重离子注入法诱变维生素B_(12)高产菌株
新型物理诱变方法及其在微生物诱变育种中的应用进展
新型物理诱变方法及其在微生物诱变育种中的应用进展陈义光;李铭刚;徐丽华;刘祝祥;夏振远;文孟良【摘要】综述了新型物理诱变方法离子注入(Ion Implantantion)、激光(Laser)和微波(Microwave)的生物学效应及其近年来在微生物诱变育种中的研究与应用.【期刊名称】《长江大学学报（自然版）理工卷》【年(卷),期】2005(002)005【总页数】3页(P46-48)【关键词】微生物诱变育种;物理诱变方法;离子注入;激光;微波【作者】陈义光;李铭刚;徐丽华;刘祝祥;夏振远;文孟良【作者单位】云南省微生物研究所,教育部微生物资源重点实验室(云南大学),云南,昆明,650091;吉首大学生物资源与环境科学学院,湖南,吉首,416000;云南省微生物研究所,教育部微生物资源重点实验室(云南大学),云南,昆明,650091;云南省微生物研究所,教育部微生物资源重点实验室(云南大学),云南,昆明,650091;云南省微生物研究所,教育部微生物资源重点实验室(云南大学),云南,昆明,650091;吉首大学生物资源与环境科学学院,湖南,吉首,416000;云南省烟草科学研究院玉溪农业研究所,云南,玉溪,653100;云南省微生物研究所,教育部微生物资源重点实验室(云南大学),云南,昆明,650091【正文语种】中文【中图分类】Q6-33;Q937以人工诱发基因突变为基础的诱变育种具有速度快、收效大、方法简单等优点，它是菌种选育的一个重要途径，在发酵工业菌种选育上具有卓越的成就，迄今为止国内外发酵工业中所使用的生产菌种绝大部分是人工诱变选育出来的。
近年来，虽然随着代谢控制理论、基因工程技术、蛋白质点突变技术等生物技术的发展，代谢控制育种、杂交育种，特别是基因工程育种在微生物育种工作中发挥着越来越大的作用[1～3]，但是，传统的(“经典的”)诱变育种仍是大多数工业微生物育种最重要、最有效的技术[4～6]。
离子注入
论文摘要: 离子束生物技术是一种新的生物诱变技术,它是通过将（略）入生物体内,来研究其生物效应和作用机理,并将其应用于诱变育种和基因工程等方面.经过二十余年的探索研究,人们对其生物学效应和作用机理有了一定的认识,并在应用方面取得了良好的成果.本文主要研究山核桃属植物及伞形树低（略）i离子注入的诱变效应. 采用四种不同的方法对山核桃属植物种子进行预处理,从中选出可行的方法进行离子注入.结果表明:山核桃种子由于颗粒较大、含水量较多等原因（略）发芽率极低. 分别采用N和Ti两种离子对伞形树种子进行离子注入,能量为30kev,束流为10mA,真空度为10-3Pa,每21s注入一次,每次注入3s,剂量分别为:0、200×1014ion/cm2、400×1014ion/cm2、600×1014ion/cm2、800×1014ion/cm21000×1014ion/c（略）0×1014ion/cm2,然后进行发芽试验,并对其生理生化指标进行测定.结果表明: 1.两种离子注入后,种子发（略）呈“马鞍型”存活曲线,发芽势、发芽率与注入剂量之间均呈现极显著相关,低剂量(200×1014ion/...Ion beam bioengineering te（omitted）as been considered as a new meth（omitted）ation breeding. With （omitted）ions implanted organisms, the biolog（omitted）ts and the function mechanisms of the technology were investigated by some researchers, and the technology has been used into genetics breeding and gene engineering. The researchers have observed some biological effects and revealed some basic mechanisms for the past twenty years, and the great development and application have been （omitted）In this pape...目录:摘要第4-6页ABSTRACT 第6-7页1 绪言第10-23页·离子束的特点第10-11页·离子注入的诱变机理第11-12页·能量沉积效应第11页·质量沉积效应第11-12页·电荷交换效应第12页·离子注入的生物学效应第12-15页·离子注入对生物体存活率的影响第12-13页·离子注入对细胞、染色体结构的影响第13页·离子注入对生物分子的影响第13-15页·离子注入与传统辐射诱变效应的比较第15-16页·国内、外研究进展状况第16-17页·离子注入诱变育种的应用现状第17-22页·植物第17-20页·微生物第20页·基因第20-22页·前景第22页·研究的目的意义第22-23页2 山核桃属植物离子注入诱变技术的研究第23-28页·试验材料第23页·试验方法第23-24页·种子预处理第23-24页·离子注入处理第24页·发芽试验第24页·结果与分析第24-27页·处理方法的选取第24-25页·发芽结果分析第25-27页·结论与讨论第27-28页·结论第27页·讨论第27-28页3 金合欢属植物离子注入诱变技术的研究第28-51页·试验材料第28页·试验方法第28-34页·试验材料处理第28页·发芽试验第28页·DH含量的测定第28-29页·CAT活性的测定第29-30页·POD活性的测定第30-31页·游离有机酸含量的测定第31-32页·叶绿素含量的测定第32-34页·试验结果与分析第34-49页·离子注入对种子发芽势、发芽率的影响第34-35页·离子注入对DH含量的影响第35-36页·离子注入对CA T活性的影响第36-37页·离子注入对POD活性的影响第37页·离子注入对游离有机酸含量的影响第37-38页·离子注入对叶绿素含量的影响第38-40页·N离子注入后各指标间相关性第40-44页·Ti离子注入后各指标间相关性第44-49页·结论与讨论第49-51页·结论第49-50页·讨论第50-51页4. 创新点第51-52页参考文献第52-62页附图第62-63页附表第63-64页致谢第64页本论文转载于论文天下：/product.sf.4101435.1/低能离子注入大肠杆菌的诱变选育及培养优化本论文转载于论文天下：/product.sf.3502326.1/低能离子注入大肠杆菌的诱变选育及培养优化本论文转载于论文天下：/product.sf.3502326.1/论文摘要: 离子束生物技术是一种新型的诱变技术,它是通过将低能重离子注入生物体内,来研究其生物学效应和作用机理,并将它用于遗传育种和基（略）的一种综合技术.