TMB显色液使用说明书
单组份TMB显色液
单组份TMB显色液
目录
1. 产品说明 (1)
2. 需要准备的材料 (1)
3. 操作步骤 (1)
4. 产品订购信息 (1)
1.产品说明
单组份TMB显色液主要用于辣根过氧化物酶(HRP)为标记的酶联免疫吸附实验(ELISA)。
单组份TMB显色液的主要成分是3, 3’5 ,5’-四甲基联苯胺,在辣根过氧化物酶的作用下与氧化剂反应生成蓝色物质。
本产品采用独特的配方,避免常规AB液分开使用前再混合的方法,方便快捷,减少实验误差。
2. 需要准备的材料
酶标仪;终止液:1M硫酸或盐酸
3. 操作步骤
3.1 样品显色
1) 样品孔在加完HRP标记物并孵育一段时间后,用PBST货PBS洗板3-5次。
2) 每孔加入100μL TMB 溶液。
反应体系孵育10min。
3) 每孔加入50μL 反应终止液终止。
4) 终止后5-10min内检测波长450nm。
如果出现较高的背景或沉淀,可在终止后马上读
数,或进一步稀释一抗和/或HRP标记物。
3.2结果分析
1) 观察样品显色结果,空白和阴性应无色,含有HRP标记物的孔应为蓝色,终止液终止
后为黄色,颜色越深浓度越高。
2) 根据450nm检测结果绘制标准曲线,计算出待测样品的浓度。
1 / 1常州天地人和生物科技有限公司。
沉淀型AB双液TMB 显色液
3. 置于平式摇荡仪上,在室温下孵育 2 至 5 分 钟,直至深蓝色沉淀出现。
4. 用镊子夹起固相膜,放进无离子水里清洗 。 5. 空气中晾干。
6. 拍照记录 。 二、 免疫化学染色
1. 准备好含有待测蛋白的组织切片:包括固着、 封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化 酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处 理、清洗等步骤
A 液 500ml
适合排
B 液 500ml
枪加样
保存: 2℃~8℃ A 和 B 液均采用稳定技术,不需要 冷冻保存,甚至可以室温保存。
实验步骤 一、 免疫印迹染色
1. 准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、 转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根 过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和 素)处理、清洗等步骤
相对于DAB来说,有以下优点。 1.敏感,要比DAB敏感许多倍。 2.色泽稳定,不必避光显色 3.色带为蓝色,易于观测 4.无致癌性
包装:
货号 包装
规格
备注B 液 6ml×10
WB1120 园盖瓶
A 液 100 ml
适合排
B 液 100 ml
枪加样
WB1130 大瓶
沉淀型 AB 双液 TMB 显色液
沉淀型 A B 双液 TMB 显色液
产品说明: TMB 因其灵敏度较高及无致癌性而得到广泛应用。 本产品采用稳定敏感的配方,辣根过氧化物酶接物 反应时产生一种深蓝色的沉淀产物,适用于 Western Blot 及其适用于蛋白质杂交和免疫化学, 以及原位杂交染色等。产品即到即用,性能稳定, 操作便捷,敏感度高,显色清晰,重复性好。 产品特点:
一管式TMB显色液说明书
一管式TMB显色液说明书产品编号:BTN91101规格:100mL(A)/100mL(B)产品及特点:四甲基联苯胺,即TMB(3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine),是辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase、HRP)的显色底物,在辣根过氧化物酶和H2O2存在时,TMB会产生可溶性蓝色产物(光吸收在370nm),加入硫酸后,溶液呈黄色,此时可以在450nm测定吸光度,因此TMB和H2O2一起常用于检测HRP的存在。
