鸡蛋分子检测技术的研究
QuEChERS-_超高效液相色谱串联质谱法测定鸡蛋中甲硝唑和地美硝唑药物残留量
QuEChERS-超高效液相色谱串联质谱法测定 鸡蛋中甲硝唑和地美硝唑药物残留量王 易(广东省惠州市质量计量监督检测所,广东惠州 516000)摘 要:建立了QuEChERS结合超高效液相色谱串联质谱法测定鸡蛋中甲硝唑和地美硝唑残留量的方法。
样品经乙腈提取,QuEChERS净化后,使用Agilent Eclipse Plus C18柱分离,以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相进行洗脱,多反应监测模式下检测,外标法定量。
结果表明,甲硝唑和地美硝唑的质量浓度在0~50 ng·mL-1时线性关系良好(r2>0.999),检出限分别为0.002 μg·kg-1、0.007 μg·kg-1;在低、中、高3个添加水平下甲硝唑和地美硝唑的加标回收率分别为95.79%~97.80%、95.66%~100.10%。
该方法前处理简单、重现性好、灵敏度高,适用于鸡蛋中甲硝唑、地美硝唑的测定。
关键词:鸡蛋;甲硝唑;地美硝唑;QuEChERS;超高效液相色谱串联质谱法Determination of Metronidazole and Dimetridazole Residues in Eggs by QuEChERS Combined with Ultra-High Performance Liquid Chromatography Tandem-Mass SpectrometryWANG Yi(Guangdong Huizhou Quality and Measuring Supervision Testing Institute, Huizhou 516000, China) Abstract: A QuEChERS combined with ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry method was established to determine the residues of metronidazole and dimetridazole in eggs. The sample was extracted with acetonitrile, purified with QuEChERS, and separated using an Agilent Eclipse Plus C18 column. The mobile phase was eluted with acetonitrile and 0.1% formic acid aqueous solution, and detected under multiple reaction monitoring mode. The external standard method was used for quantification. The results showed that the mass concentrations of metronidazole and dimetridazole were linear in the range of 0~50 ng·mL-1 (r2>0.999), and the detection limits were 0.002 μg·kg-1 and 0.007 μg·kg-1; under low, medium and high addition levels, the recoveries were 95.79%~97.80%, 95.66%~100.10% respectively. The method is simple, reproducible and sensitive, and is suitable for the determination of metronidazole and dimetridazole in eggs.Keywords: eggs; metronidazole; dimetridazole; QuEChERS; ultra-high performance liquid chromatography tandem-mass spectrometry鸡蛋含有非常丰富的卵磷脂、脂肪、蛋白质、微生物、矿物质、微量元素等营养成分,被誉为“全营养”食品[1],现已成为日常饮食中的重要组成部分。
蛋清实验分析报告
蛋清实验分析报告1. 引言蛋清是指鸡蛋中透明液体的部分,也被称为鸡蛋白。
蛋清富含蛋白质、维生素和矿物质等营养成分,并且在食品加工和实验室研究中有着广泛的应用。
本实验旨在对蛋清进行分析,包括蛋清中蛋白质含量的测定和电泳分析。
2. 实验步骤2.1 蛋清样品制备从市场购买新鲜鸡蛋,并将鸡蛋分离成蛋清和蛋黄。
本实验主要使用蛋清部分进行分析。
2.2 蛋白质含量测定采用标准的比色法对蛋清中的蛋白质含量进行测定。
拿取一定体积的蛋清样品,并加入适量的显色剂,充分混合后等待一定时间,使用分光光度计测量样品的吸光度,并与标准曲线进行比对,从而确定蛋清中蛋白质的含量。
2.3 电泳分析将测得蛋清中蛋白质的含量较高的样品进行进一步的电泳分析。
电泳是一种常用的蛋白质分析方法,通过在电场中的带电蛋白质分子在凝胶中的迁移速率不同来进行分离和检测。
3. 结果与讨论3.1 蛋白质含量测定结果经过比色法测定,蛋清样品中的蛋白质含量为X g/L。
这个结果说明蛋清是一种富含蛋白质的食品材料,适合作为膳食补充或食品加工的原料。
3.2 电泳分析结果经过电泳分析,我们观察到蛋清样品在凝胶上呈现出多个蛋白质带。
这些带对应着蛋清中不同分子质量的蛋白质。
通过与已知分子质量的标准品对比,我们可以初步确定蛋清中包含了多种蛋白质成分。
3.3 结果讨论蛋清中蛋白质含量的测定结果表明蛋清具有较高的蛋白质含量,这对于身体健康和生理功能的维持非常重要。
电泳分析结果显示,蛋清中存在多种蛋白质成分,这些蛋白质可能具有不同的功能和生理效果。
通过进一步的研究和分析,我们可以深入了解蛋清中的蛋白质组成,为其在食品加工和医药领域的应用提供有力的基础。
4. 结论蛋清样品中的蛋白质含量为X g/L,表明蛋清富含蛋白质。
电泳分析结果显示蛋清中存在多种蛋白质成分,进一步的研究将有助于揭示蛋清的营养和功能价值。
5. 参考文献•参考文献1•参考文献2•参考文献3注:本报告仅为实验结果分析,不涉及具体实验操作细节。
鸡蛋蛋白质水解多肽分子量分布的研究
1 .o 。 60 %
关键 词 : 蛋蛋 白质 ; 鸡 水解 多肽 ; 子 量分布 分 中 圈分 类号 :S0 T2 1 文 献标识 码 : A 文章 编 号 :0 4 8 2一(0 2 o 10 —14 2o )5—0 5 0 5 4— 2
摘
要 : 用起 滤法 结合凝 胶 过滤 色谱 法 , 定 了鸡蛋 蛋 白水解 产物 中肽 分子 量 的分 布情 况 。结 果表 采 测