经过近十年的研究,人们对它的生物学效应和作用机理有了初步的认识,但还没有掌握低能离子注入生物体的作用规律,特别是利用金属离子对微生物进行诱变还没有报道.本课题选择苯丙氨酸生产（略）杆菌进行低能离子处理,观察和统计了离子注入大肠杆菌所引起的生物学效应,旨在为进一步探索低能离子与生物体相互作用规律的研究打下基础,（略）高产菌株来进一步提高苯丙氨酸的产量. 本课题实验主要从如下几个方面展开:首先,对实验室保藏菌株进行复壮、培养,选定酶活高,生长速度快,培养条件粗放的菌株,作为诱变筛选的出发菌株. 然后,重点讨论氮离子注入诱（略）生物学效应.利用不同能量、剂量的氮离子处理大肠杆菌,通过绘制存活率曲线比较不同能量、剂量注入下大肠杆菌的存活率,找出最佳的注入能量和剂量.在该能量剂量下对菌株进行反复诱变,摸索低能离子与大肠杆菌的相互作用规律,统计变（略）进行大量的筛选工作,在经过遗传稳定实验后,最终得到一株比出发菌株摇床...Low-energy ion im（omitted）has been considered as new kind of mutation breeding and foreign （omitted）ery techniques. By the means of implantin（omitted）gy ions into organisms, the biological effects and the function mechanisms of the techni（omitted）nvestigated by some researchers. Although the researchers have observed some biological effects and reveals some basic me（omitted）ince past the decade, they do not master the roles of low-energy ion implantation, and the studies on the law of inheritance in t...目录:摘要第4-6页ABSTRACT 第6页第1章文献综述第12-23页·离子束生物技术与应用进展第12-17页·离子注入与生物体相互作用第12-15页·离子注入微生物诱变育种的应用现状第15-16页·离子注入微生物诱变育种的市场前景第16-17页·L-苯丙氨酸的研究现状和发展趋势第17-22页·L-苯丙氨酸的性质和用途第17-18页·L-苯丙氨酸的制备方法第18-20页·L-苯丙氨酸的市场分析第20-22页·本论文的研究目的和意义第22-23页第2章材料与方法第23-31页·材料第23-24页·菌种第23页·主要仪器第23页·主要试剂第23-24页·培养基第24页·实验方法第24-31页·苯丙酮酸浓度的测定方法第24-25页·苯丙氨酸浓度的测定方法——高效液相色谱法第25页·底物的制备方法第25页·天冬氨酸转氨酶酶活的测定方法第25-26页·转化实验第26页·出发菌株的筛分方法第26页·氮离子注入诱变方法第26-28页·金属离子注入诱变方法第28页·摇瓶条件下对高产菌株的培养及转化条件的优化第28-29页·L 发酵罐上培养条件的优化第29-31页第3章N~+离子注入对苯丙氨酸生产菌株的诱变选育第31-39页·前言第31页·出发菌株的筛分第31-32页·出发菌株稳定性的考察第32页·氮离子注入诱变育种第32-38页·氮离子注入诱变存活率曲线第32-34页·N~+离子注入对菌体突变率的影响第34-36页·N~+离子注入诱变筛选第36-37页·突变菌株遗传稳定性考察第37-38页·小结第38-39页第4章金属离子注入对苯丙氨酸生产菌株的诱变选育第39-50页·前言第39页·金属钛离子注入诱变第39-44页·金属钛离子注入诱变存活率曲线第39-40页·金属钛离子注入对酶活的影响第40-41页·氮离子注入、钛离子注入诱变对菌体突变率的影响比较第41-42页·金属钛离子注入诱变菌株转化实验结果第42-43页·考察高产菌株的遗传稳定性第43-44页·碳、铁、锌、银离子注入诱变第44-49页·碳、铁、锌、银离子注入诱变存活率曲线第44-46页·碳、铁、锌、银注入大肠杆菌对酶活的影响第46-47页·碳、铁、锌、银离子注入对突变率影响的比较第47-48页·金属离子注入诱变菌株转化实验结果第48页·考察高产菌株的遗传稳定性第48-49页·小结第49-50页第5章培养及转化条件的优化第50-57页·前言第50页·培养条件的优化第50-54页·装液量(溶氧)对酶活的影响第50页·转速对酶活的影响第50-51页·接种量对酶活的影响第51-52页·pH 值对酶活的影响第52页·温度对酶活的影响第52-54页·转化条件的优化第54-56页·转化转速与产率的关系第54页·转化时间与产率的关系第54-55页·转化pH 值与产率的关系第55-56页·转化温度与产率的关系第56页·小结第56-57页第6章发酵罐培养条件的优化第57-64页·前言第57页·发酵罐培养条件的优化第57-63页·发酵罐上高产菌株生产曲线、酶活曲线的绘制第57-58页·溶氧对酶活的影响第58-60页·pH 值对菌体高密度培养的影响第60-61页·培养温度对酶活的影响第61-62页·小结第63-64页第7章结论与展望第64-66页·结论第64-65页·展望第65-66页参考文献第66-71页成果第71-72页致谢第72页本论文转载于论文天下：/product.sf.3502326.1/低能离子注入食药用真菌生物效应的研究全文提供：购买充值卡，就可下载本篇论文全文论文编号：3607975【收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿】英文名称：Study on Biological Effects of Edible and Medical Fungi by Low-Energy Ion Implantation学位类型：硕士毕业论文作者：涉及隐私，隐去***作者本人请参看权力声明>>导师：涉及隐私，隐去***毕业学校：涉及隐私，隐去***专业：化学工艺毕业年份：涉及隐私，隐去***关键字：离子注入诱变筛选发酵真菌多糖简介目录：点击此处免费索取本论文简介和目录>>全文提供：购买充值卡，就可下载本篇论文全文论文发表：快速、低价、包过！发表论文就找论文天下！论文摘要: 将离子束应用于食药用真菌的育种以提高（略）微生物诱变育种的新方法.本研究进行了低能离子注入食药用真菌和新疆阿魏菇的诱变筛选的研究,拓展了离子注入技术在食品微生物和工业微生物中的研究与应用范围,同时对提高食药用真菌多糖的含量具有重要的意义. 