晚期NSCLC分子病理诊断的重要性及新进展

首次出现EML4-ALK阳性 非小细胞肺癌的称谓，并将其 定义为NSCLC的独特亚型
不同的 驱动基因
不同的临床 &病理特征
不同的 患者预后
不同的 治疗方法
ALK阳性非小细胞肺癌已成为NSCLC 特定的亚型
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AT. Shaw, et al. J Clin Oncol, 2009
ALK阳性NSCLC定义
中国EGFR与ALK阳性NSCLC 诊断及治疗指南（2014） 所有含腺癌成分的 NSCLC
诊断方法
FISH, 经权威机构批准的 IHC与RT-PCR，其余 IHC可做为筛选
CSCO中国专家共识
所有含腺癌成分的 NSCLC，富集人群可优 先检测
FISH, Ventana IHC, RT-PCR, 常规IHC可做 初筛
中国肿瘤登记年报，2012
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主要内容：ALK阳性NSCLC的诊断
ALK阳性非小细胞肺癌的定义 ALK检测适宜人群 ALK检测诊断流程专家共识
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中华病理学杂志2013年6月第42卷第6期 中华肿瘤杂志2014年7月第36卷第7期 中华结核呼吸科杂志2014年3月第27卷第3期
ALK阳性NSCLC具有鲜明的 临床及病理特征
1426例NSCLC患者接受FISH检测
FISH阳性细胞数 0%-9% 10%-15% 16%-30% 31%-50% >50%
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患者占比 79.3% 8.5% 1.4% 2.7% 8.1%
DR.Camidge, et al. Cancer 2013
Ventana IHC 试剂设计
ALK融合蛋白:
exon 19 del exon 19 del exon 19 del exon 19 del exon 19 del exon 19 del L858R insufficient L858R L858R exon 19 del
PK. Paik, et al. Mol Cancer Ther. 2012.
主要内容：ALK阳性NSCLC的诊断
ALK阳性非小细胞肺癌的定义 ALK检测适宜人群 ALK检测诊断流程专家共识
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中华病理学杂志2013年6月第42卷第6期 中华肿瘤杂志2014年7月第36卷第7期 中华结核呼吸科杂志2014年3月第27卷第3期
ALK阳性NSCLC的诊断-三大指南推荐
适宜人群
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Ventana IHC与FISH检测结果比较
FISH 总数 敏感性 特异性 一致率
阳性
Ventana IHC(1) 阳性 阴性 Ventana IHC(2) 阳性 阴性 46 0 31 2
阴性
7 377 0 198 53 377 31 200 94% 100% 99.10% 100% 98.20% 98.40%
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中国ALK阳性NSCLC总患者数约为HER2 阳性乳腺癌患者的70%，CML患者的3倍多
EGFR阳性肺癌（新发病数）208923例 ALK阳性肺癌（新发病数）34820例
其他
驱动突变肿瘤的每年发病数
乳腺癌 HER2阳性 患者49,631例
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ALK阳性肿瘤患者34,820例
CML 10,000例左右
Ventana IHC优势二——可重复性高
全自动检测，避免操作流程中的误差，可重复性好
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Ventana ALK (D5F3)的 CFDA注册 临床实验
三家公立医院超过1100例NSCLC样本进行Ventana ALK(D5F3)与FISH ALK 结果的对比验证实验 结果表明Ventana ALK(D5F3)与FISH ALK的一致性为99.23%
• 无ALK重排的NSCLC不表达ALK融合 蛋白 • 部分ALK融合蛋白表达较低
Optiview Amplification Kit Optiview DAB IHC Detection
D5F3 rabbitt monoclonal antibody
Ventana IHC的原理:
• 使用具有高度敏感性和特异性的一 抗——D5F3 • 全自动仪操作，充分保证特异性 • 独有Optiview扩增技术，充分保证敏 感性
主要内容：ALK阳性NSCLC的诊断
ALK阳性非小细胞肺癌的定义 ALK检测适宜人群 ALK检测诊断流程专家共识
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中华病理学杂志2013年6月第42卷第6期 中华肿瘤杂志2014年7月第36卷第7期 中华结核呼吸科杂志2014年3月第27卷第3期
NSCLC 活检组织标本
EGFR突变检 测
FISH, RT-PCR， Ventana IHC
晚期非小细胞肺癌分子靶向治疗 所有含腺癌成分的 专家共识 NSCLC
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中华肿瘤杂志2014年7月第36卷第7期 中华病理学杂志2013年6月第42卷第6期 中华结核呼吸杂志2014年3月第37卷第3期
源自文库
2015 NCCN V1: 小标本的鳞癌也需 检测EGFR & ALK
• • 阴性或未知； EFGR突变且使用EGFR-TKIs 后出现原发或继发耐药的患者
据组织类型选择合适技术§
新鲜标本
石蜡标本 常规IHC检测*
3+/2+/1+
RT-PCR＆（qPCR、 多重PCR或RACEPCR-Seq）
FISH
Ventana IHC
阳性
阴性
ALK阳性非小细胞肺癌
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中华病理学杂志2013年6月第42卷第6期
Estimated Enrollment: Study Start Date: Estimated Study Completion Date: Inclusion Criteria:
1. Patient has a histologically or cytologically confirmed diagnosis of non-squamous Non-small cell lung cancer (NSCLC) that is Anaplastic lymphoma kinase (ALK) positive as assessed by
荧光原位杂交（FISH）
检测NSCLC中EML4-ALK融合的现行标准 采用“分离”分析，倒位和ALK重排后红色和绿色探针分开
野生型
ALK重排
样本中≥15％细胞红色和绿色信号分开表示阳性结果
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Varella Garcia, IASLC 2011; Abs #MTE36.1. 19
FISH方法问题多多: 15% 阳性细胞Cut off值的合理性
ALK阳性非小细胞肺癌：
是指包括ALK FISH检测阳性、ALK序列融合变异或ALK融合蛋白表达阳 性的肺癌，肿瘤细胞中存在ALK融合基因表达，是非小细胞肺癌的一个 分子亚型，常见于腺癌，该类患者通常可从ALK抑制剂治疗中获益。
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张绪超等. 中华病理学杂志 2013; 42(6):402-406.
