大白菜-结球甘蓝异附加系的SRAP鉴定

大白菜—结球甘蓝1号染色体异附加系衍生后代外源染色体的遗传分析

大白菜—结球甘蓝1号染色体异附加系衍生后代外源染色体的遗传分析异附加系是创造异代换系和异源易位系的重要桥梁材料,在理论研究和育种实践中具有十分重要的价值。

在异附加系的有效利用中,对外源染色体的精确鉴定以及遗传分析非常重要。

在各种鉴定方法中,基于基因组重测序开发的多态性In Del标记为异附加系的鉴定提供了技术保证。

异附加系外源染色体的遗传分析包括外源染色体传递给子代频率和染色体片段大小,它决定着异附加系衍生后代染色体的数目和组成。

为了创新大白菜(Brassica rapa L.ssp.pekinensis,AA)遗传种质,丰富其遗传背景,近年来,本课题组开展了将结球甘蓝优良基因导入大白菜进行种质创新研究,获得了整套大白菜—结球甘蓝单体异附加系和部分二体异附加系等珍贵材料。

但关于外源染色体在异附加系衍生后代中的遗传情况尚需系统的研究。

本研究利用In Del标记和细胞学方法,对大白菜—结球甘蓝1号染色体二体异附加系(AC1D)自交后代及小孢子再生植株、大白菜—结球甘蓝1号染色体单体异附加系(AC1M)辐射诱变后代的染色体组成及数目进行了鉴定,对获得的2个携带甘蓝易位片段材料的特征特性进行了研究。

主要研究结果如下:1.以大白菜‘85-1’、结球甘蓝‘11-1’为对照,利用均匀分布在甘蓝9条染色体上的6~8个In Del标记,对从大白菜—结球甘蓝AC1D自交后代中获得的21条和22条染色体的2个单株进行PCR扩增,确定了大白菜—结球甘蓝1号染色体异附加系附加了结球甘蓝的C03染色体,并渗入了C05和C07的染色体片段;进一步利用2个单株对甘蓝C03染色体沿全长分布的67个多态性In Del标记进行筛选,结果表明染色体数为21的单株携带了C03染色体的52个标记,染色体数为22的单株携带了C03染色体的40个标记,推断2个单株分别为大白菜—结球甘蓝单体异附加系和大白菜—结球甘蓝二体异附加系。

2.利用甘蓝C03染色体67个多态性In Del标记和细胞学方法对大白菜AC1D 自交后代46个单株进行鉴定分析,结果表明,其中3个单株为染色体数22条的大白菜—结球甘蓝二体异附加系,6个单株为染色体数21条的大白菜—结球甘蓝单体异附加系,1个单株为染色体数20条的大白菜双体代换系,29个单株为染色体数20条的附加了结球甘蓝染色体片段的大白菜易位系,还有3个单株染色体数为22条,2个单株染色体数为21条,推断其分别为易位了结球甘蓝染色体片段的大白菜双三体和三体。

大白菜和结球甘蓝基因组原位杂交及核型分析

园艺学报2007,34(6):1459-1464Ac ta H orticu lt urae Si n ica大白菜和结球甘蓝基因组原位杂交及核型分析郄丽娟,申书兴*,轩淑欣,王彦华,陈雪平,张成合,李晓峰,罗双霞(河北农业大学园艺学院,河北保定071001)摘要:为研究A、C基因组间的亲缘关系和识别不同染色体,分别以大白菜(AA)和结球甘蓝(BB)的基因组总D NA为探针,与大白菜和结球甘蓝的中期染色体杂交。

结果表明,两种基因组总D NA 在大白菜20条染色体和结球甘蓝18条染色体上都有杂交信号,但信号图型有明显差异。

大白菜基因组总DNA在大白菜和结球甘蓝染色体上的杂交信号几乎都只集中于近着丝粒区和核仁组织区,但在大白菜染色体上的分布区域略大;结球甘蓝基因组总DN A在其染色体上的杂交信号分散布满其全长,但在着丝粒区和核仁组织区显示增强的信号带,而在大白菜中期染色体上则主要集中于着丝粒和近着丝粒区,且强度弱于大白菜基因组总D NA为探针的杂交信号。