在确定（略）线、育种路线和筛选路线后,进行了大量的研究工作.通过多批次的离子注入实验,观察了注入离子对细胞的刻蚀情况,确定了提高阿魏菇阿魏多糖含量的最佳注入剂量.在注入过程中,进行了保护剂的选择.为了提高（略）和效率,根据育种思路确定了最佳培养基的配方. 本研究证明,离子注入食药用菌对其多糖含量的提高具有明显的效果.在本研究中,获得了阿魏多糖高产菌株2a-3,发酵周期为4d,其胞内多糖和胞外多糖含量分别较对照菌株提高了20.33%和18.53%,取得了阶段性的成果（略）行真菌多糖的研究和开发奠定了基础.It is a new method which increase polysaccharide content of the edible and medical（omitted）ion implantation . This paper shows that the mutagenic breeding of the edible and medical fungi and Xinj（omitted）ae mushroom by N+ ion implantation,（omitted）en the application range of ion beam bioengineering i（omitted）le microbe and the industrial microbe , moreover, the study will be significant for increasing fungus polysaccharides content. Lots of studies （omitted）, after the fermentation technical proce...目录:第1章绪论第6-18页·离子束生物工程学的发展第6-13页·离子束生物工程学第6-7页·低能离子束注入对生物体的作用机理第7-9页·低能离子对生物诱变的基本原理第9-10页·离子束生物工程学的应用进展第10-13页·真菌多糖的研究概况第13-16页·国内真菌多糖结构的研究现状第13-14页·真菌多糖的生物活性的研究现状第14-16页·本文研究的目的和内容第16-18页·目的第16页·内容第16-18页第2章实验装置、材料及方法第18-26页·离子注入机装置简介第18-20页·装置基本情况第18页·离子源第18-19页·靶室和真空系统第19页·注入剂量和剂量率第19页·本装置的基本技术参数第19-20页·实验材料及仪器第20-21页·菌种来源第20页·培养基配方第20页·主要试剂第20-21页·其它实验仪器第21页·产物的检测方法第21-26页·发酵液中多糖的提取与测定第21-23页·多糖含量测定的方法--苯酚-硫酸法第23-24页·原理第23页·试剂第23页·绘制标准曲线第23-24页·,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法第24-26页第3章离子束注入食药用真菌及阿魏菇多糖高产菌株的筛选的研究第26-38页·注入前准备第26-27页·通过估算,需做如下准备第26页·阿魏菇、香菇和猴头菇孢子的收集第26-27页·准备注入第27页·离子注入剂量与存活率的关系第27-29页·离子注入对细胞的刻蚀作用第29-31页·育种程序以及筛选方法的研究第31-33页·传代第33页·液体发酵第33-38页·发酵时间对发酵物鲜重与胞外多糖与胞内多糖的影响第34-38页第4章注入时保护剂的选择与发酵时发酵液的变化第38-40页·保护剂的选择第38-39页·发酵过程中发酵液及菌丝球的变化第39-40页第5章结论与展望第40-42页附录I 图片第42-45页附录II 发表论文目录第45-46页附录III 参考文献第46-50页附录IV 致谢第50页购买充值卡，就可下载本篇论文全文本类相关论文：·CXJZ95-198菌株分泌果胶酶和半纤维素酶·从噬菌体肽库中筛选淀粉酶亲和配基的研究·一株高活力纤维素分解菌的筛选及酶学性质研究·蜡样芽孢杆菌核黄素操纵子的克隆与在枯草芽孢杆菌·高等职业教育化工工艺专业的教学改革与实践·酵母粉的作用及氮源对Bacillus subt·一株苝醌类光敏剂产生菌的rRNA基因ITS测序·文昌红树林微生物细胞毒活性物质的筛选·天冬氨酸转氨酶分离纯化及其性质研究·低能离子注入大肠杆菌诱变选育的研究离子注入论文：诱变筛选论文：·稀土超磁致伸缩材料表面离子注入渗氮改性机理研究·Cu离子注入A304不锈钢抗菌性能研究·离子束技术制备聚酰亚胺基体铜膜与钛/铜膜的性能·离子注入和退火对非故意掺杂4H-SiC中本征缺·漆酶高产菌选育及竹材木质素降解研究·秸秆降解菌的诱变筛选及降解效果研究·低能氮离子束诱变筛选盐霉素产生菌的技术研究·一株植物乳酸杆菌LABR-X产细菌素的研究·等离子体诱变筛选降解高浓度对苯二酚的突变株及其·1.报告基因法筛选克拉维酸高产菌2.报告基因发酵论文：真菌本论文转载于论文天下：/product.sf.3607975.1/。
N +注入诱变选育β-葡萄糖苷酶高产菌株及其产酶条件的优化
Ｄ葡萄糖苷酶 （．ｌ ｏｉ ｓ，Ｅ ３ ．２ ）主要催化水解含有ｐ葡萄糖苷键的化合物， ． ｐ ｕ ｓ ａｅ Ｃ ． １ １ ｇｃ ｄ ２． ． 使非还原性ＤＤ 葡萄糖残基及其末端断裂 ，同时释放 出ｐＤ葡萄糖和相应的配基 ， ．． －－ 如芳香基 和羟基等【。在纤维素水解的过程 中，ｐ葡萄糖苷酶能够水解低分子质量的纤维糊精和纤维 ¨ ．
注入后的平皿用无菌水洗脱，制成孢子悬液，适度稀释后均匀涂布在筛选平板上 ，３ ０
℃培养 ４ ～５天 ，ｐＮ Ｇ被酶解 后会 产生 对硝基 苯酚 ，喷洒 ｌ ｌ ２Ｏ３ 显淡黄 色 。挑 －Ｐ ／ ＮａＣ 后 ｍｏ Ｌ
木糖渣是玉米芯深加工生产木糖工业 中产生的废渣 ，经过测定，纤维素质量分数可达
５％以上 。本研究 以筛选得到能够有效利用木糖渣作为碳源生产Ｂ葡萄糖苷酶的菌株为 目 ０ － 的，利用 Ｎ 注入棘孢 曲霉 （ ｓｅ ｉｕ ｃ ｌ ｔ ）Ｌ ２ Ａ ｐ ｒ ｌｓａｕ ａ ｓ ２ ，筛选得到一株Ｄ葡萄糖苷酶活显著 ｇｌ ｅｕ －
１ 培养 基 ． ３
１ ． 斜面培养基 ．１ ３
麦 麸浸汁 １％，琼脂 ２ ０ ％， 自然 ｐ Ｈ。
１ － 平板初筛培养基 ．２ ３
麦 麸浸汁 １％， ０ 琼脂 ２ 自然 ｐ 灭菌冷 却至 ５ ＂ 加入 ０ ％去氧胆 酸钠 ，． － Ｇ。 ％， Ｈ， ０ Ｃ， ． ２ ０１ ＮＰ ％ｐ
木糖渣 ，山东龙力集团提供 ，因前期工艺不同分为三类 ：稀酸水解玉米芯残余的废渣 ，
简称为酸解木糖渣；木聚糖酶酶解玉米芯残余的废渣 ， 简称为酶解木糖渣； 用玉米芯酸法水
解 生产糠 醛残 余 的废渣 ，简称 为 糠醛 渣 。