跟HRP的其他底物(如ABTS和OPD)相比,TMB不但灵敏,而且无毒,所以在ELISA中的应用日趋广泛。
传统的TMB显色试剂一般由两个组份组成(另一个是H2O2),必须在使用前新鲜配制,并且容易产生沉淀,使用相对不太方便,并且也容易导致操作误差。
为克服这些缺点,本公司开发了只有一个溶液的一管式TMB显色液,它具有下列特点:1.即开即用,操作简单,用户不需要配制任何溶液。
2.显色液只是单一溶液,简化了操作步骤,降低了操作误差,结果更加稳定。
3.既可用于ELISA等的显色液,也可以用于检测血液或血红蛋白等样品中的过氧化物酶含量。
4.该底物溶液含TMB、H2O2和特殊的稳定剂,可以在4℃长期放置。
5.分沉淀可溶型(A型,适用于ELISA)和沉淀不可溶型(B型,使用于Western印迹膜免疫检测)两种。
规格及成分:成分A型B型本产品A型(ELISA专用)100ml无本产品B型(Western专用)无100ml说明书1份1份保存条件:常温运输、2-8℃避光保存,有效期一年。
自备试剂:A型:ELISA相关试剂,TMB终止液(1-2M H2SO4)。
B型:Western印迹杂交相关试剂。
使用方法:可溶型(A型)使用方法:1.在酶标板的每个孔中直接加入100μL或150μL本产品(A型)。
2.室温温育5-30分钟。
3.向每个孔中加入100μL或150μL终止液。
W-TMB 显色试剂
W-TMB显色试剂产品编号:PW025包装规格:5 membranes产品简介TMB的全称为3,3,,5,5,-四甲基联苯胺,为无色物质,作为供氢体,在辣根过氧化物酶作用下,被氧化的情况下,产生有兰色的产物,在特殊试剂的作用下,沉淀在膜上,主要吸收峰在370 nm和652nm,比色方便,是HRP结合物最常用的底物,在免疫组织化学,原位杂交,western blot ,southernblot等膜显色中应用比较广泛, 也可以用于原位检测细胞或组织内源性的过氧化物酶。
运输和保存条件常温下运输,收到后,将所有溶液 2-8°C情况下保存,保质期为一年。
组成本试剂用于免疫组织化学,原位杂交,western blot ,southernblot等膜显色,由底物溶液A, 底物溶液B和缓冲液C三部分构成:能够使用5次成份PW025PW025-1底物溶液A 2.60 mlPW025-2底物溶液B 0.10 mlPW025-3缓冲液C 50 ml使用方法1. 在免疫印迹(western blot)实验中,先将相应的HRP(辣根过氧化氢酶)标记的二抗覆盖膜后,在37°C的情况下,于震荡器上,震荡一个半小时左右,再用TBST或者PBST洗涤膜3~4次, 最后一次用TBS或PBS洗涤膜,将膜转移到阴暗处.2. 显色前,先将膜浸泡在10 ml的缓冲液C中十分钟,再加入0.5 ml左右的底物溶液A,底物溶液B 4ul,混匀。
3. 在阴暗处,在37°C的情况下,反应5-30分钟即可.这时兰色的产物条带出现.4. 照像记录实验结果.注意事项1. 缓冲液C在使用前充分震荡混匀。
2. 请在使用前按照上述比例配置所需溶液。
现配现用,如果有多余,当颜色变蓝时,应该丢弃。
3. 请使用完后,将分析液A,分析液B和缓冲液C的盖子旋紧,以防止溶液挥发和与空气中的成分发生化学反应。
4. 如果所使用的膜较大,请适当增加所配试剂的量,以便完全覆盖膜。
PH0410 TMB显色液 沉淀型组化或膜HRP显色使用手册
PH0410|TMB显色液(沉淀型,组化或膜HRP显色用)TMB Color Development Solution for IHC or BlottingCatalog No:PH0410Size:☐100mL|500mL Storage:Store@4℃◆产品简介TMB,即3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine,是辣根过氧化物酶(HRP)的常用底物。
