临床微生物检验标本的采集

临床微生物检验标本的采集及微生物检验报告的解读

一临床微生物检验标本的采集

1.临床微生物检验的思路和原则

确保标本可靠（（分析前质量）

保证检验质量

全面了解机体的正常菌群

快速准确提供信息

微生物学的定性、定量和定位分析

结合病情，与临床联系

2.微生物结果的影响因素

2.1针对性的检验申请、病人准备、标本的采集、标本的运输标本的保存和处理（46~68.2%）；标本检验（ 4­15% ）；结果审核和批准、危急值报告（18.5­47%）

2.2正确采集、转运与保存微生物标本直接关系到致病微生物培养的正确性与阳性率，是从临床微生物检验获得正确结果的最关键一步。

2.3Garbage-In- Garbage-Out 不合格的标本-不正确的检验结果-错误的诊断-错误的治疗-卫生资源的浪费、病人费用增加、耐药菌株增加

2.4成功治疗感染症的重要前提:正确的微生物学检验始自标本采取。否则工作人员水平再高也不可能得到正确的结果，临床医师、护士及检验人员都必须通晓其要领

3.标本采集前临床医师及护士要考虑的问题

3.1是否感染？细菌感染？真菌感染还是病毒、寄生虫感染？

3.2何时采集样本？

3.3采集什么样的标本？怎样采集？样本是否足量？

3.4采用哪种无菌容器或运送培养基采集标本？

3.5如何完善的填写标本申请单？针对某些特殊致病菌的排查要求应怎样写？（申请单信息越详尽，越有助于实验室出具符合临床情况的结果报告，如疑似诊断、准确的取材部位、甚至取样时用抗菌药物。）

3.6关键需要特别重视的问题：标本采集是否规范；标本保存、运送是否规范？；无菌体液培养重视与否？

4.微生物检查的样本收集原则：

4.1收集样本时应使用严格的无菌技术，将污染情形降至最低。

4.2收集真正感染的病灶处之样本，且不受到邻近区域微生物的污染。

4.3采用无菌卫材收集样本，并置于已贴有病患标签之坚固且密和性佳的容器中，将容器置于适当的储存环境待送。

4.4在病患感染的急性期、使用抗生素或伤口局部治疗前收集标本，成人应需氧瓶、厌氧瓶同时培养，以提高阳性检出率和避免漏检。

4.5样本不可添加防腐剂，以免干扰病原菌分离。

4.6于送检申请单上提供足够的有关临床资料(如姓名、性别、年龄、病例号、临床诊断、标本来源、采集时间、检查项目、抗生素应用情况等)，以便实验室能够合理选择培养环境和培养基；。

4.7即刻将样本送检，不可拖延，标本采集后在室温下超过2h未送达实验室，可视为不合格标本。不能使用冷藏的样本检验。

4.8实验室只能接受和处理合格标本；对不合格标本退回必须说明原因，并应及时与临床联系。

4.9厌氧菌样本采取必须隔绝空气，混入空气的样本影响检验结果，不能使用。

5.血液培养标本采集和处理：

5.１采血指征：

对入院危重感染患者应在未进行抗菌药物治疗之前，及时做血培养。一般患者出现以下一种体征时可作为行血培养的重要指征：

①发热（≥38℃）或低温（≥36℃）；②寒战；③白细胞增多（计数＞10.0×109/L，特别有“核左移”时）；④皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭，血压降低；⑤C反应蛋白升高及呼吸加快；⑥血液病患者出现粒细胞减少，血小板减少等，或同时具备上述几种体征时而临床可疑菌血症应采集血液培养。

新生儿可疑菌血症，应同时做尿液和脑脊液培养。

5．2皮肤消毒程序：严格执行以下三步法。

5.2.1 70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。

5.2.2 1%~2%碘酊作用30s或10%碘伏60s，从穿刺点向外划拳消毒，至消毒区域直径达3cm以上。

5.2.3 70%酒精脱碘：对碘过敏的患者，用70%酒精消毒60s，待酒精挥发干燥后采血。

5.3培养瓶消毒程序：①70%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞，作用60s；②用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞子表面残余酒精。

5.4静脉穿刺和培养瓶接种程序：

5.4.1在穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手套固定静脉，不可接触穿刺点；

5.4.2用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头（如果行第二次穿刺，应换针头）直接注入血培养瓶，轻轻颠倒混匀防止血液凝固。立即送检，切勿冷藏。

5.5采血量：

成人采血量是8~10ml，儿童1~5ml。血液和肉汤之比为1:5~1:10。

5.6血培养次数和采血时间：

◆根据研究，仅抽血培养1次分离率约占80%，培养2次的分离率约占90%，而培养3次的分离率约占99%。仅抽血培养1次，除了分离率低（其原因是菌血症常会暂时消失）外，且将很难评估病原菌是污染还是与感染有关。如果抽血培养2次或3次，则能够得到肯定。

◆采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行，24h内应采集2~3次做血培养（一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养）。入院前两周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3d，每天采集2份。对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前0.5~1h采集血液，或于寒战或发热后1h进行。

5.7特殊的全身性和局部感染患者采血培养的建议：

◆可疑急性原发性菌血症、真菌菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎，应在不同部位采集2~3份血标本。

◆不明原因发热，如隐性脓肿，伤寒热和波浪热，先采集2~3份标本，24~36h后估计体温升高之前（通常在下午）再采集2份以上。

◆可疑细菌性心内膜炎，在1~2h内采集3份血标本，如果24h后阴性，再采集3份以上的血标本。

5.8标本运送：

采血后应该立即送检，如不能立即送检，需室温保存或置35℃~37℃孵箱中，切勿冷藏。

6尿液标本采集和处理：

6．1采样原则：标本需在应用抗菌药物之前或停用抗菌药物5天之后留取尿液标本；尿液在膀胱内应停留6～8 小时以上，使细菌有足够的时间繁殖。一般以清晨第一次的中段尿为宜。

6.2采集方法：

6.2.1中段尿采集法：：成年男性和女性分别用肥皂水或1：1000 高锰酸钾水溶液清洗尿道口和外阴部，再用无菌生理盐水冲洗尿道口，然后排尿弃去前段尿液，收集中段尿5～10ml 盛于带盖的无菌容器内送检。

6.2.2导尿法：用导尿管导取10～15ml尿液，置灭菌容器中送检；长期留置导尿管者应更换新导尿管留尿；留置导尿时，用无菌消毒法消毒导尿管外部及导尿管口，用无菌注射器通过导尿管抽取尿液送检(不可采集尿液收集袋中的尿液送检)；

6.3送检：尿液收集后，盖上容器盖子立即送检，若无法及时送检，置于4℃冰箱中保存不可超过2小时。

6.4注意事项：

◆收集尿液过程中，请勿将手伸入容器内，且尿液勿满出容器外，以免污染。而以无菌导管技术