重金属检查法 ppt课件

第三法用来检查能溶于碱而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）的 药品中的重金属；
第四法用微孔滤膜过滤，使重金属硫化物沉淀富集成色斑，用于有色 溶液或重金属限度较低的品种。检查时，应根据药典品种项下规定的 方法选用。
四种方法显示的结果均为微量重金属的硫化物微粒均匀混悬在溶液 中所呈现的颜色；采用滤膜法可获得“色斑”；如果重金属离子浓 度大，加入显色剂后放置时间长，就会有硫化物聚集下沉。
供试品如含高铁盐影响重金属检查时，可取该 药品项下规定方法制成的供试液，加抗坏血酸 0.5～1.0g，并在对照液中加入相同量的抗坏血 酸，再照上述方法检查。
配制供试品溶液时，如使用的盐酸超过1.0ml （或与盐酸1.0ml相当的稀盐酸），氨试液超 过2ml,或加入其他试剂进行处理者，除另有规 定外，对照液中应取同样同量的试剂置瓷皿中 蒸干后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml与水 15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加标 准铅溶液一定量，再用水稀释成25ml。
5 注意事项
5.1 标准铅溶液应在临用前精密量取标准铅贮备液新鲜稀释配制，以防止硝酸铅 水解而造成误差，配制与贮存标准铅溶液使用的玻璃容器，均不得含有铅。
密联接；B为连接头；C为垫圈(外径10mm，内径 6mm)；D为滤膜，直径10mm，孔径3.0μm，用 前经在水中浸泡24小时以上；E为尼龙垫网(孔径 不限)，直径10mm；F为滤器下部，出口处套上 一合适橡皮管。
标准铅斑的制备
精密量取标准铅溶液一定量，置小烧杯 中，用水或该药品项下规定的溶剂稀释 成10ml，加入醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml 与硫代乙酰胺试液1.0ml,摇匀，放置10 分钟，用50ml注射器转移至上述滤器中 进行压滤(滤速约为每分钟1ml)，滤毕,取 下滤膜，放在滤纸上干燥，即得。
1.5 由于在药品生产过程中遇到铅的机会较多，且铅易积蓄中毒， 故以铅作为重金属的代表，用硝酸铅配制标准铅溶液。 2 仪器与 用具
2.1 纳氏比色管 应选玻璃质量好、无色（尤其管底）、配对、刻 度标线高度一致的纳氏比色管。
2.2 滤器 见中国药典2005年版二部附录Ⅶ H重金属检查法第四法 附图，由具有螺纹丝扣并能密封的上、下两部分以及垫圈、滤膜 和辅助滤板组成。
4 操作方法 4.1 第一法
4.1.1 取25ml纳氏比色管两支，编号为甲、乙。 4.1.2 甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，加水或各品种项下规定的
溶剂稀释成25ml。 4.1.3 乙管中加入按该品种项下规定的方法制成的供试液25ml。 4.1.4 如供试液带颜色，可在甲管中滴加稀焦糖溶液少量或其它无干扰的有色溶液，使其色泽
重金属是指在规定实验条件下能与显色
剂作用显色的金属杂质。中国药典2005 年版二部附录Ⅷ H采用硫代乙酰胺试液 或硫化钠试液作显色剂，以铅（Pb）的 限量表示
：1.2 由于实验条件不同，分为4种检查方法
第一法适用于供试品不经有机破坏，在酸性溶液中进行显色的重金属 限度检查；
第二法适用于供试品需灼烧破坏，取炽灼残渣项下遗留的残渣，经处 理后在酸性溶液中进行显色的重金属限度检查；
4.2.3 取配制供试溶液的试剂，置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲 液（pH3.5）2.0ml与水15ml，微热溶解后，移置甲管中，加标准 铅溶液一定量，加水稀释成25ml。
4.2.4 按4.1.5方法检查。
4.3 第三法
4.3.1 取25ml纳氏比色管两支，编号为甲、乙。 4.3.2 除另有规定外，取供试品适量，加水20ml与氢氧
检查法
取照各药品项下规定方法制成的供试液10ml， 照标准铅斑的制备，自“加入醋酸盐缓冲液 (pH3.5)2ml”起，依法操作,将生成的斑点与标 准铅斑比较,不得更深。
若供试溶液有颜色或浑浊，应用滤膜进行预滤， 如滤膜上有污染，应换滤膜再滤，直至滤膜不 再染色；然后取滤液10ml,照标准铅斑的制备, 自“加入醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml”起，依法 操作，并照上述检查法中所述比较，即得。
