更改基因序列。
这项技术为研究细胞生物学提供了一个全新的工具箱，使得细胞及其功能可以被更精确和深入地研究。
6、蛋白质纯化和分析蛋白质是细胞中非常重要的分子，因为它们负责一系列重要的生物过程。
因此，细胞生物学家通常需要纯化和分析蛋白质，以了解细胞的功能。
蛋白质纯化技术包括更分、层析、电泳和质谱分析等方法。
结论最后，细胞生物学家在研究细胞的时候使用很多不同的技术和方法。
以上列举了一些最常见的技术，包括显微镜、细胞培养、流式细胞术、免疫学技术、基因编辑技术和蛋白质纯化和分析等。
细胞生物学实用方法与技术
细胞生物学实用方法与技术细胞生物学是研究细胞结构、功能和生理过程的学科，而实用方法与技术则是在细胞生物学研究中常用的实验方法和分析技术。
本文将介绍几种常见的细胞生物学实用方法与技术，包括细胞培养、细胞染色、蛋白质分析和基因编辑。
一、细胞培养细胞培养是细胞生物学研究的基础，通过将细胞放置在含有营养物质的培养基中，维持其生长和增殖。
细胞培养可以用于研究细胞的生理功能、病理机制以及筛选药物等。
常见的细胞培养技术包括无菌技术、细胞传代和细胞冻存等。
二、细胞染色细胞染色是观察和分析细胞形态、结构和功能的重要手段。
常用的细胞染色方法包括荧光染色、核酸染色和蛋白质染色。
荧光染色可以通过标记荧光抗体或荧光染料来检测特定蛋白质或细胞器的分布和表达水平。
核酸染色可以通过荧光染料如DAPI、Hoechst等来观察细胞核的形态和染色体的数量和结构。
蛋白质染色可以用于检测蛋白质的表达水平和定位。
三、蛋白质分析蛋白质是细胞的重要组成部分，研究蛋白质的表达水平和功能对于理解细胞生物学过程至关重要。
常用的蛋白质分析技术包括SDS-PAGE、Western blot和质谱分析等。
SDS-PAGE是一种常用的蛋白质分离技术，通过电泳将蛋白质按照分子量大小分离出来。
Western blot则可以用于检测特定蛋白质的表达水平和鉴定蛋白质的功能。
质谱分析可以用于鉴定蛋白质的氨基酸序列和翻译后修饰。
四、基因编辑基因编辑技术是近年来细胞生物学领域的重要突破，它可以精确地修改细胞或生物体的基因组。
常用的基因编辑技术包括CRISPR-Cas9系统和基因敲除技术。
CRISPR-Cas9系统通过引入一段特定的RNA序列和Cas9蛋白质，可以实现对细胞或生物体基因组中特定基因的精确修饰。
基因敲除技术则是通过引入特定的DNA序列或RNA干扰体，来抑制或靶向破坏特定基因的表达。
细胞生物学实用方法与技术的不断发展和创新，为研究人员提供了强大的工具和手段，推动了细胞生物学领域的进步。
细胞生物学的现代研究技术和方法
细胞生物学的现代研究技术和方法细胞生物学作为生物学的重要分支领域，研究细胞的结构、功能和生物过程对于深入理解生命的本质至关重要。
随着科技的不断进步，现代细胞生物学的研究技术和方法也在不断发展和创新。
本文将探讨一些在细胞生物学领域中常用的现代研究技术和方法。
一、光学显微镜技术光学显微镜是细胞生物学中最基本的工具之一，用于观察和研究细胞的结构和功能。
随着技术的发展，光学显微镜也得到了不断改进。
例如，荧光显微镜技术利用特定的荧光标记物使细胞的某些结构或分子可见，从而更好地研究细胞的动态过程。
二、电子显微镜技术电子显微镜是利用电子束和电磁透镜代替光线、将细胞的图像放大万倍的一种显微镜技术。
相比光学显微镜，电子显微镜具有更高的分辨率和放大倍数。
透射电子显微镜（TEM）可用于观察细胞的超微结构，如细胞核、线粒体和内质网等。
扫描电子显微镜（SEM）则能提供细胞表面的高清图像。
三、蛋白质分析技术蛋白质是细胞中最重要的分子之一，影响着细胞的功能和代谢过程。
蛋白质分析技术被广泛应用于细胞生物学研究中。
其中，聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）是常用的分离蛋白质的方法，可以根据蛋白质的分子质量进行分析和定量。
Western blotting（免疫印迹）则能检测特定蛋白质的存在和定量。
