真菌常用培养基配方
MSB5N6培养基配方
MSB5N6培养基配方
培养基配方是指用于细菌、真菌、细胞等微生物的培养和生长的营养物质组成及其比例。
MSB5N6培养基配方,是一种常用于细菌培养的基本培养基,以下是其配方和制备过程。
1.成分:
- 蛋白胨(Peptone):5.0 g
- 淀粉(Starch):1.0 g
- 大豆粉(Soybean Meal):5.0 g
-氯化钠(NaCl):1.0g
-磷酸二氢钾(KH2PO4):0.6g
-磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.0g
- 葡萄糖(Glucose):1.0 g
-碳酸钠(Na2CO3):0.3g
- 卵黄脱水物(Yeast Extract):2.0 g
- 纯化水(Distilled Water):1000 mL
2.pH调整:
使用1MHCl或1MNaOH调整pH值至7.0±0.2
3.灭菌:
将培养基装入培养瓶中,密封并加入适当的滤纸。
在121摄氏度高压灭菌器中高压下进行灭菌,常规灭菌时间为15-20分钟。
4.制备过程:
-将蛋白胨、淀粉、大豆粉、氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠和葡萄糖依次加入纯化水中,充分溶解;
-加入碳酸钠,混合均匀;
-用1MHCl或1MNaOH调整pH值至7.0±0.2;
-加入卵黄脱水物,充分溶解;
-装瓶并灭菌。
需要注意的是,配方中的成分均应为分析纯级别的物质,而培养基的制备过程应在无菌条件下进行,以避免外部的细菌或真菌污染。
146种细菌-真菌-酵母培养基配方
146种培养基配方——2009年2月1日星期日by尛森蟲1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基)Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10gCaCO3 20g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8适用范围:恶臭醋酸杆菌混浊变种2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂)Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30gNaCl 5g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2[Note]:When cultivation of Bacillus,5mg of to MnSO4.H2O may be added .It is favorable to promote spore formation .适用范围:产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种(青虫菌)、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌(大肠杆菌)、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌3. Azotobacter Medium (固氮菌培养基)KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8gMgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O0.1gNa2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5gMannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量)Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15gAdjust (调) pH to 7.2适用范围:固氮菌、胶质芽孢杆菌4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1gGlucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml[Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the li quid , then autoclave at 121℃for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。
真菌常用培养基的配方
酵母菌、霉菌常用培养基的配制一、目的要求了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。
学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。
二、基本原理麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。
马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。
豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。
察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。
麦芽汁培养基为天然培养基,马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基,而察氏培养基则为合成培养基。
培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。
三、实验材料(一)药品葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HPO4、KCI、MgSO4 7H2O, FeSQ、琼脂。
