响应面法优化黑木耳胞外多糖液体培养基组成的研究
响应面法在生物过程优化中的应用
响应面法 （RSM） 是 1951 年 Box- Wilson 开发 3.1 Plackett- Burman 设计法的应用
的用于化学过程因子优化的一种综合性方法。响应
Plackett- Burman 设计法是一种两水平的实验设
面法采用多元二次回归方程来拟合因素与响应值之 计方法。他试图用最少的实验次数使因子的主效果
1 几种常见生物过程优化技术的比较
1.1 单次单因子法 单次单因子法是传统的优化方法，即每次实验
只改变一个因子而保持其他因子不变的优化方法。 当考察的因子较多时，这种优化方法需要的实验次 数较多、实验周期较长，还可能因实验批次的不同 和实验条件的不一致导致不可靠甚至错误的结论， 而且这种方法还不能够分析因素之间的交互作用。 但由于不需要数学统计方面的知识，而且操作简 单、结果也能直观地用图表显示，单次单因子法仍 然是常见的生物过程优化方法之一。 1.2 正交试验设计
2010 年第 2 期 田泱源，等：响应面法在生物过程优化中的应用
9
6 月出版
取最佳实验方案时，对于不显著因素的选取一般是 凭经验。因此，正交试验对于创新实验是不宜选择 的。
为了弥补传统的单次单因子法和正交试验设计 法的缺陷，近年来许多生物过程优化技术已采用了 统计学方法。常见的优化技术包括响应面法 （response surface methodology）、调优运算 （evolutionary operation）、典型分析法 （canonicalanalysis）、单纯 形法等，其中响应面法是近年来应用最多的一种优 化技术。 1.3 调优运算
典型分析法是利用综合变量对之间的相关关系 来反映两组指标之间的整体相关性的多元统计分析 方法。他的基本原理是：为了从总体上把握两组指 标之间的相关关系，分别在两组变量中提取有代表 性的两个综合变量 U1 和 V1 （分别为两个变量组中 各变量的线性组合），利用这两个综合变量之间的 相关关系来反映两组指标之间的整体相关性。其基 本思想是：
响应面法优化黑木耳液体菌种发酵配方及条件
山西农业科学 2023，51（6）：653-662Journal of Shanxi Agricultural Sciences响应面法优化黑木耳液体菌种发酵配方及条件周超 1，马银鹏 1，包旭翔 1，戴肖东 1，孔祥辉 1，张介驰1，2（1.黑龙江省科学院 微生物研究所，黑龙江 哈尔滨 150000；2.黑龙江省科学院 高技术研究院，黑龙江 哈尔滨 150000）摘要：液体菌种已在黑木耳菌包工厂化生产中广泛应用并取得较好效果，但提高黑木耳液体菌种发酵生产效率仍是菌包生产企业的重要技术需求。
为深入探究发酵营养条件、环境条件及其交互作用对黑木耳液体菌种生产效率的影响，为黑木耳液体菌种高效生产提供有益参考。
试验以国家认定品种黑木耳2号为试验菌株，以发酵醪中菌丝量为响应值，采用经典的响应面法对液体菌种发酵过程进行研究。
结果表明，发酵基质营养与环境条件对黑木耳菌丝生物量具有显著影响，试验范围均出现影响峰值；基质营养条件中的碳源浓度、环境条件中与溶氧水平密切相关的装液量和摇床转速都与其他发酵条件有很强的交互作用。
结合单因素试验、响应面试验分析和验证试验，确定最佳配方为葡萄糖22.3 g/L 、蛋白胨2.7 g/L 、KH 2PO 4 2.0 g/L 、MgSO 4·7H 2O 1.5 g/L ，同时添加羧甲基纤维素钠3 g/L ，菌丝生物量达13.22 g/L ，与预测值13.05 g/L 相比，相对误差为1.3%；最佳发酵条件为温度30 ℃、时间7 d 、摇床转速165 r /min 、装液量105 mL （250 mL 锥形瓶），菌丝生物量达到14.32 g/L ，与预测值14.11 g/L 相比，相对误差为1.49%。
研究结果表明，此液体发酵培养基配方及调控条件有效可行、菌丝得率高。
关键词：黑木耳；液体菌种；响应面法；交互作用；发酵配方；发酵条件中图分类号：S646.6 文献标识码：A 文章编号：1002‒2481（2023）06‒0653‒10Optimization of Fermentation Formula and Conditions of Auricularia heimuerLiquid Strain by Response Surface MethodologyZHOU Chao 1，MA Yinpeng 1，BAO Xuxiang 1，DAI Xiaodong 1，KONG Xianghui 1，ZHANG Jiechi 1，2（1.Institute of Microbiology ，Heilongjiang Academy of Sciences ，Harbin 150000，China ；2.High Technology Research Institute ，Heilongjiang Academy of Sciences ，Harbin 150000，China ）Abstract ：Liquid strains have been widely used in the factory production of Auricularia heimuer , and good effects have been achieved. However, improving the fermentation efficiency of Auricularia heimuer auricularia liquid strains is still an important technical requirement for the production enterprises of Auricularia heimuer . In order to further explore the effects of fermentation nutritional conditions, environmental conditions, and their interaction on the production efficiency of Auricularia heimuer liquid strain, and provide a useful reference for the efficient production of Auricularia heimuer liquid strain, in this