基于大白菜基因组D NA的G IS H信号对大白菜和结球甘蓝的核型进行了分析。

该研究结果为鉴别其种间杂种及其染色体的组成和同源关系提供了分子细胞学依据。

关键词:大白菜;甘蓝;基因组原位杂交;种间杂交;染色体;核型分析中图分类号:S63411;S63511文献标识码:A文章编号:05132353X(2007)0621459206K a ryotype Ana lysis of C h i nese C abbage and C abbage by G eno m e i n Sit uH ybr i d iza ti onQ I E L i2juan,S HEN Shu2xi n g*,X UAN Shu2xi n,WANG Yan2hua,C HEN Xue2pi n g,Z HANG Cheng2he, LI X i a o2f eng,and L UO Shuang2xia(College o f H orticulture,Agricult ura l Uni ver sit y o f H ebei,Ba o d i ng,H ebei071001,China)Abstr act:In order to study the relati o nship and i d entif y dif ferent chr o moso mes bet w een the A and C ge2 no me of Bra ssic a,the labeled geno m ic DN A s of Ch i n ese cabbage and cabbage were respectively hybridized to t h e ir metaphase chro moso mes.N onun if or m distri b ution of the fluorescent labeled probe D NA s were observed on all the chro moso mes of t w o species tested.The si g na l patter ns varied bet w een species and were related to t h e geno m e D NA probes.W hen Ch i n ese cabbage geno m ic D NA was used as probe,the signals were al m ost on l y i n the pericen tro meric regi o ns and the nucleolus organ izer regi o ns(NORs)of Chinese cabbage and cab2 bage,bu t the si g na l regions were larger in f or m er than latter.Wh il e cabbage geno m ic D NA was used as probe,the si g na ls d i s persed along the chro moso m e lengths of cabbage and enhanced signal bands were sho wn i n all pericentro meres and t h e NORs;On l y were observed in the pericen tro meres and the NORs of Ch i n ese cabbage chro moso mes,and t h at a ll the signal i n tensity was weaker than w it h geno m ic D NA probes ofCh i n ese cabbage.K aryotypes of Chinese cabbage and cabbage were ana l y zed based on G I S H signals.The resu lts pro2 vided a molecu lar cytol o gica l basis f or identification of i n terspecific hybrids,t h e ir chr o moso m ic co mponents and ho mologous bet w een A and C geno mes.K ey w ords:Chi n ese cabbage;Cabbage;Geno me in situ hybridization;Interspecific hybri d;Chr o mo2 so me;Karyotype analysi s收稿日期:2007-06-25;修回日期:2007-09-03基金项目:国家自然科学基金项目(30471182);河北省自然科学基金项目(C2005000222);河北农业大学将帅计划项目*通讯作者Au t hor f or corres ponden ce(E2ma i:l shen s x@m ail1hebau1edu1cn)1460园艺学报34卷大白菜(Bra ssica c ampestris L.ssp.pe ki n e nsis,AA,2n=20)和结球甘蓝(Bra ssic a ole race a var. capita ta L.,CC,2n=18)作为芸薹属的基本种,其起源演化、基因组间的亲缘关系以及细胞遗传学的研究十分重要。

大白菜、结球甘蓝、黑芥同源多倍体新种质的创建

大白菜、结球甘蓝、黑芥同源多倍体新种质的创建人工诱导多倍体是创建新种质和新材料的重要途径之一，它可以直接应用于新品种的选育，同时作为桥梁亲本可以克服远缘杂交不亲和性，打破种间杂交不育的瓶颈、实现作物育种的突破。

本文采用秋水仙素药液滴蘸籽苗生长点、细胞DNA含量检测、染色体数目鉴定及核型分析等方法对大白菜、结球甘蓝和黑芥等芸薹属植物进行了多倍体诱变和鉴定，并对获得的多倍体进行了形态学、细胞学、营养品质和分子水平甲基化研究。

主要结果如下：1.通过优化秋水仙素处理方法，成功获得了大白菜、结球甘蓝和黑芥的同源四倍体和同源八倍体新材料，使大白菜、结球甘蓝和黑芥的加倍体株率均达到80%以上。

2.大白菜、结球甘蓝和黑芥四倍体植株的染色体数分别为2n=4x=40、2n=4x=36和2n=4x=32，各有4个染色体组，通过流式细胞仪分析，结果显示四倍体植株的细胞DNA含量分别是其二倍体亲本的2倍。