(二)仪器天平、高压蒸汽灭菌锅。
(三)玻璃器皿移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等。
(四)其他物品药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。
四、实验内容(一)麦芽汁培养基的配制1培养基成分新鲜麦芽汁一般为10-15波林。
2.配制方法(1) 用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6-12h,置于15C阴凉处发芽,上盖纱布, 每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,贮存备用。
(2) 取一份麦芽粉加四份水,在65C水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。
(3) 糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清, 加水20 ml,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。
(4) 用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH 至6. 4。
如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10-15波林后使用。
真菌常用培养基配方
[沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂,沙堡弱培养基,SDA](一)组成葡萄糖 40.0g蛋白胨 10.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水 1000ml(二)制法上述混合后加入200mg氯霉素,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)目的是常用的分离或保存菌种的培养基。
[沙氏液基,SDB](一)组成葡萄糖 40.0g蛋白胨 10.0g蒸馏水 1000ml(二)制法上述混合后加入200mg氯霉素,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,SDA with antibiotic](一)组成葡萄糖 40.0g蛋白胨 10.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水 1000ml(二)制法上述混合后加入200mg氯霉素。
250mg放线菌酮,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,modified SDA](一)组成葡萄糖 20.0g蛋白胨 10.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水 1000ml(二)制法上述混合后121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)目的保存菌种培养基。
[马铃薯葡萄糖琼脂,PDA](一)组成马铃薯 200.0g葡萄糖 20.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水 1000ml(二)制法先将马铃薯洗净去皮切片,加水180ml,煮沸30分钟后过滤,再加葡萄糖、琼脂,将过滤液补足到1000ml,121摄氏度灭菌后备用。
(三)用途此培养基是培养真菌较好的培养基,同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。
鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。
[玉米吐温80琼脂,CMA with Tw80](一)组成玉米粉 40.0g琼脂15.0g蒸馏水 1000ml吐温80 10ml(二)制法先将玉米粉混于水中,65摄氏度水浴一小时,过滤,再补足水量,然后加入琼脂和吐温80,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)用途用于观察白念珠菌厚壁孢子及假菌丝;红色毛癣菌在此培养基产色素较好。
[米饭培养基rice grain medium](一) 组成大米 300.0g蒸馏水 1000ml(二)制法将3g大米放入试管中,加入10ml蒸馏水,高压121摄氏度10分钟灭菌后备用。
常用培养基配方汇总
常用培养基配方汇总1. 营养琼脂培养基 (Nutrient Agar)- 夏洛特奥康纳 (Charlote A. O'Connor) 配方:-蛋白胨:5克-麦芽提取物:3克-胰蛋白酶胨:1.5克-硫酸镁:0.2克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
2. 肉蔗糖琼脂培养基 (Tryptic Soy Agar, TSA)- 条件反射琼脂 (孟德尔和赛尼·特鲁斯 ('Sneath and Tres') 配方):-牛肉蛋白胨:17克-大豆酪蛋白胨:3克-肉汤提取物:5克-葡萄糖:2.5克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
3. MAC琼脂培养基 (MacConkey Agar)- 麦康奈 (MacConkey) 配方:-紫胆杆菌胨:17克-葡萄糖:1.5克-硫酸盐:1.5克-中性红:0.03克-石蕊:0.3克-氯化钠:5克-地膜:10克-pH值调整到7.1-7.5-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
4. LB琼脂培养基 (Luria-Bertani Agar)- 古斯塔夫·诺维斯 ('Gustaf Novis') 配方:-研磨大豆饼粉:10克-酵母提取物:5克-部分脱脂酪蛋白:5克-氯化钠:1克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
5. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (Potato Dextrose Agar, PDA)- 林登麦卡蒂 ('Lindenmuth and McCarty') 配方:-马铃薯提取物:4克-葡萄糖:20克-地膜:15克-pH值调整到5.6-5.8-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
这些是一些常用的培养基配方,适用于细菌和真菌的培养。
亚历山大罗夫培养基配方
亚历山大罗夫培养基配方亚历山大罗夫培养基(Alexander Lwoff Medium)是用于微生物的常规培养和分离的一种常用培养基。
亚历山大罗夫培养基主要用于培养土壤和海洋样品中的微生物,特别是放线菌和真菌。
其配方的特点是含有多种有机物和无机盐,以促进微生物生长和代谢。
下面是亚历山大罗夫培养基的一种常用配方:1.葡萄糖:10g2.维他命B1:0.5g3.酵母浸膏粉:0.3g4.外因子(如壳聚糖、肉膏提取物等):0.2g5.硫酸镁七水合物:0.05g6.柠檬酸铵:0.5g7.麦芽浸膏粉:0.1g8.高尔基胆汁:0.1g9.pH值调节至7.2-7.410.加入适量的蒸馏水,使总容量达到1L操作步骤:1.将葡萄糖、维他命B1、酵母浸膏粉、外因子、硫酸镁七水合物、柠檬酸铵、麦芽浸膏粉和高尔基胆汁加入适量的蒸馏水中。
2.用磁力搅拌器搅拌溶解,直到溶液均匀。
3.用酸碱滴定仪调节溶液的pH值,使其达到7.2-7.44.转移溶液到试管中或分装到培养皿中。
5.加入适量的琼脂糖,溶解并均匀混合。
6.使用无菌技术,将试管或培养皿密封,进行高温高压灭菌。
7.培养基冷却后可以使用。
亚历山大罗夫培养基可以支持广谱微生物的生长和繁殖,特别是分离土壤和海洋源中的微生物。
葡萄糖作为碳源提供能量,维他命B1促进微生物的代谢反应,酵母浸膏粉提供维生素和氨基酸,硫酸镁七水合物和柠檬酸铵提供微量元素,麦芽浸膏粉和高尔基胆汁则提供激素和生长因子。
整体配方提供了微生物生长所需的多种营养物质,促进微生物的生长和代谢。
总结:亚历山大罗夫培养基是一种用于微生物培养和分离的常用培养基,广泛应用于真菌和放线菌的培养。
其配方中包含多种有机物和无机盐,能够提供微生物所需的营养物质。
通过使用亚历山大罗夫培养基,可以更好地了解微生物的生态特性,并开展相关的研究工作。
常见微生物培养基
常见微生物培养基Medium含有碳水化合物、含氮应用化学药品配成并标液体培养基不易长期保有不同。
一般培养基在对一些需严格灭菌的培2~6。
C的冰箱内。
1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克 1.00.5 1.5水100毫升在烧杯内加水100火上加热。
待烧杯内各10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.27.6,30分钟。
配方二马铃薯培养基250500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好2pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升配方三根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升2、放线菌培养基配方一可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克琼脂2克水100毫升595使它溶解。
在烧杯外做好pH值到7.27.4备用。
配方二面粉琼脂培养基面粉60克琼脂20克水1000毫升50030分钟。
另取500pH值到7.43、真菌培养基配方一Sabouraud’s蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升40本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。
配方二马铃薯糖琼脂培养基2001000液中加入10煮沸溶解后加糖20用。
把这培养基的pH值调到7.27.4杆菌。
配方三黄豆芽汁培养基黄豆芽100克琼脂15克葡萄糖20克水1000毫升301000把这培养基的pH值调到7.27.4配方四豌豆琼脂培养基豌豆80粒琼脂5克水200毫升取801小4、食用菌菌种培养基配方一马铃薯—蔗糖--琼脂培养基20%马铃薯煮汁1000毫升蔗糖20克琼脂18克200100020分钟足水分到100020%pH配方二综合马铃薯培养基20%马铃薯煮汁1000 毫升磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克葡萄糖20克维生素10毫克琼脂18克先配制20%整pH值到6该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。
常用微生物培养基配方大全
常用微生物培养基配方大全Pleasure Group Office【T985AB-B866SYT-B182C-BS682T-STT18】(1)分离细菌时,在培养基中加入浓度为50U/ml制霉菌素,可以抑制霉菌和菌的生长。
(2)(2)分离放线菌时,在样品中加入%十二烷基磺酸钠(SDS)不仅可以抑制细菌的生长,还能激活放线菌孢子的萌发。
加入氟哌酸(5mg/L)+制霉菌素(50mg/L)+青霉素(L)也可以有效地抑制细菌和真菌,而不影响放线菌的生长。
(3)(3)分离霉菌和菌时,在培养基中加入青霉素、链霉素和四环素各30U/ml,可以抑制细菌和放线菌生长。
(4)(4)分离根霉和毛霉时,由于这些微生物的菌丝易蔓延成片,难以得到纯化的菌落,通常在培养基中添加%去氧胆酸钠或山梨醇防止菌丝蔓延,使菌落长得小而紧密。