paper, a national recognized variety Auricularia heimuer 2 was taken as the test strain, and the amount of mycelium in the fermentation mash as the response value, and the classical response surface method was adopted to conduct experimental research on the fermentation process of Auricularia heimuer liquid strain. The results showed that the nutrient and environmental conditions of fermentation substrate had significant effects on mycelium biomass of Auricularia heimuer , and the influence peak values were found in all experimental ranges. The carbon source concentration in the substrate nutrient condition, the liquid volume closely related to the dissolved oxygen level in the environment condition and the shaker speed all had strong interaction with other fermentation conditions. Combined with single factor test, response surface test analysis, and validation test, the optimal formula was determined as glucose 22.3 g/L, peptone 2.7 g/L, KH 2PO 4 2.0 g/L, MgSO 4•7H 2O 1.5 g/L, and sodium carboxymethyl cellulose 3 g/L. The mycelial biomass reached 13.22 g/L, compared with the predicted value of 13.05 g/L, the relative error was 1.3%. The optimal fermentation conditions were as follows: temperature 30 ℃, time 7 d, shaker rotation speed 165 r/min, liquid volume 105 mL(250 mL conical flask), mycelial biomass was up to 14.32 g/L, compared with the predicted value of 14.11 g/L, the relative error was 1.49 %. The results showed that the liquid fermentation medium formula and regulation conditions were effective and feasible, and the mycelium yield was high.Key words ：Auricularia heimuer ; liquid strain; response surface method; interaction effect; fermentation formulation; fer⁃mentation conditionsdoidoi:10.3969/j.issn.1002-2481.2023.06.08收稿日期：2022-10-14基金项目：国家食用菌产业技术体系（CARS -20）；黑龙江省科学院双提雁阵特别计划（YZ202002）作者简介：周 超（1996-），男，河南安阳人，在读硕士，研究方向：黑木耳栽培与遗传育种。
响应面法优化酵母菌产胞外多糖培养基的研究
响应面法优化酵母菌产胞外多糖培养基的研究杨迎凤;杨文娟;杨锟;闫家阔;姚淑敏【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2014(033)009【摘要】对能够影响酵母菌胞外多糖产量的基础培养基成分(碳源、氮源、无机盐离子)进行单因素试验,在单因素试验基础上,利用响应面法对主要影响因素进行优化,得出最适培养基配方为蔗糖6.0％、胰蛋白胨0.2％、硫酸铵0.1％、硫酸镁0.035％和磷酸二氢钾0.1％.此培养基在pH值为6、装液量50 mL/250 mL锥形瓶、温度28℃、转速170 r/min的条件下,在第8天酵母菌YF01-g胞外多糖产量最大,为4.672 g/L.【总页数】5页(P115-119)【作者】杨迎凤;杨文娟;杨锟;闫家阔;姚淑敏【作者单位】曲阜师范大学生命科学学院,山东曲阜273165;曲阜师范大学生命科学学院,山东曲阜273165;曲阜师范大学生命科学学院,山东曲阜273165;曲阜师范大学生命科学学院,山东曲阜273165;曲阜师范大学生命科学学院,山东曲阜273165【正文语种】中文【中图分类】TS201.3【相关文献】1.响应面法优化假单胞菌产胞外多糖发酵培养基 [J], 王晓霞;赵晨;赵祥颖;刘建军;张家祥2.响应面法优化桑黄菌产胞外多糖的培养条件研究 [J], 牛广财;朱丹;李志江;左锋;关琛3.响应面法优化黑木耳胞外多糖液体培养基组成的研究 [J], 刘芳茗;胡耀辉;隋新4.柠檬明串珠菌TD1产胞外多糖条件的响应面法优化及其抗氧化性研究 [J], 叶广彬;陈源红;王长丽;杨睿睿;宾晓芸;银联飞5.齐整小核菌发酵产胞外多糖的培养基优化研究 [J], 张丽;柳昊睿;赵馨仪;翟丽;黄福山;黄正梅;王敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
硕士导师牛广财简介黑龙江八一农垦大
5、沙棘果醋酿造工艺研究[J].《中国酿造》，.
6、沙棘原酒与陈酿酒香气成分的比较研究[J].《食品科学》，.