3.大白菜、结球甘蓝和黑芥四倍体的减数分裂行为均比较正常，花粉生活力在70.85%-82.35%；八倍体的减数分裂极为紊乱，不能形成正常的花粉。

4.大白菜、结球甘蓝和黑芥四倍体生长旺盛，可溶性糖、Vc、粗蛋白和水分等营养品质的含量均高于其二倍体亲本。

5.对大白菜、结球甘蓝和黑芥的二倍体亲本与其相应的四倍体植株DNA甲基化水平及其模式进行了分析，结果表明：四倍体DNA总甲基化率有所增加。

大白菜、结球甘蓝和黑芥的二、四倍体甲基化水平与模式有显著区别，这些变化可能会控制某些基因的表达，从而在表观遗传等方面体现出来。

结球甘蓝-大白菜异源三倍体与结球甘蓝回交获得初级三体的研究

结球甘蓝-大白菜异源三倍体与结球甘蓝回交获得初级三体的研究李艳霞;管志坤;赵建军;申书兴;王彦华【摘要】In this study, an aneuploid plant with 2n + l chromosome was obtained from the progeny of cabbage-Chinese cabbage allotriploid backcrossing with cabbage. Cytological and SSR analysis showed that the aneuploid plant was a primary trisomic - 8 of cabbage. Furthermore, the chromosome number of the self ing and backcrossing progenies of the primary triso-mic-8 plant was identified, and the transfer rate of female and male gametes of extra-chromosome was clarified as 34. 74% and 6. 17%, respectively.%采用结球甘蓝-大白菜异源三倍体与二倍体结球甘蓝回交的方式,从回交后代BC2中获得了1株2n+1非整倍体植株.经细胞学和SSR鉴定分析,确认该2n+1植株为结球甘蓝8号初级三体.通过对8号初级三体植株自交和回交后代染色体数目的测定,明确了其额外染色体雌、雄配子的传递率分别为34.74％和6.17％.【期刊名称】《河北农业大学学报》【年(卷),期】2012(035)004【总页数】4页(P37-40)【关键词】结球甘蓝;异源三倍体;初级三体;核型分析;SSR【作者】李艳霞;管志坤;赵建军;申书兴;王彦华【作者单位】河北农业大学园艺学院,河北保定071000;河北农业大学园艺学院,河北保定071000;河北农业大学园艺学院,河北保定071000;河北农业大学园艺学院,河北保定071000;河北农业大学园艺学院,河北保定071000【正文语种】中文【中图分类】S634.1;S635.1异源三倍体是不同物种种间杂交产生的杂种，通常是一个物种先诱导成同源四倍体，再与另一物种的二倍体进行种间杂交获得。

利用SRAP分子标记分析结球大白菜的遗传多样性

中筛选出８引物应用于扩增基因组ＤＡ对Ｎ，共获得３８２条重复性好、清晰可辨的条带，大小在２００ｂ之间，其０～２５０ｐ
中２３８条为多态性带（６２％）８．８。其平均多样性指数为０３４，每个位点的有效等位基因数是１４Ｏ．８０．１，遗传相异性系７
数分布在０００．５３间，平均０５０，标准差为９４ ×１。利用ＵＧＡ法聚类分析，可将试材分成五大．５～０７５之．５８．７０ＰＭ方
类群，与传统的形态学分类有一定差异。第一、二、三类群为高桩材料，第四类群仅包括Ｖ０－１，第五类群囊Ｂ６８括绝大多数的矮桩材料。第五类群又明显分成两个亚群，春材料集中分布在一亚群之中。结果显示：结球大白菜
关键词：结球大白菜；ＳＡ标记；自交系；遗传多样性ｇＰ
白菜类蔬菜原产于中国，包括结球白菜、不结球白菜（叶、花心、半结球变种）芜菁３亚种类型ｌ散和个１】中结球。其白菜，又名大白菜（ｒｓｉａｃｍｐｓｒｓｐＰｋｅｓ）ＢａｓｃａｅｔｓＬ．．ｅｉｎｉ，ｉｓｎｓ因营养丰富、食用广泛、耐贮藏而成为我国种植面积最大的蔬菜作物之一。传统上，大白菜主要通过常规育种进行

