植物叶绿素测定方法

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测定叶绿素含量实验报告

引言：

叶绿素是植物中最重要的色素之一，它在光合作用中起着至关重要的作用。测定叶绿素含量可以帮助我们了解植物的生理状态和光合效率。本实验旨在通过分光光度法测定叶绿素含量，并探讨影响叶绿素含量的因素。

材料与方法：

1. 实验材料：新鲜的植物叶片、乙醇、丙酮、二氯甲烷、石英比色皿、量筒、离心机、紫外可见分光光度计等。

2. 实验步骤：

a. 将适量的新鲜叶片切碎，并加入适量的乙醇中，用离心机离心10分钟，使叶绿素溶解于乙醇中。

b. 取适量的叶绿素提取液，加入丙酮和二氯甲烷，混合均匀。

c. 用量筒将混合液转移到石英比色皿中，放入紫外可见分光光度计，设置波长为665nm和649nm，测定吸光度。

d. 计算叶绿素含量。

结果与讨论：

通过实验测定，我们可以得到不同植物叶片的叶绿素含量。在实验中，我们发现不同植物叶片的叶绿素含量有所差异。这是因为不同植物对光合作用的需求和适应能力不同，导致叶绿素合成的数量和比例不同。

此外，我们还发现在同一植物的不同部位，叶绿素含量也存在差异。例如，在一棵树上，树叶的叶绿素含量可能比树干或树枝的含量高。这是因为树叶是进

行光合作用的主要部位，需要更多的叶绿素来吸收光能。

除了植物本身的因素外，环境条件也会对叶绿素含量产生影响。光照强度、温度、水分等因素都会对叶绿素合成和降解产生影响。例如，充足的光照和适宜

的温度可以促进叶绿素的合成，而干旱和寒冷的环境则可能导致叶绿素的降解。在实验中，我们使用了分光光度法来测定叶绿素含量。这种方法基于叶绿素对

叶绿素含量的测定分光光度法

叶绿素是植物和一些原生生物中重要的光合色素之一，它在光合作用中起到接

收和转换光能的关键作用。测定叶绿素含量可以帮助我们了解植物的光合效率和健康状况，以及研究光合作用的机制和调控。分光光度法是一种常用的测定叶绿素含量的方法，本文将介绍该方法的原理、实验步骤和数据分析。

一、原理

分光光度法测定叶绿素含量的原理是基于叶绿素对光的吸收特性。叶绿素分子

可以吸收特定波长的光，特别是蓝光和红光，而对绿光的吸收较弱。利用分光光度计测量叶绿素溶液在不同波长的光下的吸光度，可以通过比较吸光度与叶绿素浓度的标准曲线，计算出待测样品中叶绿素的含量。

二、实验步骤

1. 制备叶绿素提取液：将适量的鲜叶片（去除茎和大的叶脉）放入离心管中，

加入少量酒精，并用研钵捣碎，使叶绿素释放到酒精中。然后用酒精将研钵中的残渣洗入离心管中，最后用酒精将叶绿素完全溶解。注意，酒精的使用要避免火源。

2. 离心沉淀：将叶绿素提取液离心10分钟，以沉淀残渣和悬浮物。

3. 分光光度计测量：取离心后的叶绿素提取液，用分光光度计在特定波长下

（如645 nm和663 nm）测量其吸光度。记录吸光度值。

4. 制备标准曲线：取不同浓度的叶绿素标准溶液，用同样的方法测量其吸光度，记录吸光度值。

5. 计算叶绿素含量：根据标准曲线，将待测样品的吸光度值代入，通过计算叶

绿素浓度的公式，得出叶绿素的含量。

三、数据分析

1. 标准曲线的绘制：将各个标准溶液的叶绿素浓度作为横坐标，吸光度作为纵

坐标，绘制曲线。利用标准曲线可以通过待测样品的吸光度值，反推出其叶绿素的浓度。

叶绿素测定方法

分光光度法测定叶绿素含量

一、实验目的

1.了解植物组织中叶绿素的分布及性质。

2.掌握测定叶绿素含量的原理和方法。

二、实验原理

叶绿素广泛存在于果蔬等绿色植物组织中，并在植物细胞中与蛋白质结合成叶绿体。当植物细胞死亡后，叶绿素即游离出来，游离叶绿素很不稳定，对光、热较敏感；在酸性条件下叶绿素生成绿褐色的脱镁叶绿素，在稀碱液中可水解成鲜绿色的叶绿酸盐以及叶绿醇和甲醇。高等植物中叶绿素有两种：叶绿素a 和b，两者均易溶于乙醇、乙醚、丙酮和氯仿。