(5)一般用于分离单一目的微生物的培养基中均含有抑制其他微生物的抑制剂,这些专用的抑制剂在小型实验室配制较麻烦,现已有成品供应,只要直接加入基础培养基即可。
如氨苄西林,主要用于分离亲水气单孢菌。
(6)1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏克,蛋白胨克,氯化钠克,琼脂克,水 1000毫升在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。
待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。
等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到~,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌30分钟。
配方二马铃薯培养基取新鲜牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀细细剁成肉末后,加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好记号,煮沸,转用文火炖2小时。
过滤,滤出的肉末干燥处理,滤液pH值调到左右。
每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心,灭菌,备用。
配方四根瘤菌培养基葡萄糖 10克磷酸氢二钾克碳酸钙 3克硫酸镁克酵母粉克琼脂 20克水 1000毫升 1%结晶紫溶液 1毫升先把琼脂加水煮沸溶解,然后分别加入其他组分,搅拌使溶解后,分装,灭菌,备用。
36种常用微生物培养基配制汇总
36种微生物常用培养基配制1.牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7.4~7.6。
2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCl 0.5g,K2HPO4•3H2O 0.5g,MgSO4•7H2O0.5g,FeSO4•7H2O0.01g,水1000mL,pH7.4~7.6。
配制时注意:可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
3.马丁氏(Martin)培养基(用于从土壤中分离真菌)K2HPO41g,MgSO4•7H2O0.5g,蛋白胨5g,葡萄糖10g,1/3000孟加拉红水溶液100mL,水900mL,自然pH,121℃湿热灭菌30min。
待培养基融化后冷却55~60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。
4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮)200g,蔗糖(或葡萄糖)20g,水1000mL,配制方法如下:将马铃署去皮,切成约2cm2的小块,放入1500mL的烧杯中煮沸30min,注意用玻棒搅拌以防糊底,然后用双层纱布过滤,取其滤液加糖,再补足至1000mL,自然pH,霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖。
5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖30g,NaNO3 2g,K2HPO4 1g,MgSO4•7H2O0.5g,KCl 0.5g,FeSO4•7H2O0.1g,水1000mL,pH7.0~7.2。
6.Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液)1000mL,蛋白胨10g,NaCl 5g,琼脂15g,pH7.8~8.0,分装每瓶70mL,121℃湿热灭菌15min,待冷却至80℃左右,每70mL中加入马血清20mL,25%鲜酵母浸出液10mL,15醋酸铊水溶液2.5mL,青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5mL,以上混合后倾注平板。
*注意:醋酸铊是极毒的药品,需特别注意安全操作。
常用25种培养基详细配方
一、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨10gNaCl 5g琼脂15—20g水1000mlpH 7.0—7.21.05kg/cm2,121.3℃灭菌20分钟。
二、淀粉琼脂培养基(高氏1号培养基,培养放线菌用)可溶性淀粉20gKNO31gNaCl 0.5gK2HPO40.5gMgSO40.5gFeSO40.01g琼脂20g水1000mlpH 7.2—7.4配制时,先用少量冷水,将淀粉调成糊状,在火上加热,边搅拌边加水及其他成分,溶化后,补足水分至1000ml。
1.05kg/cm2,121.3℃灭菌20分钟。
三、查氏培养基(培养霉菌用,实验16)NaNO32gK2HPO41gKCl 0.5gMgSO40.5gFeSO40.01g蔗糖30g琼脂15—20g水1000mlpH 自然1.05kg/cm2,121.3℃灭菌20分钟。
四、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5gKH2PO41gMgSO4·7H2O 0.5g1/3000孟加拉红(rose bengal,玫瑰红水溶液)100ml琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800ml0.56kg/cm2(8磅/英寸2),112.6℃灭菌30分钟。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100ml,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