SRAP在大白菜遗传性状分析试验中的应用

表１用于大白菜遗传多样性分析的ＳＡ￣物序列ＲＰｌ
引物正向引物序Ｎ（一）５３引物反向引物序￣（－）ｌ３Ｊ５
ｅｌｒｅＴＧＧＴＣＣＡＡＡＣＣＧＧＡＴＡｅｌＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＡｍＧＡＡＴＴＡＡＴｍｅＴＧＡＧＴＣＣＡＡＡＣＣＧＧＡＧＣｅ２ＧＡＣＴＣ２ｍＧＧＴＡＣＧＡＴＴＴＣＡＧ
ｍｅＴ３ＧＡＧＣＣＡＡＡＣＣＧＧＡＡＴｅ３ＴｍＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＧＡＡＴＴＧＡＣｍｅＴ４ＧＡＧＣＣＡＡＡＣＣＧＧＡＣＣｅ４ＴｍＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＧＡＡＴ１ｒｖＧＡｍｅＴＧＡＧ５ＴＣＣＡＡＣＣＧＧＡＡＧｅ５ＧＡＣＴＧＣＧＡｍＴＡＣＧＡＡＴＴＡＡＣｍｅＴ６ＧＡＧＣＣＡＡＡＣＣＧＧＴＡＧＴｅ６ｍＧＡＣＴＧＣＧＡＣＧＡＡＴＴＧＣＡＴｍｅＴＧＡＧＴＣＣＡＡＡＣＣ７ＧＧＴＴＧｅ７ｍＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＧＡＡＴＴＡＴＧ
ｐ．）Ｈ８０，加水溶解，然后定容至ｌＯ（Ｏｍ１酚多加１ＶＰ。％Ｐ）
（）ＴＢ２５ｘＥ缓冲液：Ｔｉ５ｇ硼酸２．ｇ０５ｌｒｓ４，７５，．ｍｏ／
１２主要器材设备．
（）Ｔｃ０热循环仪；（）１Ａ４ｌ２ＤＹＹ一１型电脑三恒多用电２
摘要：研究利用ｓＡ分子标记，结合测序板电泳和银染染色技术，对遗传关系较近的大白菜自交系进行多态ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ性ＲＰ
分析，结果分辨率高，清晰度好。８引物共检测到３８对２个位点，其中２５８个为多态性位点，多态性比率达８．８６２％，

添加甘蓝3号染色体片段的AT3-11等大白菜易位系筛选及鉴定

添加甘蓝3号染色体片段的AT3-11等大白菜易位系筛选及鉴定为创建大白菜—结球甘蓝异源易位系，本研究以大白菜—结球甘蓝3号单体异附加系（AA+C3）为试材，用60Co-γ射线对其植株进行辐射，对辐射前后植株进行自交和游离小孢子培养，并对获得的自交后代和小孢子植株进行细胞学和InDel标记鉴定，从54个小孢子植株及46个自交后代中初步筛选出8个添加结球甘蓝3号染色体片段的大白菜—结球甘蓝易位系，为大白菜的遗传与育种提供了基础研究材料。

主要研究结果如下：1．对大白菜—结球甘蓝3号单体异附加系（AA+C3）进行游离小孢子培养，利用结球甘蓝C02连锁群（位于结球甘蓝3号染色体）相对于大白菜的特异InDel标记对获得的小孢子植株进行鉴定，从17个小孢子植株中筛选出1个具有结球甘蓝特异条带的植株。

花粉母细胞减数分裂观察结果显示，该植株染色体数为20条，为添加结球甘蓝3号染色体片段的大白菜—结球甘蓝易位系，命名为AT3-11。

通过对InDel 标记的加密设计，明确了该植株中外源甘蓝片段的大小为1.03Mb。

利用大白菜A基因组10个连锁群上均匀分布的100个InDel标记对其进行分子鉴定，初步确定了该易位系中甘蓝染色体片段位于大白菜5号染色体上。

2．分别利用30Gy、45Gy和60Gy的60Co-γ射线对大白菜—结球甘蓝3号单体异附加系进行植株辐射，并对辐射后的植株进行游离小孢子培养，利用结球甘蓝C02连锁群相对于大白菜的特异InDel标记对获得的小孢子植株进行鉴定，从37个小孢子植株中筛选出8个具有结球甘蓝C02连锁群特异条带的植株。