明: 鸡蛋 蛋 白质 水解 多肽 分子 量是 连 续分布 的 , 子 量 10 分 00以下 占 6 .7 、 子 量 10 65 % 分 0 0—2O OO之 间
6. 8 , t e n 4 0 d l 0 0 i 7. 3 。 x e d 1 0 0 i 1 0 2 % bw e 0 0 a 0 0 S 7 % e c e 0 0 8 6. 0% . n
Ke r s e rti;y ml e e t e o l ua —w i t irui ywod : g poe h d y dp p d ;m elr n z i c e sb t n h g dt o
维普资讯
第 1卷 第 5 8 期
2O O 2年 1 0月
哈 尔 滨 商 业 大 学 学 报( 自然科 学版 )
J u n lo r i ie st fCo me c t r lS in e d t n o r a fHa bn Unv ri o m y r e Nau a ce cs E ii o
Ab ta t I l d sr u in o e t e moe u a sr c : 1 it b t f p p i l c r— w ih n h d o y e g r t i rd c a e i o d l e g t i y r l s d e g p oe n p o u t h s b e ee n n t d b t f t t n a d g lf tr c r ma o r p y 1e r s l n iae h t t e e n d t n i a e y u r i r i n e l h o tg a h . l e u t id c t d t a l a la o i e I s h
鸡蛋品质检测的研究现状及其展望
【 关键词 】 鸡蛋 ;品质 ;检 测方法
中 图 分 类 号 :T 2 3 7 S 5 . 文献 标 识 码 :A 文 章 编 号 :10 0 9—1 0 (0 2 1 0 3—0 8 7 20 )1 —0 3 3
研 究 了 蛋 壳 裂 纹 检 测 仪 ,提 高 了 裂 纹 检 测 精 度 。
< 粮油加工与食 品机械)20 年 第 1 期 02 1 33
的方 法 ,其 原 理 是 根 据 敲 击 鸡 蛋 所 产 生 的 声 脉 冲振 动 ,做 频谱 分 析来 研究 鸡 蛋的 品质 特性 。
Sn a( 9 2 ih 1 9 )通 过对 鸡 蛋 敲击所 产 生 的声学 共振 特性 来 分 析 鸡 蛋 的 蛋 黄 小 孔 和 裂 纹 。公 茂 法 等 人
检测 速 度为 每秒 5个鸡 蛋 。
随着 人 民生活 水 平 的提 高和 对 食 品需 求 的变 化 如何 检 测 品质 ,减 少鸡 蛋 破损 ,提 高 经济 效 益 ,已经 成 为 当前及 未来 我 国亟 待解 决 的 问题 。而 且 ,鸡 蛋壳 质 量 的好 坏直 接影 响鸡 蛋 的破 损率 。据报 道美 国每 年 约有 6 %的鸡 蛋 因蛋壳 破 损 而 浪 费 ,造成 的经 济 损 失 达 到 70 0多万 美元 。同 时 ,蛋 的 内部 品 质 的好 坏 直 0 接影 响 食 用 品 质 ,甚 至 每 个 食 用 者 的 身 体 健 康 。 因
维普资讯
专 题 综 述
血
鸡 蛋 品质 检 测 的研 究现 状 及 其 展 望
姜瑞 涉 陆 秋君 王 俊
( 江 大学农 业 工 程 与食 品科 学学 院 ) 浙 【 摘要】 近几年来,国内外不少研究机构开始对
鸡蛋中兽药残留的检测方法及其防治措施
鸡蛋中兽药残留的检测方法及其防治措施近年来,随着养殖业的快速发展,鸡蛋成为人们日常生活中不可或缺的食品之一。
一些不法商人为了追求利益最大化,可能会在鸡蛋中添加兽药,以促进鸡的生长或防止疾病的发生。
这样一来,就会导致鸡蛋中出现兽药残留的问题,给人们的健康带来潜在风险。
对鸡蛋中兽药残留的检测方法及其防治措施的研究显得尤为重要。
鸡蛋中兽药残留的检测方法主要有以下几种:物理检测法,化学检测法,免疫学检测法和分子生物学检测法。
物理检测法主要是通过显微镜观察或用机械手段分离兽药残留物质。
这种方法简单易行,但是只能对部分大颗粒的兽药残留进行检测。
化学检测法是通过对鸡蛋中兽药残留物质的化学特性进行分析,比如利用高效液相色谱、气相色谱和质谱等技术分析兽药的种类和残留量。
这种方法的优点是准确性高,但是需要专业的仪器设备和化学知识。
免疫学检测法是利用抗体与兽药残留物质结合,通过观察或测量抗体与兽药的结合程度来判断是否存在兽药残留。
这种方法检测速度快,可靠性高,但对抗体的选择和制备较为困难。
分子生物学检测法是通过提取鸡蛋中的DNA或RNA,利用聚合酶链反应(PCR)或其他核酸检测技术,检测鸡蛋中是否存在兽药的遗传物质。
这种方法具有高度的特异性和灵敏度,但是对于小剂量的兽药残留可能检测不到。
针对鸡蛋中兽药残留的防治措施,可以从源头上加强管理措施,严格禁止添加兽药;加强养殖场的监管,定期对鸡蛋进行抽检;加强消费者的宣传教育,提高其食品安全意识;加强兽药残留监测中心的建设,提高检测方法和技术的准确性和敏感性。
鸡蛋生产企业可以加强自我监管,建立严格的质量控制体系,规范兽药使用的程序和剂量,确保生产出无兽药残留的优质鸡蛋。
政府部门也应加强宣传和培训工作,引导养殖场科学合理地使用兽药,避免滥用和误用兽药导致鸡蛋中兽药残留的问题。
对于鸡蛋中兽药残留的检测方法及其防治措施的研究对保障人们饮食安全至关重要。
我们应加强监管力度,提高兽药残留的检测能力,加强宣传和教育,增强人们的食品安全意识,共同营造一个安全可靠的食品环境。
鸡蛋卵清中溶菌酶的提取与纯化
四、实验材料和方法
四、实验材料和方法
1、实验材料:新鲜鸡蛋、磷酸缓冲液(PBS)、乙酸乙酯、正丁醇、蛋白酶 抑制剂、透析袋。
四、实验材料和方法
2、实验设备:高速离心机、真空泵、氮气仪、色谱柱。 3、实验方法: (1)鸡蛋卵清的收集:将新鲜鸡蛋打破,分离出卵黄和卵清, 收集卵清备用。 (2)粗提:将收集的卵清加入磷酸缓冲液(PBS),搅拌均匀 后进行高速离心,取上清液即为粗提液。 (3)沉淀:向粗提液中加入等体积的 乙酸乙酯,充分混合后静置分层,取下层沉淀。 (4)
鸡蛋卵清中溶菌酶的提取与 纯化
目录
01 一、背景介绍
03 三、实验原理
02 二、研究目的 04 四、实验分析
07 参考内容
06 六、结论与展望
一、背景介绍
一、背景介绍
溶菌酶是一种广泛存在于生物体内的天然抗菌酶,具有抗菌、抗炎、抗病毒 等多种生物活性。近年来,随着人们对食品安全和药物研发的度不断提高,从天 然生物资源中提取和纯化溶菌酶成为了一个热门领域。鸡蛋卵清作为一种丰富的 天然资源,具有较高的溶菌酶含量,因此成为了提取和纯化溶菌酶的重要来源。 本次演示旨在探讨鸡蛋卵清中溶菌酶的提取与纯化方法,以期为相关领域的研究 提供参考。
四、实验材料和方法
复溶:将沉淀物真空干燥后,加入适量正丁醇溶解,再加入透析袋中透析去 除小分子杂质。 (5)色谱分离:将透析后的溶液通过色谱柱进行分离,收集流 出液,检测其中溶菌酶的纯度和含量。 (6)鉴定:采用光谱分析、分子量测定 等方法对纯化的溶菌酶进行鉴定。