收稿 日期：２ ０ ．３０ ０ ８０ ．４ ｛通讯作 者 作者简介：沈 加成 （ ９ ２ ，男，硕士研 究生：主要从事 资源 与环境微 生物学方面的研 究。 １ ８～）
N +注入诱变选育氨肽酶高产菌株及发酵条件初步优化
逐 步 筛选 高酶 活菌 株 ； 高酶 活菌 株进 一步 分离 ， 培养 ，
再通 过发 酵测定 ， 筛选 目标 高产 菌 ｌ 。 ６ Ｊ １ ４ 发 酵条 件 的初 步 优化 ． 在原 有发 酵 培养基 基 础上 ， 一步 优化 碳源 和氮 进 源配 方 ， 定 最 佳 浓 度 、 适 的 碳 氮 比 、 始 ｐ 条 确 合 初 Ｈ
泛应用 于调 味 品和 干 酪 的 生产 、 白水 解 液 的脱苦 、 蛋
７ ２ ｈ。
发 酵培 养 ：３ ±１ ℃ ，２ ／ ｉ 床 振 荡 培 养 （ １ ） ２ ０ ｒｒ ｎ摇 ａ
６ ４ ｈ。
蛋 白质深度 水解 和 多 肽 的 制 备 等方 面 … 。 随着 食 品
工业 的发 展 ， 肽 酶 的应 用 呈 现 出 愈 来 愈 广 阔 的 前 氨
斜 面培养 基 （ ／ ） 麦 汁 培养 基 ， ～６ 麦 汁 ， ｇＬ ： ５ 。
琼脂 粉 １ ７ ｐ ６ ０ ．， Ｈ ．。 种 子培养 基 ： 皮 ： ：ｌ １ 麸 水 ：。 发 酵培 养 基 （ ／ ：玉米 浆 ３ ，麸 皮 ６ ，Ｍｇ ｇ Ｌ） ０ ０ —
Ｓ ・ Ｈ２ ０． Ｏｄ ７ Ｏ ５，ＫＨ２ ０４１ ０，Ｃ Ｃ ２１ ０，ｐ ． 。 Ｐ ，０． ａ １ ． Ｈ６ ８
） ０ ．， ｗ丁５１本实验室保藏 。
米 曲霉 （ ｐｒｉｕ Ａｓ ｇｌ ｓ ｅ ｌ ０
１ 、０ｓ４ 、 ０ｓ８ 不 同时 间作 注 入处 理 － ， ０ｓ２ 、０ｓ ６ 、０ｓ ５ 靶 ｊ
室真 空 度 为 ｌ Ｐ 。取 出 平 皿 ， ５ｍＬ无 菌 水 洗 ０ ａ 以 脱 ， 释涂 布分 离平 皿 ， （ １ ） 培养 ７ 。 稀 于 ３ ±１ ℃ ２ｈ ｌ ３ ３ 高产 菌株 的 筛选 ， ． 从 分 离平皿 中挑 选 生长 状态 良好 、 解 圈相对 较 水 大的单 菌落 ， 别接 斜 面 培养 基 再 培 养 ， 接 二 代 后 分 转 接种 子培养 基 ， 接种 于发 酵摇 瓶 ， 再 经几 轮发 酵测 定 ，
离子注入生物学在D110菌诱变育种中的应用研究初报
ｉ ３ ２ 样 品 制 喜
出发菌一级种子种龄 ８ Ｏ 镜检健壮且无杂菌 ． 释度达 １ ～， ￣ｌｈ， 稀 ０ 准确吸取 ０ ｌ ， ｍｌ均匀埭布于 ９ｍ 无菌培养皿上 ， ｃ 无菌 风风干
苗种 退 化导致 发酵 产酸率下降至 ６ ～６ ５ ， ． 生产不稳定 ， 生产周期延 长。因此 ， 了提高 ＧＡ ， 为 我们采用离子注 八来进行各氨 致茁件的育 种研 究， 从而筛选出高产酸率菌株。同时 ， 本课题的开展秆进行将为备氨酸高产酸菌株的 筛选 搛究出一种垒新的具有较
高 翌 并 效 益 的方 法
隶Ｊ 于生物技术 是国际公认的拥有 自ｊ 知 １产权妁 究成果 。 尘 三 只 离子束注＾作为新的诱变洱表现 出损伤轻、 突变谱宽、 突变率高
‘ 容易 控 制 等特 点 ｌ ， 此 具 有 良好 的应 用前 景 。 筵整 ［因 ］ 新 疆 是 国家 糖 料 基 地 此 甜 菜 糖 蜜 资 源 较 为 丰 富 石 河 子 味 精 厂 的 天 山 牌 味 精 作 为 知 名 严 品有 较 强 的 竞 争 力 。但 是 由 于 Ｄｍ 因
ｌ 试 验 材 料 和方 法
ｌ１ 菌种 各氡酸产生茁 Ｄ． 新疆石河子味精ｒ提供 ） ｎ （ ＝ １２ 培养 基 完 全 培 券 基 ， 殖 培 养 基 ， 筛 培 养 基 ， Ｇ 梯 度 培 养 基 ， ＧＡ 梯 度 培 养 基 ， 唯 一 Ｃ、 源 培 养 基 ， 离 培 养 基 ， 级 种 子 培 增 初 ＨＲ Ｈ ＧＡ Ｎ 分 一
关 键 词 离 子 注 人 生 物 学
咎氨酸
诱 变ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ种
N +和Ti +离子注入井冈霉素生产菌诱变筛选高产菌株的研究
１ ． 初 筛 据文 献报 道 ，形态 为 中心吸水 状 的单 ．１ ４ 菌落发酵生产抗生素水平比其它形态 的高［。本实 ５ 】
１ 材 料 与方 法
１１ 菌种 ． 吸 水 链 霉 菌 井 冈 变 种 （ｔｐｏ ｃｓｈｇｏｃ— Ｓｒ ｔｍｙｅ ｙ ｒｓｕ ｅ ｐｃｓ ａ．ｉｇ ａｇ ｅｓ ｅ．，本 实 验室保 藏 。 ｉ ｒＪｎｇ ｎｇｎｉＹ ｎ） ｕｖ ｓ
方法 得到 的突变菌 株 。菌 种对 这些诱 变手 段 产生 了
固体培养基（・－ ：葡萄糖 １ 、Ｌ 天冬酰胺 ｇ Ｌ） ０ 一 ０５ ２Ｐ ４ ．、琼 脂 １ 、ｐ 自然 。 ．、ＫＨ Ｏ ０５ ５ Ｈ 摇瓶发酵培养基（・－： ｇ 大米粉 ９ 、 Ｌ） ０ 黄豆粉 ２ 、 ０ 花 生粉 １、酵 母粉 １ 、 －Ｐ ４ ．５ Ｎａ １ ．、ｐ ０ ０ ＫＩ Ｏ ０８ 、 Ｃ ５ Ｈ Ｉ ２ １
色 ，低毒 对人 畜无 害的生物 农药 ，井 冈霉素 的应 用
１ 培 养基 ． ２
价值越来越得到认可 。 目 前我国井冈霉素的生产企业多达 ３ 多家 ， ０ 产 品严重供过于求 ，售价逐年下降 ，竞争十分激烈。 井冈霉素生产厂家所用的井冈霉素生产菌株几乎都 是经过紫外诱变【 】 微波诱变 、６ ｏ辐射诱变等 ５、 ’ ６ Ｏ Ｃ
将实验室保存的吸水链霉菌井冈变种的孢子悬 液以不同的稀释度在平板培养基上进行涂布分散 ， ３ ￣培养三 四天 ，挑选形态 圆整的单菌落至斜面培 ８ Ｃ 养二三天 ，接种至发酵培养基中培养 ９～９ ，测 ２ ６ ｈ 定井冈霉素 Ａ的效价。 摇瓶装液量为 ４ Ｌ， ０ ｎ 接种 ｒ
量为一环孢子， 培养温度 ３ ￣ ， ８Ｃ 摇床转速 ２０ ／ ｉ。 ２ ｍ ｎ ｒ
Ｎ＋ Ｔｉ离 子 注 入 井 冈 霉 素 和 ＋
等离子体注入诱变选育细菌纤维素高产菌株
Ａ ｓ ａｔＴ ｅ ａｔ ａｃｌｌｓ （ Ｃ－ｒｄ ｃ ｇｓａ （ ｌｃｎｃｔ ａｔ ｌ ｕ ， ） ａ ｔ ｅｉ ｄｗｔ ｌ ｍａｏ ｌ ｔ ｉ ， ｂｔ ｃ： ｈ ｃ ｒ ｌｅｕｏｅ Ｂ ） ｏｕｉ ｒｉ Ｇ ｕｏ ａｅ ｂ ｃ ｒ ｙｉ ｍ Ｇｘ ｗ ｓ ａ ｎｚ ｉ ｐａ ｎｉ ａ ａ ｏ ｒ ｂ ｅ ｌ ｉ ｐ ｎ ｔｎ ｏ ｅｘ ｎ ｍｕ ｇ ｅ ｈ ｓ ｉ ｍｐ ｎ ｔ ｎ ｎ ｔ ｍ ｔ ｓ ｆｔ ｉ ａｄ ｅ ｕａｔｏ ｓａ Ｘ ｎｍｅ Ｘ ５ ａ ｏ ｔｎｄ Ｔ ｅ Ｃｐｏｕｔ ｎ ｙＧ －（． ２／） ａ ｏ ｔ ． １一 ｌｈｇｅ ｔ ｔａｏ ｔｅ ｈ ｎ ｒ ｎＧ ， ａ ｌ ｙＧ 一， ｓ ｂａ ｅ ． ｈ Ｂ ｒｄｃ ｏ ｂ Ｘ ５４ｔ ｇＬ Ｗ ａ ｕ １ ３９ｆ ｄ ｉ ｒ ａ ｈｔ ｆ ｗ ｉ ｉ ６ ｓ ｂ ８ ｏ ｈ ｈ ｎ ｈ