五、马铃薯培养基(实验16)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖) 20g琼脂15—20g水1000mlpH 自然马铃薯去皮,切成块煮沸半小时,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,溶化后补足水至1000ml。
1.05kg/cm2,121.3℃灭菌20分钟。
六、麦芽汁琼脂培养基(实验15)1.取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,置15℃阴暗处发芽,上盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。
2.将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴锅中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。
真菌琼脂培养基
配方(每升):
胨5.0g
酵母浸出粉 2.0g
葡萄糖 20.0g
磷酸氢二钾 1.0g
硫酸镁 0.5g
琼脂 14.0g
最终pH 6.4±0.2
使用方法:
1、 称取本品42.5g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管,摆成斜面,115℃灭菌30min。
2、 将菌株接种至斜面培养基上,置于23~28℃按规定时间进行培养3d。
规格:250g
编号:021041
中文名称:真菌琼脂培养基 (改良马丁琼脂培养基)
英文名称:Fungi Agar
用 途:
用于真菌培养及药品和生物制品无菌检查用。(《中华人民共和国药典》2010年版)
原 理:
胨提供碳源和氮源;酵母浸出粉提供B族维生素;葡萄糖提供能源;磷酸氢二钾为缓冲剂;硫酸镁提供必须的微量元素;琼脂是培养基的凝固剂。
3、 观察结果。
质量控制:
本品倾注平皿,质控菌株接种后于23~28℃培养3d,结果如下:
菌 名 菌 号 生长状况 菌落特征
黑曲霉 CMCC(B)98003 良好 菌丝白色孢子黑色
白色念珠菌 CLeabharlann CC(B)98001 良好 菌落表面呈奶油色
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
真菌培养常用培养基(完整资料).doc
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(三)目的是常用的分离或保存菌种的培养基。
[沙氏液基,SDB](一)组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g蒸馏水1000ml(二)制法上述混合后加入200mg氯霉素,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,SDA with antibiotic] (一)组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水1000ml(二)制法上述混合后加入200mg氯霉素。
250mg放线菌酮,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,modified SDA](一)组成葡萄糖20.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水1000ml(二)制法上述混合后121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)目的保存菌种培养基。
[马铃薯葡萄糖琼脂,PDA](一)组成马铃薯200.0g葡萄糖20.0g琼脂12.0~15.0g蒸馏水1000ml(二)制法先将马铃薯洗净去皮切片,加水180ml,煮沸30分钟后过滤,再加葡萄糖、琼脂,将过滤液补足到1000ml,121摄氏度灭菌后备用。
(三)用途此培养基是培养真菌较好的培养基,同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。
鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。
][玉米吐温80琼脂,CMA with Tw80(一)组成玉米粉40.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml吐温80 10ml(二)制法先将玉米粉混于水中,65摄氏度水浴一小时,过滤,再补足水量,然后加入琼脂和吐温80,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)用途用于观察白念珠菌厚壁孢子及假菌丝;红色毛癣菌在此培养基产色素较好。
[米饭培养基rice grain medium](一)组成大米300.0g蒸馏水1000ml(二)制法将3g大米放入试管中,加入10ml蒸馏水,高压121摄氏度10分钟灭菌后备用。
常用微生物培养基配方大全
(1)分离细菌时,在培养基中加入浓度为50U/ml制霉菌素,可以抑制霉菌和菌的生长。
(2)(2)分离放线菌时,在样品中加入0.05%十二烷基磺酸钠(SDS)不仅可以抑制细菌的生长,还能激活放线菌孢子的萌发。
加入氟哌酸(5mg/L)+制霉菌素(50mg/L)+青霉素(0.8mg/L)也可以有效地抑制细菌和真菌,而不影响放线菌的生长。
(3)(3)分离霉菌和菌时,在培养基中加入青霉素、链霉素和四环素各30U/ml,可以抑制细菌和放线菌生长。
(4)(4)分离根霉和毛霉时,由于这些微生物的菌丝易蔓延成片,难以得到纯化的菌落,通常在培养基中添加0.1%去氧胆酸钠或山梨醇防止菌丝蔓延,使菌落长得小而紧密。
(5)一般用于分离单一目的微生物的培养基中均含有抑制其他微生物的抑制剂,这些专用的抑制剂在小型实验室配制较麻烦,现已有成品供应,只要直接加入基础培养基即可。
如氨苄西林,主要用于分离亲水气单孢菌。