五、实验结果及分析
五、实验结果及分析
二、研究方法与技术
1、材料与设备
1、材料与设备
本研究采用新鲜鸡蛋作为原料,使用离心机、分光光度计、电泳仪等设备进 行实验。
鸡蛋蛋白质含量无损检测技术研究_高佩佩
( MSC) ,Standard Normalized Variate( SNV) and Spectroscopic Transformation( ST) of The Unscrambler pretreated
spectroscopy. Combined with partial least squares ( PLS ) method with leverage correction to establish the
and sharp-side model R2 were above 0.97,values of RMSEE,RMSEP were small and close to each other; With the
从鸡蛋中获取生物活性蛋白及生物活性肽新探
在内的很多细菌具有广谱的抗菌作用。还已证明,
第26卷第4期
国外畜牧学——猪与禽
・55・
万 方数据
体外试验发现,卵清蛋白与二羰基甲基乙醛酸 发生反应可在体外以剂量依赖型的方式诱导肿瘤坏 死因子a(TNF一位)的释放(Fan等,2003),现在免疫 原性卵清蛋白肽已在癌症的免疫治疗中被用于增强 机体的免疫应答(Vidovic等,2002;Goldberg等, 2003;He等,2003)。Tezuka和Yoshikawa(1995)发 现,添加卵清蛋白肽OA 77—84和oA 126—134后 巨噬细胞的吞噬能力增强,这两种肽分别是胃蛋白 酶和胰凝乳蛋白酶对卵清蛋白的消化产物。同样, 卵粘蛋白肽在体外表现提高巨噬细胞的活性 (Tanizaki等,1997)。合成的类卵粘蛋白肽也表现 出免疫调节活性,可诱导T细胞分泌细胞因子如白 细胞介素4(IL一4)、白细胞介素10(IL—10)、白细 胞介素13(IL—13)、丫一干扰素(INF—Y)和白细胞 介素6(IL一6)(Holen等,2001)。已经证明,溶菌酶 可起免疫调节剂和免疫刺激剂的作用。现已证明, 进行免疫治疗的同时使用溶菌酶对改善慢性窦炎有 效果(Asakura,1990),可使慢性支气管炎病人的体 液免疫应答和细胞免疫应答恢复正常(Sava,1996), 还可以提高杂交瘤和淋巴细胞中的抗体产量,因此 溶菌酶被称为免疫球蛋白生产刺激因子(Sugahara 等,2000),可用以调控和恢复那些正在接受抗癌治 疗的免疫抑制型病人的免疫应答(Sava,1996)。此 外,据认为,溶菌酶还可能通过刺激巨噬细胞的吞噬 功能而发挥抗菌作用。肽聚糖的水解产物可作为一 种佐剂或免疫调节剂(Li—Chan和Nakai,1989)。 卵转铁球蛋白在鸡是一种急性期蛋白质,在炎症和 感染时,其在血清中的水平会增高(Xie等,2002)。 Xie等(2002)证明,转铁球蛋白在体外能起免疫调 节剂的作用而调控巨噬细胞和异嗜细胞的功能。还 已证明了转铁球蛋白进一步的免疫调节作用,包括 抑制鼠脾淋巴细胞的增生(Otani和Odashima, 1997),提高狗外周血单核细胞和多形核细胞的吞噬 反应(Hirota等,1995)。最后,研究结果还表明,血 清胱抑素(cystatin)可以通过细胞因子网络以及通
dna提取 实验报告
dna提取实验报告DNA提取实验报告引言:DNA提取是生物学和分子生物学中的一项基础实验技术,通过提取和纯化DNA 分子,可以进一步进行DNA测序、PCR扩增、基因克隆等分子生物学实验。
本实验旨在探究DNA提取的原理和方法,并通过实际操作来提取和纯化DNA分子。
材料与方法:1. 实验材料:鸡蛋、酒精、洗涤剂、盐、蛋白酶K、蒸馏水等。
2. 实验步骤:a. 将鸡蛋壳剥离,取出蛋黄与蛋白。
b. 将蛋黄放入容器中,加入适量的洗涤剂和蒸馏水,充分混合。
c. 加入盐和蛋白酶K,轻轻搅拌,使其充分溶解。
d. 将溶液倒入离心管中,离心10分钟,使得DNA沉淀到离心管底部。
e. 倒掉上层液体,加入冰冷的酒精,轻轻晃动离心管,观察DNA沉淀的形成。
结果与讨论:通过以上实验步骤,我们成功地提取到了DNA分子。
在实验过程中,洗涤剂和蛋白酶K的作用是破坏细胞膜和细胞核膜,使DNA释放出来。
盐的加入可以中和DNA周围的带电离子,使其沉淀。
冰冷的酒精则提供了一个适合DNA沉淀的环境。
DNA提取是分子生物学实验中的关键步骤,其成功与否直接影响后续实验的结果。
在实际操作中,需要注意以下几点:1. 实验材料的质量和纯度对结果有重要影响,因此需要选择优质的鸡蛋和纯净的试剂。
2. 操作过程中要严格遵守无菌操作,避免外源性DNA的污染。
3. 需要注意实验仪器的消毒和清洁,以防止实验结果的干扰。
4. 实验过程中要轻柔操作,避免DNA的断裂或损伤。
DNA提取的成功与否还与样本的类型有关。
在本实验中,我们选择了鸡蛋作为样本,因为鸡蛋中含有大量的DNA分子。
而在实际应用中,可以从不同的生物样本中提取DNA,如血液、植物叶片等。
不同样本的DNA提取方法可能会有所差异,需要根据具体样本的特点进行相应的优化。
DNA提取技术的不断发展和改进,为分子生物学和生物技术的研究提供了强有力的支持。
通过提取和纯化DNA分子,我们可以进一步进行基因测序、基因克隆、遗传病诊断等研究工作。
高效液相色谱紫外法同时检测鸡蛋中5种青霉素类药物残留的研究
C o l l e g e o f An i m a l S c i e n c e a n d V e t e r i n a r y Me d i c i n e ,Q i n g d a o Ag r i c u l t u r a l U n i v e r s i t y,Q i n g d a o 2 6 6 1 0 9 ,
中图 分 类 号 : ¥ 8 5 9 . 7 文献标识码 : A 文 章 编 号 :1 6 7 1 — 7 2 3 6 ( 2 0 1 7 ) 0 8 — 2 4 8 3 — 0 6
Re s i d u e An a l y s i s o f Fi v e Ki n d s o f Pe n i c i l l i ns i n Eg g s b y Hi g h Pe r f o r ma nc e Li qu i d Ch r o ma t o g r a p h y — Ul t r a v i o l e t De t e c t i o n L I L e i — i r n g ,L I U J u n - h u a 2 ,L I U B a o - t a o ,F U Ho n g - l e i 。 ,Z OU Mi n g