7、沙棘果酒主发酵工艺的研究[J].《中国酿造》，.
8、南瓜籽油微胶囊化的研究[J].《中国农学通报》，.
9、刺五加凝固型酸乳的研制[J].《沈阳农业大学学报》，.
2、吉林省延边州科技局课题“苹果梨品种改良与良种繁育及标准化生产技术研究”（第5参加人）
3、吉林省延边州科技局课题“黑木耳深加工的研究”（第1参加人）
4、延边大学校级课题：“苹果梨果醋加工技术的开发研究”（第1参加人）。
参编“十五”及“十一五”规划教材3部：
《食品工艺学概论》（孟宪军主编），中国农业出版社，2005
10、马齿苋保健冰淇淋的研制[J].《食品工业科技》，.
11、马齿苋多糖对小鼠的抗衰老作用[J].《中国农学通报》，.
12、沙棘果冻的研制[J].《沙棘》，.
13、植物多糖的生物活性及其制备技术研究进展[J].《食品研究与开发》，.
2、黑龙江省科技厅“十一五”重点项目——沙棘果精深加工关键技术的研究（GB06B404）二级子课题：沙棘果酒菌种筛选及酿造工艺研究（2006～2008）。
3、大庆市科技局项目：复合菌种发酵生产糙米酵素及应用研究（2007～2009）。
二、科研成果及获奖情况
1、吉林省教委课题“苹果梨果实蜜病和苦痘病病因及其防治”（第5参加人）
硕士导师牛广财简介黑龙江八一农垦大
食品学院农产品加工及贮藏工程专业硕士研究生导师情况简介
导师姓名：牛广财
性别：男
出生年月：1971．5
职称：副教授
学历：博士联系电话：研方向：果蔬贮藏加工/发酵食品拟招生人数：1人
响应面法优化重组大肠杆菌发酵生产藻蓝蛋白培养基的关键介质组分
响应面法优化重组大肠杆菌发酵生产藻蓝蛋白培养基的关键介质组分响应面法是一种常用的参数优化方法，它可以在多个变量之间建立数学模型，通过优化模型的参数，得到最优结果。
在生物制药领域，响应面法被广泛应用于发酵过程的优化。
藻蓝蛋白是一种重要的生物色素，它被广泛用于生物技术、医药和食品工业等领域。
大肠杆菌是产生藻蓝蛋白的重要菌种之一。
在大肠杆菌发酵生产藻蓝蛋白的过程中，培养基是一个关键的因素。
培养基中的关键组分可以影响藻蓝蛋白的合成和产量。
因此，优化培养基中的关键介质组分是提高藻蓝蛋白发酵生产的重要策略。
在优化培养基中的关键介质组分时，响应面法可以帮助我们确定最佳组合条件。
响应面法通常包括以下几个步骤：1. 确定变量和水平：在大肠杆菌发酵生产藻蓝蛋白的过程中，培养基中的关键介质组分可能涉及多个变量，如碳源、氮源、微量元素等。
通过实验确定变量和每个变量的水平。
2. 设计试验矩阵：使用正交试验设计或中心组合试验设计等方法，生成一组试验矩阵，包含各种组合条件下藻蓝蛋白的产量和其他指标。
3. 进行实验：使用试验矩阵中的组合条件进行实验，并记录藻蓝蛋白的产量和其他指标。
4. 分析结果：根据实验数据建立数学模型，并通过响应面分析确定最佳组合条件。
在确定大肠杆菌发酵生产藻蓝蛋白培养基的关键介质组分时，可以选择以下几个关键介质组分：1. 碳源：碳源是大肠杆菌产生藻蓝蛋白的关键组分之一。
常用的碳源包括葡萄糖、甘露糖、乳糖等。
通过响应面法优化碳源的组分和浓度，可以提高藻蓝蛋白的产量。
2. 氮源：氮源对大肠杆菌的生长和藻蓝蛋白的合成也具有重要的影响。
常用的氮源包括酵母提取物、氨基酸、尿素等。
优化氮源的组分和浓度可以提高藻蓝蛋白的合成和产量。
3. 微量元素：微量元素对大肠杆菌发酵生产藻蓝蛋白也具有重要的影响。
铁、镁、锌、铜等微量元素都可以影响藻蓝蛋白的产量和合成。
优化微量元素的组分和浓度可以提高藻蓝蛋白的发酵生产。
综上所述，响应面法可以帮助我们确定最佳的培养基中的关键介质组分，进而提高大肠杆菌发酵生产藻蓝蛋白的产量和合成效率，具有重要的应用价值。
黑木耳液体菌种培养基配方及培养条件优化
黑木耳液体菌种培养基配方及培养条件优化摘要：黑木耳(Auriculariaauricula)作为担子菌门中重要的药食同源真菌，含有丰富的氨基酸、多糖、黑色素和维生素等成分，具有增强机体免疫功能、补血、补脑、抗衰老、抗凝血和抑制肿瘤生长等保健效果和药用功效，是维持人体健康的绝佳食材。
近年来，随着“菌粮”等新名词的出现，黑木耳在人类健康重要性中的体现越为明显。
关键词：黑木耳；液体菌种培养基配方；培养条件；优化引言木耳属(Auricularia)真菌是我国常见的野生食用菌，常生长于林间阔叶树倒木及枯死木桩，由于其特殊的生物学特性，木耳属真菌能够分解多种材料中的纤维素、半纤维素、木质素等物质提供生长所需的营养。
木耳在我国栽培历史悠久，从初期的椴木“砍花”栽培到如今的袋料菌棒培育已有1000多年历史，经过食用菌工作者的努力和研究，木耳人工栽培技术目前已经趋于成熟，多篇文献报道了菌种驯化、栽培种生产、替代基质筛选等方面的内容，为食用菌产业生产提供了较好的指导和借鉴。
1.菌丝培养将退化的黑木耳菌种接种到相应的母种培养基中(以ADA培养基为对照，不同浓度的麦麸、木屑、稻杆ADA培养基为实验组)，每个培养基接种直径3mm的黑木耳菌块，接种后置于26℃恒温箱中避光培养9d，期间注意观察菌丝的生长情况。
2.液体培养条件的优化（1）培养时间、温度、pH值、碳源、氮源、无机盐的筛选：无菌条件下分别将2种野生木耳菌种打孔为大小相同的“菌饼”（直径0.5cm），接种至不同pH值（pH值为5、6、7、8、9）、不同碳源（蔗糖、麦芽糖、果糖、淀粉、葡萄糖）、不同氮源（蛋白胨、牛肉膏、尿素、(NH4)2SO4、酵母膏）、不同无机盐（MgSO4、CaCl2、CuSO4、NaCl、KH2PO4）的基础培养基中，于25℃，160r/min条件下摇床培养10d；培养时间及温度实验将菌种接种至基础培养基中，分别于25℃，160r/min条件下培养不同天数（2、4、6、8、10d）、以及不同温度（20、25、30、35、40℃）条件下，160r/min摇床培养10天。
黑木耳多糖提取工艺的研究进展
文献综述黑木耳多糖提取工艺的研究进展×××××××××摘要：大量研究结果表明，多糖具有抗肿瘤、抗凝血、抗血栓、降血糖、血脂等生物活性，因此对多糖结构和生物功能的研究已成为继蛋白质、核酸之后探索生命奥秘的第三大里程碑。
黑木耳多糖作为一种天然保健品也为大家所接受，但现在工业化提取黑木耳多糖时多采用热水浸提，耗时长、产量低、成本高，无法满足市场需求，通过黑木耳多糖高产菌株的筛选和选育、优化多糖提取方法、改造天然多糖而增强原有活性、优化深层发酵生产黑木耳多糖工艺以及多糖药理机制、临床应用有效性和安全性研究等发功能性食品添加剂、保健品或药品的市场前景更加广阔，而研发出有益于人类身体健康、经济效益高的黑木耳多糖深加工产品，对推动黑木耳多糖产业发展具有重要意义。