在辣根过氧化物酶或其他适当过氧化物酶的催化下,TMB会产生蓝色产物。
Phygene的TMB显色液(沉淀型,组化或膜HRP显色用,TMB Color Development Solution for IHC or Blotting)采用最新的单一溶液的TMB显色技术,用于Western或免疫组化等HRP的显色检测,简化了操作步骤,并且使检测结果更加稳定可靠。
本显色液具有高灵敏性,与HRP反应后产生蓝紫色沉淀,沉淀吸附于印迹膜上,不会脱落,方便显色结果的保存和观察。
由于产生的是沉淀型蓝色产物,不适用于ELISA检测。
*用于免疫组化检测时,如果每个样品的显色液用量为0.1ml,则可以检测1000个样品;对于膜的显色检测,如果每次使用2.5ml显色液,则可以检测40次。
特点:方便:无需其他试剂,直接使用;也无需特别的设备,能直接观察;灵敏:独特的配方,显色时间短,对超微量的HRP都能检测,不像4-CN等那样会褪色;安全:不含任何有机溶剂,也无需用有机溶剂稀释;稳定:4℃避光保存至少1年有效。
◆产品保存4℃避光保存;一年有效。
◆使用参考如果发现TMB显色液出现混浊或颜色变成蓝色,应该停止使用。
一.免疫组化检测:1.参考免疫组化的实验步骤,在与辣根过氧化物酶标记的抗体孵育后,用适当洗涤液(如PBS)洗涤3-5次,每次3-5分钟。
2.洗涤完毕后,去除洗涤液,滴加约100微升TMB显色液。
3.室温避光孵育3-30分钟或更长时间(可在湿盒中显色过夜),直至显色至预期深浅。
TMB Soluble Substrate TMB可溶性底物显色剂使用方法
规格
本产品包装规格为 500ml
储存及运输
常温运输(勿超过 30°C), 2-8°C 储存,在有效期内使用。
注意事项
· 选择:两种 TMB 有相同的灵敏度,Cat#1001 为无色。Cat#1001R 为粉红色,更容 易区分是否加样。
· 应用: 本品适合于标记物为 HRP 的 ELISA 实验,本品中含有的 TMB 和过氧化氢, 在 HRP 的作用下,TMB 被氧化形成水溶性蓝色产物,在 370nm 和 650nm 有吸收 峰。进行动力学实验时,可直接检测 650 nm 的吸光度。加入终止液,可进行终点 法检测。终止液可以选择 0.1%NaF,终止后 TMB 的颜色不变,在 650nm 检测,也 可肉眼观察定性判断。加入酸性终止液后变成黄色,检测波长为 450 nm,吸光度值 可较不酸化增加数倍。
加入硫酸或盐酸终止,检测波长 458701451874
TMB 底物液的主要成分是 3,3’,5,5’ –四甲基联苯胺(3,3’,5,5’ - tetramethylbenzidine (TMB)), 是辣根过氧化物酶(HRP)的底物,在辣根过氧化物酶的作用下,与氧化剂反应 生成蓝色产物。颜色的强弱与 HRP 的活性呈正比,从而可以用于检测基于 HRP 标记物的 检测。
TMB单组分显色液使用说明说明书
北京普利莱基因技术有限公司电话:************62053186Email:***********************
Applygen Technologies Inc.DocRev:201910Page 1of 1TMB 单组分显色液使用说明B1067
描述:TMB (3,3',5,5'-四甲基联苯胺)主要应用于酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫斑点杂交或者免疫组化以及氯和过氧化氢的检测分析。
TMB 在HRP 的显色反应体系中,比其它色原具有更高的灵敏度且无致癌性被广泛应用。
为了满足不同试剂盒产品研发与生产以及科研需求,普利莱TMB 单组份显色液可用于针对不同类型的基于HRP 的免疫分析实验。
本产品使用方便,无需混合,灵敏度高、稳定性好、背景低、稳定可靠。
规格:100mL
保存:4℃避光,一年有效
使用方法:
1.HRP 结合物孵育一定时间后,用适当洗涤液洗板3-5次,每孔加适量TMB 显色液(建议100ul )。