叶绿素的含量测定方法有多种，其中主要有：

1.原子吸收光谱法：通过测定镁元素的含量，进而间接计算叶绿素的含量。

2.分光光度法：利用分光光度计测定叶绿素提取液在最大吸收波长下的吸光值，即可用朗伯—比尔定律计算出提取液中各色素的含量。

叶绿素a 和叶绿素b 在645nm 和663nm 处有最大吸收，且两吸收曲线相交于652nm 处。因此测定

提取液在645nm、663nm、652nm 波长下的吸光值，并根据经验公式可分别计算出叶绿素a、叶绿素b

和总叶绿素的含量。

三、仪器、原料和试剂

仪器

分光光度计、电子顶载天平(感量0．01g)、研钵、棕色容量瓶、小漏斗、定量滤纸、吸水纸、擦境纸、滴管。

原料

新鲜(或烘干)的植物叶片

试剂

1. 96％乙醇(或80％丙酮)

2. 石英砂

3. 碳酸钙粉

四、操作步骤

取新鲜植物叶片(或其它绿色组织)或干材料，擦净组织表面污物，去除中脉剪碎。称取剪碎的新鲜样品2g，放入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉及3mL95％乙醇，研成均浆，再加乙醇10mL，继续研磨至组织变白。静置3～5min。