关键词：黑木耳；多糖；提取工艺Research Review on the Extractive Conditions of Polysaccharide from Auricularia auricular Abstract: Lots of research results indicate that the polysaccharide has antitumour，anticoagulant，antithrombotic，fall blood sugar，blood fat，such as biological activity，so the research of polysaccharide structure and biological function has become after the protein，nucleicacid，explore the mysteries of life in the third major milestone。
响应面法设计优化阿维菌素化学合成发酵培养基
响应面法设计优化阿维菌素化学合成发酵培养基胡栋;柯灵超;张敬宇;谭高翼;张立新;高强【摘要】目的设计优化一种化学合成发酵培养基,为阿维菌素产生菌生理生化研究提供基础.方法在单因素实验的基础上运用响应面分析的方法,对9种因素进行Plackett-Burman设计筛选得到3个显著因子,并对其进行最陡爬坡试验和Box-Behnken 试验,利用Design-Expert V8.06分析软件进行回归分析得到最优组合.结果优化后化学合成培养基的组成为:葡萄糖12 g/L,麦芽糖18g/L,苏氨酸1.98g/L,50％乳酸钠0.5mL/L,K2HPO4·3H2O 0.3g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,NaCl 0.5g/L,FeSO4· 7H2O0.01g/L,MnSO4·H2O 0.015g/L,MOPS 5g/L.结论经验证,该培养基的产素能力比目前的清亮培养基提高了397.4％,并具有透明清亮且产素稳定等特点,为以后阿维链霉菌的理论和生产研究奠定了基础.【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2018(043)008【总页数】7页(P1055-1061)【关键词】阿维链霉菌;阿维菌素;化学合成培养基;响应面法;设计优化【作者】胡栋;柯灵超;张敬宇;谭高翼;张立新;高强【作者单位】工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457;工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457;生物反应器工程国家重点实验室,华东理工大学,上海200237;生物反应器工程国家重点实验室,华东理工大学,上海200237;生物反应器工程国家重点实验室,华东理工大学,上海200237;工业发酵微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457【正文语种】中文【中图分类】R978.1阿维菌素(avermectins, AVMs)是由阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)代谢产生的一种效果极佳的大环内酯类杀螨杀虫剂和潜在的抗生素药物[1]，阿维链霉菌发酵液中通常含有8种阿维菌素组分，既A1a/A1b、A2a/A2b、B1a/B1b和B2a/B2b，其中，B1组分，尤其是B1a组分的杀虫效果最佳，目前B1a组分也是商品化的阿维菌素产品中的主要成分[2-3]。
响应面法优化微波辅助提取黑木耳多糖工艺的研究
浸 提 等方 式 生 产 ［ 不 仅 提取 率 低 ， 提 取 时 间长 ， ６ ３ ， 且 能耗 高同 近年来 ， 波辅 助提 取技 术凭 借其 高效 ， 。 微 快 速 ， 能 耗 等 优 点 被 广 泛应 用 于天 然 产 物 领 域 ０ 低 １ 。
响 应 面 实 验 设 计 采 用 较 少 的实 验 次 数 全 面 考 察 各
食 品 与 发 酵 科 技
Ｆｏ ｄ ａ ｄ Ｆ ｒ ｎｔ ｔｏｎ Ｔｅ ｈ ｌ ｇ ｏ ｎ ｅ ｍｅ ａ ｉ ｃ ｎｏ ｏ ｙ
第４ ７卷 （ ５期 ） Ｖ １ ７Ｎ ． 第 ｏ． ，ｏ ４ ５
响应面法优化微波辅助提取黑木耳 多糖工艺的研究
曾维 才 ， 曾 贾利 蓉 张 ，
（ ． 川大 学 轻 纺 与食 品学 院 ， 都 ６ ０ ６ ；． Ｉ 学 生 命 科 学 学 院 ， 都 ６ ｏ ６ ） １四 成 １０ ５ ２ 四Ｊ 大 Ｉ 成 １ｏ４
健 功 能 。工业 中一 般 采用 热水 浸 提 、 稀碱 浸 提 、 法 酶
技 术 在黑木 耳 多糖 生产领 域 的应 用提供 理论 基础 。
１ 材 料 与方 法
１１ 材 料 ．
１１１ 黑 木 耳 ｕｉｕａｉ ｒ ｕａ） 由四川省 青川 县 ．． ｒ ｌ ａａ ｉ ｌ ， ｃｒ ｕ ｃ ｒ 川 珍 实业有 限公 司提 供 。
型 电热鼓 风 干燥箱 上海 实验 仪器 总厂
１２ 方 法 ．
Ｔａ ． Ａｎ ｌｔ ａ ｆｃｏ ｓａ ｄｌｖ ｌ ｆｒ ｅ ｐ ｎ ｅｓ ｒ ｃ ａｙ ｉ ｂ１ ａｙｉ ｌａ ｔｒ ｎ ｅｓ ｏ ｓ ｏ ｓ ｕ ａ ｅＡｎ ｌｓｓ ｃ ｅ ｒ ｆ
１ ． 黑木耳 多糖 的提 取工 艺流 程 ．１ ２ 黑 木耳一 室 温发 胀 ３ ｍｉ一 清洗 ， ０ ｎ 除杂 ， 子实 取 体一 ６ 。 ５Ｃ烘 箱 热 风干 燥 ， 黑木 耳 子实 体呈 脆 状一 至 粉 碎一 筛分一 取 各粒 度黑 木 耳粉 ，按 固液 比 １ ０添 ： ２
响应面法优化实验条件
BD
CD B2 C2 D2 残差 失拟项 纯误差 总变异
1
1 1 1 1 5 3 2 14
0.039
3.73 11.27 48.87 1.592×10-4 10.29 10.19 0.1 262.63
0.039
3.73 11.27 48.87 1.592×10-4 2.06 3.4 0.052
0.019
如何利用响应面法优化条件
满都拉 沈阳应用生态研究所
2012.12.5
前言 方差分析 响应面法
前言
新产品、新工艺、新材料、新品种及其他科研成果 产生流程.