如在甲管中滴加稀焦糖溶液仍不能使颜色一致时，可取该药品项下规 定的二倍量的供试品和试液，加水或该药品项下规定的溶剂使成30ml， 将溶液分成甲乙二等分，乙管中加水或该药品项下规定的溶剂稀释成 25ml；甲管中加入硫代乙酰胺试液2ml，摇匀,放置2分钟，经滤膜(孔 径3μm)滤过,然后甲管中加入标准铅溶液一定量，加水或该药品项下 规定的溶剂使成25ml；再分别在乙管中加硫代乙酰胺试液2ml，甲管 中加水2ml，照上述方法比较，即得。
4.2 第二法
4.2.1 除另有规定外，取该品种在500～600℃灼烧的炽灼残渣项 下遗留的残渣，加硝酸0.5ml蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，加盐酸 2.0ml，置水浴上蒸干后加水25ml，滴加氨试液至对酚酞指示液 显中性，再加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2.0ml，微热溶解后，移置 乙管中，加水稀释成25ml。
重金属检查法
定义:重金属系指在实验条件下能与
硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的杂质。
标准铅溶液的制备
重金属检查法 称取硝酸铅0.160g，置1000ml量瓶中,加硝酸5ml与水
50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。 临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀
释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于10μg的Pb)。 配制与贮存用的玻璃容器均不得含铅。 生产中遇到铅的机会较多，且铅又易在体内积蓄中毒，所
以检查时以铅为代表。重金属影响药物的稳定性及安全性。
【中国药典95版】附录中规定了四种方法：
第一法 除另有规定外， 取25ml纳氏比色管两支，甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液
(pH3.5)2ml后，加水或该药品项下规定的溶剂稀释成25ml，乙管中加 入该药品项下规定的方法制成的供试液25ml；若供试液带颜色，可在 甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液,使之与乙管一 致；再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2ml，摇匀，放置2分钟， 同置白纸上，自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比较,不得更深。
2.2.4 50ml注射器，应能与滤器上盖入口处紧密联接 3 试药和试 液
3.1 标准铅溶液 精密称取在105℃干燥至恒重 的硝酸铅0.160g，置1000ml量瓶中，加硝酸 5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀， 作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml， 置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即 得（每1ml相当于10ug的Pb ）。
第二法
除另有规定外，取炽灼残渣项下遗留的残渣，加硝酸 0.5ml，蒸干,至氧化氮蒸气除尽后（或取供试品一定量， 缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5～1.0ml,使恰 湿润,用低温加热至硫酸除尽后，加硝酸0.5ml，蒸干， 至氧化氮蒸气除尽后，放冷，在500～600℃炽灼使完 全灰化），放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干后加水 15ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加醋酸 盐缓冲液（pH3.5）2ml，微热溶解后，移置纳氏比色 管中，加水稀释成25ml；另取配制供试品溶液的试剂， 置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml与水 15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶 液一定量，再用水稀释成25ml；
与乙管一致。 4.1.5 在甲、乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2.0ml，摇匀，放置2分钟，同置白色衬板上，
