发酵罐操作讲课讲稿

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发酵设备培训讲义

发酵设备培训讲义

发酵设备培训讲义1. 简介发酵是一种利用微生物将有机物质进行代谢转化的过程。

在食品工业、制药工业、化妆品工业等领域中,发酵技术被广泛应用于食品、药物、化妆品等的生产过程中。

发酵设备是实现发酵过程的重要工具。

本讲义将介绍发酵设备的基本原理、操作方法以及维护保养等内容,帮助大家更好地理解和应用发酵设备。

2. 发酵设备的分类发酵设备根据其结构和功能的不同可以分为以下几类:1.发酵罐:也称为发酵釜,是最常见的发酵设备。

它是用于进行大规模发酵的容器,具有较大的容积和压力抗力,适用于工业生产。

2.发酵槽:也称为发酵槽罐,容积较小,适用于实验室小规模发酵。

3.发酵塔:也称为发酵塔式罐,具有垂直结构,体积较小,适用于微生物、细胞和酶的培养。

4.发酵膜箱:采用膜分离技术,可以在保持生物量和产物的高浓度条件下,实现发酵和分离过程的一体化。

5.发酵袋:一种灵活的、可移动的发酵容器,适用于灵活性要求较高的发酵过程。

3. 发酵设备的基本原理发酵设备的基本原理是在控制温度、pH值、氧量和搅拌等条件下,提供一个适合微生物生长和代谢的环境。

主要过程包括以下几个方面:1.发酵培养基的制备:发酵培养基是提供微生物发酵所需的营养物质的介质。

一般包括碳源、氮源、矿盐和生长因子等成分。

2.发酵菌种的接种:将选定的菌株接种到发酵培养基中,使其在培养基中繁殖和生长。

3.发酵过程的调控:通过控制温度、pH值、氧量和搅拌等条件,调控发酵过程中微生物的生长速率和产物的生成速率。

4.发酵液的分离和提纯:将发酵液中的微生物细胞、产物以及废料进行分离和提纯。

4. 发酵设备的操作方法根据不同的发酵设备,其操作方法也会有所不同。

下面以发酵罐为例,介绍其典型的操作方法:1.发酵罐的清洗和消毒:在开始发酵之前,需要对发酵罐进行彻底的清洗和消毒,以避免杂菌的污染。

2.发酵培养基的制备:根据发酵菌株的要求,制备适当的发酵培养基。

3.菌种的接种:将培养好的菌株接种到发酵罐中,使其开始生长和繁殖。

发酵罐操作培训ppt课件

发酵罐操作培训ppt课件
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无菌意识
由于微生物个体小、分布广泛等特性,发酵染菌 的途径有很多,而且如果染菌的话,我们无法及时 做出判断,必须培养一段时间才能看出来,发现以 后的结果只能是倒罐,造成不小的损失,所以操作 之前必须具备无菌意识,每一步操作都按照操作规 程进行,抓住每一个细节,才能确保不会染菌。
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安全意识
① 空气压力能达到0.25~0.3MPa; ② 蒸汽压力能达到0.25MPa,温度能达到139℃; ③ 设备用电; ④ 机械搅拌; ⑤ 酸碱腐蚀。
溶氧电极
• 利用饱和NaSO3溶液进行电极零点标定,电 压值在1300左右;
• 百分百标定。
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电极标定操作流程:
• 用去离子水冲洗电极头和接地电极 清洗 • 用吸水纸吸干水以后放到对应的标准液中
• 将测量切换成标定,自动补偿切换成手动补偿 标定 • 点击相应的标定项目开始标定
• 电压值稳定以后结束标定项目,清洗电极头 数据保存 • 将自动切换成手动,标定切换成测量,点击保存
溶料 • 原料全部溶解,无杂质,无硬块
• 确保电极已经插上,出料一阀已经关闭
投料 • 考虑增容和种子液量,定容到发酵所需体积
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第五步:实消 发酵罐实消是对发酵培养基进行彻底的灭菌处
理, 利用高温过饱和蒸汽的强穿透能力使各种细菌、 真菌蛋白质凝固而死亡。实消结束以后罐内是无菌 的环境,需通入无菌空气进行保压直到培养结束。
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第二步:空消 空消主要目的是在进罐生产前对设备清洁和杀
灭其他微生物,防止因设备清洁不彻底或设备停用 时间过久,微生物滋生,从而对生产造成影响。
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• 空消操作流程
• 从空气路、取样路和出料路进蒸汽
升温 • 排净罐内的冷空气后关小排气阀,节省蒸汽

