制样方法对粗饲料中NDF和ADF测定值的影响

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2010年第3期秸秆是自然界中存在极广的一种饲料资源。我国秸秆资源很丰富，是农村最主要的农作物副产

品。我国农村自古以来一直利用秸秆做为草食家畜

饲料，也是反刍动物的重要的能量来源。但每年大约有20％左右被利用，其余大部分秸秆被作为能源燃料或就地焚烧还田，不仅造成浪费，而且污染环境，甚至带来其他负面影响。作为饲料利用的秸秆

类通常不经其它处理，只是铡切至3～5cm 长饲喂牲畜，这样采食量有所提高，饲喂浪费也大为减少。秸秆粗饲料的营养特点是粗纤维含量高，一般在30％～70％之间，其消化率一般都在50％以下，除

供给能量外其它营养物质含量很低。苜蓿素有“牧草之王”的美誉。目前全世界苜蓿栽培面积约3300万ha ，是当今世界上种植面积最大，应用最广的多年生豆科牧草。我国种植苜蓿已有2000多年的历史，现有种植面积约133.3万ha ，

居世界第6位。苜蓿产量高、

品质好、营养丰富、适口性好，是牲畜的优质饲料。在干草生产、

青贮、青饲以及放牧草地建设中，占据着重要地位。苜蓿干草是家畜最有价值的粗刮料，它含有丰富的蛋白质，一般为17％～20％，

粗脂肪多数在2％～3％，粗纤维和无氮浸出物随生育期的延长而增加，营养

价值降低。粗灰分含量一般在10％左右，钙含量

1.5％左右，磷的含量只有0.1%～0.3％。

秸秆类饲料和苜蓿干草都是西北地区的主要粗饲料广泛应用于草食动物的牛产中。粗饲料的特点是纤维类物质含量高，纤维类物质的评定通常用粗纤维(CF)、

中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)等，因粗纤维测定结果的不准确性，通常用

NDF 和ADF 。测定粗饲料中NDF 和ADF 的方法比较多，如Van Soset 饲草分析法(简称范氏法)、CAU 滤袋法、

尼龙滤袋法、近红外漫反射光谱法；ANKOM 滤袋法

等。这些方法测定纤维类物质的过程中，

对样品的制备最初的要求是过40目(0.45mm)筛，1994年国标(GB/T6434-94)对粗纤维的测定要求为18目(1mm)筛，但对NDF 和ADF 测定的制样没有严格的限制，也有文献资料报道用18目筛制样，

但对样品细度的控制不严格。尤其近几年来用高速粉碎机的制样，对纤维类物质样品的粒度有较大的影响。高

速粉碎机自身没有分样筛，使得制样的结果均匀性很差，容易引起测定的系统误差。本试验用不同制样器(碾槽、铁研钵，高速粉碎机等)粉碎小麦秸秆和

苜蓿干草，探讨高速粉碎机制样是否对纤维类物质的测定结果产生影响。1材料与方法1.1试验设计本试验选用小麦秸秆和苜蓿干草为试验样品，

用2种方法制样，一种是用碾槽、铁研钵、剪刀和分样筛手工制备。另一种用高速万能粉碎机(FW80型)、剪刀和分样筛制样。样品粒度都控制在全过1mm 筛，0.5mm 筛上物为80％。然后用尼龙滤袋法和Van Soset 饲草分析法测定样品中NDF 和ADF 的含量。1.2样品的制备

1.2.1手工制样用碾槽、铁研钵、剪刀、分样筛和制样方法对粗饲料中N D F 和AD F

测定值的影响

李慧玲1，郭振华2，牛昌奎1

（1.甘肃省卓尼县动物疫病预防控制中心，卓尼747600；2.卓尼县畜牧工作站，卓尼747600）摘要：为探讨高速粉碎机制样对纤维类物质测定的影响，本实验选用小麦秸秆和苜蓿干草为实验

样品，用两种方法制样，一种是用碾槽、

铁研钵等手工制样，另一种用高速粉碎机制样，粒度控制为全过1mm 筛，0.5mm 筛上物为80％，然后用尼龙滤袋法和范氏法测定其中的NDF 和ADF 。实验结果表明，小麦秸秆用范氏法测定的ADF 值手工制样的结果极显著高于万能粉碎机制样的测定值，其余各组间差异均不显著，但用碾槽等手工制样的测定结果有高于粉碎机制样测定结果的趋势；苜蓿干草NDF 的两种方法的测定值碾槽制样的结果均显著高于粉碎机制样的结果，而ADF 用范氏法处理中碾槽制样的结果均显著高于粉碎机制样的结果，尼龙滤袋法处理中碾槽制样的结果与粉碎机制样的结果差异不显著。因此，用高速万能粉碎机制样对粗饲料中NDF 和ADF 的测定有影响。关键词：制样；粗饲料；NDF ；ADF

DOI:10．3969/J.ISSN ．1671-6027．2010．03．083牧草饲料

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2010年第3期电子秤制样。先用剪刀将试验样品剪短到1cm 左右，取一定量放入碾槽碾制，为控制细度，分多次碾制，每次碾制时间1min 左右，过筛，每次过筛均称