根据个人实验需要,在室温(15-25℃)或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间,直至显色至预期深浅。
2.加入等体积的1M 盐酸或硫酸溶液终止反应,孔中反应液由蓝色变为黄色。
3.终止反应后30分钟内,在450nm 处测定吸光值。
注意:如果出现高反应背景或沉淀,表明TMB 底物反应过于强烈。
为了避免产生沉淀,可在终止后马上读数;或者进一步稀释一抗和/或HRP 结合物。
tmb过氧化物酶显色
tmb过氧化物酶显色TMB过氧化物酶显色TMB过氧化物酶显色是一种常用的实验技术,用于检测酶反应的活性和测定物质的浓度。
通过TMB过氧化物酶显色,可以观察到酶催化反应的结果,从而得出实验的结果。
TMB过氧化物酶显色的原理是利用过氧化物酶(TMB)催化TMB 底物的氧化反应,产生一种蓝色产物。
这种蓝色产物在酸性条件下可以转化为黄色产物,其吸光度与底物浓度成正比。
因此,通过测量吸光度的变化,可以确定底物的浓度。
TMB过氧化物酶显色的实验步骤一般分为以下几个部分:制备反应液、设置对照组、加入样品、加入底物、加入过氧化物酶、控制反应时间、停止反应、测量吸光度。
制备反应液。
通常反应液包括缓冲液、TMB底物和过氧化物酶。
缓冲液的选择根据实验的要求而定,可以根据需要调整pH值和离子浓度。
TMB底物是反应的关键物质,其浓度应根据需要进行调整,以确保反应的灵敏度和线性范围。
过氧化物酶的浓度也需要根据实验要求进行调整。
接下来,设置对照组。
对照组是用于比较样品反应的基准,通常使用纯缓冲液作为对照组。
对照组的吸光度应该尽可能接近零,以保证实验结果的准确性。
然后,加入样品。
样品可以是生物样品、化学物质或其他待测物质。
在加入样品之前,需要将样品处理好,以确保反应的准确性和灵敏度。
接着,加入底物。
将预先调整好浓度的TMB底物加入反应体系中,观察反应液的颜色变化。
底物的浓度应根据实验要求进行调整,以确保反应的线性范围和灵敏度。
然后,加入过氧化物酶。
将预先调整好浓度的过氧化物酶加入反应体系中,使其与底物反应。
过氧化物酶的浓度应根据实验要求进行调整,以确保反应的速度和灵敏度。
接下来,控制反应时间。
根据实验要求,控制反应的时间,使其在适当的时间范围内完成。
然后,停止反应。
通过加入停止液,改变反应液的酸碱度,停止底物的氧化反应。
停止液的选择应根据实验要求进行调整,以确保反应的准确性和灵敏度。
测量吸光度。
使用分光光度计等仪器,测量反应液的吸光度。
TMB 单组分显色液使用说明
TMB单组分显色液使用说明货号:PR1200规格:100ml保存:4℃避光保存,复检期为3年。
产品简介:目前酶免疫分析(EIA)技术,已被广泛应用于抗原,半抗原或抗体的定量或定性检测分析。
辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是酶联免疫分析技术中常用的一种酶,由于3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)在HRP的显色反应体系中,比其它色原具有更高的灵敏度且无致癌性而被广泛应用。
TMB主要应用于酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫斑点杂交或者免疫组化以及氯和过氧化氢的检测分析。
为了满足不同的试剂盒产品研发与生产以及科研需求。
产品特点:即用型:无需混合,方便快捷,减少误差灵敏度高:不低于A、B液稳定性好:2-8℃保存,有效期不低于36个月;显色终止后读数稳定背景低:底物溶液在650nm检测时检测OD值小于0.04质量可靠:产品批间差异小外观:本试剂一般情况下为无色,有时略显浅蓝色或浅黄色使用方法:用适当的干净容器(用纯净水反复冲洗),倒出适量的单组分TMB显色液,待达到室温后即可使用。
加液:加完HRP结合物并孵育一定时间后,用适当洗涤液洗板3-5次,每孔加TMB显色液100ul。