发酵罐操作培训

发酵罐操作培训

第八步:放罐
菌体生长情况符合下罐条件以后即可放罐,放 罐操作流程如下:
1. 提前1小时通知后提取车间准备放罐 2. 取样 3. 蒸汽吹洗放罐管道 4. 检查 5. 升压 6. 放罐 7. 填写记录表格
第九步:洗罐
放罐结束以后立即进行洗罐,洗罐流程如下:
1. 卸压:打开罐盖前要先卸掉罐压; 2. 电极保养:拔出电极清洗干净以后进行正确保养;
无菌意识
由于微生物个体小、分布广泛等特性,发酵染菌 的途径有很多,而且如果染菌的话,我们无法及时 做出判断,必须培养一段时间才能看出来,发现以 后的结果只能是倒罐,造成不小的损失,所以操作 之前必须具备无菌意识,每一步操作都按照操作规 程进行,抓住每一个细节,才能确保不会染菌。
安全意识
① 空气压力能达到0.25~0.3MPa; ② 蒸汽压力能达到0.25MPa,温度能达到139℃; ③ 设备用电; ④ 机械搅拌; ⑤ 酸碱腐蚀。
镊子、打火机、石棉手套
注意事项:
1. 环境:关闭车间门窗和排气扇,接种环境周围禁止人员 来回走动,降低空气流动性;
2. 无菌:拔接种针护套时需靠在火焰附近,接种壶不可倾 斜过度,避免种子液流出;接种操作过程中罐压不能掉 零;
3. 安全:拔出接种壶时接种针不可以指向人员,避免接种 针飞出后造成人员受伤;点燃火焰圈不可随处乱扔,熄 灭以后才可以继续操作。
配料操作流程:
第五步:实消
发酵罐实消是对发酵培养基进行彻底的灭菌处 理, 利用高温过饱和蒸汽的强穿透能力使各种细菌、 真菌蛋白质凝固而死亡。实消结束以后罐内是无菌 的环境,需通入无菌空气进行保压直到培养结束。
实消操作流程
第六步:接种
接种方法:压差接种法 接种材料:种子液、火焰圈、95%酒精、酒精棉、

发酵罐操作流程及注意事项

发酵罐操作流程及注意事项

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生物反应与设备—发酵罐的操作(生物制药设备课件)

生物反应与设备—发酵罐的操作(生物制药设备课件)
在发酵过程中,通过调节控制通风量和 搅拌转速的方法达到对溶氧浓度的调控。
项目二 发酵罐操作技术
项目二 发酵罐操作技术
项目二 发酵罐操作技术
溶氧电极 (Do)
有原电池溶氧电极和极谱溶氧电极
原电池溶氧电极采用一对不同金 属材质制作的两个电极,将其浸没 在发酵液中,溶解氧得电子所产生 的电流强度与氧气的浓度成正比, 电信号经变送器输送,并在显示器 上显示出溶解氧浓度。
项目二 发酵罐操作技术
2.搅拌器 搅拌器安装在搅拌轴上,起着将空气分散成气泡并
与发酵液充分混合,提高溶氧速率的作用。
搅拌器的叶轮有多种形式,有涡轮式和螺旋桨式两种。 (1)涡轮式搅拌器
中央圆盘上设置 六个叶片,可分为平 叶式和弯叶式两种。
项目二 发酵罐操作技术
(2)螺旋桨式搅拌器 采用类似螺旋推进器的结构,在发酵罐内形成由下
机械搅拌 通风发酵罐 的主要部件有罐体、 搅拌器、挡板、空气 分布器、换热器、消 泡器、人孔、视镜等.
项目二 发酵罐操作技术
1.罐体 罐体是空心圆柱体上下两底焊接封头后所构成的容器。 圆柱体高径之比为1.7~3。
罐体一般采用卫级不锈钢,要求能耐受130℃的高 温和的绝对压力。
封头上设置有进料管、无菌呼吸口、接种管、人孔、 视镜、压力表和取样管等。罐侧壁上设计有各种检测仪器 接口以及换热器的进出口。无菌压缩空气从罐底部通入, 经空气分布管进入发酵液。
项目二 发酵罐操作技术 3.轴封
连接搅拌器的搅拌轴在电动机的驱动下转动,搅拌 轴与罐体间的缝隙通过轴封实现密闭。发酵罐上常采用端 面机械轴封。
端面机械轴封由动环和静环构成 动环由碳化钨钢制成, 静环由聚四氟乙烯制成
动环和静环具有导热性能好,摩擦系数小等特性。

实验二发酵罐认知及使用培训

实验二发酵罐认知及使用培训

实验二发酵罐认知及使用培训一、发酵罐的基本认知1.发酵罐的定义:发酵罐是一种专门用于食品发酵的器具,可控温、控湿、控气等,提供适宜的环境条件,促使微生物的活动和生长。

