大型溞毒性实验标准
水质物质对蚤类(大型蚤)急性毒性测定方法
水质物质对蚤类（大型蚤）急性毒性测定方法water quality——Determination of the acute toxicityof substance to Daphnia（Daphnia magna straus）GB/T13266-91本标准参照采用国际标准ISO 6341—1982《水质——大型蚤运动抑制的测定》。
本标准用大型蚤（Daphnia magna straus（Cladocera Crustacea））为试验生物。
测定物质或废水的半数抑制浓度，半数致死浓度（24h-EC50、24h-LC50或 48h-EC50、48h－LC50），用于判断物质或废水的毒性程度。
1 适用范围本标准适用于以下范围；a.在试验条件下可溶的化学物质（包括工业原料和产品、食品添加剂、农药、医药等）。
b.工业废水。
C.生活污水。
d.地表水、地下水。
2 原理2.1 24h－EC50、48h－EC50指在 24或 48 h内百分之五十的受试蚤运动受抑制时被测物的浓度。
2.2 运动受抑制（Immobilization）反复转动试验容器，15s之内失去活动能力的大型蚤，被认为运动受抑制。
即使其触角仍能活动，也应算做不活动的个体。
2.3 24h－LC50、40h－LC50指在24或48h内百分之五十的受试蚤死亡时被测物的浓度，以受试蚤心脏停止跳动为其死亡标志。
3 试验材料3.1试验生物为大型蚤（Daphnia magna straus,甲壳纲，枝尼亚目）。
保持良好的培养条件，使大型蚤的繁殖被约束在孤雌生殖的状态下（见附录A）。
选用实验室条件下培养3代以上的、出生 6～24 h的幼蚤为试验蚤。
试验蚤应是同一母体的后代。
3.2试验用水：3.2.1配制人工稀释水为试验用水。
新配制的标准稀释水PH为7.8±O.2，硬度250±25 mg／L（以CaCO3计）Ca／Mg比例接近 4:1，溶解氧浓度在空气饱和值的 80 ％以上，并不含有任何对大型蚤有毒的物质。
大型水蚤测试标准方法
大型水蚤测试标准方法大型水蚤测试标准方法本标准部分参照国际标准ISO6341：1982《水质——大型水蚤(甲壳纲、枝角目)活动抑制的测定》(UDC 617.777：576.097.2)及美国标准法“水和废水标准检验法”804B.水蚤(Daphnia)的生物检测步骤。
1 主题内容与适用范围本标准规定了大型水蚤生物测试技术中生存及运动影响(急性试验)和生长及繁殖试验方法(慢性效应)。
本标准适用于评价可溶性化学物质的毒性；评价工业废水及工业固体废物浸出液的综合毒性；评价废水处理效果；也适用于地面水、地下水的毒性评价及水中沉积物的毒性评价。
2 方法原理2.1 测定初始浓度EC50值，此浓度是指在本标准规定的条件下，24h及48h内使50%暴露在试验液中的大型水蚤失去活动能力的浓度，并指出使所有实验水蚤失去活动能力的最低浓度，及不能使任何实验水蚤丧失活动能力的最高浓度。
2.2 测定初始浓度LC50值，此浓度是在本标准规定的条件下24h 及48h内使50%暴露在试验液中的大型水蚤心脏停止跳动能力的浓度，并指出使所有大型水蚤死亡的最低浓度及不引起死亡的最高浓度。
2.3 测定生长曲线，不同浓度下实验水蚤生长的速度不同，其生长曲线也不同，与对照组生长曲线比较判断其生长影响。
2.4 测定生殖量，相同条件的实验水蚤在不同浓度实验液中由于毒性作用，其每胎生出的幼水蚤数量不同，与对照组比较判断其毒性。
3 试剂和材料3.1 试验生物采用大型水蚤(Daphnia magna straus)62Dm纯品系生物株，为同龄同母体后代。
EC50及LC50试验用1龄～3龄水蚤，每容器10个，平行2～3组；繁殖及生长试验用刚出生的幼水蚤，每浓度组5～6个水蚤。
3.2稀释水可采用未被有毒物质污染的天然水(地面水或地下水)及自来水(自然暴气的)，pH值为7～8.6，溶解氧4mg/L以上，或空气饱和氧的60%以上，水的硬度为250±22mg/L(以CaCO3表示)，也可用符合上述条件的人工配制水。
实验方案
材料：1.大型水溞（做水生态毒理或是水生态、小池塘）（采自淡水池塘,在20±1℃的恒温光照培养箱中进行纯系培养。
挑出一只健壮个体进行孤雌繁殖后移出母溞继续培养幼溞,如此反复操作直至达到试验要求的幼溞数量。
其间投喂纯培养的淡水小球藻Chlorellasp.,小球藻培养的密度约为6×106cells/mL,日投喂量为10mL。
挑选溞龄小于24h的健康幼溞供试。
）1.预备试验：试验浓度分别为0.1、1、10mg/L，每个浓度至少放5个幼蚤，通过预试验找出被测物使100％大型蚤运动受抑制的浓度和最大耐受浓度的范围，然后在此范围内设计出正式试验各组的浓度。