叶绿素测定的原理

叶绿素是植物体内最为重要的一种色素，它参与了光合作用中太

阳能的吸收和传递过程。因此，叶绿素测定是研究植物光合作用的基

础实验之一。

叶绿素的测定原理基于溶液中叶绿素对光的吸收特性，即在一定

波长范围内，吸收与溶液中叶绿素的浓度成正比的光量。常用的叶绿

素测定方法有分光光度法和荧光法。

分光光度法中，首先需要将样品离心沉淀，然后用乙醇或乙醚提

取叶绿素，最后将提取的液体悬浮于乙醇或乙醚中，测量反射或透射

光的强度。根据比色法原理，溶液中每单位叶绿素吸收的光量与浓度

成正比，通过标准曲线计算出样品中叶绿素的浓度。

荧光法则是利用叶绿素在激发光的作用下会发出荧光现象，荧光

的强度与叶绿素的浓度成正比关系。在荧光法中，首先需要将样品加

入荧光素，搅拌均匀后，测量样品中荧光素的荧光强度与标准曲线计

算出样品中叶绿素的浓度。

总之，叶绿素测定原理基于叶绿素对光的特性，通过分光光度法

或荧光法测量样品中叶绿素吸收或发出的光的强度来计算叶绿素的浓度。在科研和实际工作中，叶绿素测定是十分常用和重要的实验方法。

叶绿素的测定

叶绿素是植物中的重要色素，用于光合作用中的光能捕捉和转化。测定叶绿素的含量可以评估植物的光合活性和健康状况。

常用的叶绿素测定方法包括：

1. 酸醇提取法：将植物组织置于酸醇混合液中，利用酸溶解细胞膜，醇提取叶绿素。然后用光度计测定提取液的吸光度，根据吸光度与叶绿素浓度的关系计算出叶绿素的含量。

2. 高效液相色谱法(HPLC)：通过将植物样品制备成溶液，在高效液相色谱仪中进行分离和检测。根据标准曲线或内标法，确定叶绿素的浓度。

3. 光谱分析法：通过测量叶绿素在可见光区域的吸收光谱，计算叶绿素的浓度。常用仪器包括光度计或分光光度计。

4. 荧光光谱法：通过测量样品在激发光下发射的荧光光谱，间接推测出叶绿素的浓度。这种方法可以通过测量不同波长下激发光和荧光信号的比值来评估叶绿素的含量。

5. 无损测定法：利用近红外光谱或其他无损技术，通过样品材料的光学特性来推测叶绿素的含量。这种方法适用于大范围的植物样本测定。

叶绿素测定方法的选择取决于实验条件、设备和样品特性。根据需求，可以选用适当的方法来测定叶绿素的含量。

叶绿素含量的测定方法

叶绿素含量的测定

叶片叶绿素含量与光合作用密切相关，叶绿素含量的测定无论是在生理上，还是在选育品种以及抗性研究等方面都很有必要。叶绿素含量的经典测定方法是光电比色法，即用光电比色计以无机有色溶液为标准进行比色测定。该方法不仅要配制无机标准溶液，而且不能对溶液中不同色素分子进行定量测定；分光光度法则不需配制标准溶液，又可对溶液中不同色素分子进行定量测定，已得到广泛应用。

一、原理

分光光度法测定叶绿素含量，就是利用叶绿素 a和叶绿素b吸收光谱的不同，测定各特定峰值波长下的光密度，再根据色素分子在该波长下的消光系数，计算出浓度。

叶绿素 a、叶绿素b的丙酮溶液在可见光范围内的最大吸收峰分别位于 663nm、 645nm处，同时已知叶绿素a和叶绿素b在663nm处的消光系数分别为82.04和9.27；在645nm处的消光系数分别为16.75和45.60。这样叶绿素a和叶绿素b的浓度与他们在663nm、645nm处的光吸光密度的关系可用下式表示：

D663=82.04C a+9.27C b

D645=16.75C a+45.60C b

式中D663和D645分别为叶绿素溶液在波长663nm、645nm处的光密度；C a、C b分别为叶绿素a和叶绿素b的浓度，单位g.·L-1。解方程可得到：

计算：C a=12.7D663-2.59D645

C b=22.9D645-4.67D663

C a+b=20.3D645+8.04D663

C a ,C b分别为叶a和叶b的浓度，C a+b为叶a和叶b的总浓度，单位为mg·L-1

叶绿素含量测定方法

叶绿素是植物体内含量较高的绿色色素，它在光合作用中起着重要的作用。因此，测定叶绿素含量对于研究植物的生理过程和生态体系具有重要意义。本文将介绍几种常用的测定叶绿素含量的方法。

1. 直接萃取法：

直接萃取法是最常用的测定叶绿素含量的方法之一。具体步

骤如下：

(1) 取新鲜叶片，将其切碎并放入含有乙醇或丙酮的试管中。

(2) 在测定之前，将试管置于黑暗中，以避免光照对叶绿素

的破坏。

(3) 将试管加热至60-80摄氏度，使用超声波震荡器震荡一段时间，以使叶绿素从叶片中完全溶解到溶液中。

(4) 将溶液离心，收集上层液体，并使用分光光度计测定其

吸光度。

(5) 根据吸光度测定值和标准曲线来计算叶绿素的含量。

2. 酸碱法：

酸碱法是测定叶绿素含量的一种简便方法。具体步骤如下：

(1) 取新鲜叶片，用醋酸乙酯将其完全浸泡。

(2) 在测定之前，将其放在黑暗中保护叶绿素不受光照。

(3) 将浸泡叶片的醋酸乙酯溶液转移到一个离心管中，再添

加一些酸性乙醇（如95%乙酸）。

(4) 离心一段时间，使叶绿素溶于酸性乙醇中。

(5) 将上清液转移到一个试管中，并用乙醚稀释，使其适合测定。

(6) 使用分光光度计测定溶液的吸光度，并根据标准曲线计算叶绿素的含量。

3. 间接法（叶绿素含量的计算）：

间接法是一种根据叶片在不同波长下吸光度的差异来推测叶绿素含量的方法。具体步骤如下：

(1) 使用分光光度计测定叶片在不同波长下的吸光度，包括440 nm、645 nm和663 nm。

(2) 根据以下公式计算：

非光合色素 Chl (a+b) = 0.0073 A663 + 0.036 A645

叶绿素测定实验方法

引言：

叶绿素是一种存在于植物和藻类细胞中的绿色色素，它在光合作用中起着至关重要的作用。因此，测定叶绿素含量对于研究光合作用的过程和效率具有重要意义。本文将介绍一种常用的叶绿素测定实验方法，通过该方法可以准确快速地测定叶绿素的含量。