根据个人实验需要,在室温(15-25℃)或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间,直至显色至预期深浅。
终止:加入等体积的1M盐酸或硫酸溶液终止反应,孔中反应液由蓝色变为黄色。
读数:终止反应后30分钟内在450nm处测定吸光值。
注意:如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。
为了避免产生沉淀,可在终止后马上读数;或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。
相关试剂:SE13羊抗小鼠IgG-HRPP103310×PBSTC1050ELISA包被液(1×)C1058ELISA终止液A1800抗体稀释液A1820HRP标记抗体稀释液。
人凝血酶(TM)说明书
人凝血酶(TM)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,组织及相关液体样本中凝血酶(TM)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人凝血酶(TM)水平。
用纯化的人凝血酶(TM)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入凝血酶(TM),再与HRP 标记的凝血酶(TM)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的凝血酶(TM)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人凝血酶(TM)浓度。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:45ng/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
神经HRP示踪显色液(TMB法)说明书
神经HRP示踪显色液(TMB法)说明书货号:G2011规格:50T产品内容:名称规格保存试剂(A):TMB assay buffer2×500ml RT避光试剂(B):TMB显色液30ml-20℃避光试剂(C):TMB增强剂2×1ml RT试剂(D):TMB Wash buffer(20×)100ml RT产品说明:上个世纪70年代,Kristensopn和Olsson报道了HRP可神经末梢摄取,经轴浆逆行运输至神经元胞体,经组织化学方法可显示出神经元的轮廓,从而开发出HRP追踪神经元示踪技术,即为HRP法。
3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)是非常优越的酶免试验显色剂,能溶解于多种有机溶剂和双蒸水中,为稳定的无色溶液,与适量过氧化脲或双氧水与缓冲液混匀后,与过氧化物酶作用产生清晰的蓝色产物,极易观察,在辣根过氧化物酶的催化下,TMB会产生蓝色沉淀,该沉淀不溶于水和乙醇,显色后呈蓝色,可在显微镜下观察。
神经HRP示踪显色液(TMB法)是动物经麻醉、注入HRP后,游离或络合型的HRP与氧化剂反应生成络合物,该络合物氧化供氢的TMB显色剂,呈蓝色,在显微镜下清晰可见,该检测法较DAB法灵敏。
该显色液仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
操作步骤(仅供参考):(一)、准备工作1、动物麻醉:多用(3.5%)戊巴比妥钠作为麻醉剂,大鼠的麻醉剂量为0.25-0.35ml/100g。
2、导入HRP:有压力注射法、电泳法以及周围神经系统的注射涂抹等法。
3、确定动物存活期。
4、动物灌注:麻醉后,经左心室升主动脉插管行心内灌注固定。
先用生理盐水或PBS快速灌注。
随后用4%的多聚甲醛固定液灌注,先快后慢,时间控制在30-40min。
最后用10%蔗糖磷酸缓冲液(pH7.4)。