四、基因编辑技术基因编辑技术是近年来在细胞生物学领域中崭露头角的重要工具。
CRISPR-Cas9技术是一种高效的基因编辑技术，可用于修改细胞中的基因序列。
通过CRISPR-Cas9技术，研究人员可以研究基因在细胞中的功能，甚至对特定基因进行精确编辑。
五、细胞培养技术细胞培养技术是研究细胞生物学的基础，能够让研究者以人工方式培养出体外细胞。
细胞培养技术可广泛应用于研究细胞生长、分化和药物筛选等领域。
常用的细胞培养方法有悬浮培养和附着培养，具体选择哪种方法取决于研究的目的和细胞类型。
六、高通量测序技术高通量测序技术是近年来取得突破性进展的细胞生物学研究方法之一。
细胞生物学研究方法总结
细胞生物学研究方法总结细胞生物学是研究细胞的结构、功能和活动的学科领域。
在细胞生物学研究中，科学家们使用了多种方法和技术来观察和探索细胞的奥秘。
本文将总结几种常见的细胞生物学研究方法，包括显微镜技术、细胞培养和基因编辑等。
一、显微镜技术显微镜技术是细胞生物学研究中最基础也是最常用的方法之一。
通过显微镜，科学家能够观察到细胞和细胞内各种结构的微观细节。
常见的显微镜技术包括：1. 光学显微镜：利用光线聚焦成像的原理，可以观察到细胞核、细胞质以及细胞膜等基本结构。
2. 电子显微镜：通过利用电子束的原理，将样品进行电子显微镜投射，可以观察到细胞内更细微的结构，如线粒体、高尔基体等。
3. 共聚焦激光显微镜：利用激光光源和经过滤波的探测器，可以在三维空间内重建出细胞内的结构和分子分布。
二、细胞培养细胞培养是研究细胞生物学的常用方法之一。
通过将人类或动植物组织中的细胞分离并生长在培养皿中，科学家可以观察到细胞在不同生长条件下的行为和反应。
常见的细胞培养技术包括：1. 原代细胞培养：从活体组织中分离出来的原代细胞，可以用于观察细胞的形态、增殖和代谢等。
2. 细胞系：将原代细胞进行传代培养并永久保存，形成细胞系，可用于长期的细胞研究。
3. 三维细胞培养：将细胞种植在具有三维结构的培养基中，如凝胶、支架等，模拟体内环境，有助于研究细胞的生长、分化和功能。
三、基因编辑基因编辑技术是近年来迅速发展的一种研究方法。
通过人工干预细胞的基因组，科学家们能够修改细胞的遗传信息，探索基因与细胞功能之间的关系。
常见的基因编辑技术包括：1. CRISPR-Cas9系统：通过引入特定的CRISPR RNA和Cas9蛋白质，可以实现对细胞基因组的定点突变和修复。
2. TALEN：利用转录激活样效应子核酸酶（TALEN）来剪切和编辑细胞基因组。
3. RNA干扰（RNAi）：通过引入特定的小分子RNA序列，可以靶向特定基因的mRNA分解，从而实现基因的沉默。
细胞生物学的实验方法和技术
细胞生物学的实验方法和技术细胞生物学是研究细胞结构、功能和生命活动的学科，可以帮助我们了解生命的起源和本质。
在细胞生物学领域，实验是非常重要的，因为只有通过实验才能获取丰富的数据和信息。
接下来，我们将介绍一些常用的细胞生物学实验方法和技术。
1. 细胞培养细胞培养是一种将细胞放置在含有营养物的培养基上的实验方法。
这种方法可以被应用于很多方面，例如研究基因表达、病理生理学和新药发现等领域。
细胞培养通常要求细胞处于可能生长和分裂的特定生长条件下，培养基的配方和组成要根据细胞类型进行调整。
2. 免疫荧光染色免疫荧光染色是一种将抗体特异性地与待检测蛋白质结合，然后用荧光染色剂标记抗体的实验方法。
这种方法被广泛应用于检测蛋白质的组织学定位、蛋白质相互作用和细胞信号传导等方面的研究。
3. 细胞色素c释放实验细胞色素c释放实验是通过检测细胞色素c的释放来检测细胞凋亡状况的实验方法。
这种实验需要将细胞暴露在合适的刺激条件下，然后收集细胞，用针头机械破碎并分离出线粒体，接着用色素c检测试剂。
此方法可以被应用于癌症治疗、新药研发和基础细胞生物学研究等领域。
4. 网格溶解实验网格溶解实验是一种检测细胞侵袭和扩散能力的实验方法，常用于研究细胞恶性生长、转移和肿瘤治疗等领域。