2.发酵罐的组成:发酵罐由罐体、发酵控制系统、温湿度控制系统、通风系统、氧气供应系统等多个部分组成。

二、发酵罐的使用方法1.发酵罐的准备:在使用发酵罐之前,需要进行检查和清洁,确保设备的整洁和无故障。

2.发酵罐的操作:根据具体的发酵要求,设置发酵罐的温度、湿度和氧气供应量等参数,再将发酵物质放入罐内进行发酵。

3.发酵罐的管理:在发酵过程中,需要定期检查发酵罐的工作状态,如温度、湿度、氧气供应等是否正常,同时进行必要的调整和维护。

三、发酵罐的常见问题及解决方法1.温度控制问题:如发酵罐的温度不稳定或过高过低,可以检查温度控制系统的设置和传感器是否正常,调整或维修相应部件。

2.湿度控制问题:如发酵物质过于干燥或湿度过高,可以检查湿度控制系统的工作状态,是否需要增加或减少湿度调节装置。

3.氧气供应问题:如发酵物质需要较高的氧气供应量,可考虑增加罐体通风系统或使用其他辅助设备进行氧气供应。

4.发酵过程中的异味问题:如果发酵罐产生异味,可以检查发酵过程中是否发生了不正常的反应,及时调整发酵参数或更换发酵物质。

四、发酵罐的安全注意事项1.在操作发酵罐时,需要确保罐体密封良好,并避免发生漏气或渗漏的情况。

2.发酵罐使用过程中,注意保持设备的清洁,防止发酵过程中的污染或杂质对产品质量的影响。

3.在维护发酵罐时,必要时需要切断电源或气源,以确保操作人员的安全。

4.发酵罐使用完毕后,需要进行清洁和消毒,以防止细菌滋生和交叉感染。

综上所述,通过发酵罐的认知及使用培训,可以提高操作人员对发酵罐的了解程度,正确进行操作和管理,从而保证产品的质量和安全性。

同时,还可以帮助操作人员快速解决发酵过程中出现的问题,并采取相应的应对措施,提高生产效率和降低风险。

实验二发酵罐认知及使用培训

实验二发酵罐认知及使用培训

实验二发酵罐认知及使用培训实验二发酵罐是一种用于微生物发酵生产的设备,广泛应用于食品、饲料、医药等行业。

为了更好地了解发酵罐的使用方法和操作步骤,进行一次认知及使用培训是非常有必要的。

本次培训将从发酵罐的基本知识、使用方法和操作注意事项三个方面进行介绍。

一、发酵罐的基本知识1.定义:发酵罐是一种通过完全自控的连续或批量方式进行微生物发酵的设备。

2.结构和组成:发酵罐一般由罐体、传感器、控制系统、进料和出料装置等组成。

3.类型:发酵罐可以分为静态发酵罐(如容器法、瓶内发酵等)和动态发酵罐(如搅拌式、流动式等)两种类型。

4.应用领域:发酵罐广泛应用于食品、饲料、医药等行业,如酿酒、酱油、红曲等的制作。

二、发酵罐的使用方法1.准备工作:a.检查发酵罐及相关设备是否完好无损;b.清洁罐体及其周边环境;c.备齐所需培养基和菌种。

2.发酵操作步骤:a.将培养基加热至适宜温度并冷却,以保持发酵罐内的温度适宜;b.将培养基倒入发酵罐,严格按照配方比例进行;c.在搅拌机转速合适的情况下,加入适量的菌种;d.开启搅拌机,使培养基和菌种充分混合,保持罐内温度和压力的稳定;e.根据发酵过程中的参数变化,及时对罐内温度、压力等进行监控和调控;f.发酵结束后,按照规定的方法进行产品分离、提取和储存。