5、取材:取组织置于20%的蔗糖磷酸盐缓冲液中,切片厚度40μm,存于蔗糖磷酸盐缓冲液备用。
TMB显色液使用说明书
底物显色液A液(避光保存):EDTA-Na,柠檬酸,甘油,TMB(四甲基联苯胺)。
底物显色液B液:醋酸钠,柠檬酸,30%H2O2.。
【储存条件及有效期】
储存条件:2到8℃保存,避光。
有效期:12个月。
【自备仪器】
酶标仪,移液器
【使用方法】
1、待样品孔中加完HRP结合物并温育一定时间后,洗板3-5次,每孔加入底物显色液A,显色液B各50 µL(A、B液先混合再加入孔中),轻轻混匀,在37°C下温育10-30分钟。
检验原理原理是应用酶联免疫学基本原理当标记在抗体或抗原上的酶与显色液中的tmbh2o2应加入终止液后溶液由无色变成黄色黄色深浅反应elisa体系中抗原抗体结合的多少从而判断某种抗原或抗体的多少
ELISA酶-底物显色液使用说明书
【产品名称】
通用名称:TMB显色液
英文名称:TMBColor liquid
【包装规格】
组分
规格
显色液A
10mL/瓶,1瓶/盒
显色液B
10mL/瓶,1瓶/盒
【预期用途】
适用于酶联免疫反应中的显色阶段。
【检验原理】
原理是应用酶联免疫学基本原理——当标记在抗体或抗原上的酶与显色液中的TMB、H2O2等反应,加入终止液后溶液由无色变成黄色,黄色深浅反应ELISA体系中抗原抗体结合的多少,从而判断某种抗原或抗体的多少。在通过酶标仪测读吸光值,判断免疫反应的程度。
【生产企业】
企业名称
:
苏州和锐医药科技有限公司
地址
:
苏州市工业园区星湖街218号生物纳米园B2楼310、312、313室
邮政编码:215123 Nhomakorabea电话号码
:
单组分TMB显色液pdf
可溶型
沉淀型
可溶性蓝褐色产物 沉淀性蓝褐色产物
适用于 ELISA 及其 适用于 Western Blot
他通过液体反应检 及其免疫沉淀化学等
测 HRP 的应用
等
一步即用型溶液,无需混合,方便快捷
使用方法 使用之前,以超纯水反复洗涤的适当容器,
倒出适量单组分 TMB 底物溶液,即可使用。 加液:加完 HRP 结合物并温育一定时间后, 洗板 3-5 次,每孔加 TMB 底物 100- 150uL, 37°C 温育 5-30 分钟。 终止(备选):加等体积的 1N 的 HCl 或者 2N 的 H2SO4 来终止反应。酶标孔中反应液 从蓝色变为黄色。 读数:终止反应后,30 分钟内在 450nm 处读数。
下淡黄色、淡蓝色或者是淡绿色。底物溶液 37℃
温浴 15 分钟后,在 650nm 时检测 OD 值小于 0.04。
产品说明:
TMB 因其灵敏度较高及无致癌性而得到广泛应
用。单组分 TMB 过氧化物酶底物与辣根过氧化物
酶连接物反应时产生一种深蓝色的产物,适用于
定量以及定性分析的酶联免疫分析当中。又分
可溶型和沉淀型
不加终止液,显色更加稳定,可以在 620-650nm 处读数,
注意: 降低底物强度:如果出现高的反应背景和/或沉 淀,表明 TMB 底物反应过于强烈。为了避免产生 沉淀,可以在加入终止液后马上读数;另外,可 以进一步稀释一抗和/或 HRP 结合物。为了降低非 特异性背景颜色,推荐进一步降低一抗和/或 HRP 结合物的浓度,尽量避免降低底物浓度。动力学 检测:TMB 单组分底物在与过氧化物酶反应时产生 一种蓝色,可以在加底物后 620-650nm 处读数, 不需终止反应
单组份 TMB 底物液
tmb过氧化物酶显色
tmb过氧化物酶显色
TMB过氧化物酶显色是一种广泛应用于生物学和医学领域的实验技术。
该技术利用TMB(3,3',5,5'-四甲基苯基二胺)作为底物,过氧化物酶(POD)作为催化剂,产生蓝色产物,从而实现对生物分子的检测和
定量分析。
TMB过氧化物酶显色技术的原理是:TMB在POD的催化下被氧化成蓝色产物,其吸光度与TMB的浓度成正比。
因此,通过测量反应产物的吸光度,可以计算出样品中TMB的浓度,从而推断出待测生物分子的含量。