其中，1个来自30Gy辐射的植株，5个来自45Gy辐射的植株，2个来自60Gy 辐射的植株。

对8个具有甘蓝特异条带的植株进行减数分裂观察，结果显示这些植株中有4株染色体数为20条，初步确定这4株为添加结球甘蓝3号染色体片段的大白菜—结球甘蓝易位系，命名为AT3-24、AT3-45、AT3-47和AT3-54。

添加甘蓝7号染色体片段的大白菜易位系获得及遗传稳定性分析

添加甘蓝7号染色体片段的大白菜易位系获得及遗传稳定性分析易位系是指一个物种的染色体与另一物种的染色体发生单向或相互易位的个体,易位系中外源染色体片段的遗传稳定性研究对外源优良基因的利用具有重要意义。

为创建大白菜—结球甘蓝易位系,本研究以大白菜—结球甘蓝7号单体异附加系(AC7)为试材,利用结球甘蓝7号染色体相对应的结球甘蓝C01连锁群特异In Del标记,对AC7辐射M2代、未辐射AC7回交一代BC1及其小孢子植株进行筛选,结合细胞学鉴定从中获得了3个添加甘蓝7号染色体片段的大白菜易位系AT7-1、AT7-2和AT7-3。

利用结球甘蓝特异的In Del标记对易位系自交、回交后代和小孢子植株进行了遗传稳定性分析。

主要研究结果如下:1.采用60Co-γ射线对AC7花粉进行辐射,用辐射后花粉与二倍体大白菜亲本回交获得M1植株,并对植株进行自交获得M2。

利用结球甘蓝7号染色体相对应的结球甘蓝01连锁群特异(相对于大白菜)的31个In Del标记对AC7的M2代植株进行筛选,结合细胞学鉴定从中获得了14个具有结球甘蓝特异标记的易位系植株,其中2株均含有甘蓝C01连锁群2个特异In Del标记C01-1和C01-2,物理位置为206635-283038bp,大小约为76Kb;另外12株均含有结球甘蓝C01连锁群7个特异In Del标记C01-1、C01-2、C01-3、C01-4、C01-5、C01-6和C01-7。

2.从M2的14个易位系植株中选择了2个添加不同甘蓝片段的易位系植株AT7-1和AT7-2进行了游离小孢子培养和自交、回交留种。

利用结球甘蓝特异的In Del标记对AT7-1和AT7-2植株进行了遗传稳定性分析。

结果表明,不同易位系之间外源染色体片段的遗传稳定性不同,同一易位系自交、回交后代和小孢子植株中外源染色体片段的稳定性亦有差异。

AT7-1的自交、回交后代和小孢子植株中具有甘蓝片段的植株比例分别为73%、28%和50%;AT7-2的自交、回交后代和小孢子植株中具有甘蓝片段的植株比例别为84%、62%和25%。