多次反复试验
提高产量 提高产品性能 降低成本能耗
试验数据分析
规律研究
试验设计方法是一项通用技术，是当代科技和工 程技术人员必须掌握的技术方法。 他是把数学上优化理论、技术应用于试验设计中，
1.81 5.47 23.75 7.738×10-5
0.8961
0.2361 0.0664 0.0046** 0.9933
65.61
0.0151*
Y(2-KGA)=62.91+2.31B+3.26C1.71D3.15BC+0.099BD+0.97CD-1.75B2-3.64 C2+6.567×10-3E2。对该方程分析得出，其与真实值存在显著的差异（拟 失项P=0.0151<0.05），需要对该方程进行优化。
均值
29℃ 30℃ 69.36 68.21 70.32 69.23 68.93 70.12 69.52 79.02 70.36 69.698 70.98 71.512
方差分析法 Analysis of Variance
酶法降解黑木耳多糖工艺研究
Ｏ２ ｓ
图 １ 葡 萄 糖 标 准 曲线 图
从 图 １中 可得 葡 萄糖 的浓 度 与 吸光 度 值 之 间 的关
系 为 ： 液 中还 原糖 质 量 （ ） （ 光 度 （ ） ０ ０ ２ ／ 溶 ｘ＝ 吸 ｙ 一 ． ０ ） １ ６３ 相关 系 数 Ｒ 一 ０ ９ ９符 合 要 求 。表 明 葡 萄 糖 ．３ ， ．９
Ｄ ＮＳ试 剂 的 配制 ： 取 ３ ２ ｇ３ ５ 二 硝 基 水 杨 称 ． ５ ，一 酸溶 于 少量 水 中 ， 入 ５ ０ 移 ０ ｍＬ容 量 瓶 ， ２ ｌＬ氢 氧 加 ｍｏ／ 化钠 溶 液 １ ２ ５ ６ ． ｍＬ， 加 入 ２ ． ｇ丙 三 醇 ， 匀 ， 容 再 ２５ 摇 定
第 ５期
２ １ 葡 萄糖 标 准 曲 线 绘 制 图 ．
葡 萄 糖 苷 酶 用 量 对 降 解 多 糖 释 放 还 原 糖
量 的 影 响 。取 ７个 具 塞 试 管 每 管 加 入 ２ ４ ． ｍＬ多 糖 溶
液 ， 次 加 入 ０ ０ １ ０ ２ ０ ３ ０ ４ ０ ５ ０ ６ 葡 萄 依 、 ． 、 ． ． 、 ． 、 ． 、 ． ｍＩ 糖 苷 酶 溶 液 ， 余 用 缓 冲 溶 液 补 上 ， 保 证 多 糖 浓 度 为 剩 在
第 ５期 （ 第 １ ０期 ） 总 ２
２１ ０ ２年 １ ０月
中 国 林 副 特 产
Ｆｏｒ ｓ — ｏ ｕｃ ｒｄ Ｓｐ ｃａ ｉｙ ｉ ｅ ｔＢｙ Ｐｒ ｄ ｔａｉ ｅ ｉｌｔ ｎ Ｃｈｉ ａ ｎ
响应面法优化桑黄菌P037液体发酵培养基
食用苗
ＥＤⅡ； ＬＥ ＦＵＮＧＩ
酵母粉三个 因素为 自变量 ， 以胞外 多糖产量 为响应值试验 。 因
响应面 法优 化 桑 黄 菌 Ｐ ３ ０ ７液体 发酵培养基
王 飞 刘 霞
（ １江西农业大学生物科学与工程学 院 ， 昌 ３ ０ ４ 南 ３０５ ２南昌理工学 院生物环境工程系 ，南昌 ３０ １ ） ３０ ３
试 验 以蔗糖 ３ ％，玉 米粉 ２ ％，酵母 粉 ０５ ， ２Ｐ ．％， ． ＫＨ Ｏ ０１ ％
Ｍ Ｓ ． ％， ｇ Ｏ ００ 维生素 Ｂ ． ％为培养基 ， 桑黄菌 Ｐ ３ 行 ５ ｔ０ ０２ 对 ０７进 液体发酵 培养 ， 获得 了产胞 外多糖 为 １ ８ ｘ ０ ／ Ｅ的终产 ． １ ｌ ｇｍ ６ 量。 为进一步进行优化 ， 将响应面分析法（ Ｓ 用于桑黄菌丝 Ｒ Ｍ） 体的液体发酵培养基 的碳氮源浓度配 比优化 ，以胞外多糖 含
素类化合物等多种有效成 ” 。在我国 ， 天然桑黄数量非常稀
少， 而桑黄菌 的人工栽 培尚处于起 步阶段 ， 要想形成稳定 的医
根据表 ２的试验结果 ， Ｓ Ｓ 计分析软件进行多元回 用 Ａ统 药工业产品来源 ，就必须采用现代生物技术对桑黄菌进行深 归分析 所得的主要分 析结果见 表 ３ 表 ４ ， 、 。 层发酵。杨 全等 以玉米粉 ５ 麸皮 ３ 磷酸 二氢钾 ０ ％， ％， ％， ． ３ 表 ３ 方 差 分 析 表 硫酸镁 ０１％， ． ５ 维生素 Ｂ ２ ｘ／０ １０Ｉ １０ｍＬ 维生 素 Ｂ３ ｇ ０ ｇ ， ０￣ ／ ０ｍＬ １ 培养基进 行液 体发酵 ， 获得 了 １ ８ｇ１ ０ｍ ． ／０ Ｌ的菌丝体产 量 。 ５
验 中心点设置 ３次重复 。试验方案及试验结果见表 ２ ， 。
黑木耳多糖的生物活性研究进展
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一
.黑木耳中的 多 糖、黑 色 素、花 青 素、凝 集 素 等
[
８]
物质使得黑木耳具有生理活性,其具有抗氧化、抗衰
老、抗肿瘤、抑菌、抗 凝 血 及 增 强 免 疫 能 力 等 生 物 活
性.黑木耳多糖是 最 主 要 活 性 物 质 之 一,因 此 黑 木
耳多糖在药理作用、食 品 开 发 和 保 健 作 用 等 方 面 发
命.肿瘤细胞能够 降 低 免 疫 器 官 的 免 疫 能 力,使 免
挥巨大作用.目前,虽 然 黑 木 耳 多 糖 已 经 具 有 较 多
疫细胞凋亡,从而 引 起 机 体 的 免 疫 能 力 下 降. 黑 木
响应面法优化黑木耳粗多糖水浴提取工艺
科技论坛黑木耳（ＡｕｒｉｃｕｌａｒｉａｈｅｉｍｕｅｒＦ．Ｗｕ，Ｂ．Ｋ．Ｃｕｉ＆Ｙ．Ｃ．Ｄａｉ）［１］营养丰富，是我国传统的食药兼用菌，含有多糖、凝集素、三萜类等药用成分，具有提高免疫功能、抗癌、降血脂等功效［２］。
黑木耳多糖是黑木耳中最有效的活性成分之一，具有增强机体免疫力、抗氧化、抗衰老、抗动脉粥样硬化、增强心脏、防癌、抗癌等生物学功能。
［３］目前黑木耳的多糖提取方法有：热水浸提法、稀碱浸提法、酶解浸提法、超声波提取法和微波辅助提取法［４］。
超声波法对设备要求较高，碱浸提法需进行脱苦处理。