实验材料：

1. 叶绿素提取液：含有乙醇和醋酸的混合液；

2. 磷酸盐缓冲液：用于稀释样品和调整pH值；

3. 丙酮：用于去除样品中的类胡萝卜素；

4. 乙醇：用于去除样品中的脂类物质；

5. 乙酸镁溶液：用于稀释样品和调整pH值；

6. 纯水：用于稀释样品和制备试剂。

实验步骤：

1. 取一片新鲜的叶片，用研钵将其研磨成细碎的叶浆。添加适量的磷酸盐缓冲液，使叶浆与缓冲液的体积比为1:10，并搅拌均匀。

2. 将混合物过滤，收集滤液，滤液即为叶绿素提取液。

3. 将叶绿素提取液分装到两个试管中，分别标记为A和B。

4. 在试管A中加入适量的丙酮，用于去除样品中的类胡萝卜素。搅拌均匀后，使其静置5分钟。

5. 在试管B中加入适量的乙醇，用于去除样品中的脂类物质。搅拌均匀后，使其静置5分钟。

6. 分别离心试管A和B，将上清液转移到两个新的试管中。

7. 在试管A中加入适量的乙酸镁溶液，用于稀释样品和调整pH值。搅拌均匀后，使其静置5分钟。

8. 在试管B中加入适量的纯水，用于稀释样品和制备试剂。搅拌均匀后，使其静置5分钟。

9. 分别使用分光光度计测量试管A和B中溶液的吸光度。选择适当的波长（通常为665nm和649nm），分别记录吸光度值为A665和A649。

10. 根据公式A = (A665 - A649) × V / M，计算叶绿素的含量。其中，V为取样体积，M为叶绿素的摩尔吸光系数。

植物叶绿素含量的测定

一、实验目的

1. 了解叶绿素的含量对植物生长发育的影响。

2. 使用叶绿素测定仪器，熟练掌握叶绿素测定的操作方法。

二、实验原理

叶绿素的含量是植物生长发育的重要参数，它主要受到植物品种、生长环境等因素的影响，叶绿素的测定能了解植物发育及分析植物选择性。叶绿素测定仪器以叶绿素的吸收波长在670nm处，测定叶绿素的吸收值，从而计算出叶绿素的含量。

三、实验材料

1. 叶绿素测定仪器；

2. 分装标准液；

3. 各种植物叶片；

4. 纸巾；

5. 光学玻璃管（空管，分装标准液管）；

6. 吸管；

7. 水桶；

8. 烧杯；

9. 烧瓶；

四、实验步骤

1. 将叶片裁切为小块，放入烧杯中；

2. 把六个光学玻璃管清洗干净；

3. 用纸巾擦干玻璃管，将空管和标准液管装入叶绿素测定仪中；

4. 在烧杯中加入适量水，把叶片浸泡；

5. 将烧杯中的叶片倒入叶绿素测定仪中，盖上盖子；

6. 按照设备的操作指南，进行实验操作；

7. 记录实验数据；

8. 计算叶绿素含量；

9. 将实验数据做出结果表格。

五、实验结果

植物叶绿素含量（μg/g）

植物 | 叶绿素含量

---- | ----

植物1 | 10.2

植物2 | 15.3

植物3 | 8.1

植物4 | 12.6

植物5 | 13.2

植物6 | 11.4

六、结论

通过实验，可以得出不同植物叶绿素含量的不同，从而了解叶绿素含量对植物生长发育的影响。

光谱法叶绿素测定

光谱法叶绿素测定是一种常用的科学实验方法，用于测定植物组织中的叶绿素含量。该方法通过分析叶绿素在可见光谱范围内的吸收特性，实现对叶绿素含量的定量测量。

叶绿素是植物中的一种重要的光合色素，它能够吸收光能并转化为植物生长和光合作用所需的化学能。因此，测定叶绿素含量对于了解植物的生长状况、光合作用效率以及环境胁迫情况具有重要意义。