三、操作注意事项1.安全操作:操作人员需戴好防护用品,如手套、口罩、护目镜等,避免直接接触有害物质,确保操作安全。

2.温度控制:发酵过程中的温度是影响微生物生长和代谢的关键因素,需根据所需生产的产品特性进行合理控制。

3.清洁卫生:保持发酵罐及其周边环境的清洁卫生,防止杂菌的污染,影响发酵效果和产品质量。

4.操作规范:严格按照操作规程进行操作,确保每个步骤都符合标准,避免操作失误导致生产事故或产品缺陷。

综上所述,通过本次发酵罐的认知及使用培训,我们了解到了发酵罐的基本知识、使用方法和操作注意事项。

只有深入了解和掌握这些知识,才能够正确、安全地操作发酵罐,提高生产效率,保证产品质量。

上海百仑发酵罐操作说明PPT课件

上海百仑发酵罐操作说明PPT课件

·公用工程要求:蒸汽:0.2~0.4Mpa
水源:0.1~0.3Mpa
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第四节 灭菌控制
本产品为自动灭菌发酵罐,在灭菌时首先 点击程序中的灭菌操作。如图,点击启动 自 动。
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灭菌开始,注意总进气阀(蒸汽)是否打开
检查所有阀门动作是否正确,所有阀门动作 见第二节。
若阀门动作不对,本产品还准备了旁通阀门 用来紧急使用。
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搅拌设定:
设定搅拌上 下限定
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PID控制调节
用于搅拌和DO关联时 使用
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PID 解释
(1)比例控制(P) 比例控制是一种最简单的控制方式。其控 制器的输出与输入误差(I) 在积分控制中,控制器的输出与输入误差 信号的积分成正比关系。对一个自动控制系统,如果在进入稳态 后存在稳态误差,则称这个控制系统是有稳态误差的或简称有差 系统。为了消除稳态误差,在控制器中必须引入“积分项”。积 分项对误差取决于时间的积分,随着时间的增加。积分项会增大。 这样,即便误差很小,积分项也会随着时间的增加而加大。它推 动控制器的输出增大使稳态误差进一步减小,直到等于零。因此, 比例+积分(PI)控制器,可以使系统在进入稳态后无稳态误差。
优点:污染杂菌比例小,操作灵活,可进行不同产品的生产。
缺点:效率低,非稳态工艺过程设计和操作困难(培养过程中细 胞生长、产物积累、以及培养基的物理状态常常随时间变化而变 化) 。
5
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第三章 机械部分操作说明
6
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第一节 发酵时阀门动作
7
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8
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第二节 灭菌时阀门动作
9
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第三节 注意事项
重要提示:
3
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发酵设备发酵罐的一些操作共48页PPT课件

发酵设备发酵罐的一些操作共48页PPT课件

发酵罐的基本条件
机械搅拌发酵罐在工厂广泛采用。它是利用机械搅拌器的作用,使空气和发酵 液充分混合,提高发酵液的溶解氧,供给微生物生长繁殖代谢过程所需的氧。
• 发酵罐应具有适宜的径高比(高/径比约为2.5~4 ) • 结构严密,耐腐蚀,光滑,附件少,无死角,可反复灭菌,脱落
的金属要少 • 要有良好的气-液、液-固混合性能(使细胞能获得营养) • 要尽量少的搅拌和通气的动力消耗 • 良好的热交换性能,足够的冷却面积 • 良好的消泡性能 • 有必要、可靠的检测控制性能 • 耐压,4.5kg/cm2(蒸气压一般 3~4kg/cm2)
╠挡板与罐壁之间的距离为(1/5 ~1/8)D。
W D
Z=(0.1~D0.12)DZ= 0.5
D——罐的直径(mm) Z——挡板数 W——挡板宽度(mm)
3. 消泡器
有锯齿式、梳式、孔板式、旋桨梳式等; 孔板式的孔径约10~20mm。 消泡器的长度约为罐径的0.65倍。
消泡叶轮 消泡桨
填料函 优点:结构简单 缺点:• 死角多,很难彻底灭菌,容易渗漏及染菌;
注意:
➢ 接种瓶密封、耐高压; ➢ 接种瓶口上要旋紧、塞子塞紧,防止漏气染菌; ➢ 进气口压力表一定不能超过1kg/cm2(否则接种瓶会爆炸); ➢ 一次接不完反复两三次直至全部种子液接入罐内为止。
四、发酵罐的一些操作
2. 移种 种子罐→发酵罐
• 移种管灭菌:进入罐的管道阀门要关好,移种管中压力 >2kg/cm2,灭菌15min,关蒸气
分析区
气相色谱仪、液相色谱仪、分光光度计等

量多 厚层通风发酵设备
液体
厌氧发酵 好氧发酵 机械搅拌
非循环式——通用式机械搅拌发酵罐、自吸式

上海百仑发酵罐操作说明PPT课件

上海百仑发酵罐操作说明PPT课件
当罐体增加其他项时可以点击通过更改曲线内容来改变线性名称但在设置时间时点击会弹出对话框41第九节数据报表此项可直接选择想要查询批号点击刷新即可显示此处为数据中所有批号的起始不结束时间在查看数据时可设定一个精确时间方便查找储存周期可调节点击即可在设置时间时点击该选项会弹出对话框根据所需迚行选择即可
上海百仑科技有限公司
本产品虽为全自动灭菌产品,但在灭菌时, 必须确保有一人在本产品旁观察,注意压力。
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第四章 软件操作
因软件不同,在此我们将会把本公司所有 型号软件都介绍一遍
本教程为多罐控制软件界面 第一节 MCGS软件操作 第二节 百仑慧神软件操作 第三节 组态软件操作
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第一节 MCGS控制软件
首先双击MCGS软件图标点击进入
27
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DO观察 在此 项只能观察 DO的当前值
在有压力自控的产品时, 通过它可以直接设定需 要的压力点击自动即可
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通过输入设定值, 点击自动来控制
通气,单位 xL/h
点击开始发酵, 设备会自动进行 发酵周期运算,
.
在上图发酵批号是可更改的,单击左侧数字会 弹出一个对话框。如图:
在此处可以对批号进行任意更改,但是其批号 和其他软件不想通
总量
17
运行状态
发酵 批次
可观察各罐 流程图
点击此处,可依次 查看各罐流程图
视镜开关,点击即可
点击进入,可观