这种实验需要在培养皿中放置一层含有孔的膜，将预处理好的细胞悬浮在孔上方的区域，然后留置一段时间等待细胞穿过孔隙层次，最后收集并处理细胞样本，通过各种方式检测细胞侵袭和扩散的情况。
5. 蛋白-蛋白相互作用实验蛋白-蛋白相互作用实验是一种检测蛋白质互相作用的实验方法。
这种实验有几种方法，包括酵母对二杂交法、共免疫沉淀法和化学交联法等。
这些方法可以帮助我们了解蛋白质相互作用的机制，为研究信号转导、基因表达和疾病机理等领域提供参考资料。
以上是几种常用的细胞生物学实验方法和技术。
每一种方法都有自己独特的适用范围和步骤，研究者们需要根据具体的实验内容选择合适的方法。
细胞生物学常用研究方法
Southern杂交：是体外分析特异DNA序列的方法，操作时先用限制性内切酶将核DNA或线粒体DNA切成DNA片段，经凝胶电泳分离后，转移到醋酸纤维薄膜上，再用探针杂交,通过放射自显影，即可辨认出与探针互补的特殊核苷序列.将RNA转移到薄膜上,用探针杂交，则称为Northern杂交.RNAi技术: 是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA 高效特异性降解的现象.由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。
可以利用siRNA或siRNA表达载体快速、经济、简便的以序列特异方式剔除目的基因表达，所以现在已经成为探索基因功能的重要研究手段。
Southern杂交一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量]。
扫描电镜技术：是用一束极细的电子束扫描样品，在样品表面激发出次级电子，次级电子的多少与样品表面结构有关，次级电子由探测器收集，信号经放大用来调制荧光屏上电子束的强度，显示出与电子束同步的扫描图像。
细胞显微分光光度计:用来描述薄膜、涂层厚度超过1微米的物件的光学性能的显微技术。
免疫荧光技术:将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法.由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出，从而可对抗原进行细胞定位。
电镜超薄切片技术：超薄切片是为电镜观察提供极薄的切片样品的专门技术。
用当代较好的超薄切片机，大多数生物材料，如果固定、包埋处理得合适，可以切成50-100微米的超薄切片。
Northern印迹杂交（Northern blot）。
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Southern杂交: 是体外分析特异DNA序列的方法，操作时先用限制性内切酶将核DNA或线粒体DNA切成DNA片段，经凝胶电泳分离后，转移到醋酸纤维薄膜上，再用探针杂交，通过放射自显影，即可辨认出与探针互补的特殊核苷序列。
将RNA转移到薄膜上，用探针杂交，则称为Northern杂交。
RNAi技术: 是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。
由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。
可以利用siRNA或siRNA表达载体快速、经济、简便的以序列特异方式剔除目的基因表达，所以现在已经成为探索基因功能的重要研究手段。
Southern杂交一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量]。
扫描电镜技术：是用一束极细的电子束扫描样品，在样品表面激发出次级电子，次级电子的多少与样品表面结构有关，次级电子由探测器收集，信号经放大用来调制荧光屏上电子束的强度，显示出与电子束同步的扫描图像。
细胞显微分光光度计：用来描述薄膜、涂层厚度超过1微米的物件的光学性能的显微技术。
免疫荧光技术：将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。