光谱法叶绿素测定的基本原理是根据不同波长的光在叶绿素分子中的吸收情况，来推断叶绿素的含量。从物理学的角度来看，各种物质对不同波长的光有不同的吸收和透射特性，而叶绿素对红光和蓝光的吸收最为显著，而对绿光的吸收较弱。因此，我们可以通过测定植物组织在不同波长的光下的吸光度，来推测叶绿素的含量。

在光谱法叶绿素测定实验中，通常使用分光光度计或分光光度计等设备。首先，需要将待测植物组织样品制备成提取液，一般使用丙酮、酒精等溶剂进行提取。提取液中含有植物组织中的叶绿素，通过分光光度计测量提取液在不同波长下的吸光度。

测定时，首先需要调节分光光度计的波长到红光、蓝光、绿光等吸收峰出现的波长，然后将提取液倒入光瓶或试管中，将选择的波长所对应的吸光度读数记录下来。然后，通过比较各个波长下的吸光度读数，可以推断出叶绿素的含量。

当然，为了准确测定叶绿素的含量，需要进行一些控制实验。比如，需要进行空白对照实验，在没有叶绿素存在的情况下，测量提取液在各个波长下的吸光度，以消除提取液本身的吸光度。此外，还需要制备标准曲线，通过测量不同浓度的标准叶绿素溶液的吸光度，构建出标准曲线，从而根据待测样品的吸光度来推断叶绿素的含量。

叶绿素含量测定方法

一、引言

叶绿素是植物体内的一种重要的生物色素，对于植物的光合作用和生长发育有着至关重要的作用。因此，测定叶绿素含量对于研究植物生理生态学、环境保护等领域具有重要意义。本文将介绍几种常用的叶绿素含量测定方法。

二、材料与仪器

1. 乙醇：纯度为95%。

2. 醋酸：纯度为99%。

3. 氯仿：纯度为99%。

4. 石油醚：纯度为95%。

5. 甲醛：纯度为37%。

6. 碳酸钠：分析纯。

7. NaOH溶液：浓度为0.1mol/L。

8. 蒸馏水：去离子水或超纯水均可。

9. 离心管、比色皿、移液管等实验器具。

三、方法

1. 乙醇法

步骤：

（1）取适量新鲜叶片，洗净后切成小段；

（2）加入95%乙醇中，放置在室温下静置20-24小时；

（3）将样品离心，取上清液；

（4）将上清液转移到比色皿中，加入等体积的95%乙醇；

（5）用分光光度计在663nm和645nm处测定吸光度，计算叶绿素含量。

2. 醋酸法

步骤：

（1）取适量新鲜叶片，洗净后切成小段；

（2）加入80%醋酸中，放置在室温下静置24小时；

（3）将样品离心，取上清液；

（4）将上清液转移到比色皿中，加入等体积的80%醋酸；

（5）用分光光度计在652nm和665nm处测定吸光度，计算叶绿素含量。

3. 氯仿-甲醛法

步骤：

（1）取适量新鲜叶片，洗净后切成小段；

（2）加入95%甲醛中，在水浴中加热至90℃保持10分钟；（3）将样品离心，取上清液；

（4）将上清液转移到比色皿中，加入等体积的氯仿，并振荡混合均匀后静置10分钟；

（5）用分光光度计在649nm和665nm处测定吸光度，计算叶绿素含量。

叶绿素含量的测定分光光度法

叶绿素是一种广泛存在于植物和一些浮游生物中的绿色色素，它在光合作用过程中起着至关重要的作用。测定叶绿素含量是研究植物光合作用和生长发育的重要手段之一。其中，分光光度法是一种常用的测定叶绿素含量的方法。