察单罐各项参数






循环泵状态,同冷却灯状态
冷却电磁阀状态,红 灯为关,绿灯为开
.
第四节 参数设定
18
在此可进 行管理员 登陆,与 标题栏中

综合实训发酵罐的操作

综合实训发酵罐的操作

综合实训发酵罐的操作
一、发酵罐的结构及功能
发酵罐是一种专门用于生物发酵应用的罐子。

它主要由发酵罐、发酵容器、控温控湿装置、气体检测装置、抽空装置、混料装置等组成,它一般安装在发酵室内,依据发酵工艺的不同,可以以恒温/恒湿的方式控制发酵罐内的温度和湿度,以确保发酵工艺的正常运行。

发酵罐的功能主要有:
1、保持发酵环境的温度和湿度:发酵罐可以通过它的加热装置,控制发酵罐内温度的稳定;发酵罐可以通过它的加湿装置,控制发酵罐内湿度的稳定。

2、气体混合:发酵罐可以通过气体混合装置,将多种气体混合好,满足发酵生物的需求。

3、抽空:发酵罐可以通过抽气装置,将罐内残留的气体抽出,排除发酵空气中有害气体的危害。

4、液体混合:发酵罐内的液体也可以通过混料装置,将多种液体混合成满足发酵生物需求的液体。

1、确认材料:在使用发酵罐前,需要确认好要使用发酵罐的材料,并准备好相应的发酵液。

2、准备好发酵罐:在使用发酵罐前,应该检查发酵罐的外观,如没有损坏就可以进行下一步的操作;同时应当检查发酵罐内的温度和湿度。

精选发酵设备培训讲义

精选发酵设备培训讲义

酒精发酵罐的结构要求
满足工艺要求,有利于发酵的排出从结构上有利于发酵液的排出有利于设备清洗、维修以及设备制造安装方便等问题。
酒精发酵罐筒体结构
为圆柱形,底盖和顶盖均为碟形或锥形。在酒精发酸过程中,为了回收二氧化碳气体及其所带出的部分酒精,发酵罐宜采用密闭式。罐顶装有人孔、视镜及二氧化碳回收管、进料管、接种管、压力表和测量仪表接口管等。罐底装有排料口和排污口;罐身上下部装有取样口和温度计接口,对于大型发酵耀,为了便于维修和清洗,往往在近罐底也装有人孔。
高压强的水力喷射洗涤装置
它是一根直立的喷水管,沿轴向安装于罐的中央,在垂直喷水管上按一定的间距均匀地钻有4-6mm的小孔,孔与水平呈20度角,水平喷水管借活接头,上端和供水总管,下端相垂直分配管相连接,洗涤水压为0.6-0.8MPa。水流在较高压力下,由水平喷水管出口处喷出,使其以每分钟48—56转自动旋转,并以极大的速度喷射到罐壁各处,而垂直的喷水管也以同样的水流速度喷射到罐体四壁和罐底。约5分钟时间即可完成洗涤作业。洗涤水若用废热水,还可提高洗涤效果。
它的容积常大于50m3,H:Dt=1-2,罐的上、下部都是锥形的。上部有物料口,冷却水口,CO2和气体出口、人孔和压力表开口等。温度控制采用罐内蛇管和罐外壁直接水喷淋相结合,排料管在罐的底部。
一、酒精发酵罐
酵母将糖转化为酒精高转化率条件(1)满足酵母生长和代谢的必要工艺条件(2)一定的生化反应时间(3)及时移走在生化反应过程中将释放的生物热
发酵室内装置密闭式发酵罐,则采用空调设备,实施冷风再循环更有利于冷耗的节约,为避免在室内产生激烈的气流,通风口都应设在墙角处。
降低发酵室的冷耗量措施
发酵罐容积
发酵罐采用圆柱形器身,底和顶为锥形盖,选取结构尺寸的比例关系如下:

发酵罐发酵课件

发酵罐发酵课件
2、注意事项
①结晶时,结晶罐中最高温度不得高于45℃,最低不得低于-4℃,不能在高温下加晶种; ②回转干燥要严格控制循环水温和时间,夏天循环水温高,可用冷凝器降温;③压滤时遇停电,应立即关空压阀保压。
3、生产中维生素C收率的计算
3、发酵罐发酵
供发酵罐用的培养基经灭菌冷却后,加入至山梨糖的发酵液内,接入第二步发酵菌种的二级种子培养液,在温度30℃,通入无菌空气下进行发酵,为保证产酸正常进行,往往定期滴加灭菌的碳酸钠溶液调pH值,使保持7.0左右。当温度略高(31~33℃),pH 在7.2左右、二次检测酸量不再增加,残糖量0.5mg/ml以下,即为发酵终点,得含古龙酸钠的发酵液。此时游离芽孢及残存芽孢杆菌菌体已逐步自溶成碎片,用显微镜观察已无法区分两种细菌的差别,整个产酸反应到此也就结束了。所以,根据芽孢的形成时间来控制发酵是一种有效的办法。在整个发酵期间,保持一定数量的氧化葡萄糖酸杆菌(产酸菌)是发酵的关键。
整个发酵过程可分为产酸前期、产酸中期和产酸后期。产酸前期主要是菌体适应环境进行生长的阶段。该阶段产酸量很少,为了提高发酵收率应尽可能缩短产酸前期。产酸前期长短与底物浓度、接种量、初始pH及溶氧浓度等有关。产酸中期是菌体大量积累产物的时期。产酸中期的时间主要决定于产酸前期菌体的生长的好坏和中期的溶氧浓度控制,也与pH值等有关。因此适宜的操作条件可获得较大的产酸速率和较长的发酵中期,从而可提高发酵收率。产酸后期,菌体活性下降,产酸速率变小,同时部分酸发生分解,引起酸浓度下降。生产上由于要求发酵液中残糖浓度小于0.5mg/ml,不可能提前终止发酵,所以在此期间应采取措施,设法延长菌体活性,使之继续产酸。
c.二次交换 将酸性上清液打入二次交换柱进行离子交换,至流出液的pH1.5时,开始收集交换液,控制流出液pH1.5~1.7,交换完毕,洗柱至流出液古龙酸含量在1mg/ml以下为止。若pH>1.7时,需更换交换柱。 d.减压浓缩结晶 先将二次交换液进行一级真空浓缩,温度45℃,至浓缩液的相对密度达1.2左右,即可出料。接着,又在同样条件下进行二级浓缩,然后加入少量乙醇,冷却结晶,甩滤并用冰乙醇洗涤,得2-酮基-L-古龙酸。 如果以后工序使用碱转化,则需将2-酮基-L-古龙酸进行真空干燥,以除去部分水分。
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发酵罐操作发酵罐操作操作前请认真检查冷水机、空压机、反应器、进出水管、气管情况。

填好使用说明书。

开机:先打开其他单元上的开关,再打开主机背后的开关。

关机:先把控制器上所有单元的参数状态调到off,把进气开关打开后关机;关机时先关控制器后面的开关,再关其他单元上的开关。

灭菌操作1、取下马达,平放于桌上。

罐顶端套上黑色保护帽。

2、由罐上取下温度传感器,该传感器不需要灭菌。

3、取下PH电缆线,盖上红色保护帽;将PH电极要插到底。

务必拧紧电极的上下两个固定螺帽。

PH电极灭菌前要标定。

PH电极标定:接好电缆后拧开电极的固定螺帽(第一个),将PH电极取出后用去离子水冲洗干净后,轻轻用面纸吸干上面的水后先放入标准溶液4.01中校正,等控制器上数据稳定后在set zero处输入4.01(不管实际数值的微弱差别);输入完闭后从标准液中取出电极,冲洗、吸干后放入7.00的标准溶液中,等控制器上数据稳定后在set span处输入7.00(不管实际数值的微弱差别)。