故本实验采用水浴法，该方法对实验要求较低，易于操作。
１实验材料１．１实验材料。
黑木耳子实体超微粉。
１．２实验试剂。
葡萄糖，苯酚，浓硫酸，蒸馏水。
２实验方法２．１木耳样品处理。
黑木耳干燥（７０℃，２４ｈ）→粉碎→过筛（４００目）→得到木耳超微粉。
２．２多糖测定方法。
水浴法提取黑木耳多糖，其含量测定采用苯酚－硫酸比色法［５］。
按葡萄糖标准曲线的回归方程ｙ＝１３．６５ｘ＋０．００７６（Ｒ２＝０．９９８３），计算木耳多糖含量。
得出测量浓度（ｍｇ／ｍＬ），然后按公式计算多糖提取率［６］。
多糖提取率（％）＝（测量浓度×稀释倍数×提取液体积）／原料干重×１００％２．３最佳液料比的测定。
称取５份黑木耳粉各１ｇ，以液料比３０：１、４０：１、５０：１、６０：１、７０：１分别加入蒸馏水，在７０℃水浴锅中加热７ｈ后取上清液进行多糖含量测定。
２．４提取最适温度的测定。
称取５份黑木耳粉各１ｇ，以液料比５０：１加入蒸馏水，分别放入５０℃、６０℃、７０℃、８０℃、９０℃水浴锅中加热７ｈ后取上清液进行多糖含量测定。
２．５提取最佳时间的测定。
称取８份黑木耳粉各１ｇ，以液料比５０：１加入蒸馏水，在７０℃水浴锅中分别加热１ｈ、２ｈ、３ｈ、４ｈ、５ｈ、６ｈ、７ｈ、８ｈ后取上清液进行多糖含量测定。
２．６响应面法优化。
实验以多糖含量为考察指标，在单因素试验的基础上，利用响应面分析法对木耳多糖提取工艺进行优化研究。
木耳表面层多糖结构与功能的研究
木耳表面层多糖结构与功能的研究在中国的传统饮食中，木耳是一种非常常见的食材。
木耳营养丰富，口感独特，深受人们的喜爱。
除了美味之外，木耳还具有很多的药用价值。
有研究表明，木耳多糖对人体健康具有很多的益处，因此得到了广泛的关注。
在近年来，越来越多的研究表明，木耳多糖的分子结构和功能具有很高的研究价值。
1. 木耳多糖形成的过程首先，我们需要了解木耳多糖是如何形成的。
木耳的表面覆盖着一层黏液状的物质，被称为表面黏性多糖（SVP）。
SVP是由水溶性高分子多糖组成，它是木耳生长过程中分泌出来的。
木耳的生长过程是通过菌丝的形成进行的，木耳细胞表面会分泌出SVP，SVP会逐渐形成囊泡沉积在表面，使表面产生了一层黏性物质。
2. 木耳多糖的分子结构随着科技的发展，人们对木耳多糖的分子结构进行了深入的研究。
经过研究发现，木耳多糖的分子结构非常复杂，它是由多种不同的单糖分子组成的高分子聚合物。
其中，主要组成单元包括葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖等多种不同的单糖，这些单糖之间通过不同的键连接起来形成了多种不同的分子结构。
除了包含多种不同的单糖之外，研究人员还发现SVP中的多糖分子具有不规则的分子排列方式，这种不规则排列的方式增强了多糖之间的相互作用和纠缠，从而增强了整个多糖分子的凝胶作用。
3. 木耳多糖的药用价值随着对木耳多糖分子结构的深入研究，人们也开始逐渐发现木耳多糖在医学上的应用价值。
研究表明，木耳多糖具有很强的抗氧化、免疫调节、降血糖、抗肿瘤等多种功能。
抗氧化：木耳多糖中的多种单糖具有很强的抗氧化作用，能够有效抑制人体内的自由基，从而有助于预防细胞氧化损伤。
免疫调节：木耳多糖可以调节人体免疫系统的功能，增强人体的抵抗力。
研究表明，长期食用木耳多糖可以显著提高人体的免疫功能，预防各种疾病。
降血糖：木耳多糖中的多种单糖具有降低血糖的作用，对于糖尿病患者来说具有很高的应用价值。
抗肿瘤：多项研究表明，木耳多糖具有抗肿瘤的作用。
黑木耳多糖提取、功能及应用研究进展
黑木耳多糖提取、功能及应用研究进展孔祥辉;于德水;陈鹤;张介驰【摘要】黑木耳(Auricularia auricular)又名黑菜,桑耳、本菌、树鸡、木蛾、木茸等,属真菌门担子菌亚门木耳科木耳属.木耳性平味甘,入胃、大肠经,具有养血益胃、润燥润肺、活血止血、润肠作用,主要活性成分是多糖,其抑制肿瘤、增强免疫力、抗氧化、止咳化痰及降血脂等功能已被大量研究证实.文章综述了黑木耳多糖提取、结构分析、功能及在食品、保健等领域的应用研究进展,有助于黑木耳多糖类产品开发应用.【期刊名称】《黑龙江科学》【年(卷),期】2018(009)022【总页数】2页(P12-13)【关键词】黑木耳多糖;提取纯化;结构分析;功能特性;产品开发;应用前景【作者】孔祥辉;于德水;陈鹤;张介驰【作者单位】黑龙江省科学院微生物研究所,哈尔滨150010;黑龙江省科学院高技术研究院,哈尔滨150001;黑龙江省科学院微生物研究所,哈尔滨150010;黑龙江省科学院高技术研究院,哈尔滨150001;黑龙江省科学院微生物研究所,哈尔滨150010;黑龙江省科学院微生物研究所,哈尔滨150010;黑龙江省科学院高技术研究院,哈尔滨150001【正文语种】中文【中图分类】R284.2黑木耳(Auricularia auricular)又名黑菜、桑耳、本菌、树鸡、木蛾、木茸等，属真菌门担子菌亚门木耳科木耳属。
木耳性平味甘，入胃、大肠经，具有养血益胃、润燥润肺、活血止血、润肠作用，主要活性成分是多糖，其抑制肿瘤、增强免疫力、抗氧化、止咳化痰及降血脂等功能已被大量研究证实[1,2]。
本文就木耳多糖提取方法、结构分析、功能特性及在食品、医疗、保健等领域的开发应用的最新研究进展进行综述，为黑木耳多糖的开发利用奠定基础。
1 黑木耳多糖提取、分离纯化和结构分析1.1 黑木耳多糖提取目前对黑木耳多糖的传统提取技术为热水浸提法[3]及稀碱浸提法[4]，工业化提取多集中在热水浸提法；现代提取技术有生物酶法[5]、超声波辅助提取法[6]、微波辅助提取法[7]、超微粉碎法[8]及利用多种方法协同复合提取法，如生物酶法联合微波提取法[9]、超声波联合复合酶法[10]等。
响应面优化实验