C h i n a;2 . Qi n g d a o I n s p e c t i o n S t a t i o n o f Fe e d a n d V e t e r i n a r y Dr u g,Qi n g d a o 2 6 6 1 0 0 ,C h i n a )
中国 畜 牧 兽 医
2 0 1 7 , 4 4 ( 8 ) : 2 4 8 3 — 2 4 8 8
C h i n a An i ma l Hu s b a n dr y & Ve t e r i n a r y Me d i c i n e
鸡蛋的检测与质量认证技术
鸡蛋的检测与质量认证技术近年来,食品安全问题成为社会关注的焦点之一。
而鸡蛋,作为人们饮食中重要的营养来源之一,其质量的安全性更是备受关注。
因此,鸡蛋的检测与质量认证技术的研究和应用显得尤为重要。
本文将从鸡蛋检测技术的历史发展、现有的鸡蛋质量检测方法以及未来的发展趋势等方面展开论述。
一、鸡蛋检测技术的历史发展随着科技的进步和食品安全意识的提高,鸡蛋检测技术也不断得到改进和完善。
早期的鸡蛋检测主要依赖目视检查,仅仅能对鸡蛋的外观进行简单判断,无法全面了解鸡蛋的内部品质。
随着电子显微镜、痕量元素分析等技术的应用,鸡蛋检测技术有了长足的发展。
如今,我们可以通过各种物理、化学、生物学的手段对鸡蛋的质量进行全面检测。
二、现有的鸡蛋质量检测方法1. 外观检测法外观检测法是最常见的一种方法,通过目视或借助仪器对鸡蛋表面进行检测,包括鸡蛋壳的颜色、形状、表面是否有裂纹等方面。
但这种方法只能检测一些表面问题,对于鸡蛋内部的质量无法获得有效的信息。
2. 重量检测法重量检测法是通过称重来检测鸡蛋的质量。
合格的鸡蛋质量一般在指定的范围内,重量的偏差可能意味着鸡蛋内的某些问题,如蛋黄和蛋白的配比不合适等。
3. 壳膜检测法壳膜检测法是通过鸡蛋壳外膜的透气性、抗压性、孔隙度等参数进行评估。
这种方法可以判断鸡蛋的新鲜程度和存储条件。
4. 蛋黄和蛋白指标检测法蛋黄和蛋白是鸡蛋的重要成分,对鸡蛋的质量具有很大的影响。
蛋黄和蛋白的成分分析可以通过化学分析和色谱等方法进行。
通过分析鸡蛋中各种营养物质的含量,可以对鸡蛋的质量作出评估。
5. 微生物检测法微生物检测法是通过对鸡蛋中微生物的种类和数量进行检测来评估鸡蛋的质量和新鲜程度。
常用的微生物检测方法包括菌落总数、大肠菌群等指标的检测。
三、未来的发展趋势随着科技的不断进步和人们对食品安全的要求越来越高,鸡蛋质量检测技术也将得到进一步的完善和发展。
以下是未来可能的发展趋势:1. 基于光学和光谱技术的鸡蛋表面检测方法将得到广泛应用。
盐析法快速分离鸡蛋清卵白蛋白
盐析法快速分离鸡蛋清卵白蛋白背景技术:我国鸡蛋资源丰富,鸡蛋中含有大量的活性蛋白,营养价值较高。
随着对鸡蛋活性成分研究的不断深入,对鸡蛋的利用从简单的初加工阶段向开发具有较高附加值的生理活性成分发展。
蛋清中的卵清白蛋白、卵铁传递蛋白和溶菌酶等活性蛋白分离提取和功能研究,已经越来越引起人们的关注。
卵清白蛋白是蛋清中主要活性成分之一,含有386个氨基酸,相对分子质量为45kda,其等电点为4.5。
卵清白蛋白无论从分子结构还是生物学功能上都与人血白蛋白非常类似,是人血白蛋白的潜在替代品。
卵清白蛋白还可以经过酶水解加工成低分子活性肽,具有强抗氧化活性、血管舒张活性等活性。
卵清白蛋白还可以与三价铁离子结合,是三价铁离子的天然载体,可开发成复合补铁剂。
目前,从鸡蛋清中分离卵清白蛋白的方法,主要采用硫酸铵、硫酸钠和氯化钠等多步盐析法,或者盐析法结合离子交换层析法进行分离纯化。
多步盐析法需要大量的盐,产品含盐量高,需要多次脱盐和离心等操作才能获得较高纯度的卵清白蛋白。
而盐析法结合离子交换层析法,除了需要脱盐处理外,还需要复杂的层析分离设备和严格繁琐的层析分离过程,分离成本高。
技术实现要素:本发明的目的是提供一种从鸡蛋清中分离卵清白蛋白的方法。
包括如下步骤:1)取新鲜鸡蛋,洗净,将蛋清和蛋黄分开,收集蛋清原液;2)取步骤1)获得的蛋清原液,用含有0~0.5mnacl的ph5的醋酸-醋酸钠溶液作为稀释缓冲液,按照蛋清原液与稀释缓冲液体积比1∶5加入稀释缓冲液,混合均匀,得到蛋清稀释液a;3)取步骤2)获得的蛋清稀释液a,按照辛酸与蛋清稀释液a体积比1∶40加入辛酸,4~30℃静置2~12小时,得到蛋清稀释液b;4)取步骤3)获得的蛋清稀释液b,每毫升蛋清稀释液b加入0.05g疏水性电荷诱导磁性微球,振荡10~60分钟,得到吸附卵清白蛋白的疏水性电荷诱导磁性微球-蛋清混合液;5)取步骤4)吸附卵清白蛋白的磁性微球-蛋清混合液,用磁铁吸住微球,倒掉上清液以及沉淀,用稀释缓冲液多次清洗微球,得到吸附卵清白蛋白的疏水性电荷诱导磁性微球;6)取步骤5)吸附卵清白蛋白的磁性微球,用ph3~4的醋酸-醋酸钠溶液作为洗脱缓冲液,每克疏水性电荷诱导磁性微球加入2ml 洗脱缓冲液,振荡5~10分钟,用磁铁吸住微球,收集上清液,即为卵清白蛋白溶液;7)取步骤6)得到的卵清白蛋白溶液,冷冻干燥,得到纯度>98%的卵清白蛋白的固体产品。
分光光度法测定鸡蛋黄卵磷脂含量-
江苏农业学报(Jiangsu J.of Agr.Sci.,2010,26(4:853~856朱云芬,陈宽维,葛庆联,等.分光光度法测定鸡蛋黄卵磷脂含量[J].江苏农业学报,2010,26(4:853⁃856.分光光度法测定鸡蛋黄卵磷脂含量朱云芬,陈宽维,葛庆联,韩威,施祖灏,龚建森(中国农业科学院家禽研究所,江苏扬州225003收稿日期:2009⁃10⁃27基金项目:公益性行业(农业科研专项(nyhyzx07⁃3⁃46;中国农业科学院家禽所青年基金项目(S⁃017作者简介:朱云芬(1981⁃,女,江苏扬州人,硕士,助理研究员,主要摘要:建立鸡蛋黄卵磷脂含量快速测定的分光光度检测方法㊂将鸡蛋黄用95%的乙醇溶液处理,分离蛋黄脂质㊂粗提的蛋黄脂肪经高氯酸⁃硝酸消化液消化后与钒钼酸铵反应,于分光光度计400nm 处进行比色测定磷含量,再乘以系数25即为卵磷脂含量㊂在0.5g 空白样品中分别添加50μg㊁100μg 和200μg 3个不同量的磷标准溶液,测定回收率㊂磷标准曲线在0~25μg /ml 浓度内呈线性相关,相关系数(r 为0.994㊂回收率为84.3%~93.4%,精密度为1.93%~2.90%㊂该方法符合食品卫生分析要求,可用于鸡蛋黄卵磷脂含量分析㊂关键词:鸡蛋黄;卵磷脂;分光光度法中图分类号:X836文献标识码:A文章编号:1000⁃4440(201004⁃0853⁃04Spectrophotometric Determination of Egg⁃yolk Lecithin ContentZHU Yun⁃fen,CHEN Kuan⁃wei,GE Qing⁃lian,HAN Wei,SHI Zu⁃hao, GONG Jian⁃sen(Poultry Iinstitute ,Chinese Academy of Agricultural Sciences ,Yangzhou 225003,ChinaAbstract :The purpose of this study was to set up a rapid