分光光度法是通过测量溶液对特定波长光的吸收程度来确定其中物质浓度的一种方法。在测定叶绿素含量时，我们会选择特定波长的光，并测量通过溶液后的光线强度。根据光线的吸收程度，可以计算出样品中叶绿素的浓度。

在进行叶绿素含量的分光光度法测定时，我们首先需要提取叶绿素。通常采用乙醇、丙酮等溶剂来破坏叶绿素在叶片中的结构，并将其溶解出来。然后，将提取液置于离心管中进行离心，以去除悬浮的杂质。离心后，我们可以得到含有叶绿素的溶液。

接下来，我们需要使用分光光度计来测量叶绿素溶液的吸光度。分光光度计通过选择特定波长的光源，将光线通过样品后，再通过光电二极管接收光信号，最后转化为电信号。根据吸光度的定义，可以通过测量进射光和透射光的光强来计算吸光度，并由此得到叶绿素的浓度。

为了准确测定叶绿素含量，我们需要在测量前进行一些预处理。首先，需要校准分光光度计，以确保测量的准确性。其次，应该选择

适当的波长进行测量。常用的波长为663纳米和645纳米，这两个波长对叶绿素的吸光度较高。最后，要注意样品的稀释，以确保其吸光度在仪器检测范围内。

在实际测定中，我们可以根据测量结果计算出叶绿素的浓度，并进行统计分析。通过比较不同处理组的叶绿素含量，可以了解不同因素对植物生长和光合作用的影响。此外，还可以将分光光度法与其他方法相结合，来对叶绿素含量进行验证和比对，以提高测定结果的可靠性。

叶绿素含量测定方法

1.酒精提取法

这是一种简单、常用的叶绿素含量测定方法。首先，将待测样品中的叶绿素溶解到酒精中，然后通过分光光度计测定酒精溶液的吸光度。根据已知浓度的叶绿素标准溶液的吸光度与浓度之间的关系，可以计算出待测样品中叶绿素的含量。

2.乙醚提取法

这是一种更精确的叶绿素含量测定方法。首先，将待测样品中的叶绿素溶解到乙醚中，然后通过离心将悬浮液分离成上层乙醚相和下层水相。接下来，测定乙醚相的吸光度，并根据已知浓度的叶绿素标准溶液的吸光度与浓度之间的关系，计算出待测样品中叶绿素的含量。

3.高效液相色谱法

这是一种更为准确的叶绿素含量测定方法。首先，将待测样品中的叶绿素提取出来，并经过预处理后注入到高效液相色谱仪中进行分析。高效液相色谱法可以准确地分离出叶绿素及其衍生物，并通过检测器测定它们的吸光度，从而计算出叶绿素的含量。

4.气相色谱法

这是一种用于测定叶绿素含量的高灵敏度方法。首先，将待测样品中的叶绿素提取出来，并经过预处理后注入到气相色谱仪中进行分析。气相色谱法可以准确地分离出叶绿素及其衍生物，并通过检测器测定它们的吸光度，从而计算出叶绿素的含量。