ｏ ｇ ｎ ｌ ｔａ ． ｉ ｒ ｉ ａ ｒ ｉ ｓ ｎ Ｋ ｅ ｏ ｄ ： ｃｅ ｉｌ ｅｌ ｏ ｅ ｌｃ ｎ ｅｏ ａ ｔｒｘ ｉ ｍ； ａ ｍ ａ ｙｗ ｒ ｓ ｂａ ｔｒａ ｌ ｓ ；ｇｕ ｏ ａｃ ｔ ｂ ｃｅ ｙｌ ｃ ｕｌ ｎｕ ｐｌｓ
１８ 年 Ｂ ｏ ｎ 发 现 木 醋 杆 菌 （ ｃ ｔ ａ ｔ ８６ ｒｗ Ａ ｅ ｂｃ ｒ ｏ ｅ
好 的诱变效果 以及细菌纤维素产量低的 问题，采用等
离子体注入诱变的方法对菌体进行诱变 ，探 讨合适 的 筛选方法 ，筛选高产细菌纤维素的突变株。
１ 材料与方法 １ 菌种 ． １ 木 葡糖 酸 醋杆 菌 （ ｌ ｏ ａｅ ｂ ｃ ｒｘ ｌ ｕ Ｇｕ ｎ ｃｔ ａ ｔ ｙｉ ｍ） ｃ ｏ ｅ ｎ
葡萄糖 ２ ，酵母粉 ７５ ５ ．，蛋 白胨 １ ，ＮａＩ Ｏ ０ ２Ｉ ４ － Ｐ
离子注入选育高产壮观链霉菌的研究
１ １２ 培 养 基 成 分 ． ．
美国 Ｃ ＤＣ指 定 的作 为 治 疗 耐 药 淋球 菌 的最 佳 药 物 。 壮 观 霉 素 对 我 国 目前 流 行 的 淋 病 奈 瑟 氏菌 分 离 株 仍
霉素的产量具有重要 的社会及经济价值 。
由 于壮 观 霉 素 具 有 重 要 的应 用 价 值 ， 实 验 拟 本 通 过 离 子 注 入 ， 育 出稳 定 遗 传 的 高 产 菌 株 ， 高 壮 选 提
观 链 霉 菌 发 酵 生 产 盐 酸 壮 观 霉 素 的水 平 ， 达 到 用 以
于 工 业 化 生 产 ， 高 产 量 ， 低 成 本 的 目的 。 提 降
不 同 ， 壮 观 霉 素 淋 病 奈 瑟 氏 菌 一 般 对 其 它 抗 生 素 耐 仍 敏 感 。 因此 ， 于壮 观 链 霉 菌 进 行 选 育 ， 高 壮 观 对 提
（ ｔ ｏ ｔｅ ｔｃｎ ， 在 １ ６ Ａｃｉ ｓｒ ｐａ ｉ） 是 ｎ ９ １年 由 Ｍａ ｏ ｓ ｎ等 从 壮 观 链 霉 菌 （ ｅ ｔ ｏ ｙ ｅ ｐ ｃａ ｉｓ 发 酵 液 中分 离 ５ ｐ ｉ ｍ ｃｓ ｅｔｂｌ ） ｎ ｓ ｉ 出的一种广谱抗菌素 。 国医学科学 院于 １７ 中 ９ ２年 从 杭 州 土壤 中分 离 到 壮 观 链 霉 菌 １ ４ ， 对 其 产 生 的 ０３并 壮 观 放 线 菌 素 进 行 鉴 定 ， 明 和 国外 报 道 的 抗 生 素 证 Ｍ 一４ １ １是 同 种 抗 生 素 口ｅ。壮 观霉 素 属 于 氨 基 糖 苷 ． ｌ 类 广 谱 抗 生 素 ， 革 兰 式 阳 性 菌 及 革 兰 式 阴 性 菌 均 对
甲醇下游产品项目简介
甲醇(jiǎ chún)下游产品项目简介甲醇下游产品项目(xiàngmù)简介甲醇下游产品项目(xiàngmù)简介近年来，煤化工行业装备、技术大型化日渐成熟，以(CO、H2)为原料生产的基础化工原料甲醇国内外产量激增，造成甲醇价格下挫，各地甲醇企业开工负荷不足，带来了下游产品的开发要求(yāoqiú)，衍生的甲醇制甲醛、甲醇制烯烃、甲醇制冰醋酸、二甲醚、醇醚燃料以及这些为原料衍生的下游产品成为甲醇企业的发展目标。
现介绍几种甲醇的下游产品：1、甲醛(jiǎ quán)甲醛作为甲醇的主要下游产品，开发的最早。
随着市场需求量增大(zēnɡ dà)，该产品一直方兴未艾，甲醛主要应用酚醛树脂(fēn quán shù zhī)等工程塑料、粘合剂，以及以甲醛为原料的乌洛托品、多元醇。
以甲醇为原料合成甲醛的方法主要有甲醇氧化脱氢、甲醇单纯氧化和甲醇单纯脱氢。
（1）甲醇氧化脱氢。
常用的工艺路线用精甲醇（粗甲醇）以银为催化剂，由甲醇氧化脱氢生产甲醛，1吨甲醛需0.47吨甲醇。
（2）甲醇单纯氧化。
铁钼法具有反应温度低、催化剂活性和选择性高、寿命长、对毒物不敏感、单耗低、产品浓度高等特点。
但是我国铁钼法无论工艺还是催化剂都依赖从国外引进，严重制约了其在我国的推广应用。
四川金象化工股份有限公司介绍反应温度300-350℃，并且可以生产50%的浓甲醛，催化剂寿命最高可达2年。
（3）目前,甲醇直接脱氢制甲醛的工作重点依然是高效催化剂的开发,也考虑(kǎolǜ)改进化学工艺,尽量缩短反应过程的接触时间,减少副反应发生。
太原(tài yuán)理工大学2007年申请专利，甲醇脱氢制无水甲醛(jiǎ quán)。
将上述制备的催化剂用于甲醇脱氢制无水甲醛，其工艺条件是：反应温度为700℃，；反应(fǎnyìng)压力为常压，甲醇进料浓度为１０％。
维生素b1的生产工艺
维生素b1的生产工艺维生素B1，又称硫胺素，是一种重要的水溶性维生素。
它在人体内参与多种酶的催化作用，对于神经系统和能量代谢有重要作用。
维生素B1的生产工艺主要包括：发酵法、合成法和提取法。
维生素B1的主要生产工艺之一是发酵法。
该方法是利用微生物菌种，在含有碳、氮和其他必需营养物质的培养基中进行发酵生产。
首先，通过筛选得到高产的维生素B1菌株，经过培养和增殖，然后将菌种接种到大规模的发酵罐或发酵罐中。
在发酵过程中，需要控制好培养基的酸碱度、温度、通气量和搅拌速度等参数，以促进菌体生长和产酶。
当发酵达到一定程度后，通过分离、提取和纯化等步骤，得到维生素B1成品。
另一种生产维生素B1的工艺是合成法。
合成法主要通过化学反应合成维生素B1。
首先，通过有机合成化学方法，将合成原料进行反应，合成B1的结构骨架。
然后，通过一系列的化学反应和纯化过程，得到维生素B1的晶体或粉末。
合成法主要适用于规模化生产，但需要进行多步反应和繁琐的纯化过程，成本较高。
此外，还有一种生产维生素B1的工艺是提取法。
提取法主要通过天然物质进行提取得到维生素B1。
首先，选择含有丰富维生素B1的天然原料，例如糠醇、生物质等。
然后，将原料进行预处理和提取，得到含有维生素B1的提取液。
最后，通过浓缩、纯化和结晶等步骤，得到维生素B1成品。
提取法相对于发酵法和合成法，对原料的要求较高，但相对于合成法，提取法的成本较低。
综上所述，维生素B1的生产工艺主要包括发酵法、合成法和提取法。
每种工艺都有其适应的特定情况，选择不同的工艺主要取决于生产规模、成本和原料资源等因素。
随着科学技术的不断发展，维生素B1的生产工艺也在不断改进和创新，以提高生产效率和降低成本。
N +离子注入诱变选育中性蛋白酶高产菌株及发酵条件的研究
基础 发酵 培养基 （ ： ％）豆饼 粉 ３ ５ 薯干 粉 ６５ ．， 、，
麸皮 ５３Ｋ ２ Ｏ ０ ０ ， ａＨ Ｏ ０７ 。 ． ， Ｈ Ｐ ４ ．３Ｎ ｚ Ｐ ４．８
牛奶培养 基 （ ： ％）脱脂奶 粉 １ ， 脂 ２ ０琼 。
在 于低 能离予 注人 生 物 体 时 同时存 在 能量 交 换 、 能
量沉 积 、 量沉 积及 电荷交 换 四大效 应 。 由于 注入 质