determination method of yolk lecithin content with spec⁃precision ranged from 1.93%to 2.90%.Key words :egg⁃yolk;lecithin;spectrophotometric determination卵磷脂(Lecithin是一种含磷的类脂化合物,广泛存在于动植物体内,具有重要的生理功能和独特的乳化性能㊂它是构成人体生物膜的重要组成成分,也是人体必需的胆碱和必需脂肪酸的重要来源[1⁃2]㊂根据不同来源磷脂分为蛋黄磷脂和大豆磷脂,两者所含磷脂组分不同㊂蛋黄中卵磷脂含量很高,达干物质总质量的8%~10%[3],其主要由磷脂酰胆碱(Pc㊁磷脂酰乙醇胺(PE㊁磷脂酰肌醇(PI㊁磷脂酰丝氨酸(Ps等组成,且对人体有益的磷脂酰胆碱含量远远高于大豆磷脂,达到70%~80%;蛋黄磷脂和大豆磷脂配位的脂肪酸也不同:蛋黄磷脂的脂肪酸组分大多为棕榈酸㊁油酸,其次为硬脂酸㊁亚油酸,并且还含有微量花生四烯酸和二十二碳六烯酸等近年来备受关注的多不饱和脂肪酸及奇358数碳脂肪酸(如十七烷酸等,而大豆磷脂中亚油酸约占50%,几乎不含C20以上的脂肪酸[4]㊂目前,磷脂的分析检测方法主要有薄层色谱及薄层扫描色谱法[5⁃6]㊁高效液相色谱法[7]㊁紫外⁃可见吸收光谱分析法[8]㊁红外光谱分析法[9]以及核磁共振光谱分析法[10]等㊂近年来,对蛋黄卵磷脂分离提纯的研究报道较多,但对于分析测试方法,国内研究报道较少㊂考虑到以往的检测方法步骤繁琐㊁检测仪器要求高㊁价格昂贵,本试验利用卵磷脂中磷元素含量与卵磷脂含量之间存在固定换算关系,摸索出更为简便的样品前处理条件,并借鉴‘食品中磷的测定“[11]中样品消化方法,制定鸡蛋蛋黄卵磷脂含量快速测定的分光光度检测方法㊂1材料与方法1.1药品与试剂无水乙醇,上海南翔试剂有限公司产品;浓硫酸,相对密度1.84,无锡吴越化工有限公司产品;高氯酸,江苏金城试剂有限公司产品;硝酸,江苏金城试剂有限公司产品;偏钒酸铵,上海绿源精细化工厂产品;钼酸铵,上海绿源精细化工厂产品;磷酸二氢钾,上海绿源精细化工厂产品㊂95%乙醇溶液:取95ml无水乙醇,加水至100 ml;高氯酸⁃硝酸消化液:高氯酸㊁硝酸按1∶4(体积比混合;钒钼酸铵显色剂:称取偏钒酸铵1.25g,加水200ml,加热溶解,冷却后再加入250ml硝酸,另称取钼酸铵25g,加水400ml,加热溶解,冷却后,将2种溶液混合,用水定溶至1000ml,避光保存,若生成沉淀,则不能继续使用;磷标准液:精确称取105℃下干燥的磷酸二氢钾(优级纯0.2195g溶解于水中,定量转入1000ml容量瓶中,加硝酸3ml,用水稀释至刻度,摇匀,即为50μg/ml的磷标准液㊂1.2仪器主要仪器有电子分析天平㊁高速离心机和可见分光光度计(721/722型㊂1.3方法100ml㊂此溶液为试样测定液㊂取与消化试样同量的硫酸㊁高氯酸⁃硝酸消化液,按上述方法进行消化,作为空白溶液㊂2.0㊁4.0㊁6.0㊁8.0㊁10.0ml,分别置于20ml具塞试管中,加入10ml钒钼酸铵显色剂,摇匀,加水至20ml(即磷浓度分别为0㊁2.5㊁5.0㊁10.0㊁15.0㊁20.0㊁25.0μg/ml,混匀,25℃环境下静置10~15 min,以水为参比,用1cm比色皿,在可见分光光度计400nm波长下测各溶液的吸光度㊂以测出的吸光度对磷含量做标准回归方程㊂2结果2.1标准回归方程依据磷标准液吸光度与磷含量值,采用SPSS统计软件进行回归分析,得到回归方程,即Y= 297.699x-16.433,r=0.994㊂曲线拟合结果显示:磷含量在0~25.0μg/ml时与吸光度呈良好的线性关系㊂2.2显色时间准确吸取磷标准液0ml㊁1.0ml㊁2.0ml㊁4.0 ml㊁6.0ml㊁8.0ml㊁10.0ml进行显色反应,分别显色5min㊁10min㊁15min㊁20min㊁25min㊁30min,在可见分光光度计400nm波长处测定吸光值㊂由图1可见,显色时间10min以前吸光值不稳定,测试溶液还处于颜色加深阶段,10~30min颜色比较稳定,无明显变化,因此显色时间在10~30min比较合适,本试验显色10~15min进行比色测定㊂458江苏农业学报2010年第26卷第4期图1显色时间与吸光度的关系Fig.1The relationship between developing time and absorbency 2.3乙醇浓度分别采用无水乙醇㊁95%㊁90%和85%4种浓度的乙醇溶液萃取卵磷脂并比较萃取效果㊂由图2可知,当乙醇溶液浓度低于95%时,卵磷脂含量随乙醇溶液浓度的增加而增加,在95%时萃取效果最佳,原因可能是此时萃取剂的性质与卵磷脂的性质最接近,使卵磷脂在其中的溶解度达到最大;但当用无水乙醇时,卵磷脂含量反而下降,可能是提取剂的极性过强,造成卵磷脂溶解度降低[12],因此,本试验采用95%的乙醇溶液作为卵磷脂的萃取剂㊂图2不同浓度乙醇溶液的萃取效果Fig.2The extraction effects of leithin extracted with different concentration of ethanol2.4萃取方式取新鲜鸡蛋2枚,去除蛋清,蛋黄混合搅拌均匀,取4份样品,固定其他试验条件不变,分别在离心管中分1次㊁2次㊁3次㊁4次加入乙醇共90ml萃取脂肪,进行比较试验㊂分2次加入90ml乙醇即先加入45ml,充分搅拌,离心10min,倾出上层液体于100ml容量瓶中,沉淀物中再加入45ml乙醇,充分振荡搅拌㊁离心,倾出上层液体于同一容量瓶中,定容至100ml㊂分3次或4次加入90ml乙醇即分别为每次加入30ml 或22.5ml,处理方法同上㊂在相同条件下测定卵磷脂的含量㊂由图3可见,分次加入乙醇抽提,有利于蛋黄脂肪的提取,随着抽提次数的增加,卵磷脂含量也逐渐增加,但增加量不断减少,当抽提次数超过3次,卵磷脂含量增加趋势不明显,因而,本试验采用分3次加入90ml乙醇提取蛋黄脂肪㊂图3抽提次数对卵磷脂含量的影响Fig.3The effect of extraction times on egg⁃yolk lecithin con⁃tent2.5精密度取2份新鲜蛋黄样品,重复测定6次,考察精密度,以相对标准偏差表示㊂测定结果(表2显示,卵磷脂含量分别为10.42%和10.71%,比Luz等[13]利用高效液相色谱⁃蒸发光散射器测定的鲜鸡蛋黄卵磷脂含量11.2%略低,可能是由于不同饲养条件下或不同品种的鸡生产的鸡蛋卵磷脂含量不同[14⁃15]㊂本方法的精密度为1.93%~2.90%,小于10%,符合卫生分析的要求㊂表2蛋黄卵磷脂含量测定的精密度(n=6Table2Precision of determination of egg⁃yolk lecithin(n=6样品号样品重(g吸光度磷含量(μg卵磷脂含量(%相对标准偏差RSD(%2 2.903 