需要注意的是，不同的测定方法在操作和结果上可能存在差异，因此在进行叶绿素含量测定时应选择合适的方法，并根据具体情况进行校正和修正。

总之，准确测定叶绿素含量对于研究植物的生长和光合作用具有重要意义。通过选择合适的方法并进行准确的操作，可以获得可靠的叶绿素含量数据，为相关研究提供有力的支持。

叶绿素的测定

叶绿素的测定（分光光度计法）

1.样品的选取

在测定叶片光和作用的枝条上，随机选取3~5片叶子，用水洗净并用滤纸吸干，取其中脉两侧的叶肉组织，取其鲜重0.1g，剪碎放于试管中。

2.叶绿素的提取

在试管中加入10毫升二甲基甲酰氨，加塞，放于阴暗处提取，待样品为白色透明时即表明叶绿素提取完毕。

3.测定

把提取的上清液注入比色杯中，以二甲基甲酰氨为对照，用72G型分光光度计测定在645nm和663nm时的光密度。

4.计算

（1）叶绿素浓度的计算：以Amon公式计算

参考文献：丁圣彦编著的《常绿阔叶林演替系列比较生态学》河南大学出版社.1999年

熊庆娥编著的《植物生理学实验教程》四川科学技术出版社2003年

呼吸速率的测定

卞勇主编的《植物与植物生理》中国农业大学出版社2007

化学实验测定某种植物中叶绿素含量

一、实验目的

本实验旨在通过化学方法准确测定某种植物中叶绿素的含量，探究

不同环境条件对叶绿素含量的影响，并加深对叶绿素的了解。

二、实验原理

叶绿素是一种重要的生物色素，可以吸收光能转化为化学能参与光

合作用，因此对于一种植物来说，叶绿素的含量直接关系到其对光合

作用的效率。此次实验使用乙醇提取法测定某种植物中叶绿素的含量。

实验步骤如下：

1. 将新鲜的某种植物叶片取出，并用解剖刀切成细碎的碎片。

2. 将叶片碎片放入研钵中，加入适量的乙醇，使其完全浸泡。

3. 使用研钵和捣棒将叶片碎片充分研磨，使叶绿素充分溶解到乙醇中。

4. 将研磨后的混合液倒入离心管中，离心10分钟，使悬浮在乙醇

中的固体碎片沉淀到离心管底部。

5. 取出上清液，用吸管移至比色皿中。

6. 使用分光光度计以470nm为波长进行读数，记录吸光度A1。

7. 在比色皿中加入一定体积的乙醇，作为空白处理。

8. 再次使用分光光度计以470nm为波长进行读数，记录吸光度A2。

根据比色法的原理，通过计算吸光度的差异可以得到叶绿素的含量。

三、结果分析

根据实验数据，我们可以通过以下公式计算叶绿素的含量：

叶绿素含量(mg/g) = (A1 - A2) × V / M

其中，A1为样品的吸光度，A2为空白的吸光度，V为乙醇的体积，M为样品的质量。

根据实验步骤和原理，我们可以得到结果如下：

1. 样品的吸光度A1为0.6。

2. 空白的吸光度A2为0.1。

3. 乙醇的体积V为1mL。

4. 样品的质量M为0.1g。

代入公式计算，可得：

叶绿素等的测定方法

叶绿素是存在于植物和藻类细胞中的一种绿色色素，它在光合作用中起着关键作用。因此，测定叶绿素及其相关的测定方法对于研究植物生理学、光合作用机理以及环境生态学等方面具有重要意义。下面将介绍几种常用的叶绿素测定方法。

1.全光谱扫描法

全光谱扫描法可以用于测定叶绿素a、叶绿素b以及类胡萝卜素的含量。该方法基于不同波长下叶绿素和类胡萝卜素的吸光度差异，通过测量样品在300-800nm范围内的吸光度来确定其含量。全光谱扫描法准确度较高，但需要较贵的设备。

2.分光光度法

分光光度法是一种常用的测定叶绿素含量的方法。该方法基于叶绿素和类胡萝卜素在不同波长下的吸光度差异，通过选择波长进行测定。常用的波长包括470nm、645nm和663nm等。该方法简单、快速，并且可以用于高通量样品测定。

3.乙醇提取法

乙醇提取法是一种常用的叶绿素提取和测定方法。该方法将叶样品放入乙醇等有机溶剂中，通过溶剂提取叶绿素并使其溶于溶剂中，然后使用分光光度法或高效液相色谱法等测定溶液中叶绿素的含量。乙醇提取法可以快速提取样品中的叶绿素，适用于大量样品的测定。

4.高效液相色谱法

高效液相色谱法是一种高精度的叶绿素测定方法。该方法基于叶绿素在特定条件下在高效液相色谱柱中的分离和检测，通过测定样品中叶绿素的峰面积或峰高来确定其含量。高效液相色谱法准确度高，但需要较为复杂的仪器和操作技术。

除了以上介绍的常用方法外，还有一些新兴的测定方法不断涌现，例如荧光光谱法、激光诱导荧光法、红外反射法等。这些新方法在提高测定精度、扩展测定范围和降低测定成本方面具有优势，正在逐渐得到广泛应用。