(6)1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克,蛋白胨1.0克,氯化钠 0.5克,琼脂 1.5克,水 1000毫升在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。
待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。
等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2~7.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌30分钟。
配方二马铃薯培养基取新鲜牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀细细剁成肉末后,加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好记号,煮沸,转用文火炖2小时。
过滤,滤出的肉末干燥处理,滤液pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心,灭菌,备用。
配方四根瘤菌培养基葡萄糖 10克磷酸氢二钾 0.5克碳酸钙 3克硫酸镁 0.2克酵母粉 0.4克琼脂 20克水 1000毫升 1%结晶紫溶液 1毫升先把琼脂加水煮沸溶解,然后分别加入其他组分,搅拌使溶解后,分装,灭菌,备用。
常用培养基的制备及注意事项
常用培养基的制备及注意事项培养基是细菌、真菌、细胞等微生物进行繁殖和培养的营养地,广泛应用于微生物学和生物技术领域。
下面将介绍几种常用的培养基的制备方法及注意事项。
1.琼脂培养基:琼脂培养基是最常见的一种培养基,它以琼脂凝胶为基质,通过加入不同的营养成分,满足微生物的生长需求。
制备方法如下:1)称取适量琼脂,加入适量蒸馏水中搅拌均匀。
2)加入适量皂液,加热融化琼脂。
3)待琼脂溶液冷却至40°C左右时,加入已经制备好的培养基成分,如碳源、氮源、维生素等。
4)搅拌均匀,调整pH值,加热煮沸。
5)倒入装有适量培养基的培养皿中,使其凝胶化。
注意事项:1)使用较干燥的琼脂可减少湿润时间。
2)煮沸或加热时间不宜太长,以免过度加热导致一些营养成分失活。
3)制备过程中要注意无菌操作,避免细菌等微生物污染。
2.液体培养基:液体培养基适用于微生物的扩大培养、动态研究等实验。
制备方法如下:1)称取适量蒸馏水,加热至沸腾。
2)加入培养基成分,如碳源、氮源、维生素等,搅拌均匀。
3)调整pH值,加热至沸腾。
4)倒入试管或烧杯中,用胶塞或铝箔盖好。
注意事项:1)加热过程中要注意及时搅拌,避免成分沉积或变色。
2)制备前要将试管或烧杯等容器进行高温灭菌处理。
3)使用培养基前要进行菌液均匀混合,避免因成分沉积而导致的营养不均匀。
3.固体选择性培养基:固体选择性培养基是指根据微生物对特定组分的感受性选择性地制备的培养基。
制备方法如下:1)制备好的琼脂培养基加热至融化,放置冷却至40°C左右。
2)加入特定的抗生素、色素或指示剂等,搅拌均匀。
3)倒入装有适量培养基的培养皿中,等待凝胶化。
注意事项:1)特定抗生素或其他抑菌剂的添加量需要谨慎,过量添加可能抑制需要培养的微生物。
2)搅拌均匀时,应快速且均匀,以避免导致混合不均。
3)固体选择性培养基凝胶化后,尽量避免暴露于空气中,以免细菌等微生物的污染。
以上所述的常用培养基只是其中的一部分,不同微生物的培养要求不同,制备方法也有所差异。
实验室常用培养基
.常用培养基的制备(1)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)和马铃薯蔗糖琼脂(PSA)培养基培养真菌最常用的培养基,成分如下:去皮马铃薯200 g 葡萄糖或蔗糖20g琼脂15-20g 水1000 ml配制方法:将马铃薯洗净去皮,称取200 g,切成小块(不必大小)放入锅中,加水1000ml,煮沸半小时,稍冷后用双层纱布过滤,在滤液中加蔗糖20g,加水补足到1000ml。
配成的培养基一般呈酸性,用于培养真菌,可以不必调pH。
如配制固体培养基,在加蔗糖前先加15-20g 琼胶加热熔化,最后加入蔗糖,混匀并加水补是至1000ml,趁热分装在试管或三角瓶中。
标准试管(15×150mm)分装量如下:一般用作斜面培养的每试管装培养基3-5ml,用作平面培养的每试管约10ml,加棉花塞后灭菌。
培养细菌用的培养基必须调节其酸度值到中性(pH7.0左右)。
(2)牛肉汁蛋白胨培养基(NA)是培养细菌最常用的培养基,又称营养琼脂或肉汤培养基。
成分如下:酵母浸膏1g 牛肉浸膏3g蛋白胨5-10g 蔗糖(或葡萄糖)l0g琼脂15-20g 水1000mlpH7.0配制方法:称取牛肉浸膏及蛋白胨溶于少量热水中备用,在其余水中加入琼脂,加热溶化后将牛肉浸膏和蛋白胨溶液加入混匀,然后加水补足到1000 ml,用NaOH或HCL调整至pH7.0,趁热分装,加棉花塞后灭菌。
(3)玉米叶培养基取一定数量的玉米叶片,洗净后剪成1㎝2左右的小块,放在250ml的三角瓶中,盛放量一般为三角瓶的1/3,然后加少量的水以保持湿润,加棉花塞后灭菌。
天然培养基一般不必调整pH。
(4)查氏(Czapek)培养基查氏培养基是一种组合培养基,其成分如下:NaNO3 2g K2HPO4 1 gMgSO4·7H2O 0.5g KCl 0.5gFeSO4 0.01g 蔗糖30g水1000ml(5)灭菌水的配制蒸馏水(或自来水)经过灭菌处理即成灭菌水,是实验室用量最大的必备品之一,常用于病原菌的分离、稀释、保湿等。
常用培养基制备灭菌与消毒
分生孢子丝
气生菌丝 琼脂表 面 基内菌丝
The cross section of an actinomycete colony showing the substrate mycelium(基内菌丝) and aerial mycelium (气 生菌丝)with chains of conidiospores(分生孢子)