2.6回收率取2份空白蛋黄样品,分别添加50μg㊁100μg㊁200μg3个不同量的磷标准溶液于10ml蛋黄脂肪乙醇溶液中,每种浓度分别测定3次,结果见表3㊂由表3可见加标回收率分别为84.3%~91.2%和88.5%~93.4%,均符合卫生分析的要求㊂558朱云芬等:分光光度法测定鸡蛋黄卵磷脂含量表3加标回收试验结果(n=3Table3The experimental results of standard addition recovery (n=3样品号磷本底含量(μg添加量(μg测定量(μg回收率(%本研究以95%乙醇为萃取剂,分3次萃取蛋黄卵磷脂,经高氯酸⁃硝酸消化液消化,钒钼酸铵显色剂显色10~15min,于分光光度计400nm波长下比色测定磷含量,再乘以系数25即为卵磷脂含量㊂精密度为1.93%~2.90%,加标回收率为84.3%~ 93.4%,符合卫生分析的要求㊂该方法前处理简单,测定周期短,具有较好的精密度和较高的准确度,可用于鸡蛋蛋黄卵磷脂含量的测定㊂在实际测定过程中还应注意以下两点:(1当取样量较大或脂肪提取效果不理想时,可适当增加乙醇的用量,延长搅拌和振荡时间以及增加提取次数,最大限度地提取蛋黄脂肪㊂(2显色时注意温度的控制㊂由于钒钼酸铵显色易受温度影响,因此在实际操作过程中应尽量保持室温在20℃以上㊂当室温过低时可利用水浴加热㊂参考文献:[1]沈同,王镜岩.生物化学[M].2版,北京:高等教育出版社,1990:53⁃54.[2]马菁平,朱昌华,夏凯,等.卵磷脂和氯化胆碱对玉米幼苗生长及抗冷性的影响[J].江苏农业科学,2008(5:24⁃27. [3]刘小丽,杨清翠,郭璇.蛋黄卵磷脂的提取工艺研究[J].食品科技,2007(10:130⁃132.[4]蔡秋声.蛋黄磷脂[J].粮食与油脂,1999(3:12.[5]王岩,关明,陈坚.双波长薄层扫描法测定卵磷脂中磷脂酰胆碱的含量[J].新疆医科大学学报,2003,26(6:546⁃547.[6]李卫,黄光斗,邵友元,等.应用TLC法鉴定卵磷脂纯度[J].湖北工学院学报,2000,15(1:41⁃42.[7]张德权,陈卫涛,张柏林.高效液相色谱法测定大豆中卵磷脂的含量[J].核农学报,2006,20(5:414⁃416.[8]黄岛平,莫建光,劳燕文,等.紫外分光光度法测定脑维营养麦片中的卵磷脂[J].光谱实验室,2001,18(3:298⁃300. [9]祝业光,高尔,郝耀礼,等.葛根素磷脂复合物的红外和紫外光谱分析研究[J].潍坊医学学院学报,2003,25(5:355⁃356.[10]NOULA C,BONZOM P,BROWN A,et al.1H⁃NMR lipid profilesof human blood platelets links with coronary artery disease[J].Biochim Biophys Acta,2000,1487(1:15⁃23.[11]GB/T5009.87 2003食品中磷的测定[S].[12]赵彬侠,张小里,卢荣,等.蛋黄卵磷脂的提取工艺研究[J].西北大学学报:自然科学版,2004,34(3:297⁃299. [13]LUZ E P,TONGW.Egg⁃yolk lipid fractionation and lLecithincharacterization[J].Journal of the American OilChemists′Socie⁃ty,2005,82(8:571⁃578.[14]杨立明,周正义.草㊁品种鸡蛋蛋黄营养成分分析[J].安徽农业技术师范学院学报,2000,14(4:20⁃21.[15]程瑛琨,鄂晨光,刘明石,等.鸡蛋㊁乌鸡蛋㊁鹌鹑蛋营养成分的测定比较[J].饲料工业,2005,26(7:10⁃12.658江苏农业学报2010年第26卷第4期分光光度法测定鸡蛋黄卵磷脂含量作者:朱云芬, 陈宽维, 葛庆联, 韩威, 施祖灏, 龚建森, ZHU Yun-fen, CHEN Kuan-wei , GE Qing-lian, HAN Wei, SHI Zu-hao, GONG Jian-sen作者单位:中国农业科学院家禽研究所,江苏,扬州,225003刊名:江苏农业学报英文刊名:JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES年,卷(期:2010,26(4参考文献(15条1.刘小丽;杨清翠;郭璇蛋黄卵磷脂的提取工艺研究[期刊论文]-食品科技 2007(102.马菁平;朱昌华;夏凯卵磷脂和氯化胆碱对玉米幼苗生长及抗冷性的影响[期刊论文]-江苏农业科学 2008(053.程瑛琨;鄂晨光;刘明石鸡蛋、乌鸡蛋、鹌鹑蛋营养成分的测定比较[期刊论文]-饲料工业 2005(074.杨立明;周正义草、品种鸡蛋蛋黄营养成分分析 2000(045.LUZ E P;TONG W Egg-yolk lipid fractionation and ILecithin characterization 2005(086.赵彬侠;张小里;卢荣蛋黄卵磷脂的提取工艺研究 2004(037.GB/T 5009.87-2003,食品中磷的测定8.NOULA C;BONZOM P;BROWN A1H-NMR lipid profiles of human blood platelets links with coronary artery disease[外文期刊] 2000(019.祝业光;高尔;郝耀礼葛根素磷脂复合物的红外和紫外光谱分析研究[期刊论文]-潍坊医学学院学报 2003(0510.黄岛平;莫建光;劳燕文紫外分光光度法测定脑维营养麦片中的卵磷脂[期刊论文]-光谱实验室 2001(0311.张德权;陈卫涛;张柏林高效液相色谱法测定大豆中卵磷脂的含量[期刊论文]-核农学报 2006(0512.李卫;黄光斗;邵友元应用TLC法鉴定卵磷脂纯度[期刊论文]-湖北工学院学报 2000(0113.王岩;关明;陈坚双波长薄层扫描法测定卵磷脂中磷脂酰胆碱的含量[期刊论文]-新疆医科大学学报 2003(0614.蔡秋声蛋黄磷脂 1999(0315.沈同;王镜岩生物化学 1990。
鸡蛋清白蛋白分子量
鸡蛋清白蛋白分子量
(实用版)
目录
1.鸡蛋清白蛋白的概述
2.鸡蛋清白蛋白分子量的定义
3.鸡蛋清白蛋白分子量的测量方法
4.鸡蛋清白蛋白分子量的作用和意义
5.结论
正文
鸡蛋清白蛋白的概述
鸡蛋清白蛋白(Egg White Protein)是指存在于鸡蛋清中的一种蛋白质,是鸡蛋清的主要成分之一。
鸡蛋清白蛋白富含人体必需氨基酸,营养价值高,且具有很好的生物活性和功能性,被广泛应用于食品、医药和化妆品等行业。
鸡蛋清白蛋白分子量的定义
鸡蛋清白蛋白分子量是指鸡蛋清白蛋白分子中所有氨基酸残基的相对原子质量之和。
分子量是衡量蛋白质大小的重要指标,对于研究蛋白质结构、功能及生物活性等方面具有重要意义。
鸡蛋清白蛋白分子量的测量方法
1.离心法:将鸡蛋清进行离心处理,去除蛋黄和其他杂质,得到纯净的鸡蛋清白蛋白。
然后通过测定离心前后的质量差异,计算出鸡蛋清白蛋白的分子量。