离 子的 电荷 数 、 量 数 、 质 能量 和剂 量 的组 合不 同 ， 可
选和存 活率 的计算 。 １４ 突变 株的 筛选 ．
以提供众多的诱变条件 ， 使离子注入诱变具有突变 谱宽 ， 突变率高的特点， 从而可以筛选到符合生产要
－
２ ％， ３℃ －４￣ ～３℃ 变温发酵 ４ ｈ 酶 活力最 高可达 １６ ０ ｍＬ， ０ 以 ２ ０ ０ ２， ９８ ｕ／ 为初始 菌株 的 ２ １ 。 ．倍
关 键词 ： 枯草 芽孢杆 菌 ； 中性蛋 白酶 ； 离子 注入 ； 诱 变选育 中性 蛋 白酶 是一种 能将 大分子 蛋 白质 迅速水 解 成肽类 和部分 游离 氨基酸 的胞外 酶 ， 其最 适作用 ｐ Ｈ 介于 ６０ ． 间 ］ ．～７５之 。作 为一种 生物催 化剂 ， 该
性 宽 ， 广 泛地 应 用于 食 品 、 药 、 被 制 化妆 品 、 涤剂 、 洗
丝纺、 毛皮 软化 等行业 ］ 。
种子培 养基 （ ： 浸 粉 ０ ５ 胰蛋 白胨 ０５ ％）酵母 ．， ．，
葡萄 糖 １ Ｋ Ｐ ４ 、 ５ ＮａＨＰ ４ 、 。 ， Ｈ２ Ｏ ０ ０ ， ２ Ｏ ０ ４
离子注入技术在微生物诱变育种中的研究
１１ 正 突变菌体 的 高效 性 ，
离子 注入 诱 变育 种 的特 点 ， 表
的损伤可能 Ｎ 注 入后 电荷 积 累发挥 了作 用 ， 活 了细胞 的修 复 机 激 制和修复 酶。高剂量 Ｎ 时 ， 细胞损伤 程度大 于其修 复能力 ； 电荷效 应也 由于达 到 了临界 值 ， 而产 生库仑 爆 炸 ， 护屏 障 保 消失 。虽然 ， 上 能解 释其 原 因 ， 具体 的修 复 机制 情 况 理论 但 需进一 步研 究 。“ 马鞍型 ” 活 曲线 充 分地 说 明 了离 子注 入 存 诱变具有 独特的作用 机制 。
增加其抗磨性， 减小磨擦系数， 抗腐蚀等， 继而用于无生命
有机 物使其分子量分 布 和溶 解 度发 生 变化 。 １ ６ 由中科 ９ 年 ８
院等离子体所率先将低能离子束应用于诱变育种（ 余增亮 等） ， … 从此 ， １ 我国将离子束用于作物遗传改 良方面走在 了世
界 的前列 。
１ 离子注入微 生物育种 的特 点
摘要 概述 了离子 注入的特 点、 变机理 、 诱 引起 的生 物学效应 、 与传 统辐射 诱 变效应 异 同以及 近几 年来 离子 注入 技 术在 微 生物 改 良、 选 育优 良工业微 生物 菌株的应 用研 究情况 ， 分析 了今后 离子注入微 生物育种 的发展 趋势 。 关键词 离子 注入 ； 生物诱 变育种 微 中图分 类号 Ｑ ３ 文献标 识码 Ａ ３６ 文章 编号 ０１— ６ ２ｏ）９ Ｏ５４ ０ ５７ ６Ｈ（ｏ７ｏ 一 ２６ — ２
２ 离子 注入微 生物 的方法
明 了其是一 种物理效 应 、 化学效应 ， 化学诱变 、 是集 物理诱变 为一体 的综 合 诱 变 方 法。它 能 够 引起 染 色体 的 畸变 ， 导致 Ｄ Ａ链 碱基 的损伤 、 ＿ ， 而使 遗 传物 质在 基 因水 平或 Ｎ 断裂 ２ 从 Ｊ 分 子水平上 发生改变或缺失 ， 幅提高变 异 的频 率 。特别是 大
工业微生物低能重离子注入应用研究进展
过 Ｎ离子注入之江菌素产生菌 ， 筛选得到高产菌株 ９－ ９其效价 比出发菌提高 ４ ７４ ， 倍多， 并通过 了 ４Ｏ ０ Ｌ 发酵罐 中试 实验 ，结果表 明诱变菌株具备生产能 力， 而且稳定性高。姚建铭等 利用离子束诱变得 到 产量提高了 ４％的利福平霉素菌株 。在发酵实验 ０
方面： １１ 抗 生素产 生茵 的选 育 ．
外报道的 ２ 倍。古绍彬等 采用离子束诱变方法对
米根霉进行改 良， 获得高产 Ｌ 乳酸菌株 Ｐ ３０ ， 一 Ｅ ３３ 产 酸能力较原始菌株提高 ７ ％， ５ 达到 １０ ／ 。 ４ Ｌ ｇ １５ 其他 生物 制 品的 生产 茵 ．
张丽 敏 等【通过 Ｎ注 入 聚唾 酸 生产 菌 株 ， 得 获 高产菌株 ， 其唾液酸产量高达 ３１０ ｇｍ ， ０ ／ Ｌ 比出 ｍ
变效应 。从此揭开了离子束生物工程 的研究序幕。 经过近 ２ 年的发展 ，离子束生物工程 已从基础理 ０ 论 研究 阶 段进 入 到理 论 研 究 与实 际应 用 研 究 相 结
合的阶段。在农作物诱变育种 、 植物转基 因、 生命
起源和进化嘲环境辐射与人类健康等嘲 ， 方面 已取得 了一 系 列 阶段性 成 果 。 同时 ， 工业 微 生 物 的菌 种 在
中图分类号 ： ６ １ 文献标识码 ： 文章编 号：０ ８ １６ （０ ７ ０ － ０ １０ Ｑ９ Ａ １０ － ２ ７ ２ ０ ）２ ０ ０ － ２
２ 世纪 ８ 年代初期 ，材料学开展了利用离子 ０ ０ 注入金属 ， 半导体等材料进行表面改性 ， 掺杂 等研 究并取得重大进展。与此同时 ， 中国科学院等离子 体物理研究所余增亮等 ０ 造性地将低能重离子用 于农作物品种改 良， 并发现 了离子注入对生物的诱
中， 效价最高可达 ６ ０ ／ Ｌ ０ ｎｍ 。 ８ Ｉ
重离子束辐照诱变及高通量筛选金霉素高产菌株
重离子束辐照诱变及高通量筛选金霉素高产菌株韩鹏军;李冰;李书至;刘娟【摘要】应用不同剂量12C+6重离子束对金霉素链霉菌出发菌株B9-34-125进行辐照诱变,并应用96和48孔板高通量筛选金霉素高产菌株.结果表明:当重离子束12C+6离子的辐照剂量为60Gy时,对金霉素链霉菌的诱变效果显著,筛选出5株优势菌株,其中Z-1452菌株摇瓶发酵效价较对照提高14.4％,60m3发酵效价较对照提高5.7％,产量提高了2.6％.【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2018(043)008【总页数】3页(P1031-1033)【关键词】金霉素;重离子束;孔板;高通量筛选;效价检测【作者】韩鹏军;李冰;李书至;刘娟【作者单位】驻马店华中正大有限公司,驻马店463000;驻马店华中正大有限公司,驻马店463000;驻马店华中正大有限公司,驻马店463000;驻马店华中正大有限公司,驻马店463000【正文语种】中文【中图分类】R978金霉素(chorotetracycline, CTC)属于四环素类广谱抗生素，有预防疾病、改善消化代谢、抑制有害微生物，促进有益微生物生长的作用，因此其在医疗、畜牧业和农业上有广泛的用途[1]。
目前，金霉素的生产水平趋于稳定，为了再度提高生产效能，就需加大优势菌株的筛选。
传统的菌种筛选以摇瓶为主，工作量大，效率低。
近年来，随着高通量筛选技术的发展，孔板筛选技术在其他放线菌的筛选中取得了很好的效果[2]，能显著提高筛选效率，为高通量筛选金霉素高产菌株提供了较好的参考。
重离子束诱变育种与传统的辐射法及化学诱变剂相比，具有损伤轻、突变率高、突变谱广、遗传相对稳定、易于获得理想的新菌种等特点[3]，对菌种的选育是较理想的方法。