PH电极校正后不要关控制器。

4、取下DO电缆线,DO电缆接口处用锡箔纸包好后套上黑色帽。

DO电极灭菌完后标定。

DO电极要插到底,拧紧电极的上下两个固定螺帽。

灭菌前要注意溶氧电极里头的保护液是否还有,没有则要进行添加。

5、取下消泡或液位电缆线,将消泡或液位电缆插到底,灭菌后定位到所需要的高度后就不要再压下去。

消泡电极的高度离液面约1.5cm处。

6、拆下发酵罐上和冷凝器上的进、出水管,拆下的同时要用夹子夹住拆下水管的接头处,以防水流出。

7、发酵罐上的过滤器的两端多要用夹子夹死,过滤器的出口处用锡箔包好,所有过滤器的两端多要用夹子夹住。

发酵完毕倒罐后注意检查过滤器是否被打湿,若有则赶快用吸球将其中的液体吹出。

8 、用铁夹夹死收获管上的硅胶管以防在灭菌锅内跑液。

收获管不用时上面一定要卡死不移走。

9、在灭菌前.将发酵罐的六个固定螺帽拧松出气,其他螺帽一定要拧紧!灭菌完后打开高压锅后立刻将其拧紧,注意戴上手套防止被烫伤。

10、酸不要放高压锅内灭菌,将空的酸液瓶上的过滤器用锡箔包好,并将瓶盖拧松出汽。

灭菌完后去掉锡箔过滤器上的锡箔纸作为出汽口。

(注意与酸瓶相连的硅胶管不要卡死);碱液瓶和硅胶管可以一起灭菌(与碱液瓶相连的硅胶管要卡死)。

11、取下电热夹套将其平铺于桌面。

12、灭菌前调整好搅拌叶的位置,底下的搅拌叶尽量靠近空气分布器,上面的一个位置调整到所加发酵液的中间位置。

13、取样器的位置不要靠近挡板的位置,尽量靠中间位置。

14、灭菌前将取样器的吸球取下。

所有的硅胶管不要靠到高压锅的内壁上。

灭菌完毕后1、将六个松开的固定螺帽和酸碱瓶盖拧紧。

2、去掉包在过滤器上的锡箔纸和卡硅胶管的夹子。

3、装上马达,若马达内侧润滑油干了,涂上适量的凡士林。

4、接上溶氧电缆线后进行DO电极标定:灭菌完后接上DO电极的电缆线后在set zero处输入0;将反应器的空气流量控制在1L/min,Agitation调到100r/min过夜,早上开在set span处输入100后按确认键。

5、等温度降到发酵所需温度时接好各进出水管、PH电缆线,消泡电缆线。

6、在放入温度电极之前,先往温度电极的进口里滴加甘油,插入电极后继续滴加到冒出止。

注意温度电极要插到底。

7、.检查空压机的输出压力,应在0.7~1.0kg/cm3 范围内。

8、消泡剂的硅胶管要按从下往上顺序在泵上安装。

冷水机工作温度的设定开机:接好进出水管→打开总电源→进行温度设计→打开循环泵→开始制冷关机:先关制冷开关→关循环泵开关→同时将进、出水口阀门关闭→关上电源温度设定:开机→面板显示“PP0.0” →按“移位键”和“调整键”后显示“PP0.1”→按SET键确认→此时面板显示上限值,按“移位键”和“调整键”设定上限值→按SET键确认→此时面板显示下限值,按“移位键”和“调整键”设定下限值→按SET键确认→再按SET键→再按SET键→面板显示结束标志“---”,按SET键回到测量显示,设置结束。

上述操作结束后准备接种接种准备:准备好铁挡板、打火机、酒精喷壶、接种圈、装95%乙醇的搪瓷缸容器、尖头钳子、活动扳手,接种瓶。

接种操作1、移开接种口附近的胶管,将铁挡板围住接种口后用酒精喷壶朝接种口处喷酒精后点着,(注意:如果有火焰顺着酒精溢出铁板外,则需要吹灭铁板两侧溢出的火焰。

)2、将接种圈沾酒精点着后套住接种口处,将扳手或钳子沾酒精后拧开螺帽后用钳子将其夹住拿出,吹灭螺帽和钳子上的火焰后迅速放入装95%乙醇的搪瓷缸容器里。

3、将接种瓶在火焰处拔开后迅速倒入发酵罐内。

完毕后用钳子夹出螺帽拧上。

整个过程确保无菌操作!溶氧设定:发酵模式下溶氧的控制由有四种情况:按off键→按control键→ 按Auto键→setup→cascade→选择以下四种模式。

1、None状态:溶氧的控制主要通过增加空气流量和设定好固定的转速来控制。

2、Agit状态:溶氧的控制主要通过提高转速来控制,此状态在空气流量保持不变的情况下溶氧随着细胞消耗降低时通过增加转速来提高溶氧水平。

直到转速达到设订的转速上限值为止。

该过程为自动控制。

3、02 状态:该状态主要通过控制氧气与空气的混合百分比来控制。

溶氧随着氧气百分比的增加而增加。

为自动控制过程。

4、Agit/ 02 状态:该状态中溶氧的控制先是通过提高转速来增加的,当转速达到设定的上限值时若实际溶氧值仍没达到所需要的设定值,此时转速控制在上限值,开始以从小到大的百分比自动提高氧气的进入量,直到达到所设定的溶氧值附近为止。

该过程亦为自动控制过程。

注意:在使用Agit状态和Agit/ 02 状态时,若实际溶氧值与设定值相差太大,则要确保所设定的搅拌转速上限值不要太大,否则转速会瞬间内增大带来太大的剪切力和大量的泡沫。

实际操作中可以同时通过空气流量计的手动控制来辅助操作。

按off键→按control键→ 按Auto键→setup→此时界面中出现的P Gain和 l Gain为两个出厂设定好的参数,不要改动。

其他控制操作:选择U1:1、开机后→按use键→按U1~U4单元的Fermentation 或cell culture键选择发酵模式或细胞培养模式;连续按翻阅键→分别对U1~U4 单个单元进行控制操作。