不结球白菜品种鉴定 ssr分子标记法

不结球白菜品种鉴定 ssr分子标记法不结球白菜是一种重要的蔬菜作物，具有高营养价值和经济价值。

为了研究不同的不结球白菜品种，可以使用SSR分子标记法进行品种鉴定。

SSR分子标记法包括先从DNA中扩增核苷酸序列，然后根据DNA序列特性，使用引物对PCR扩增产物进行分析。

这种技术广泛应用于分子遗传学和生物技术领域，可以提供快速而准确的品种鉴定和基因检测。

使用SSR分子标记法进行不结球白菜品种鉴定的步骤包括：
1.提取不结球白菜DNA。

2.选择适当的SSR引物和PCR反应体系。

3.通过PCR扩增获得DNA片段。

4.电泳分析PCR产物，评估基因型差异。

5.根据结果进行不结球白菜品种鉴定和分析。

通过SSR分子标记法进行品种鉴定，可以帮助种植者和消费者确定不同品种的不结球白菜，从而提高种植效率和产品质量。

大白菜-结球甘蓝异附加系的SRAP鉴定

大白菜-结球甘蓝异附加系的SRAP鉴定闻晓英;李晓峰;商少川;顾爱侠;申书兴;王彦华【期刊名称】《华北农学报》【年(卷),期】2012(027)005【摘要】以8个结球甘蓝品种和7个大白菜品种为试材,利用23对SRAP引物,筛选结球甘蓝相对于大白菜特异的SRAP引物.结果表明,18对引物在大白菜和结球甘蓝间表现多态性,可以区分大白菜和结球甘蓝不同品种.利用筛选出的18对SRAP 引物对部分大白菜-结球甘蓝异附加系进行了鉴定,结果表明,其中6对引物P53、P86、P93、P121、P123和P142可以鉴定异附加系AA+ 2C1、AA+C3、AA+C5、AA +C7和AA+C8.大白菜-结球甘蓝异附加系特异SRAP标记的建立,为开展大白菜-结球甘蓝易位系的鉴定奠定了基础.【总页数】3页(P101-103)【作者】闻晓英;李晓峰;商少川;顾爱侠;申书兴;王彦华【作者单位】河北农业大学园艺学院,河北保定071000;河北农业大学园艺学院,河北保定071000;河北农业大学园艺学院,河北保定071000;河北农业大学园艺学院,河北保定071000;河北农业大学园艺学院,河北保定071000;河北农业大学园艺学院,河北保定071000【正文语种】中文【中图分类】S634.03【相关文献】1.大白菜-结球甘蓝2号单体、双体异附加系的获得与鉴定 [J], 王娟;桑丹;轩淑欣;李晓峰;王彦华;申书兴2.大白菜-结球甘蓝5号二体异附加系的选育及鉴定 [J], 孟雅宁;王彦华;顾爱侠;李晓峰;申书兴3.大白菜-结球甘蓝双单体异附加系的SSR鉴定及其特性 [J], 顾爱侠;王娟;陈雪平;罗双霞;王彦华;申书兴4.大白菜-结球甘蓝2号单体异附加系的FLOWERING LOCUS C(FLC)基因鉴定[J], 顾爱侠;刘立平;赵建军;许愿超;王彦华;申书兴5.大白菜-结球甘蓝4号单体异附加系的鉴定 [J], 刘畅;王彦华;轩淑欣;罗双霞;陈雪平;李晓峰;申书兴因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

大白菜缘枯病抗性基因的SRAP标记筛选

大白菜缘枯病抗性基因的SRAP标记筛选邸青;张淑江;章时蕃;李菲;孙日飞【摘要】以大白菜缘枯病抗病材料山西信中籽-339和感病材料山西信中籽-332为亲本构建包含111个单株的F2分离群体,利用SRAP分子标记技术并结合分离群体混合分析法(BSA)筛选与抗病基因连锁的标记.结果表明:在672对SRAP引物中有19对引物在抗感病池间存在多态性,经过单株筛选,BMe10CO11标记与大白菜缘枯病抗病基因连锁,其遗传距离为11.4 cM.【期刊名称】《中国蔬菜》【年(卷),期】2010(000)016【总页数】5页(P21-25)【关键词】大白菜;缘枯病;SRAP标记【作者】邸青;张淑江;章时蕃;李菲;孙日飞【作者单位】中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081【正文语种】中文【中图分类】S436.341.1+9大白菜〔Brassica campestris L. ssp. pekinensis（Lour）Olsson〕起源于中国，是十字花科芸薹属中重要的蔬菜作物之一。

