Y染色体微缺失类型与睾丸活检组织病理分型相关性分析

域内的１５个ＳＴＳ位点，分别是ＡＺＦａ区ｓＹ８２，ｓＹ８４， ｓＹ８６，ＡＺＦｂ区的ｓＹｌ２４，ｓＹｌ２７，ｓＹｌ２８，ｓＹｌ３３， ｓＹｌ３４，ｓＹｌ４３，ＡＺＦｄ区的ｓＹｌ４５，ｓＹｌ５２和ＡＺＦｃ区 的ｓＹ２３９，ｓＹ２４２，ｓＹ２５４，ｓＹ２５５，用性别决定因子
（ｓｅｘ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｒｅｇｉｏｎ Ｙ’ＳＲＹ）作为内控片段，每 次检测均同时进行质量控制。设立正常男性阳性对照 及空白对照。
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎ ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｆｏｕｒ ｇｒｏｕｐｓ ｂｙ ｔｈｅ ｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎ ｏｆ Ｙ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ（氏０．Ｏ １）． Ｔｈｅ １ ４（６６．７％）ｃａｓｅｓ ｏｆ Ｓｅｒｔｏｌｉ ｃｅｌｌ ｏｎｌｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ａｎｄ ｔｈｅ ６（２８．６％）ｃａｓｅｓ ｏｆ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ａｒｒｅｓｔ ｗｅｒｅ ｆｏｕｎｄ ｉｎ ｔｈｅ ｇｒｏｕｐ １． Ｔｈｅ ３（９ ７％）ｃａｓｅｓ ｏｆ Ｓｅｒｔｏｌｉ ｃｅｌｌ ｏｎｌｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ａｎｄ ｔｈｅ ２８（９０．３％）ｃａｓｅｓ ｏｆ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ａｒｒｅｓｔ ｗｅｒｅ ｆｏｕｎｄ ｉｎ ｔｈｅ ｇｒｏｕｐ２． Ｔｈｅ ２８（４４．４％）ｃａｓｅｓ ｏｆ Ｓｅｒｔｏｌｉ ｃｅｌｌ ｏｎｌｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ａｎｄ ｔｈｅ ３３（５２．４％）ｃａｓｅｓ ｏｆｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ａｒｒｅｓｔ ｗｅｒｅ ｆｏｕｎｄ ｉｎ ｔｈｅ ｇｒｏｕｐ３．
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：Ｔａｎｇ Ｙｕｎｇｅ，Ｅ—ｍａｉｌ：ｔｙ９８１３＠１２６．ｃｏｍ
Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｙ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｓｐｅｒｍａｔｏｇｅｎｉｃ ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ ａｎｄ ｓｅｖｅｒｅ ｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｒｅｐｏｒｔ ｏｆ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｂｉｏｐｓｙ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｄｉａｇｎｏｓｅｄ ａｓ ａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ ａｎｄ ｓｅｖｅｒｅ ｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ ｗｉｔｈ Ｙ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ．Ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｌｏｃｕｓ ｏｆ ｄｅｌｅｔｉｏｎ，ｔｈｅｙ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ Ｇｒｏｕｐ １（ＡＺＦａ ｄｅｌｅｔｉｏｎ），Ｇｒｏｕｐ２（ＡＺＦｂ ｄｅｌｅｔｉｏｎ），Ｇｒｏｕｐ３（ ＡＺＦｂ／ｃ／ｄ ｄｅｌｅｔｉｏｎ），Ｇｒｏｕｐ４（ＡＺＦｃ／ｄ ｄｅｌｅｔｉｏｎ）．Ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｙ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ， ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｖｏｌｕｍｅ，ｆｏｌｌｉｃｌｅ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ，ｌｕｔｅｉｎｉｚｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ ｗａｓ ａｎａｌｙｚｅｄ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ
（２８／３１）为成熟停滞：Ｂ／Ｃ／Ｄ联合缺失组有４４．４％（２８／６３）为唯支持细胞综合征和５２．４％（３３／６３）为成熟停滞； Ｃ／Ｄ联合缺失３３．１％（４６／１ ３９）为唯支持细胞综合征和有５１．８％（７２／１３９）为成熟停滞。成熟精子总检出率９．４％