实验步骤1.输入三因素及其水平，设计响应面实验。
2. 应变量3.输入实验数据4.试验方案形成5.实验数据分析利用系统软件SAS8.0对表5实验数据进行二次多项回归拟合，通过RESEG（响应面回归）过程进行数据分析，建立二次响应面回归模型，并寻求最优相应因子水平，得到回归方程：Y=2.136667+0.44625X1+0.045X2-0.01375X3-0.44583X12-0.13833X22-0.09083X3 2-0.1175X1X2+0.015X1X3-0.0725X2X3模型的F检验值在α=0.05时远大于F（9,5）=4.77，说明方程有很高的显著性。
R2=0.9973，表明方程模型与实验数据有99.73%的符合度，调整后的R2adj=0.9925，表明方程模型有很高的可信度。
6.正态分布图7.Residuals vs Predicted 图8.Predicted vs Actual 图9.实验实际值和方程预测值10.等高线图11.三维相应曲面图 ABACBC在获得非线性回归模型和响应面之后，为了求得培养基最佳浓度，对所得的回归拟和方程分别对各自的变量求一阶偏导数，并令其为得到三元一次方程组，求解此方程组可以得到最大多糖量时的最佳条件：X1=0.5066(2.2533%) ，X2=-0.0488(0.9756%) ， X3=0.0144(0.0993%) ，Y=2.2487g/L。
所以产多糖最高时的培养基组成为：葡萄糖2.2533%，鱼粉0.9756%，VB1 0.003%，NaCl0.8%，MgSO4·7H2O 0.1%，FeSO4·7H2O 0.04%，KH2PO4 0.0993%，初始pH值5.5。
12.用RSM预测最优值根据最优培养基配方对模型进行验证，香菇菌丝体产粗多糖为2.33g/L，实际值与预测值的误差为+3.61%。
初始培养基条件下总多糖产量为0.80g/L，优化后提高了1.91倍。
黑参国内外研究进展
黑参国内外研究进展陈林;郭建鹏【摘要】In recent years, black ginseng is regarded as the high-end product of ginseng in international market, which hashigh research value. However, domestic and foreign research on black ginseng is less than red ginseng and dry radix ginseng, review the related literatures at home and abroad, summarize the processing technology, chemical composition, pharmacological effects and detection methods of black ginseng, and provide reference for the quality control, rational drug use and further research and development of black ginseng. In the future, we should conduct in-depth research in the standard processing technology, quality control standards, and specific pharmacological active ingredients.%近年来, 在国际市场上黑参被认为是人参中的高端产品, 具有很高的研究利用价值, 与红参与生晒参相比, 国内外对黑参的研究较少.作者通过查阅国内外文献, 对黑参的炮制工艺、活性成分、药理作用及分析方法进行综述, 以期为黑参质量控制、合理用药及进一步研究开发提供参考.【期刊名称】《人参研究》【年(卷),期】2019(031)001【总页数】5页(P42-46)【关键词】人参;炮制;活性成分;药理作用;分析方法【作者】陈林;郭建鹏【作者单位】延边大学药学院,延吉 133002;延边大学药学院,延吉 133002;长白山生物资源与功能分子教育部重点实验室(延边大学),延吉 133002【正文语种】中文黑参为五加科植物人参（Panax ginseng C.A.Mey）经九蒸九曝、反复蒸制烘干炮制得到的一种新型人参炮制品[1～2]。
黑木耳多糖口服液制备工艺研究
黑木耳多糖口服液制备工艺研究
范春艳
【期刊名称】《食品研究与开发》
【年(卷),期】2014(000)022
【摘要】以黑木耳多糖提取率为指标，采用正交试验法对黑木耳多糖口服液制备
工艺进行了研究。
结果表明：黑木耳多糖的最佳提取工艺为：加入50倍的蒸馏水，90℃恒温水浴加热提取2次，每次3 h，醇沉浓度为80%，4℃静置24 h，过滤
得沉淀，将沉淀复溶于水，再向提取液中加入蔗糖3.5%、蜂蜜1%、柠檬酸
0.06%，经过滤，灌装，灭菌得黑木耳多糖口服液成品。
经硫酸-蒽酮法检测，制
备的黑木耳多糖口服液产品中黑木耳多糖含量为8.0 mg/mL，该定量方法准确可靠，重现性好，可作为黑木耳多糖口服液的质量控制方法。
【总页数】4页(P53-56)
【作者】范春艳
【作者单位】大兴安岭职业学院，黑龙江加格达奇165000
【正文语种】中文
【相关文献】
1.响应面法优化黑木耳多糖的制备工艺研究 [J], 唐旋;唐王裔;何伟峰;王革;张拥军;
朱丽云;王为民
2.黑木耳多糖-银离子螯合物的制备工艺研究 [J], 赵鑫;周芳;王振宇
3.黄精铁皮石斛口服液的制备工艺研究 [J], 黄天卫;龚敏丽;马妮;赵爱;周家明
