加味茵陈四逆汤对实验性肝纤维化小鼠MMP1和TIMPs表达的影响_李洁_徐玉莲_

DOIʒ10．13192/j．issn．1000-1719．2016．06．068

加味茵陈四逆汤对实验性肝纤维化小鼠MMP1和TIMPs 表达的影响

李洁1，徐玉莲2，罗书2，许华

3

（1．广州中医药大学第一临床医学院，广东广州510405；2．广州中医药大学，广东广州510405；

3．广州中医药大学第一附属医院儿科，广东广州510405）

摘

要：目的：观察预防性使用加味茵陈四逆汤对肝纤维化小鼠肝组织中基质金属蛋白酶－1（MMP1）、基质金属蛋

白酶抑制剂－1（TIMP1）和基质金属蛋白酶抑制剂－2（TIMP2）基因表达的影响。方法：将48只雄性ICＲ小鼠随机分为

正常组、模型组、阳性对照组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组。30%CCl 4（1.5mg /kg ，溶解于橄榄油）腹腔注射建立肝纤维化模型，同时给予药物灌胃处理。用药14d 后，各组行HE 染色，观察肝脏病理组织学改变。ＲT －qPCＲ法检测MMP1、TIMP1和TIMP2mＲNA 表达。结果：（1）病理结果显示模型组肝纤维化明显，中药高、

中、低剂量组较模型组纤维化减轻；（2）MMP1mＲNA 模型组表达量与正常组比较明显减少（P ＜0.05），与阳性药物组、中药中剂量和低剂量组相较表达量同样明显减少（P ＜0.05）；（3）TIMP1mＲNA 、TIMP2mＲNA 模型组表达量比正常组明显增多（P ＜0.05），与

阳性药物组和中药中、低剂量组相较均表达量减少（P ＜0.05）。结论：加味茵陈四逆汤可上调肝纤维化小鼠MMP1表达，抑制TIMP1、TIMP2表达，发挥对肝纤维化的抑制作用。

关键词：加味茵陈四逆汤；肝纤维化；MMP1；TIMP1；TIMP2；预防

中图分类号：Ｒ575

文献标志码：A

文章编号：1000-1719（2016）06-1315-03Jiawei Yinchen Sini Decoction on MMP 1and TIMPs in Carbon

Tetrachloride －Induced Hepatic Fibrosis Mice

LI Jie 1，XU Yulian 2，LUO Shu 2，XU Hua 3

（1．The First Medical College ，Guangzhou University of Chinese Medicine ，Guangzhou 510405，Guangdong ，China ；2．Guangzhou University of Chinese Medicine ，Guangzhou 510405，Guangdong ，China ；3．The First Affiliated Hospital of

Guangzhou University of Chinese Medicine ，Guangzhou 510405，Guangdong ，China ）

Abstract ：Objective ：To observe the preventive effects of Jiawei Yinchen Sini Decoction （JWYSN ）on the gene expressions of MMP1，TIMP1and TIMP2in mice with hepatic fibrosis．Methods ：Forty －eight male ICＲmice were randomly divided into a nor-mal group ，a model group ，a positive control group ，JWYSN high ，medium and low dose groups．The hepatic fibrosis model was es-tablished by intraperitoneal injection of 30%CCl 4（1．5mg /kg ，

dissolved in olive oil ）．Meanwhile ，mice were treated with intra-gastric administration of drugs．After 14days ，the pathological fibrosis change was observed by performing HE staining．The mＲNA expressions of MMP1，TIMP1and TIMP2were detected by ＲT －qPCＲanalysis．Ｒesults ：（1）The pathological results showed he-patic fibrosis in the model group was significantly higher than that in JWYSN high ，medium and low dose groups．（2）The expres-sion of MMP1mＲNA in model group was obviously lower than the normal group （P ＜0．05）as well as that of the positive control group ，JWYSN medium and low dose groups （P ＜0．05）．（3）Levels of TIMP1mＲNA and TIMP2mＲNA expressions increased significantly in model mice （P ＜0．05）and expressions in positive control group ，JWYSN medium and low dose groups were lower than that of the model group （P ＜0．05）．Conclusion ：Jiawei Yinchen Sini Decoction could up －regulate the expression of MMP1mＲNA and inhibit expressions of TIMP1mＲNA and TIMP2mＲNA in mice with hepatic fibrosis ，and thus could attenuate the de-velopment of hepatic fibrosis．

Keywords ：Jiawei Yinchen Sini Decoction ；hepatic fibrosis ；MMP1；TIMP1；TIMP2；prevention 收稿日期：2015－12－09

基金项目：国家自然科学基金项目（81373686）；广东省教育厅科研项目

（平台）（2013KJCX0049）

作者简介：李洁（1989－），女，山西运城人，

博士研究生，研究方向：中医儿科。

通讯作者：许华（1965－），女，广西人，

教授，博士，研究方向：中医儿科。肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化发展的必经的

过程，其病理是可逆的，针对早期防治肝纤维化的研究

已成为当前医学攻关中的一个热点课题［1］

。近年，国内外研究发现有在肝纤维化进程中许多基因表达水平发生变化，如细胞外基质及其相关基因、细胞因子基

因、转绿因子、转运蛋白等［2］

。在肝纤维化发生过程中，基质金属蛋白酶（MMPs ）及其抑制物（TIMPs ）所起

到的作用已经越来越受到人们的关注［3］

，并已被证实

是调节肝细胞外基质降解与合成的重要因子［4］

。目前