总重量并已录。当样品量很少时，

用铁研钵代替碾槽研制，直到通过1mm 筛和0.5mm 筛上物约为80％(79.1％～80.9％)。制样期间若过1mm 筛后0.5mm 筛的筛上物大于80％，则将0.5mm 筛上物再碾，控制粒度过筛，直到0.5mm 筛上物约为80％(79.1％～80.9％)：若过1mm 筛后0.5mm 筛的筛上物小于80％，将筛上物再混入一些开始时留用的样品，然后碾制，控制粒度，重复过筛称重，直到0.5mm 筛上物保持在80％左右为止。

1.2.2高速万能粉碎机制样用高速万能粉碎机、剪刀、分样筛和电子秤制样。用高速万能粉碎机代替碾槽和铁研钵制样，粒度控制和制样环节同1.2.1。

1.2.3样品粒度及编号（见表1）1.3试剂的配制和滤器的处理1.3.1试验试剂的配制

中性洗涤剂：称取18.61乙胺四乙酸二钠(ED-TA ，化学纯)和6.81g 四硼酸钠(Na 2B 4O 7·10H 2O)同放入1000mL 烧杯中，加少量水加热溶解后，再加30g 十二烷基硫酸钠和10mL 乙二醇乙醚。称取4.65g 无水磷酸氢二钠，詈于另一烧杯中，加少量水，微微

加热溶解后倾入第一个烧杯中，稀释至1000mL ，

此溶液州在pH 在6.9～7.0。

酸性洗涤刑：称取20g 十六烷基三甲基溴化铵，溶于2000mL 已标定过的0.5moL/L ，硫酸溶液中，搅动溶解。

1.3.2滤器的处理尼龙滤袋的制作与处理：将200目(孔径74μm)的尼龙滤布，分别用尼龙线缝制成约5cm ×3cm 的尼龙滤袋，灼烧边缘，以防掉丝。尼龙滤袋及封口用的尼龙线分别用中性洗涤剂和酸性洗涤剂处理，并在使用前于105℃下烘干称重。坩埚式玻璃过滤器的处理：使用G1(砂芯孔径50~70um)坩埚式玻璃过滤器，每次使用前，用重铬酸钾洗液浸泡坩埚式玻璃过滤器数小时，然后抽滤清洗，保证砂芯孔不被杂物塞堵。测定前，坩埚式玻璃过滤器于105℃下烘干称重。1.4测定指标和方法

1.4.1NDF 的测定Van Soset 饲草分析法，简称范氏法。称取1g(准确到1/10000g)样品和0.5g 无水亚硫酸钠置于高型烧杯中，加入100mL 热的中性洗涤剂。将烧杯套上冷凝装詈于电热板上，在5～10min 内煮沸，并持续保持微沸60min 。在整个煮沸

过程中保证烧杯内样品不溢出，也不能粘到烧杯壁

上。煮沸完毕后，

将烧杯中溶液滤入己知重量的G1型坩埚式玻璃过滤器中，用沸水冲洗坩埚式玻璃过滤器与残渣，使烧杯中的残渣全部移入至坩埚式玻

璃过滤器，并用pH 试纸检测，

直洗至滤液呈中性为止。用20mL 丙酮冲洗二次，抽滤。将坩埚式玻璃过滤器置于105℃烘箱中烘3h 后，在干燥器中冷却30min 称重，直称至恒重。

尼龙滤袋法测定：称取1g(准确到1/10000g)样品装入已称重的200目尼龙滤袋中，扎紧袋口，放

入高型烧杯。每个高型烧杯放5个滤袋，

按每个滤袋0.5g 无水亚硫酸钠和100mL 中性洗涤剂加入试剂。将烧杯套蛀冷凝装置于电热板上，在5～10min 内煮沸，并持续保持微沸60min 。在整个煮沸过程中，每隔10min 用玻璃棒轻轻搅动并在烧杯壁上挤出尼龙滤袋内的溶液，以保证中性洗涤剂充分作用于袋内样品。煮沸完毕后，用玻璃棒将滤袋夹出并放入另一烧杯，倒掉废液。然后用沸水少量多次反

复洗涤。在洗涤过程中，

要用玻璃棒挤压滤袋，以使洗涤完全。并用pH 试纸检测，直至滤液早中性为止，挤干余水，用20mL(20mL ／袋)丙酮冲洗二次。挤干袋内丙酮，置于105℃的烘箱中烘3h ，然后取出

放入干燥器中冷却30min ，

称重，直至恒重，并记录数据。

1.4.2ADF 的测定Van Soset 饲草分析法和尼龙滤袋测定法均除样品中加入的是已煮沸的酸性洗涤剂，不加入无水亚硫酸钠外，其它方法同1.4.1。1.5数据处理

本实验采用SPSSll.5分析统计软件中Analyze 的compare means 中One way ANOVA 方法进行分析，差异显著时用Tukey 沾进行多重比较，结果以平均数±SE 表示。2结果与分析

2.1小麦秸秆和苜蓿干草中NDF 的测定结果(见表2)

从表2可以看出，小麦秸秆用200目尼龙滤袋和坩埚式玻璃过滤器处理中碾槽和粉碎机制样的结果差异均不显著(P>0.05)，但坩埚式玻璃过滤器处理结果有高于尼龙滤袋处理结果的趋势。苜蓿干草用200目尼龙滤袋和坩埚式玻璃过滤器处理十碾槽制样的结果均显著高于粉碎机制样的结果(P<0.05)。总体看来，碾槽制样结果均有比粉碎机制样结果高的趋势。

2.2小麦秸秆和苜蓿青干草中ADF 的测定结果（见表3）

从表3，可以看出，小麦秸秆200目尼龙滤袋处

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