近年来在大白菜种植过程中出现了一种新型病害，该病害多发生于北方秋季，始发于早秋，随着时间的推移，病情逐渐加重，直至植株死亡。

染病初期多数叶片叶缘焦枯，随着病情发展，由叶缘随叶脉向基部扩展，叶脉、叶柄失绿、枯黄，最终全株干枯死亡。

迄今，其病原物尚未分离出，也未见相关文献报道这一病害，根据该病害发病症状，暂定名为缘枯病。

该病一旦发生，将导致大白菜减产甚至绝产，造成极大的经济损失。

选育抗缘枯病的品种是保持大白菜生产稳产高产的重要措施，利用分子标记辅助选择抗病品种是经济有效的育种途径之一。

目前，分子标记辅助选择已广泛应用于园艺作物育种方面（张剑侠等，2001；姬广海等，2004；孟芳等，2007）。

大白菜与紫甘蓝种间杂种的获得与鉴定

大白菜与紫甘蓝种间杂种的获得与鉴定乔海云;李菲;张淑江;章时蕃;张慧;孙日飞【摘要】Interspecific hybridizations between different varieties of Brassica rapa L. ssp. peki-nensis (Lour.) Olsson and Brassica oleracea var. capitata L. were carried out. The hybrids were obtained by successive bud pollination and ovule culture and tested by means of identification by cytology. Results showed that 57 plants were obtained by interspecific hybridization between B. rapa L. ssp. pekinensis and B. oleracea var. capitata L. Cytological identification and pollen characteristics survey revealed that 47 of the hybrids had the anticipated chromosomes (2n =19) and pollen fertility was aborted; while 6 hybrids had 38chromosomes and were fertile. The BC1 plants were obtained through back cross between fertile hybrids F1 and B. rapa L. ssp. pekinensis. Field investigation showed that all F, hybrids had many characteristics from both parents,the BC1 plants had obvious heading and were similar to B. rapa L. ssp. pekinensis.%以不同类型的大白菜与紫甘蓝为材料,运用蕾期授粉结合胚挽救技术获得大白菜与紫甘蓝的种间杂种,并对其进行细胞学鉴定.结果表明,大白菜与紫甘蓝杂交,获得了57株F1代幼苗；对根尖染色体数量进行观察和杂种花粉特性调查发现,其中47株具有预期的染色体数目,2n =19,鉴定为真杂种,其花粉败育；另有6株具有38条染色体,鉴定为种间异源双二倍体,应该是发生了染色体自然加倍,其花粉可育.可育的杂种F1代与大白菜回交,获得了大白菜-紫甘蓝BC1代材料.田间观测结果显示,杂种F1代植株综合性状均介于双亲之间,BC1代植株包球明显,综合性状偏向母本大白菜.【期刊名称】《植物科学学报》【年(卷),期】2012(030)004【总页数】8页(P407-414)【关键词】大白菜;紫甘蓝;种间杂交;胚挽救;细胞遗传【作者】乔海云;李菲;张淑江;章时蕃;张慧;孙日飞【作者单位】中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京100081;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京100081;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京100081;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京100081;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京100081;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京100081【正文语种】中文【中图分类】Q943;S634蔬菜作物的色泽是产品的重要特征之一，也是吸引消费者的重要方面。

耐抽薹大白菜—结球甘蓝易位系的获得及抽薹相关基因的cDNA-AFLP分析

耐抽薹大白菜—结球甘蓝易位系的获得及抽薹相关基因的cDNA-AFLP分析大白菜(Brassica rapa ssp. pekinensis,AA)为种子春化型植物,萌动的种子即可感受低温完成春化,春夏季栽培很容易先期抽薹,使叶球失去商品价值和食用价值,给生产造成巨大损失。

结球甘蓝(Brassica oleracea var.capitata)为绿体春化型,较大白菜具有很强的耐抽薹性。

本实验室创制了大白菜染色体组背景下添加1条结球甘蓝染色体的单体异附加系,其中添加结球甘蓝4号染色体的大白菜单体异附加系表现最耐抽薹。

本研究在获得大白菜—结球甘蓝4号单体异附加系及其后代小孢子植株的群体基础上,通过2年抽薹性鉴定,筛选出耐抽薹和易抽薹植株,并进一步利用cDNA-AFLP对耐抽薹和易抽薹植株进行分析。

其研究结果如下：1.以大白菜—结球甘蓝4号单体异附加系及其自交后代的616个来自不同胚的小孢子植株群体为材料,综合考虑显蕾、抽薹、开花性状,采用6级抽薹调查分级标准、5个抽薹评价等级,通过2年抽薹性调查,筛选出60份试验材料,其中45株耐抽薹植株和15株易抽薹植株。

2.通过花粉母细胞减数分裂观察,初步对筛选出的耐抽薹植株染色体数目进行鉴定,获得了耐抽薹大白菜—结球甘蓝易位系。

并对获得耐抽薹和易抽薹植株叶片、花器官、中肋、叶球、根等性状进行了观测。

3.利用cDNA-AFLP技术,选用256对引物组合,对不同春化处理的上述耐抽薹和易抽薹植株叶片差异表达片段进行分离。

获得差异条带124条,包括1)耐抽薹材料有条带,易抽薹材料无条带的差异条带71条。

包括耐抽薹材料不同春化处理间相关产物持续表达14条,递增表达41条、递减表达16条；2)耐抽薹材料无条带,易抽薹材料有条带的差异条带53条。

包括易抽薹材料不同春化处理间相关产物持续表达8条,递增表达28条,递减表达17条。

受低温调控表达的差异条带共10条,包括耐抽薹材料有条带,易抽薹材料无条带的4条；耐抽薹材料无条带,易抽薹材料有条带的2条；耐易材料均表达的4条。