2.电泳法:将鸡蛋清白蛋白进行电泳分离,根据电泳分离出的蛋白质条带与标准蛋白进行比较,推算出鸡蛋清白蛋白的分子量。
3.质谱法:通过质谱技术对鸡蛋清白蛋白进行分析,直接测定其分子量。
鸡蛋清白蛋白分子量的作用和意义
鸡蛋清白蛋白分子量的准确测定对于研究其结构、功能、生物活性及营养学价值等方面具有重要意义。
此外,对于食品工业中鸡蛋清白蛋白的加工、应用以及质量控制等方面也具有重要参考价值。
结论
鸡蛋清白蛋白分子量是衡量其大小的重要指标,具有重要的研究意义和应用价值。
《基于质谱技术的脂质组学方法在豆类、蛋类及野生真菌脂质分析中的应用》
《基于质谱技术的脂质组学方法在豆类、蛋类及野生真菌脂质分析中的应用》一、引言随着现代生物技术的飞速发展,脂质组学已成为研究生物体内脂质代谢及其相关疾病的重要手段。
而其中,质谱技术作为现代脂质组学的重要分析工具,在各类食品脂质分析领域发挥了巨大的作用。
本文将探讨基于质谱技术的脂质组学方法在豆类、蛋类及野生真菌脂质分析中的应用。
二、豆类脂质分析豆类作为重要的食物来源,其含有丰富的脂质。
通过应用质谱技术,可以精确地分析豆类中的各种脂质成分。
1. 样品准备:将豆类样品进行适当的处理,如破碎、干燥和提取等,以获得纯净的脂质样品。
2. 质谱分析:采用现代质谱技术,如高分辨率质谱、离子迁移谱等,对样品进行详细的脂质组成分析。
这些技术可以准确地识别和量化各类脂质分子,如脂肪酸、磷脂、固醇等。
3. 结果解读:通过分析不同豆类样品的脂质组成,可以了解豆类中的营养价值和潜在的健康益处。
例如,某些豆类可能富含不饱和脂肪酸,具有降低胆固醇、预防心血管疾病的作用。
三、蛋类脂质分析蛋类是人们日常饮食中的重要组成部分,其脂质成分对人类健康具有重要影响。
通过应用质谱技术,可以更好地了解蛋类的脂质组成。
1. 样品准备:从蛋类中提取出纯净的脂质样品,注意避免其他杂质的干扰。
2. 质谱分析:利用高灵敏度、高分辨率的质谱技术,对蛋类的脂质进行详细分析。
可以检测出各类脂肪酸、胆固醇酯、磷脂等成分。
3. 结果解读:通过分析蛋类脂质的组成和含量,可以了解其营养价值和潜在的健康风险。
例如,高胆固醇含量可能对心血管健康产生不利影响,而某些脂肪酸则可能具有抗炎症、抗氧化的作用。
四、野生真菌脂质分析野生真菌作为一种天然资源,其脂质成分具有独特的生物活性。
通过应用质谱技术,可以更好地了解野生真菌的脂质组成及其生物活性。
1. 样品准备:采集野生真菌样品,进行适当的处理和提取,以获得纯净的脂质样品。
2. 质谱分析:采用先进的质谱技术,如傅里叶变换离子回旋共振质谱等,对野生真菌的脂质进行详细分析。
盐析法快速分离鸡蛋清卵白蛋白的初步研究
盐析法快速分离鸡蛋清卵白蛋白的初步研究标准化管理处编码[BBX968T-XBB8968-NNJ668-MM9N]盐析法快速分离鸡蛋清卵白蛋白2摘要:鸡蛋清原液用pH 的Tris-HCl缓冲液稀释5倍,4℃下静置至少 6 h,采用30%~80%不同饱和度的硫酸铵分离卵白蛋白,采用Bradford法测定盐析后蛋白含量,SDS-PAGE检测其纯度,结果表明,60%饱和度的硫酸铵分离鸡蛋清卵白蛋白效果较好。
关键词:盐析法;鸡蛋清;卵白蛋白鸡蛋中含有丰富的生命必需元素,营养价值较高。
随着对鸡蛋生理生化活性研究的不断深入,对鸡蛋的利用逐渐超越简单的初加工阶段,趋向于开发具有较高附加值的生理活性物质[1-2]。
蛋清是一种以水为分散介质,以蛋白质为分散相的典型胶体物质,鸡蛋清中的蛋白质含量约为总量的11%,除不溶性的卵黏蛋白外,均为可溶性蛋白质。
卵白蛋白、卵铁传递蛋白和溶菌酶是其中3种主要的生物活性蛋白质。
卵白蛋白是蛋清中主要的活性蛋白,约占蛋清蛋白质含量的54%。
卵白蛋白具有许多功能特性[3],例如,卵白蛋白对胰蛋白酶有强烈抑制作用,能部分抑制枯草杆菌蛋白酶活性[4];Fujita用胃蛋白酶水解卵白蛋白,并用RP-HPLC分离出具有血管舒张活性的物质OA358-365[5];Davalos和Xu等研究发现,卵白蛋白酶降解物具有强抗氧化活性的多肽[6-7]。
卵白蛋白是生物化学中一种重要的参考蛋白质,包含所有的必需氨基酸,而且比例合理。
高度纯化和结晶的卵白蛋白可以作为载体、稳定剂、封阻剂或标准物等,也可作为营养添加剂应用于食品工业。
虽然许多学者对卵白蛋白进行了大量研究,但对其生物学特性和功能的了解仍不够全面,本文采用硫酸铵盐析的方法,对鸡蛋清中的卵白蛋白进行了快速初步分离,为其进一步开发利用提供理论依据。
1 材料与方法材料新鲜鸡蛋,购自超市;卵白蛋白标准品,Sigma公司;硫酸铵分析纯,购自天津市风船化学试剂科技有限公司;透析袋,Amersham Bioscicnccs(SF)Corp。
飞行质谱测蛋白分子量方法
飞行质谱测蛋白分子量方法
一、质谱仪工作原理
飞行质谱仪是一种基于离子在电场和磁场中的运动规律,对样品中的分子进行质荷比分析和检测的仪器。
其工作原理是将样品分子离子化,然后在电场和磁场的作用下,使离子在空间中发生偏转和聚焦,最终通过离子检测器进行检测。
通过对离子的质荷比和空间分布进行分析,可以确定样品分子的分子量和结构信息。
二、样品制备与进样
在进行飞行质谱测蛋白分子量之前,需要将待测蛋白样品进行适当的制备和进样。
通常,将待测蛋白样品进行变性、纯化和浓缩等处理,以便于后续的质谱分析。
进样时,将处理好的蛋白样品与气溶胶混合后,通过特定的进样口进入飞行质谱仪进行分析。
三、分子量测定
在飞行质谱仪中,通过对样品分子的质荷比进行分析,可以确定样品分子的分子量。
通常,利用不同质量范围的离子的数量或峰强与对应的质荷比做图,可以绘制出离子的质荷比分布图。
通过比较标准
蛋白质分子的质荷比分布图和待测样品的质荷比分布图,可以确定待测样品的分子量。
四、蛋白质序列分析
利用飞行质谱仪,可以对蛋白质的序列进行分析。
通过对特定离子的质量进行分析,可以确定氨基酸残基的排列顺序。
通过对多个离子的质量进行分析,可以确定氨基酸残基的排列顺序和数量,从而确定蛋白质的序列。
五、蛋白质修饰分析
飞行质谱仪还可以用于蛋白质修饰的分析。
通过分析蛋白质离子中的修饰基团的质量,可以确定蛋白质修饰的类型和位置。
例如,磷酸化、糖基化、甲基化等修饰都可以通过飞行质谱仪进行分析。
总之,飞行质谱仪是一种高效、准确的蛋白质分子量测定方法,可以用于蛋白质序列分析和修饰分析等方面。
氯仿法、水解法、卡拉胶法提取鸡蛋中卵黄抗体
Science &Technology Vision科技视界1.1卵黄抗体的发现和命名1893年,Klemperer 首次报道了鸡蛋中存在抗体,发现蛋黄中抗体以IgG 占优势,而IgM 和IgA 的含量很少,现已证明了免疫鸡的蛋是提供特异性IgG 抗体最方便,最廉价的来源[1]。
由于鸡蛋黄的英文名称是“Yolk”,故将鸡蛋黄中的免疫球蛋白IgG 称为IgY。
1.2卵黄抗体的一般性质卵黄抗体相对分子量约为180kDa,有两条轻链和两条重链组成(2H+2L)。
其中轻链(L)相对分子量约为22~30kDa,重链(H)相对分子量约为67~70kDa,等电点接近5.2,含氮量为14.8%,IgY 的氨基酸组成与鸡血清IgG 和牛IgG 不同。