和传统的杂交育种相比，具有育种周期短、突变易稳定等优点。
近几年，重离子束在生物诱变育种上的应用越来越多[4-6]。
本研究采用不同剂量的12C+6重离子束对金霉素链霉菌进行诱变处理，之后使用96孔板和48孔板对大量突变株进行筛选，最终获得了生产效能稳定的金霉素高产菌株。
离子注入技术
5.1 在发酵工业中的应用
许安等以生产VC的2—酮基—L—古龙酸高 产菌系为出发菌株进行离子注入育种，选 育出了高产菌系：糖酸转化率提高15%一 20%、4代传种平均转化率达95％，并进行 了培养基优化和摇瓶发酵检测，为所选的 IPPM-1028菌系的扩大生产提供了依据 虞龙等利用H+ 、N+ 、Ar+ 三种离子注入VC 发酵菌—巨大芽孢杆菌，确定了最佳的离 子注入剂量，选出了4株改良菌株进行工业 化生产。
单细胞的获取
菌膜法（或干孢法）
取培养活化的菌体种子液或斜面活化的 菌苔进行稀释，一般是10-2—10-3 的稀释度， 菌体浓度为108—109个/ml为宜。 吸取适量的菌体稀释液涂布于无菌的玻 璃片或无菌培养皿上，显微镜检验保证无重 叠细胞，自然干燥或用无菌风吹干形成菌膜； 放入离子注入机的靶室（具有一定的真空度） 进行脉冲注入离子。要有无离子注入的真空 对照和空气对照。
微生物诱变育种 —离子注入技术
CONTENT
引言 离子注入法作用原理 装置与操作步骤 离子注入法特点 方法应用
1. 引言
菌种改良传统的诱变处理方法主要 包括以紫外线(UV)、X射线、γ射线、激 光等作为诱变介质的物理诱变方法；以 碱基类似物(5-BU)、烷化剂甲基磺酸乙 酯(EMS)和吖啶类移码突变剂等为诱变介 质的化学诱变方法；及以噬菌体、转座 子为诱变介质的生物诱变方法。
5. 离子注入的应用
在发酵工业中的应用 在菌源性酶工程中的应用 在抗生素生产中的应用 离子束介导转基因技术在微生物中 的应用
5.1 在发酵工业中的应用
在发酵工业上，以高产菌株为出发菌株进 行诱变，提高发酵产物收率和品质，一直 是工业单位的常用手段。但传统诱变方法 的多次诱变往往导致负突变和抗性饱和。 而离子注入却能打破这一瓶颈，获得以目 标产物为目的的高产、优良菌株。
产恩拉霉素链霉菌的诱变及其发酵条件的优化
产恩拉霉素链霉菌的诱变及其发酵条件的优化丁志雯;胡永红;杨文革;吴刚;顾鹏飞;王春晓【摘要】为满足恩拉霉素工业化生产对高产菌株的需求,采用N+注入技术和单因素及正交试验方法对产恩拉霉素链霉菌(Streptomyces sp.)NJWGY3665进行诱变,并对目的菌株的最佳发酵条件进行优化.结果表明:随N+注入剂量的增加,菌株的存活率呈典型的马鞍型剂量-效应曲线.在最佳注射剂量120×1013 ions/cm2条件下筛选到1株具有遗传稳定性的高产链霉菌突变菌株LD1;该菌株发酵最适培养基条件为蔗糖50 g/L,酵母粉20 g/L,NaC1 1.5 g/L,FeSO40.5 g/L;最佳发酵条件为转速190 r/min,温度28℃,pH 7,接种量8％.在此条件下,发酵液恩拉霉素浓度达11 860μg/mL.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2016(044)007【总页数】5页(P72-76)【关键词】链霉菌;N+诱变;恩拉霉素;发酵条件优化【作者】丁志雯;胡永红;杨文革;吴刚;顾鹏飞;王春晓【作者单位】南京工业大学生物与制药工程学院,江苏南京211816;南京工业大学生物与制药工程学院,江苏南京211816;南京工业大学生物与制药工程学院,江苏南京211816;南京工业大学生物与制药工程学院,江苏南京211816;南京工业大学生物与制药工程学院,江苏南京211816;南京工业大学生物与制药工程学院,江苏南京211816【正文语种】中文【中图分类】S154.39;Q935恩拉霉素（Enramycin）又名恩来霉素、安来霉素、持久霉素，商品名为恩拉鼎，是广谱、高效、安全的多肽类抗生素。
作为饲料添加剂，恩拉霉素具有稳定性好、杀菌作用强、无交叉耐药性和不会引起动物性食品药物残留等优点［1－6］。
20世纪60年代恩拉霉素在日本首次发现后，人们对其理化性质、抗菌活性、分析检测和药理等已进行了研究，同时，人们还就恩拉霉素产生菌以及不同C、N源对其产生菌的影响进行探索［7－9］。
絮凝剂高产菌株的离子注入诱变选育
责任编辑
常俊 香责任校对来自夏 蓉 絮 凝剂 高产 菌 株 的离 子 注 入诱 变 选 育
张东 李培 辉 ， 睿 ， 李宗义 ， 伟 ， 李宗 秦广雍
Ｍ ｕ ａ ｉｎ Ｂｒ ｅ ｉ ｇ ｏ ｏ ｃ ｌ ｎ ｇ Ｐｒ ｄｕ ｉ ｔ ａｎ ｙ Ｉ ｍ ｐ ａ ａ ｉ ｔ ｔｏ ｅ ｄ ｎ ｆＦｌ ｃ ｕ ａ ｔＨｉ ｈ－ ｏ ｃｎｇ Ｓ ｒ ｉ ｂ ｏｎ Ｉ ｌ ｎｔｔｏｎ
Ｚ ＨＡＮＧ Ｄｏ ｇ－ｕ ｔａ （ ｇｏ ａ ｙＬ ｂ ｒｔ ｙｏ ｏ ｅｍ ｉｅ ｇｎ ｅ ｎ ，Ｚ ｅ ｇｈ ｕＵｎｖｒｉ ， ｈ ｎ ｚｏ ，Ｈｅ ａ ５ ０ ２ ｎ ｈ ｉｅ ｌ Ｒｅｉｎ ｌ ａ ｏａｏ ｆ ｎ Ｂ ａ Ｂｏ ｎ ｉｅｒ ｇ ｈ ｎ ｚｏ ｉｅｓ ｙ Ｚ ｅ ｇｈ ｕ Ｋｅ ｒ Ｉ ｉ ｔ ｎ ｎ４ ０ ５ ） Ａ ｓ ａｔ ｆ ｂｅｔ ｅ ｈ ｉ ａ ｔ ｉ ｐｏｅ ｈ ｏ ｃ ｌ ｉ ｔ ｉ ｉ ｏ ｉ ｏ ｃ ａ ｔ Ｍ ｔ ｄ１ ｔ ｆ ｃ ｕ ｎ－ ｏ ｕ ｉ ｒｉ Ｆ ｂｔ ｃ ｉ ｉ ］Ｔ ｅａ ｗ ｓ ｏ ｍ ｒ ｅ ｃｕａ ｎ ａ ｉ ｔ ｏ ｍ ｃ ｂ ｌ ｃｕ ｎ．［ ｅ ｏ ｗｉ ｏ ｅ ｌ ｔ ｒｄ ｃ ｇ ｔ ｎ Ｊ ｒ Ｏ ｅｖ ｍ ｖｔ ｆ ｌ ｔｇ ｃｖ ｙ ｆ ｒ ａ ｆ ｌ ｌ ｈ ｈｌ ａ ｐ ｎ ｓａ
（５ ３％ ） ７ ．４ ．Ｗｈ ｎｉ ｌｎａｉｎｄ ｓ ｆＮ ａ ｅ ｍｐａ ｔｔ ｏｅｏ ｗ ｓ１×１ ｉｎ／ ｍ。 ｈ ｏｉｖ ｔｔ ｎｒｔ ｗ ｓｂｇ ｅ．Ａｔｒｐ ｍａｙｓｒｅ ｉｇｔｓ，１ ３ ｏ ０ ｏ ｓ ｃ ，ｔｅｐ ｓ ｉｅｍｕａｉ ａｅ ａ ｉｇ ｒ ｆ ｒ ｒ ｃｅｎｎ ｔ ９ ｔ ｏ ｅ ｉ ｅ
低能N+离子注入阿维菌素B1a生产菌的诱变选育
低能N+离子注入阿维菌素B1a生产菌的诱变选育
龚文静;娄兴焜;虞龙
【期刊名称】《中国酿造》
【年(卷),期】2016(035)008
【摘要】以阿维菌素生产菌阿维链霉菌为研究对象,通过低能N+离子注入法对阿维链霉菌进行诱变选育.根据其存活率和突变率,确定最佳的诱变条件为:诱变能量为16 keV,诱变剂量为160× 1014 ions/cm2.经过诱变后筛选获得高产突变菌株AVE-10-N102-26.该菌株发酵产阿维菌素B1a含量为3 012 μg/mL,较出发菌株AVE-10提高了25.7％;经多次传代试验结果证明其遗传稳定性较好.