（２４／２５４）。各缺失组之间血清卵泡刺激素存在统计学差异（尸＜０．０１）。各缺失组之间在睾丸体积、黄体生成素 水平之间比较无统计学差异性（尸＞０．０５）。结论Ｙ染色体微缺失患者中，不同缺失类型之间睾丸活检组织学类型 存在差异。ＡＺＦａ缺失类型主要表现为唯支持细胞综合征，ＡＺＦｂ缺失类型主要表现为成熟停滞，ＡＺＦｂ联合缺失和 ＡＺＦｃ／ｄ联合缺失则表现多样化，主要表现为成熟停滞和唯支持细胞综合征，成熟精子的检出率低。
关键词 不育，男性； 无精子症； 少精子症； 活组织检查，针吸； 唯支持细胞综合症 ｄｏｉ：１０，３９６９／ｊｊｉｓｓｎｊ １００８－０８４８．２０１５，０４，００４ 中图分类号 Ｒ ６９８．２
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｙ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｍｉＣｒＯｄｅｌｅｔｉＯｎＳ ａｎｄ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｓｐｅｒｍａｔｏｇｅｎｉｃ ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ
（二）睾丸体积的测量 按照ＷＨＯ《男子不育标准化诊疗手册》１２］的要 求和方法，由男科医生严格按照Ｐｒａｄｅｒ椭圆型睾丸测 量模型标准和测量方法确定。 （三）染色体核型分析 常规抽取外周血，培养制备染色体，Ｇ显带分 析，对每个受检查者常规计数３０个核型。 （四）ＡＺＦ检测 应用多重ＰＣＲ在４管ＰＣＲ反应管中扩增ＡＺＦ区
Ｌｉｕ Ｘｉｎｇｚｈａｎｇ，Ｔａｎｇ Ｙｕｎｇｅ”，Ｚｈｅｎｇ Ｌｉｘｉｎ，Ｗａｎｇ Ｑｉｌｉｎｇ，Ｄｅｎｇ Ｓｈｕｎｍｅｉ，Ｚｈｏｕ Ｂｉｎｇｙｉ，Ｌｉｕ Ｈｕａｎｇ，Ｌｉ Ｍｉｎｇｚｈｅｎ
ＴｈｅＦａｍｉｌｙＰｌａｎｎｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６００，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ
ｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ，ｍａｌｅ；
ａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ；
ｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ； Ｂｉｏｐｓｙ＇Ｎｅｅｄｌｅ；
Ｓｅｒｔｏｌｉ ｃｅｌｌ ｏｎｌｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ
随着辅助生殖技术的发展，单精子卵泡浆内注 射技术（ＩＣＳＩ）的日臻成熟，使得Ｙ染色体微缺失
（ＡＺＦ，ａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ ｆａｃｔｏｒ）患者也有希望通过ＩＣＳＩ 生育血亲后代。由于ＡＺＦ区域缺失的表现是异质的， 证实Ｙ染色体微缺失患者的生精功能损害程度主要依 靠睾丸活组织病理学检查。我们对ＡＺＦ缺失引起不育 的男性患者的睾丸活检组织生精细胞类型进行分析， 了解患者生精功能损害的程度及其与Ｙ染色体微缺失 类型的相关性，为Ｙ染色体微缺失患者进一步诊治提 供依据，为进一步研究Ｙ染色体微缺失的致病机理提 供参考。
对象与方法
一、对象 本研究收集在我院就诊的无精子症及严重少精 子症患者，病因诊断为Ｙ染色体微缺失，有完整睾丸 活检病理报告的不育患者２５４例。 二、方法
（一）精液检查 按照ＷＨＯ《人类精液检查与处理实验室手册》第 ５版…的定义和方法，进行至少２次精液分析。将精液离 心沉淀后显微镜检测，诊断为隐匿精子症、无精子症。
ｓｙｎｄｒｏｍｅ ｏｒ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ａｒｒｅｓｔ ｉｎ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｂｉｏｐｓｙ Ｓｐｅｒｍｍｏｚｏａ ｐｒｅｓｅｎｔ ｏｆ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｂｉｏｐｓｙ ｗａｓ ｌｏｗｅｒ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ｙ
ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ
’资金项目资助：广东省人１３和计划生育委员会科研项目（编号：２０１３２０１７） ”通讯作者，Ｅ－ｍａｉｌ：ｔｙ９８１３＠１２６．ｃｏｍ
万方数据
Fra Baidu bibliotek
中国男科学杂志２０１５年第２９卷第４期
１９
Ｔｈｅ ４６（３３．１％）ｃａｓｅｓ ｏｆＳｅｒｔｏｌｉ ｃｅｌｌ ｏｎｌｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ａｎｄ ｔｈｅ ７２（５１．８％）ｃａｓｅｓ ｏｆｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ａｒｒｅｓｔ ｗｅｒｅ ｆｏｕｎｄ ｉｎ ｔｈｅ ｇｒｏｕｌＭ．
血清卵泡刺激素（ＦＳＨ）（１６．３＋１０．９）ｍｌＵ／Ｌ，其中 正常１ ７１例，异常增高８３例。ＡＺＦ缺失分组和睾丸 活检结果见表１。４组患者年龄分布、睾丸体积、精 液量、ＬＨ水平比较无统计学差异性（尸＞Ｏ．０５）， ＦＳＨ水平比较有统计学差异（Ｆ＝７．３２７，Ｐ＝０．０００）。 四组ＡＺＦ缺失患者ＦＳＨ异常率比较存在统计学差异