TMB过氧化物酶显色技术具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点,因此被广泛应用于生物学和医学领域。
例如,在酶联免疫吸附实验(ELISA)中,TMB过氧化物酶显色技术被用于检测抗体或抗原的存
在和含量;在细胞生物学研究中,TMB过氧化物酶显色技术被用于检测细胞增殖和凋亡等生理过程。
在使用TMB过氧化物酶显色技术时,需要注意以下几点:首先,TMB 过氧化物酶显色反应需要在酸性条件下进行,因此需要加入适量的酸
性缓冲液;其次,反应时间和温度对反应结果有影响,需要根据实验
需要进行优化;最后,反应产物的颜色会随着时间的推移而加深,因
此需要在反应合适的时间内停止反应并测量吸光度。
总之,TMB过氧化物酶显色技术是一种简单、灵敏、特异性强的生物分子检测方法,被广泛应用于生物学和医学领域。
在实验中,需要注意反应条件的优化和反应产物的测量,以获得准确的实验结果。
tmb显色试剂盒技术参数
tmb显色试剂盒技术参数
TMB显色试剂盒是一种常用的生化试剂盒,通常用于酶联免疫吸附实验(ELISA)等生化实验中。
它的技术参数包括但不限于以下几个方面:
1. 吸光度测量范围,TMB显色试剂盒的吸光度测量范围通常在450nm左右,这是因为TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)在这个波长下的吸光度较高。
2. 灵敏度,TMB显色试剂盒的灵敏度是指它能够检测到的最低浓度的分子或物质。
通常来说,TMB显色试剂盒的灵敏度在实验室条件下可以达到较低的浓度,这使得它在检测低浓度的生物分子时非常有用。
3. 稳定性,TMB显色试剂盒的稳定性是指它在常温下或特定储存条件下的保存时间和稳定性。
这一参数对于实验室的长期使用非常重要,因为稳定的试剂可以减少实验误差。
4. 使用方法,TMB显色试剂盒的使用方法包括试剂的配制、反应时间、反应温度等。
正确的使用方法可以确保实验结果的准确性
和重复性。
5. 包装规格,TMB显色试剂盒通常有不同的包装规格,包括不
同的试剂量、试剂瓶规格等。
这些信息对于实验室进行实验计划和
成本预算非常重要。
总的来说,TMB显色试剂盒的技术参数涉及到吸光度测量范围、灵敏度、稳定性、使用方法和包装规格等方面。
这些参数对于科研
人员和实验室来说都是非常重要的,因为它们直接影响着实验结果
的准确性和可重复性。
希望这些信息能够对你有所帮助。
tmb显色原理
tmb显色原理
TMB显色原理是一种常用于酶标记实验的显色方法。
其原理基于硫酸钴(Ⅲ)催化氧化底物TMB(3,3',5,5'-四甲基苯胺)生成蓝色的介质。
主要步骤如下:
1. 将酶标记物加入待测样品中,使其发生反应。
通常酶标记物可为辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(ALP)等。
2. 加入底物TMB溶液,与酶标记物发生反应。
在存在过氧化氢的条件下,酶标记物能催化TMB在7-过氧基体环消除的过程中形成氧化TMB(蓝色化合物)。
3. 反应产物的颜色可以通过比色法进行定量分析。
使用酶标记物的底物存在与否作为对照组,通过测量待测样品和对照组的吸光度差异,可以确定目标物的含量。
需要注意的是,在实验过程中要避免阳光或强光的照射,因为TMB显色会对光敏感,可能导致颜色变浅或变淡,进而影响实验结果的准确性。
此外,在反应过程中,切忌接触到底物TMB的皮肤或眼睛,以免造成伤害。
遇到意外接触时,应立即用大量水冲洗,并及时就医。
tmb过氧化物酶显色
tmb过氧化物酶显色TMB过氧化物酶显色TMB过氧化物酶显色是一种常用的酶标技术,广泛应用于生物医学研究和临床诊断中。
本文将介绍TMB过氧化物酶显色的原理、应用以及其在医学领域中的重要性。
一、原理TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)是一种常用的显色底物,它能够与过氧化氢在过氧化物酶的催化下发生氧化反应,产生蓝色的氧化产物。