4.加味茵陈蒿口服液制备工艺研究 [J], 吕一舟;范云鹏;张艳玲;马霞;郭振环;刘永录;
张国祖
5.党参多糖提取工艺研究及党参多糖口服液的制备 [J], 王艳萍;王瑞婕
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１ 试 验 部 分
１ ． １ 试 剂与 仪器
菌种 ： 黑 木耳 为 黑 一 ２ ９品种 ， 由吉 林 农 业 大 学
（ ３ ）无 机 盐 浓 度 的 筛选 试 验 磷 酸 二 氢 钾 与
仪器 ： 立式压力 蒸汽灭菌 锅 （ 上 海 博 迅 实 业 有 限公 司 医疗设 备厂 ） ， 垂 直 净化 工 作 台 （ 苏 州 净 化 设备 有 限公 司 ） ， 电热鼓 风干 燥 箱 ， 低 速 离 心 机
１ ． ２ ． １ 培 养 方法 种 子液 的培 养 从 黑 木 耳 菌 种 斜 面 上 用 接 种 针钩 取 少许移 入 到装 有 ８ ０ ｍ Ｌ种 子培养 基 的容 积 为２ ５ ０ ｍＬ的 三 角 瓶 中 ， ２ ８℃ ， １ ５ ０ ｒ ｐ ｍ 条 件 下 培
养５ ｄ ．
Ａｐ ｒ ． ２ ０１ ５
文章 编 号 ： １ ０ ０ ７ — ２ ８ ５ ３ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ４ ４ ） ０ ７ ２ － ０ ４
响 应 面 法 优 化 黑 木 耳 胞 外 多 糖 液 体 培 养 基 组 成 的 研 究
刘 芳 茗 ， 胡 耀 辉 ， 隋 新
（ １ ． 吉林农 业大学 食 品科学与工程学院 ， 吉林 长春 １ ３ ０ １ １ ８ ； ２ ． 吉林４ ｆ ｉｎｎ 生物与食 品工程 学院 ， 吉林 吉林 １ ３ ２ ０ ２ ２ ）
第３ ２卷 第 ４期 ２ ０ １ ５年 ４月
吉 林 化 工 学 院 学 报
Ｊ Ｏ ＵＲ Ｎ Ａ Ｌ ＯＦ Ｊ Ｉ Ｌ Ｉ Ｎ Ｉ Ｎ ｓ １ ｌ 订Ｕ Ｔ Ｅ Ｏ Ｆ Ｃ Ｈ Ｅ ＭＩ Ｃ Ａ Ｌ Ｔ Ｅ Ｃ Ｈ Ｎ０ Ｌ Ｏ Ｇ Ｙ
Ｖｏ Ｉ ． ３ ２ ຫໍສະໝຸດ Ｎｏ ． ４ 有抗凝血抗 血栓 、 降血脂降血糖、 抗 衰老抗肿瘤 、 抗 氧 化等 功 能 ｊ ． 资 料 表 明 液 态 深 层 发 酵 获 得 的多糖 含 量 远 高 于 子 实 体 ， 有 很 高 的 科 研 价 值 ． 目前 ， 唐 青涛 、 肖彩 霞 ｍ ］ 、 王 国 良 “ 等人 采用正交试验 的方法对黑木耳深层发酵产多糖培
养基 进行 了优化 ． 作 为真 菌 的一种 ， 黑木 耳 是维 生 素Ｂ ２天然 缺 陷型 ， 维生 素 Ｂ ２以一种 辅 酶 的形 式 存在 ， 需 要 少量外 部 添加 才能 生 长 良好 ． 本 文研 究 了维生 素 Ｂ ２的 添 加 量 ， 并 用 响 应 面 法 研 究 了 碳 源、 氮源 、 无机盐 、 维生素 Ｂ ２的 交 互 作 用 对 于 黑 木 耳液 态深 层 发酵 的影 响 ， 优 化 了培 养基 配方 ， 为 进 一步 产业 化 生产 提供 了有 力 的依据 ．
（ １ ）碳源 种类 、 浓 度 的筛 选 试 验 分 别 用 葡 萄
糖、 蔗糖 、 大米粉、 可溶性淀粉 、 玉米粉以 ３ ０ ． ０ ｏ Ｌ 的添 加量 代替 基 础 培 养 基 的碳 源 ， 比较 胞 外 多糖 产量． 经 过试 验， 选择 玉米 粉浓度 为 １ Ｏ ． ０ ０ 、 ２ ０ ． ０ ０ 、 ３ ０ ． ０ ０ 、 ４ ０ ． ０ ０和 ５ ０ ． ｏ ０ ｇ ／ Ｌ， 考 察 玉 米 粉 浓
发酵培养 将液体种子以 １ ０ ％ 的接种量 ， 接人 装有 ８ ０ ｍＬ液 体 菌种 培 养 基 的容 积 为 ２ ５ ０ ｍ Ｌ的 三角瓶 中 ， ２ ８ ｏ Ｃ， １ ５ ０ ｒ ｐ ｍ 条件 下培 养 ７ ｄ ．
１ ． ２ ． ２ 液体 发 酵培 养基 的优 化
下胞外多糖产量最大 ， 预测值为 ６ ． ０ ７ ４ ｇ ／ Ｌ， 实际值为 ５ ． ９ ０ ５ ｇ ／ Ｌ ．
关 键 词： 黑木耳 ； 液 态发 酵 ； 培养 基 ； 响应面 文 献标 志 码 ： Ａ Ｄ ＯＩ ： １ ０ ． １ ６ ０ ３ ９ ／ ｊ ． ｃ ｎ ｋ ｉ ． ｅ ｎ ２ ２—１ ２ ４ ９ ． ２ ０ １ ５ ． ４． ０ ０ １ ７ 中 图分 类 号 ： Ｔ Ｓ ２ ０ １ ． ３
黑 木 耳隶 属木 耳 目、 木耳 科 、 木耳属… ， 是 生
（ 湖南 户 康离 心机 有 限 公 司 ） ， 全温摇瓶 柜 （ 太 仓
市试 验设 备厂 ） ．
１ ． ２ 试 验过 程
长于 朽木 之上 的一 种 营养 丰富 的药 、 食两 用真 菌 ， 是药 品与 保健 食 品 开发 的新 来 源 Ｊ ． 黑木 耳 多 糖 对 机 体免 疫功 能 有 明 显 的促 进 作 用 ， 除 此之 外 还
菌 物研究 所 提供 ．
的添加 量代 替基 础 培养 基 的氮 源 ， 比较 胞 外 多 糖 产量． 经过试验， 选择酵母浸粉浓度 为 ６ ． ０ ０ 、 ８ ． ｏ ０ 、 １ Ｏ ． ｏ ｏ 、 １ ２ ． ０ ０和 １ ４ ． ｏ ０ Ｌ， 考 察 酵 母 浸 粉 浓 度 对于 胞外 多糖 产量 的影 响 ．
摘要 ： 研究 了碳源 、 氮源 、 无机盐 、 维生素 Ｂ ２对 于黑木 耳液态 深层发 酵胞外 多糖产 量 的影响． 在单 因素
试验的基础上 ， 以胞外多糖 的产量为衡量 指标 ， 采用 响应面法 优化 了培养基 的组成 ． 最 终确定 最适 宜 的 培养基组成为玉米粉 ３ ６ ． ７ ８ ｇ ／ Ｌ， 酵母浸粉 １ １ ． ２ ３ ｇ ／ Ｌ， 无机盐 ６ ． １ ０ ｇ ／ Ｌ ， 维生素 Ｂ ２ ８ ６ ． ０ ６ ｍ ｇ ／ Ｌ ． 在此 条件