（五）睾丸活检 收集来自本院或其它正规医院检查的完整的睾 丸活检病理报告。 （六）睾丸组织学分类方法 本研究参照ＷＨＯ《男子不育标准化诊疗手册》 睾丸组织学分类方法，即睾丸活检结果分为生精小 管内见成熟精子、生精小管内有生精细胞未见成熟 精子（成熟停滞）和唯支持细胞综合症（包括严重玻 璃化，即生精小管内没有细胞存在及生精细胞完全萎 缩）共３种类型。 （七）性激素测定 用化学发光法测定血清卵泡刺激素（ＦＳＨ）、黄 体生成素（ＬＨ）水平。血清ＦＳＨ水平正常参考值范 围为：１．２７～１９．２６ ｍｌＵ／ｍＬ；血清ＬＨ水平正常参考值 范围为：１．２４～８．６２ ｍＩＵ／ｍＬ。 三、研究分组 本研究根据Ｙ染色体微缺失区域类型，分为Ａ缺 失组（ＡＺＦａ缺失）、Ｂ缺失组（ＡＺＦｂ缺失）、Ｂ／Ｃ／ Ｄ联合缺失组（有ＡＺＦｂ＋ｃ或ＡＺＦｂ＋ｃ＋ｄ缺失）、Ｃ／Ｄ 缺失组（有ＡＺＦｃ或／ＡＺＦｃ＋ｄ缺失／或ＡＺＦｄ缺失）。 四、统计学分析 采用ＳＰＳＳ １ ８．０统计软件包进行统计处理，计量 资料用均值土标准差表示，计量资料差异性分析采用 ＡＮＯＶＡ分析；计数资料差异性分析和率的比较采用 ，检验，Ｐ＜Ｏ．０５为有统计学意义。
Ｔｈｅ ｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａ ｐｒｅｓｅｎｔ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｉｎ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｂｉｏｐｓｙ ｗａｓ ９．４％．Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｗｅｒｅ ｆｏｕｎｄ ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｆｏｕｒ ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ，ｓｅｒｕｍ ＦＳＨ ｌｅｖｅｌ（Ｐ＜０．Ｏ １），ｂｕｔ ｎｏｔ ｉｎ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｖｏｌｕｍｅ，ｓｅｒｕｍ ＬＨ ｌｅｖｅｌ（Ｐ＞Ｏ．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｙｐｅｓ ｏｆ ｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎｓ ｗｏｕｌｄ ｂｒｉｎｇ ａｂｏｕｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎ ｏｆ ＡＺＦａ ｗｅｒｅ
万方数据
２０
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＡｎｄｒｏｌｏｇｙ Ｖ０１．２９ Ｎｏ．４ ２０ １ ５
结
果
表ｌ ２５４例患者的ＡＺＦ缺失和睾丸活检情况
２５４例患者平均年龄（３１．０＋４．０）岁；不育时间 （４．７＋２．９）年；睾丸总体积（２２．７：ｔ：５．７）ｍＬ；精液量
（３．２士１．４）ｍＬ；黄体生成素（ＬＨ）（６．础．１）ｍＩＵ／Ｌ；
ｍａｉｎｌｙ ｆｏｕｎｄ ｉｎ ｔｈｅ Ｓｅｒｔｏｌｉ ｃｅｌｌ ｏｎｌｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ｉｎ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｂｉｏｐｓｙ，ａｎｄ ｔｈｅ ｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎ ｏｆＡＺＦｂ ｉｎ ｔｈｅ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ａｒｒｅｓｔ ｉｎ
ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ ｂｉｏｐｓｙ．Ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆＡＺＦｂ／ｃ／ｄ ｏｒ ＡＺＦｃ／ｄ ｄｅｌｅｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｄｉｖｅｒｓｉｆｉｅｄ ａｎｄ ｇｒｏｕｐｅｄ ｍａｉｎｌｙ ｏｎ ｔｈｅ Ｓｅｒｔｏｌｉ ｃｅｌｌ ｏｎｌｙ
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＡｎｄｒｏｌｏｇｙ Ｖ０１．２９ Ｎｏ．４ ２０ １ ５
Ｙ染色体微缺失类型与睾丸活检组织病理分型 相关性分析木
刘兴章
唐运革“ 郑立新 王奇玲 邓顺美 周冰皴 刘 晃
广东省计划生育科学技术研究所（广州 ５１０６００）
李铭臻
摘要 目的 研究无精子症及严重少精子症患者Ｙ染色体微缺失的缺失类型与睾丸活检组织学类型的关系。 方法 收集来我院就诊的病因诊断为Ｙ染色体微缺失的无精子症及严重少精子症患者的完整睾丸活检病理报告。 根据Ｙ染色体微缺失区域类型，将研究对象分为Ａ缺失组、Ｂ缺失组、Ｂ／Ｃ／Ｄ联合缺失组和Ｃ／Ｄ联合缺失组。分析 Ｙ染色体微缺失的缺失类型与睾丸活检组织学类型、睾丸体积、卵泡刺激素、黄体生成素之间的关系。结果 在 ２５４例Ｙ染色体微缺失患者中，各缺失组之间睾丸活检组织学类型存在统计学差异（尸＜０ ０１）。Ａ缺失组有６６．７％ （１４／２１）为唯支持细胞综合征和２８．６％（６／２１）为成熟停滞：Ｂ缺失组有９．７％（３／３１）为唯支持细胞综合征和９０．３％