由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出，从而可对抗原进行细胞定位。
电镜超薄切片技术：超薄切片是为电镜观察提供极薄的切片样品的专门技术。
用当代较好的超薄切片机，大多数生物材料，如果固定、包埋处理得合适，可以切成50-100微米的超薄切片。
Northern印迹杂交（Northern blot）。
这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。
放射自显影技术：放射自显影技术是利用放射性同位素的电离辐射对乳胶（含AgBr或AgCl）的感光作用，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究的一种细胞化学技术。
放射自显影技术（radioautography；autoradiography）用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。
其原理是将放射性同位素（如14C和3H）标记的化合物导入生物体内，经过一段时间后，将标本制成切片或涂片，涂上卤化银乳胶，经一定时间的放射性曝光，组织中的放射性即可使乳胶感光。
核磁共振技术：可以直接研究溶液和活细胞中相对分子质量较小(20，000 道尔顿以下)的蛋白质、核酸以及其它分子的结构，而不损伤细胞。
DNA序列分析：在获得一个基因序列后，需要对其进行生物信息学分析，从中尽量发掘信
息，从而指导进一步的实验研究。
通过染色体定位分析、内含子／外显子分析、ORF分析、表达谱分析等，能够阐明基因的基本信息。
分子杂交技术: 具有互补核苷酸序列的两条单链核苷酸分子片段，在适当条件下，通过氢键结合，形成DNA-DNA，DNA-RNA或RNA-RNA杂交的双链分子。
这种技术可用来测定单链分子核苷酸序列间是否具有互补关系。
（一）原位杂交（in situ hybridization）。
用于检测染色体上的特殊DNA序列。
最初是使用带放射性的DNA探针，后来又发明了免疫探针法。
蛋白质印迹法：即Western Blot。
它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。
其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。
通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息。
GFP（绿色荧光蛋白）的应用：用于特定蛋白的标记定位外，GFP亦大量用于各种细胞器的标记如细胞骨架、质膜、细胞核等等。
Shi等人曾报道将GFP融合到大肠杆菌细胞膜表面用作标记蛋白，这一技术将有助于提高多肽库的筛选效率、疫苗的研制、构建细胞生物传感器用作环境检测以及探测信号转导过程等等。
负染技术: 用重金属盐(如磷钨酸)对铺展在载网上的样品染色；吸去染料，干燥后，样品凹陷处铺了一层重金属盐，而凸的出地方没有染料沉积，从而出现负染效果，分辨力可达1.5nm 左右。
细胞融合技术：所谓细胞融合就是指在外力(诱导剂或促融剂)作用下,两个或两个以上的异源(种、属间)细胞或原生质体相互接触,从而发生膜融合、胞质融合和核融合并形成杂种细胞的现象称为细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)
免疫共沉淀：用抗体将相应特定分子沉淀的同时，与该分子特异性结合的其他分子也会被带着一起沉淀出来的技术。
这种技术常用于验证蛋白质之间相互特异性结合。
常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。
免疫电镜技术：是利用电子显微镜在超微结构水平上研究免疫反应的一项的新技术。
用电子致密物质如铁蛋白等标记抗体，然后让其与含有相应抗原的生物标本反应，从电镜观察可见电子致密物质的所在位置，识别抗原、抗体反应的部位。