自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深。 4.1.6 如在甲管中滴加稀焦糖溶液仍不能使颜色一致时，可取该品种项下规定的二倍量的供试
品和试液，加水或该品种项下规定的溶剂使成30ml，将溶液分成甲乙二等份，乙管中加水或 该品种项下规定的溶剂稀释成25ml；甲管中加入硫代乙酰胺试液2.0ml，摇匀，放置2分钟， 经滤膜（孔径3um）滤过，然后甲管中加入标准铅溶液一定量，加水或该品种项下规定的溶 剂使成25ml，再在乙管中加入硫代乙酰胺试液2.0ml，甲管中加水2.0ml，照上述方法比较， 即得。 4.1.7 供试品中如含高铁盐而影响重金属检查时，可取该品种项下规定方法制成的供试液，加 抗坏血酸0.5～1.0g，并在对照溶液中加入相同量的抗坏血酸，再照上述方法检查。 4.1.8 配制供试品溶液时，如使用的盐酸超过1.0ml（或与盐酸1.0ml相当的稀盐酸），氨试液 超过2.0ml，或加入其他试剂进行处理者，除另有规定外，对照液中应取同样同量的试剂置瓷 皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2.0ml与水15ml溶解后移置甲管中，加标准铅溶液一 定量，再加水稀释成25ml。
4.4.2 检查法 照各品种项下规定方法制成的供试液10ml，照4.4.1 标准铅斑的制备，自“加入醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml起，依法 操作，将生成的色斑与标准铅斑比较，不得更深。
4.4.3 若供试溶液有颜色或浑浊，应用滤膜进行预滤，如滤膜上有 污染，应换滤
膜再滤，直至滤膜不再染色；然后取滤液10ml，照4.4.1标准铅斑 的制备，自“加入醋酸盐缓冲液（pH3.5）2.0ml”起，依法操作。 所得供试液的铅斑与标准铅斑比较，不得更深。
照上述第一法检查，即得。
第三法
除另有规定外，取供试品适量,加氢氧化 钠试液5ml与水20ml溶解后，置纳氏比色 管中,加硫化钠试液5滴,摇匀,与一定量的 标准铅溶液同样处理后的颜色比较，不 得更深。
第四法
仪器装置 滤器由具有螺纹丝扣并能密封的上下二部，以及
垫圈、滤膜和尼龙垫网所组成。如图。 A为滤器上盖部分，入口处应能源自文库50ml注射器紧
2.2.1 滤器上盖部分A的入口处应能与50ml注射器紧密联接，滤器 下部F的出口处能套上一合适橡皮管。A与F能通过螺纹丝扣密封。
2.2.2 垫圈应内径光滑、大小相同，以使斑点边缘圆整、清楚、 大小一致。在滤器上加上橡皮垫圈，既可使滤膜与滤板紧密结合， 又可避免在旋紧滤器接头时扭曲或损坏滤膜。
2.2.3 滤膜的直径为10mm，孔径为3.0um，使用前在水中浸泡24 小时以上，可使色斑均匀。
3.2 硫代乙酰胺试液、硫化钠试液、醋酸盐缓 冲液（pH3.5）与抗坏血酸等均按药典附录XV 的规定。
3.3 稀焦糖溶液 取蔗糖或葡萄糖约5g，置磁坩 埚中，在玻璃棒不断搅拌下，加热至呈棕色糊 状，放冷，用水溶解成约25ml，滤过，贮于滴 瓶中备用。临用时，根据供试液色泽深浅，取 适当量调节使用。
4.2.2 如不取炽灼残渣项下遗留的残渣，则可取供试品一定量， 缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5～1.0ml，使恰湿润，用 低温加热至硫酸除尽后，加硝酸0.5 ml，蒸干，至氧化氮蒸气除 尽后，放冷，在500～600℃炽灼使完全灰化，再按 4.2.1自“… 放冷，加盐酸2.0ml……”起，依法操作至“加水稀释成25ml”。
1.4 重金属硫化物生成的最佳pH值是3.0～3.5，选用醋酸盐缓冲 液（pH 3，5）2.0ml调节pH 较好，显色剂硫代乙酰胺试液用量 经实验也以2.0ml为佳，显色时间一般为2分钟。以10～20ug的Pb 与显色剂所产生的颜色为最佳目视比色范围。在规定实验条件下， 与硫代乙酰胺试液在弱酸条件下产生的硫化氢呈色的金属离子有 银、铅、汞、铜、镉、铋、锑、锡、砷、锌、钴与镍等。
化钠试液5ml溶解后，置乙比色管中。 4.3.3 取一定量的标准铅溶液，与4.3.2同样处理，置
甲管中。 4.3.4 于甲、乙两管中各加硫化钠试液5滴，摇匀。 4.3.5 甲、乙两管同置白色衬板上，自上向下透视，乙
管中所显的颜色与甲管比较，不得更深。
4.4 第四法
4.4.1 标准铅斑的制备 精密量取标准铅溶液一定量，置小烧杯中， 加水或各品种项下规定的溶剂稀释成10ml，加入醋酸盐缓冲液 （pH3.5）2.0ml与硫代乙酰胺试液1.0ml，摇匀，放置10分钟， 用50ml注射器转移至过滤器中进行压滤（滤速约为每分钟1ml）， 滤毕，取下滤膜，放在滤纸上千燥，即得。