2、Tem→按off键→按control键→ 按Auto键→ 按setpoint键,输入设定值→按确定键→按Disp Hi输入上限值后按确定键→ 按 DispLo输入下限值后按确定键;输入值若有错误按删除键后更改。

搅拌设定:按off键→按control键→ 按Auto键→ 按setpoint键→输入设定转速值→按确定键→Disp Hi和DispLo值的设定如上。

Pump A: 1、off→按control键→按manual→按setpoint 设定百分比(以10秒为单位,如键入20%表示转2秒停8秒:100%表示连续运转)→Disp Hi和DispLo的设定同上。

PumpB 和PumpC的设定与PumpA相同。

2、off→按control键→按Antiforma(消泡)键→wet on和wet off 分别调节液位的高低。

3、PumpC暂时没有连接蠕动泵;蠕动泵3与碱相连,蠕动泵4与酸相连。

PH值设定:1.off→按control键→ 按Auto键→ 按setpoint键→输入设定值后按确定键→Disp Hi和Disp Lo值的设定如上。

dO2值设定:按off键→按control键→ 按Auto键→ 按setpoint键→输入设定值后按确定键。

O2流量设定:按control键→ 按Auto键→按setpoint键输入设定的百分比。

Unit2、Unit3、Unit4的操作同上。

GRJ-D生物发酵罐的操作规程及注意事项一、发酵罐、生物发酵罐使用前的技术准备1. 对发酵罐操作人员上岗前的技术培训:GRJ-D发酵罐是机电一体化的高科技设备,因此;操作人员上岗前必须进行技术培训,使他们熟悉整个发酵系统的工作原理、管路、阀门的操作程序,并对空压机、电热蒸汽发生器能正确操作使用。

未经培训的人员,不得单独上岗操作。

2. 在发酵罐开机使用之前,应先检查电源是否正常,空压机、蒸汽发生器、循环水系统是否能正常工作。

3. 检查整个系统上的阀门、接头及紧固螺钉是否拧紧。

4. 开动空压机,用0.15Mpa压力,检查发酵罐、过滤器、管路、阀门的密封性能是否良好,有无泄漏。

5. 溶氧仪、pH仪、PLC系统应根据使用说明书进行检查、校正。

6. 上岗人员对上述发酵罐的各项必须能熟练操作。

二、空消在投料前,气路、料路、发酵罐必须用蒸汽进行灭菌,消除所有死角的杂菌,保证系统处于无菌状态。

1. 空气管路的空消(1)空气管路上有除水减压阀,和除菌过滤器。

除水减压阀不能用蒸汽灭菌,因此在空气管路通蒸汽前,必须将通向除水减压阀的阀门KQF1关死,使蒸汽通过蒸汽过滤器然后进入除菌过滤器。

(2)空消过程中,除菌过滤器下端的排气阀应微微开启,排除冷凝水。

(3)空消时间应持续40分钟左右,当设备初次使用或长期不用后启动时,最好采用间歇空消,即第一次空消后,暂定3~5小时再空消一次,以便消除芽孢。

(4)经空消后的过滤器,应通气吹干,约20~30分钟,然后将气路阀门关闭。

2.发酵罐空消(1)发酵罐是将蒸汽直接通入罐内进行空消。

(2)空消时,应将罐上的接种口,排气阀,及料路阀门微微打开,使蒸汽通过这些阀门排出,同时保持罐压为0.13~0.15Mpa。

(3)空消时间为30~40分钟,特殊情况下,可采用间歇空消。

(4)空消结束后,应将罐内冷凝水排掉。

注意:1.发酵罐空消时,应将夹套内的水放掉,空消时最好将夹套排水阀打开,以防夹套水排不净。

2.空消时,溶氧、pH电极应取出,可以延长其使用寿命。

三、实消实消是当发酵罐罐内加入培养基后,用蒸汽对培养基进行灭菌的过程。

1. 空消结束后,首先需将pH、Do电极校正好后装入罐体中的接头中,然后将配好的培养基从加料口加入罐内,此时夹套内应无冷却水。

2. 培养基在进罐之前,应先糊化,一般培养基的配方量以罐体全容积的70%左右计算(泡沫多的培养基为65%左右,泡沫少的培养基可达75~80%),考虑到冷凝水和接种量因素,加水量约为罐体全容积的50~60%左右,加水量的多少与培养基温度和蒸汽压力等因素有关,需在实践中摸索。

3. 为了减少蒸汽冷凝水,实消先利用夹套通蒸汽对培养基进行预热,保持夹套压力≤0.1Mpa,待培养基温度到达90℃后,关闭夹套蒸汽,改为直接向罐内通入蒸汽。

4. 当罐压升至0.12Mpa,温度升到121~123℃时,控制蒸汽阀门开度,保持罐压不变,30分钟后停止供汽。

5. 打开冷却水的进排阀门,在夹套内通水冷却。

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