【总页数】4页(P133-136)
【作者】龚文静;娄兴焜;虞龙
【作者单位】扬子江药业集团有限公司质量管理部,江苏泰州225321;扬子江药业集团有限公司质量管理部,江苏泰州225321;南京工业大学生物与制药工程学院,江苏南京211816
【正文语种】中文
【中图分类】Q939.97
【相关文献】
1.低能N+离子注入谷氨酸产生菌诱变选育初步研究 [J], 甄卫军;李茜;张石峰;曾宪贤
2.N+和Ti+离子注入番茄红素生产菌的诱变选育 [J], 佘涛;虞龙
3.低能N+离子注入谷氨酸产生菌诱变选育及其发酵的研究 [J], 甄卫军;李茜;张石峰;曾宪贤;高林;李江
4.低能N+离子注入诱变选育云芝高产抗病菌株的研究 [J], 蒋益;郑惠华;刘广建;全卫丰;薛璟;季宏更;汪洁
5.低能N+离子注入诱变选育金耳多糖高产菌株的研究 [J], 蒋益; 郑惠华; 刘广建; 薛璟; 季宏更; 张蕾
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
Ａｂ ｔ ａ ｔ ｉ ｍｉ ２ ｒｄ ｃｎ ｔ ｉ ０ ９—１ ６ ｗａ ｔｔｄ ｂ ０ Ｇ ｅ ｖ ｏ ｎｏ ｓ ａｎ １ ６ —８ ｏ ａｅ ｓｒ ｃ ：Ｖ ｔ ｎ Ｂ１ ｐ ｏ ｕ ｉ ｇ ｓ ａｎ ２ ０ ａ ｒ ０ ｓ ｍｕａ ｅ ｙ ５ ｙ ｈ ａ ｙ ｉｎ ｉ ｔ ｔ ｉ ０ ｒ ．Ｃ ｍｐ ｒ ｄ ｗ ｔ ｈ ｒ ｉ ａ ｔ ｉ ０ ９—１ ６，ｈ ｅａｉ ｅ ｆ ｓ ｏｅ ｃ ｆｓｒｉ ｌ ６ —８ ｉ ｃ ｅ ｓ ｄ ３ ％ ． Ａ ｔｒ ｏ ｔ ｚ ｔ ｎ ｏ ｉ ｔ ｅ ｏ ｉ ｎ ｌｓｒ ｎ ２ ０ ｈ ｇ ａ ０ ｔ ｅ ｒ ｌｔ ａ ｋ ｐ ｔ ｎ ｙ ｏ ｔ ｎ ０ ｖ ｌ ａ ｎ ｒａ ｅ １ ｆ ｐｉ ａｉ ｆ ｅ ｍｉ ｏ ｆ ｒ ｎ ａｉｎ ｍｅ ｉｍ ，ｉ ｗ ｓ ｕ ｅ ２ ｏ ｓｆｒ ｎ ａｉ ｎ ｃ ｎ，ａ ｄ ｉ ｃｅ ｓ ｄ ｐ ｏ ｕ ｔ ｎ ｏ ｖｏ ｓｙ ｅ ｍｅ ｔｔ ｄｕ ｏ ｔ ａ ｓ ｄ ｉ １ ０ ｔ ｎ ｅ ｍｅ ｔ ｔ ａ ｎ ｏ ｎ ｒ ａ ｅ ｒ ｄ ｃｉ ｂ ｉｕ ｌ ． ｎ ｏ Ｋｅ ｒ ｓ ｉ ｍｉ ；ｈ ａ ｙ ｉｎ ｉ ｌ ｎ ａｉｎ；ｍｕ ａ ｅ ｅ ｉ ；ｂ ｅ ｄ ｎ ；ｈ ｇ ｙ ｗｏ ｄ ：ｖ ｔ ｎ Ｂ ２ ｅ ｖ ｏ ｍｐ ａ ｔｔ ａ １ ｏ ｔｇ ｎ ｓｓ ｒ ｅ ｉ ｇ ｉｈ—ｙｅ ｄ ｓ ａｎ ｉｌ ｔ ｉ ｒ
维生 素 Ｂ 简 称 Ｖ ） 常 称 为钴 维 素 或 钴 （ Ｂ： 通
康人群对维生素类以及添加维生素的营养食 品、 保
健 食 品 的需 求 Ｅ益 增 大 ； 三 是 老 龄 化 社 会 的 到 ｔ 其
胺维素 ， 是一种重要 的生物活性物质 ， 参与有机体 各种代谢反应 ， 在人 体 内它还参 与制造 骨髓 红细 胞 ，Ｂ： Ｖ 可预 防 和 治疗 恶 性 贫 血 ； 防止 大 脑 神 经 遭 受破坏 ， 同时它也是 维持机体 正常生长 的重要 因
［ 收稿 日期］０ １ ０ — ７ ［ ２１ — ８ １ 文献标识码 ］ ［ Ａ 文章编号 ］０ ２ １８ （ １ ）２ ０ ３ ０ ［ １０ — ２０ ２ ２ ０ — ０ ９— ３ 中图分类号］ Ｑ ２ ０ Ｔ ９４
［ 摘
பைடு நூலகம்
要 ］ 维生 素 Ｂ 。 生产 菌 ２ ０ ０ ９—１６株 经 重离子 ５ ｙ诱 变处 理得 １６— ０ ０Ｇ ０ ８株 ， 摇瓶单 位较 出 其
来， 老年人易患 Ｖ Ｂ： 缺乏症 ， 对添加 Ｖ 的医疗保 Ｂ
健 品和食 品 的需 求将 会稳 步增 加 。所 以 ， 通过 各
种途径增加 Ｖ Ｂ 产量才能满足市场需求 ， 本实验对
Ｖ 产生 菌 Ｖ １２０ Ｂ Ｂ２ ０９—１６进行 重离 子 注 入诱 变 ， ０ 挑选 出正 突变 的菌 株 ， 对 培 养基 进 行 优 化 ， 突 并 使
（ ． ｉｇｉ ｉｇｉＰ ａｍ ｃｕｉ ｌ ｏ Ｌｄ ｔ ｉｓ ｎｔｕ ，Ｙｎｈ ａ ， ５ １１ ｈｎ ； １Ｎｎ ｘ Ｋｎ ｖ ｈｒ ａｅｔａ ．， ｔ．Ｓｒ ｎ ｓｔｔ ｉ ａ ｎ ７ ０ ０ ，Ｃ ｉａ ａ ｔ ｃ Ｃ ａ Ｉ ｉ ｅ ｃ ２ ．Ｎｉ ｘａＴ ｉ ｉ ｈ ｒ ｃｕｉ ｌＣ ． Ｌｄ ｔ ｉ ｓｔｔ，Ｙｎｈａ ７０ ０ ，Ｃ ｉ ） ｎ ｉ ａｒ ａｍａｅｔａ ｏ ， ｔ．Ｓｒ ｎ Ｉ ｔｕｅ ｉ ｕｎ， ５ １ １ ｈｎ ｇ ｕＰ ｃ ａｓ ｎ ｉ ｃ ａ
发菌株 ２０ １６提高 了３ ％ ， ０９— ０ １ 对其发酵培养基优化后 ， 应用于 １０吨发酵罐生产 ， ２ 明显提高产量。
［ 关键 词 ］ 维 生素 Ｂ：重 离子注 入 ； 变 ； 育 ； ； 诱 选 高产 菌株
Ｍ ｕ ａ ｅ ｅ ｉ ｆＨｉ ｈ —ｙｅｄ Ｖｉａ ｉ ｒ ｄ ｃｎ ｔ ｇ ｎ ｓｓ ｏ ｇ ｉｌ ｔ ｍ ｎ Ｂ１ Ｐ ｏ ｕ ｉ ｇ ２
变菌株 比出发菌株的生产能力提高 ３ ％。 １
１ 材 料和 方法 １ １ 材料 ．
１１ １ 菌株 ．．
Ｖ １ Ｂ２ 生产菌 ２０ ０９—１６ ０。
最近几年我 国 Ｖ Ｂ： 需求急剧增 加主要有三个 方面 的推动 力 ： 其一是饮食 结构变 化， 肉类 、 对 家 禽、 蛋类等食物的消耗将持续增长， 这将导致动物 养殖业和饲料产业的发展 ， 饲料工业对 Ｖ 的需求 Ｂ： 将持续增加 ； 其二是健康意识 的提高 ， 导致普通健
Ｂａ ｔ ｒａ Ｓ ｒ ｉ ｓ ｂ ｅ ｖ ｏ ｃ ｅ ｉ ｔ ａｎ ｙ Ｈ ａ ｙ Ｉ ｎ
ＣＨＥＮ Ｄｅ—ｇ ｎ ， Ｕ ｕ ， ＨＥＮ ａ ａ ｇ ＮＩ Ｃｈ ｎ Ｓ Ｘｉｏ—ｈ ｎ ， ｏ ｇ ＺＨＡＮＧ ｉ ｇ Ｓ ｎ—ｐ ｎ Ｐ ｎ ， ＨＩＹａ ｅｇ
２ １ ，６ ２ ：９— １ 陈德刚 ， ０ ２４ （ ） ３ ４ ／ 等
中国兽药 杂志
・ ９・ ３
重 离 子 注 入 法诱 变维 生素 Ｂ２ 高产 菌株
陈德 刚 ， 春 沈晓鸿 张 萍 石彦鹏 牛 ， ， ，
（． 夏金维制药有限公司菌种研究 ， １宁 所 银川 ７ １１ ． ５ ０； 宁夏泰瑞股份有限公司菌种研 ０ ２ 究所， 银川 ７００） ５１１