放线菌生长到一定阶段,大部分气生菌丝 分化成孢子丝,通过横割分列的方式产生 成串的分生孢子。孢子丝形态多样,有直、 弯曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。 孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等 等。它们的形态构造都是放线菌分类鉴定 的重要依据。 放线菌的菌落早期绒状同细 菌菌落月牙状相似,后期形成孢子菌落呈 粉状、干燥,有各种颜色呈同心圆放射状。
平板划线法: 1、倒平板,标记培养基名称,编号和实验 日期。
2、划线方法
稀释混合平板法 : 1、先加菌 2、倒平板时注意培养基温度 3、混合均匀
微生物培养技术
1、斜面接种 2、液体培养基接种 3、穿刺接种 将已接种的斜面、半固体和液体培养基放置培
养箱 中培养将生长好的菌种用牛皮纸包好,置4℃
冰箱中
查氏合成培养基
查氏合成培养基是用来分类和培养霉菌的 培养基,其配方如下:
NaNO3 3g,K2HPO4 1g, KCl 0.5g, MgSO4.7H2O 0.5g,FeSO4 0.01g,蔗糖 30g, H2O 1000ml,pH自然
麦芽汁培养基
用来培养酵母菌,干麦芽粉加4倍水,在5060℃保温糖化3-4小时,用碘液试验检查至 糖化完全为止,调整糖液浓度,煮沸后,过滤, 调pH为6.0。
有二层小梗
青霉
青霉的形态结构 A单轮型 B非对称型 C对称二轮型
发酵工业产品培养基配方大全
发酵工业产品培养基配方大全1.酵母培养基配方:-加糖培养基配方:-酵母提取物10g-葡萄糖20g-氯化镁1g-磷酸二氢钾2g- H2O 1000ml-加酵母提取物培养基配方:-酵母提取物20g-葡萄糖10g-氯化镁1g-磷酸二氢钾2g- H2O 1000ml2.细菌培养基配方:-肉膏蛋白胨加入培养基配方:-肉挫3g-蛋白胨5g-NaCl5g- 纯净水 1000ml-牛肉精加入培养基配方:-牛肉精3g-NaCl10g- Agar 15g- 纯净水 1000ml3.真菌培养基配方:-绵白糖加入培养基配方:-麦芽提取物10g-蔗糖30g-K2HPO41g-MgSO40.5g- 纯净水 1000ml-麦芽提取物加入培养基配方:-麦芽提取物20g-FeSO40.1g-K2HPO42g-MgSO41g- 纯净水 1000ml4.菌丝体培养基配方:-淀粉加入培养基配方:-玉米粉20g-淀粉10g-NaCl5g-MgSO40.5g- 纯净水 1000ml-牛肉精加入培养基配方:-牛肉精3g-酵母提取物2g-NaCl5g-MgSO40.5g- 纯净水 1000ml5.发酵液培养基配方:-玉米加入培养基配方:-玉米粉100g-蛋白胨10g-NaCl5g-淀粉10g- 纯净水 1000ml-葡萄糖加入培养基配方:-玉米粉10g-蛋白胨5g-葡萄糖20g-淀粉10g- 纯净水 1000ml上述配方仅为其中几种常用的发酵工业产品培养基配方,不同的微生物和发酵过程需要有针对性地选择合适的配方。
在实际应用中,还需要根据具体情况进行调整和优化。
同时,培养基的制备过程中,要注意使用无菌操作,以确保微生物培养的纯净性和成功率。
常用培养基概念及配方
LB培养基:是微生物学实验中最常用的培养基,用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。
用于培养大肠杆菌、枯草杆菌等细菌,分为液态培养基和加入琼脂制成的固态培养基。
加入抗生素的 LB 培养基可用于筛选以大肠杆菌为宿主的克隆。
PDA培养基:马铃薯葡萄糖琼脂培养基,即Potato Dextrose Agar (Medium),依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。
改良MC培养基:用于乳酸菌饮料中乳酸菌的菌落计数;原理:大豆蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖和乳糖为可发酵糖类提供碳源;乳酸菌发酵糖产酸使菌落周围碳酸钙溶解,以辨别乳酸菌;琼脂是培养基的凝固剂;中性红为pH指示剂。
MRS培养基:乳酸菌培养基,由多种成分组成,适用于乳酸菌的生长,用来分离培养乳酸菌的一类培养基,一种常用的培养基,宜培养分离乳酸菌。
由于该培养基十分适于乳酸菌的生长,而且抑制其他菌的生长,因此具有分离乳酸菌的功能。
当乳酸菌长成后在培养基上显黄色,之后会变淡黑色。
以此分离乳酸菌。
乳酸菌:凡是能从葡萄糖或乳糖的发酵过程中产生乳酸的细菌统称为乳酸菌。
这是一群相当庞杂的细菌,目前至少可分为18个属,共有200多种。
除极少数外,其中绝大部分都是人体内必不可少的且具有重要生理功能的菌群,其广泛存在于人体的肠道中。
目前已被国内外生物学家所证实,肠内乳酸菌与健康长寿有着非常密切的关系。
乳酸菌指发酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。
常见菌种有双歧杆菌、保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌和嗜酸乳杆菌等自配高浓度污水:葡萄糖5550 mg/L+(NH4)2SO4,1170 mg/L+KH2PO4,170 mg/L+COD为5000 mg/L。
自配污水:葡萄糖555 mg/L+(NH4)2SO4,117mg/L+KH2PO417 mg/L+CaC12 0,08 mg/L+MgSO4,1,534 mg/L+NaHCO3 550.8 mg/L+FeC13·6H2O 0.25 mg/L+C0D 500 mg/L+氨氮为30 mg/L.一、LB培养基配制1升LB培养培养基需:蛋白胨10g/L;酵母粉5 g/L、Nacl10 g/L、单/双去离子水、琼脂15~20g/L(配制液体培养基不需要加,配制固体培养基时加入)。
香菇原种培养基的配方
香菇原种培养基的配方
香菇原种培养基的配方有多种,常用的原料包括麦粒、玉米粒、高梁粒、棉籽壳、木屑、玉米芯等。
以下是一些常见的香菇原种培养基配方:
1、稻草培养基:稻草(切成3厘米长)80千克,麦麸(或米糠)18千克,石膏1千克,蔗糖1千克,含水量65%,pH8~9。
如果pH低于8,可加适量的石灰。