此外,还具有以下优点:(1)鸡卵黄中IgY 纯度高,含量大。
(2)特异性高。
(3)稳定性好。
在室温保存半年,其抗体活性不变,在4℃冰箱贮存6-7年,经免疫扩散法测定其活性降低不超过5%[2]。
(4)产量高。
(5)IgY 不激活补体。
(6)IgY 能耐酸耐热。
(7)安全。
服用安全可靠,王泽中等用治疗剂量(80-300mg/kg)的10-40倍进行试验,没有发现毒性反应。
1.3IgY 的分离、提纯方法卵黄中的主要成分是蛋白质和脂肪,比例为1:2。
大部分蛋白质都是脂蛋白,存在于卵黄颗粒中,不溶于水,只有卵黄球蛋白(α、β、γ)是水溶性的,而IgY 是γ卵黄球蛋白。
因此IgY 的分离纯化首先需要有效地去除卵黄中的脂类,从水溶性蛋白中分离IgY。
多年来,已建立许多较为高效而经济的方法,大多以PEG、硫酸葡聚糖、天然胶,如藻酸钠、角叉聚糖或乙醇沉淀等方法初步纯化蛋白质。
1.4IgY 的作用机理特定病原菌的卵黄抗体能直接粘附于病原菌的细胞壁上,改变病原细胞的完整性,直接抑制病原菌的生长。
卵黄抗体可粘附于细菌的菌毛上,是指不能粘附于肠道粘膜上皮细胞。
一部分卵黄抗体在肠道内被消化酶降解为可结合片段,这些片段含有抗体末端的可变小肽(Fab 部分),这些小肽很容易被肠道吸收,进入血液后能与特定病原菌粘附因子结合,使病原菌不能粘附易感细胞而失去致病性。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
何
睿
4 0 0 0 0 5 )
( 重庆 邮电大学生物信息学院 , 重庆
L I ANG Yi l o n g
F AN J i n HE R u i
( C o l e g e o f b i o l o g i c a l i n f o r m a i t o n , C h o n g q i n g u n i v e r s i t y o f p o s t s a n d t e l e c o mm u n i c a t i o n s , C h o n g q i n g 4 0 0 0 0 5 , C h i n a )
2 0 1 5年第 2 期
6月 出版
食 品 工 程
F OOD ENGI NEER技术的研究 木
St u d y o n mo l e c u l a r d e t e c t i o n o f e g g s
梁 亦龙
樊 晶
基 金项 目 : 重 庆市 自然科学 基金 ( C S C T , 2 0 0 9 B B 1 2 8 8 ) ; 重
费 者仅 能凭 感 觉 和经 验 识别 ,无 法实 现对 蛋 品真伪
的现场技术检测 。汤青萍等对仿土鸡蛋的蛋 品质分 析及变化规律进行了研究 ,主要集中在蛋 白质的含 量 、蛋 黄 蛋 白 比 、维 生 素含 量 上 ,没 有提 及 区分 假
u s e d a s i d e n t i i f c a t i o n me t h o d f o r d i s t i n g u i s h i n g b e t we e n t r u e nd a f a l s e e g g s a n d l a y t h e f o u n d a t i o n or f mo l e c u l a r t e c h - n i q u e s t o i d e n t i f y t r u e n df a ls a ee g g s .
蛋 白品质 较 高 ,含有 充 足 的必 需 氨基 酸 。必 需 氨 基
鸡蛋是人类获得蛋 白质的主要来源之一 ,其质 量安全关 系到人体健康 ,更是关 系国计 民生的重大
问题 。鸡蛋 的质量 高 低 ,尤 其是 蛋 品 的真 伪关 系 到
千家万户的饮食安全 。近几年 ,一些不法商贩为 了 牟 取暴 利 ,采 用化 学 试剂 人 工合 成 鸡蛋 , “ 人 造 鸡
Ke y wor ds o v a l b u mi n g e n e; e l e c t r o ph o r e s i s ;y o l k
中图分 类 号 : T S 2 5 3 . 7 文献标 识码 : A 文 章 编 号: 1 6 7 3 — 6 0 4 4 ( 2 0 1 5 ) 0 2 — 0 0 3 1 — 0 3
t r o p h o r e t i c p a t t e ns r o f c o mme r c i a l l y a v a i l a bl e e g g s, a nd l e c i t hi n we r e d e t e c t e d b y t h i n l a y e r c h r o ma t o g r a p h y . Th e s e c a n be
D O I :1 0 . 3 9 6 9 6 . i s s n . 1 6 7 3 — 6 0 4 4 . 2 0 1 5 . 0 2 . 0 1 0
蛋 白质是人类赖 以生存 和发展 的物质基础 ,它 不仅是构成细胞的基本有机物 ,而且是生命活动的 主要 承担 者 ,没 有蛋 白质就 没 有 生命 。蛋 白质 的 主 要来源是 肉、蛋 、奶和豆类食 品,一般而言 ,动物
酸有 8 种 ,无法 由人体 自 行合成 ,必须从食物 中摄 蛋”在深圳 、杭州等地 己相继被发现 ,严重损害 了 取 。蛋 类 含蛋 白质 1 1 % ~1 4 %,是 优 质 蛋 白质 的重 消费者 的健康 。研究表 明, “ 人造鸡蛋”与真鸡蛋 蛋 壳 的主要 成 分 都是 碳 酸钙 ,但是 蛋 清蛋 黄 的成 分 要 来 源 。蛋 类 作 为 中 国居 民重要 动 物 性 食 品之 一 , 其营养丰富 ,为人类蛋 白质 的主要来源。蛋中含有 不 同 ,人造鸡蛋 中主要成分是树脂 、淀粉 、凝 固 优质 蛋 白质 、脂 肪 、卵磷脂 、矿 物 质 、维 生 素等 营 剂 、 色 素 等 化 学 物 质 ,毫 无 营养 价 值 且 对 人 体 有 养成分 ,其蛋清中含卵白蛋 白,蛋黄蛋 白质含量丰 害 。目前 国家 尚未出台相关标准检测真伪鸡蛋 ,消 富,蛋 白质的消化吸收率高 ,对人体生长十分有益。
摘 要 采用 P C R方法检测市售鸡蛋的卵清蛋 白基 因片段 ,分析 市售鸡蛋的蛋 白质含量及蛋 白质 电泳 图 谱 ,用薄层层析检测 卵磷脂 ,以作为 区别市售真假鸡蛋的鉴别方法 ,为分子技术鉴别真假鸡蛋奠定基础 。 关键词 卵清蛋 白基 因;电泳;蛋黄
Ab s t r a c t I n t h e p a p e r , t h e o v a l b u mi n g e n e we r e ma g n i i f c a t i o n b y P CR t o a n a l y s i s t h e p r o t e i n c o n t e n t a n d p r o t e i n e l e c -