由于电子显微镜的分辨力很高，故可准确地显示抗原所在部位。
该技术是一种在分子水平上的抗原定位法，实际上是将细胞水平的荧光抗体技术的原理应用到分子水平上。
此项技术在细胞抗原成分的定位、识别以及细胞形态和功能关系的研究上，已成为重要的方法。
主要用于病毒、细菌等抗原定位、免疫性疾病的发病机理及超微结构免疫细胞化学研究等。
冰冻蚀刻freeze-etching:亦称冰冻断裂。
标本置于干冰或液氮中冰冻。
然后断开，升温后，冰升华，暴露出了断面结构。
向断裂面上喷涂一层蒸汽碳和铂。
然后将组织溶掉，把碳和铂的膜剥下来，此膜即为复膜（replica）。
BrdU incorporation：
阿糖胞苷（Ara-C）对人肺腺癌细胞株A549的凋亡诱导作用及其机制。
方法Ara—C体外作用于／t549细胞，噻唑蓝还原法（MTT法）检测Ara—C对A549细胞增殖的抑制作用；Hoechst33258荧光染色观察细胞核形态学的变化；单细胞凝胶电泳技术（comet assay）测定A549细胞DNA的损伤程度；以Western blotting进一步证明A549细胞发生凋亡。
结果Ara-C对A549细胞的增殖有明显抑制作用；观察到特异性的凋亡小体；Ara—C导致A549细胞发生DNA链断裂，并呈明显剂量依赖性增强：Western blotting显示caspase8，9，3都不同程度被激活，多聚ADP核糖聚合酶（PARP）被剪切降解。
结论揭示了Ara—C明显诱导A549细胞凋亡；细胞凋亡通路不仅通过线粒体途径，还通过膜受体途径，两条通路协同作用使凋亡信号增强；提示Ara-C对A549细胞有明显的化疗作用。
不可能存在绝对的核蛋白啊，因为蛋白合成是在胞浆，所以核里面再怎么多，胞浆里总会有那么一点嘛。
而且很多蛋白是一直在胞浆胞核之间穿梭，特别是信号通路中的很多蛋白，始终是在胞浆与胞核之间保持一个动态的平衡，不断地在核与浆之间循环。
这种动态的平衡其实也是生物体的精妙的调控机制。
采用干细胞治疗有着多种优势：低毒性（或无毒性），即使不完全了解疾病发病的确切机理治疗也可达到较好的治疗效果，自体干细胞移植可避免产生免疫排斥反应，对传统治疗方法疗效较差的疾病多有惊人的效果。
随着胚胎干细胞和iPS细胞的研究，更可能从患者自身细胞开始获得全能的干细胞，进而分化为所需细胞甚至器官，完全和自身匹配没有免疫排斥的细胞或器官移植已不再是梦，当人体器官衰老的时候，将衰老器官用自身细胞培育出的相应器官替代移植，人类将有可能延年益寿。
配体与膜上受体结合后，网格蛋白聚集在膜下一侧，逐渐形成50-100nm的质膜凹陷，称网格有被小窝，一种小分子GTP结合蛋白在深陷有被小窝的颈部装备成环，dynamin蛋白水解与其结合的GTP引起颈部缢缩，最终脱离质膜形成网格蛋白有被小泡。
1内质网选用放射性标记的CDP胆碱，用放射自显观察，微管用罗丹明标记的抗微管蛋白，用免疫荧光观察，比较图像是否有相关。
2用罗丹明标记微管蛋白连续注入培养细胞，用荧光显微镜观察。
3用oligo-dT对提取的RNA进行亲和层析，提取MRNA进行southern杂交。
4用荧光原位杂交确定。
5用早熟染色体凝集实验，PCC。
6扫描电镜技术，概念你自己找。
7用绿色荧光蛋白标记CENP-E蛋白。
8用BRdu incorporation培养，会引起DNA 突变，对其进行序列分析。
9用RNA干扰技术，本质是与mRNA结合阻止期翻译。
10，用荧光共振能量转移或酵母双杂交实验。
杉醇还可抑制细胞在层粘连蛋白上的粘附作用。
紫杉醇可使微管蛋白和组成微管的微管蛋白二聚体失去动态平衡,诱导与促进微管蛋白聚合、微管装配,防止解聚,使微管稳定,从而阻止癌细胞的生长。
微管是真核细胞的一种组成成分,它是由2条类似的多肽(α和β)为单位构成的微管蛋白二聚体形成的。
正常情况下,微管蛋白和组成微管的微管蛋白二聚体存在动态平
衡,紫杉醇可使2者之间失去动态平衡,导致细胞在有丝分裂时不能形成纺锤体和纺锤丝,抑制了细胞分裂和增殖,使癌细胞停止在G2期和M期,直至死亡,进而起到抗癌作用。