这种反应可被光谱仪或比色计测定,从而间接测定酶的活性或抗原和抗体的结合程度。
二、应用TMB过氧化物酶显色广泛应用于酶标技术中。
例如,可以利用TMB 显色法测定酶的活性,通过测定显色产物的光吸收值来定量分析酶的活性。
此外,TMB过氧化物酶显色还可以用于检测抗原和抗体的结合程度,常见的应用包括ELISA(酶联免疫吸附实验)和免疫组化等。
三、医学应用TMB过氧化物酶显色在医学领域中有着重要的应用价值。
例如,在临床诊断中,可以利用TMB过氧化物酶显色技术检测特定抗原的存在,从而帮助医生判断患者是否患有某种疾病。
此外,TMB过氧化物酶显色还可以用于研究新药的效果,通过测定药物对特定酶的抑制能力来评估药物的活性和选择性。
四、重要性TMB过氧化物酶显色在生物医学研究和临床诊断中扮演着重要的角色。
它不仅可以快速、准确地测定酶的活性,还可以检测抗原和抗体的结合程度,为疾病的早期诊断提供了重要的手段。
此外,TMB 过氧化物酶显色还具有操作简便、成本低廉等优点,使其成为一种广泛应用的酶标技术。
TMB过氧化物酶显色是一种重要的酶标技术,其原理简单、应用广泛,并在医学领域中发挥着重要的作用。
通过TMB过氧化物酶显色技术,我们可以快速、准确地测定酶的活性,检测抗原和抗体的结合程度,为生物医学研究和临床诊断提供了有力的支持。
相信随着科学技术的不断进步,TMB过氧化物酶显色技术将在未来的研究中发挥更加重要的作用。
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电话号码
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0512-80821756
传真号码
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【医疗器械生产器械许可证编号】
【医疗器械注册证书编号】
【产品标准编号】
【说明书批准及修改日期】
2、每孔加入终止液,15 min内在450 nm波长处测定各孔溶液的OD值。
【检验结果的分析】
1.观察方法:酶标仪450 nm检测OD值。
2.空白对照不加HRP标记的抗体/抗原和阴性对照结果应无色。阳性对照及加HRP标记的抗体/抗原产生深蓝色产物。
3.通过绘制标准曲线,检测未知浓度的OD值,对应标准曲线找欲测目标物浓度。
【主要组成成份】
底物显色液A液(避光保存):EDTA-Na,柠檬酸,甘油,TMB(四甲基联苯胺)。
底物显色液B液:醋酸钠,柠檬酸,30%H2O2.。
【储存条件及有效期】
储存条件:2到8℃保存,避光。
有效期:12个月。
【自备仪器】
酶标仪,移液器
【使用方法】
1、待样品孔中加完HRP结合物并温育一定时间后,洗板3-5次,每孔加入底物显色液A,显色液B各50 µL(A、B液先混合再加入孔中),轻轻混匀,在37°C下温育10-30分钟。
【产品性能指标】
1、外观与结构:显色液A应为淡黄色透明液体,显色液B应为无色透明液体。均无沉淀、颗粒及絮状物
2、用于酶联免疫实验中的显色阶段:可于样本反应,生成深蓝色产物。
【注意事项】
1、实验用品应该专一,避免交叉污染。
2、TMB对人体有刺激性,请注意适当防护。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ操作。
ELISA酶-底物显色液使用说明书
【产品名称】
通用名称:TMB显色液
英文名称:TMBColor liquid
【包装规格】
组分
规格
显色液A
10mL/瓶,1瓶/盒
显色液B
10mL/瓶,1瓶/盒
【预期用途】
适用于酶联免疫反应中的显色阶段。
【检验原理】
原理是应用酶联免疫学基本原理——当标记在抗体或抗原上的酶与显色液中的TMB、H2O2等反应,加入终止液后溶液由无色变成黄色,黄色深浅反应ELISA体系中抗原抗体结合的多少,从而判断某种抗原或抗体的多少。在通过酶标仪测读吸光值,判断免疫反应的程度。