特征 组织学 亚型 吸烟状态 人种 发病年龄 性别 EGFR突变 腺癌 TTF1+ 非粘液型 不吸烟 东亚 66岁 女性 EML4/ALK 腺癌TTF1+ 粘液型 不吸烟 所有人种 52岁 无差异
Shaw AT, et al. J Clin Oncol 2009; 27:4247-4253. 中华病理学杂志2013年6月第42卷第6期 中华肿瘤杂志2014年7月第36卷第7期 中华结核呼吸科杂志2014年3月第27卷第3期
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晚期NSCLC分子病理诊断的重要性及 新进展
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既往肺癌病理诊断流程
最重要的目的为区分小细胞癌与非小细胞癌 由于，组织分类与患者预后无关，因此进一步区分病理亚型 （如，腺癌、鳞癌、大细胞癌）等并不十分重要 通常可以接受非小细胞肺癌的病理诊断
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NSCLC分子分型与治疗决策密切相关
HER2
EGFR mutants
Best response to EGFR TKI PR Unavailable SD Unavailable PR Unavailable PR PR PR PR PR
TTP on TKI(months) 12.1 19.6 23.6 Unavailable 5.0+ Unavailable 1.9 5.3 2.8+ 8.4 9.2+
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小标本鳞癌诊断存在误差: 首次诊断为鳞 癌再次重复评估诊断腺癌或者腺鳞混合
Patient# 1 (1) 2 (2) 3 (3) 4 (4) 5 (5) 6 (6) 7 (10) 8 (new) 9 (new) 10 (new) 11 (new) 16 Age 61 71 58 45 46 73 58 76 68 30 50 Gender M F F F M M M M M F M Biopsy #1^ Squamous (L1)† Squamous (RLL lung)† Squamous (RUL lung) Squamous (sacrum) Squamous (R lung) Squamous (adrenal) Squamous (bronchus) Squamous (R lung)† Squamous (L lung) Adenosquamo us (R lung) Adenosquamo us (L lung) Biopsy #1
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Ventana IHC试剂盒已于2013.8全部获得 CFDA批准，用于检测ALK阳性NSCLC
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LDK378 全球III期临床使用Ventana IHC做为伴随诊断方法
LDK378 Versus Chemotherapy in Previously Untreated Patients With ALK Rearranged Non-small Cell Lung Cancer（ NCT01828099）
ALK
ROS/RET
b-raf
K-ras
K-ras
Chemotherapy and PCI
Adeno
4
LCC/NOS
SCC
SCLC
国际各大指南（CAP/IASLC/AMP、NCCN、ATLAS、ESMO 指南）均给予晚期NSCLC分子病理诊断与组织病理同等重要的 地位 含腺癌成分必须检测EGFR & ALK 鳞癌小标本推荐检测EGFR & ALK
ALK阳性 NSCLC年龄50岁左右 偏年轻
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ALK阳性NSCLC命名的由来
2010, Kwak EL:
证实克唑替尼治疗有效， 但仍沿用EML4-ALK阳性 非小细胞肺癌的称谓
2007, Soda & Mano
首次发现EML4-ALK基因
2009, Alice T. Shaw
Soda M, et al. Nature 2007; 448(7153):561-566. Shaw AT, et al. J Clin Oncol 2009; 27:4247-4253. Kwak EL, et al. N Engl J Med 2010; 363:1693-1703. 10
Ventana IHC(2)
Ventana IHC(3) Ventana IHC(4)
阳性
阴性 阳性 阴性 阳性 阴性
32
0 40 4 18 2
0
217 2 53 0 503
32
217 42 57 18 505
100%
91% 90%
100%
96% 100%
100%
94% 99.60%
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(1)Jinghui Wang,et al. PLoS ONE 2014 9(7): e101551 (2) Eugen C. Minca,et al. J Mol Diagn 2013, 15: 341-346 (3) Murry W. Wynes,et al. J Thorac Oncol. 2014;9: 631–638 (4) Greta,et al. Arch Pathol Lab Med. doi: 10.5858/arpa.2013-0388-OA
Mutation
Biopsy #2^ Adenosquamous (LLL lung) Adenocarcinoma (RLL lung) Adenosquamous (LLL lung)† Adenocarcinoma (pleural fluid) Adenocarcinoma (SC LN) Adenocarcinoma (SC LN) Squamous (T8) Adenocarcinoma (L lung) None None None
348 July 2013 June 2018
the Ventana