2、棉籽壳培养基:棉籽壳100千克,麦麸6~8千克,石灰45千克,水150升,pH8~9。
3、甘蔗渣培养基:甘蔗渣(粉碎后过筛的干品)100千克,麦麸15千克,复合肥(含钾量较多的)1千克,石灰5千克,水150升,pH8~9。
4、木屑培养基:木屑78%,麦皮20%,蔗糖1%,碳酸钙或熟石膏1%,料:水=1:1.21,pH自然。
5、马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA培养基):去皮马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升,酸碱度自然。
在制作香菇原种培养基时,需注意原料的质量、规格以及种类,并严格控制培养基的pH值。
发霉变质的原料应避免使用,以免对香菇生长带来威胁。
实验室常用培养基
实验用培养基配制 >1 .牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)牛肉膏3g ,蛋白胨10g ,NaCl 5g ,水1000mL ,pH7.4 ~7.62. 高氏1 号培养基( 用于放线菌培养)可溶性淀粉20g ,KNO 3 1g ,NaCl 0.5g ,K 2 HPO 4- · 3H 2 O 0.5g ,MgSO4 · 7H 2 O 0.5g, ,FeSO4 · 7H 2 O 0.01g ,水1000mL ,pH7.4 ~7.6 。
配制时注意,可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
3 .马丁氏(Martin )培养基(用于从土壤中分离真菌)K 2 HPO 4 1g ,MgSO 4 · 7H 2 O 0.5g ,蛋白胨5g ,葡萄糖10g ,1/3000 孟加拉红水溶液100mL, 水900mL ,自然pH ,121 ℃湿热灭菌30min 。
待培养基融化后冷却55 ~60 ℃时加入链霉素( 链霉素含量为30 μ g/mL).4. 马铃薯培养基(PDA)( 用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯( 去皮)200g, 蔗糖( 或葡萄糖) 20g, 水1000mL配制方法如下: 将马铃署去皮, 切成约2cm 2 的小块, 放入1500mL 的烧杯中煮沸30min, 注意用玻棒搅拌以防糊底, 然后用双层纱布过滤, 取其滤液加糖, 再补足至1000mL, 自然pH. 霉菌用蔗糖, 酵母菌用葡萄糖.5. 察氏培养基( 蔗糖硝酸钠培养基)( 用于霉菌培养)蔗糖30g, NaNO 3 2g, K 2 HPO 4 1g, MgSO 4 · 7H 2 O 0.5g, KCl 0.5g, FeSO4 · 7H2 O 0.1g, 水1000mL, pH7.0 ~7.26. Hayflik 培养基( 用于支原体培养)牛心消化液( 或浸出液)1000mL, 蛋白胨10g, NaCl 5g, 琼脂15g, pH7.8 ~8.0,分装每瓶70mL, 121 ℃湿热灭菌15min, 待冷却至80 ℃左右, 每70mL 中加入马血清20mL,25% 鲜酵母浸出液10mL, 15 醋酸铊水溶液2.5mL, 青霉素G 钾盐水溶液(20 万单位以上)0.5mL, 以上混合后倾注平板. 注意: 醋酸铊是极毒的药品, 需特别注意安全操作.7 .麦氏(McCLary) 培养基( 醋酸钠培养基)葡萄糖0.1g, KCl 0.18g ,酵母膏0.25g ,醋酸钠0.82g, 琼脂l.5g ,蒸馏水l00mL 。
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1.配料
配方换算→在容器中加入少量水〔蒸馏水,自然水〕→按照配方称取各种药品〔依次加入〕→加足所需水量《一药一勺,取药后立即盖上瓶盖》。
2.溶解
淀粉溶解:少量冷水调成糊状
加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95~97℃ ,且需要边
加N的盐酸或的1N NaOH把培养基调节到所要求的值。
4.过滤
滤纸或棉花进行过滤。
5.分装
一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。
(1)三角瓶
若作静置培养,则100 ml培养基/250 ml的三角瓶,最多不能超过150 ml培养基/250 ml的
7.灭菌
按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养
基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。
8.摆斜面
灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。
9.贮存
培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于4℃冰箱中备用
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含
培养基
有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及生长素和水等。有的培养基还含有抗菌素、色素、激素和血清。
培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在2~6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,现在均改制成粉末。
三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15~20 ml培养基/250
ml的三角瓶,保证通气良好。
(2)试管分装
液体培养基一般装4~5 ml,约试管的1/4高度;
固体斜面培养基一般装3~4 ml,约试管的1/5高度。
6.包扎
分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。