2.正式试验：根据预备试验得出的浓度范围,设置6 个系列试验浓度和一个空白对照组,设置浓度分别为:？？？.每个浓度 3 个平行组,试验容器为50mL 烧杯,盛放40mL 试验溶液,每个烧杯中放10 只个体均匀的6~24h 的幼溞,水温(20±2)℃.用曝气大于24h 的稀释水(pH6.8∼7.2,COD1.02∼1.20ma/L, TOC0.02mg/L,电导率160∼170μS/cm,硬度(200±25)mg/L(以CaCO3 计,Ca、Mg 比例接近4:1))配制成不同浓度的试验液,保持光照与黑暗比16h:8h,试验期间不投放饵料,不更换试验溶液,分别于24,48,72,96h 在显微镜下观察大型溞存活状况（不活动或死亡）并记录试验结果,心脏停止跳动视为死亡.对照组死亡率不超过10%.3.检查大型蚤的敏感性4.慢性毒性试验：试验浓度设置以急性48h-LC50 和预试试验结果为基础,设置一个空白对照组以及 5 个浓度,分别为？？？？.每个浓度20个平行组.每个烧杯中盛放50mL 试验溶液及 1 只6∼24h 的幼溞.试验期间采用半静态试验系统,每隔1d更换1次试验溶液,保证试验期间受试液浓度为起始浓度的80%以上,更换受试液时滴加新鲜的斜生栅藻浓缩液 1 滴,使试验液中的藻密度为2.0×105∼3.0×105cells/mL.试验期间每24h 观察 1 次,取出新生幼溞,记录母溞第 1 次产溞时间、第 1 次产溞数、第3次产溞时间、第3次产溞数以及整个试验过程中的产溞次数、总产溞数、母溞脱皮次数、产雄溞数等,试验结束时在显微镜下测量母溞的体长(从头盔至壳刺部的长度).5. 子代恢复分别选取每个试验处理组中母溞所生的第1胎幼溞F1(lst)和第3胎幼溞F1(3rd)各20只(小于24h),分别放在50mL没有受试液的正常培养液中(恢复期),进行21d的恢复培养,其他条件与以上的慢性毒性试验相同.试验期间每24h 观察 1 次,取出新生幼溞,记录母溞第 1 次产溞时间、第1次产溞数、第3 次产溞时间、第3次产溞数以及整个试验过程中的产溞次数、总产溞数、脱皮次数等,试验结束时在显微镜下测量其体长(从头盔至壳刺部的长度)6. 对大型溞的胚胎毒性将怀卵8h 的母溞置于解剖镜下,从母溞体内取出卵,分别暴露于已准备好的不同浓度的处理液和空白对照液中,其中有机硅为0.05,0.10,0.20,0.40,0.60mg/L,每个处理10 卵粒,4个重复.在培养条件下进行孵化,24,48,72,96h(直到对照组不再孵化)检查结果,记录孵化受抑制率和对发育阶段的抑制情况观察.。
甲基嘧啶磷对三种水生生物的急性毒性及安全性评价
甲基嘧啶磷(Pirimiphos-methyl)是1974年英国帝国化学工业集团开发的一种低毒、高效、低残留的嘧啶类有机磷杀虫杀螨剂[1]，属于胆碱酯酶（ChE ）抑制剂，其致毒机理为阻抑昆虫神经突触上乙酰胆碱酯酶（AchE ）的活性，引起乙酰胆碱（ACh ）蓄积，使胆碱神经受到持续冲动，导致害虫持续兴奋后死亡[2-4]。
常被用于粮食仓储防虫，是联合国粮农组织和世界卫生组织推荐使用的储粮防护剂[5]。
目前对甲基嘧啶磷的研究主要集中在合成开发和复配[6]、仓储防效[7-8]、残留[9-10]、分析方法开发[11]及废水处理[12]。
甲基嘧啶磷在农药登记中均为卫生杀虫剂或用于仓储杀虫，其除了对仓储害虫具有很好的防效外，还对田间害虫具有一定的活性，可进行甲基嘧啶磷农药登记使用范围的扩大研究。
有研究表明[13]，有机磷农药喷洒后一般只有10%～20%的药液在作物上附着，剩余大部分均残存在土壤、水和大气中，之后随着降水、沉降和径流的冲刷而进入地下水和江河湖泊中，进而对水生生物造成影响。
因此，有必要研究甲基嘧啶磷对水生生物的毒性效应，从而更加全面、可靠地评价甲基嘧啶磷的环境安全性。
目前常用于污染物毒性评价的水生生物主要有藻类、溞类和鱼类。
藻类作为水生生态系统的初级生产者，是评价水环境质量和污染物生态毒性的关键生物，如被研究者广泛应用到水环境毒理试验中的斜生栅藻(Scenedesmus obliquus )对环境污染程度就有着高度敏锐性[14]。
溞类是浮游动物的主要构成部分，对水生生态系统的功能、结构和生物生产力起着至关重要作用。
溞类中研究使用最多的是大型溞(Daphnia magna )，其分布范围广，并对毒物具有较高的敏锐收稿日期：2023-03-09作者简介：马纪（2000—），女，湖南汨罗人，在读硕士，主要研究方向为农药生态毒理。
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5％甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂对6种环境生物的急性毒性
5％甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂对6种环境生物的急性毒性游泳;林涛;李建宇;史梦竹;郑丽祯;傅建炜;魏辉【摘要】甲氨基阿维菌素苯甲酸盐是一种新型的抗生素类杀虫剂、杀螨剂，其大量使用可能会导致一系列的生态风险，因此有必要开展其对相关环境生物毒性的研究。
测定了甲氨基阿维菌素苯甲酸盐对意大利蜜蜂、日本鹌鹑、斑马鱼、家蚕、大型溞和赤子爱胜蚓6种非靶标生物的急性毒性。
5％甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂对蜜蜂的急性经口LC50（48 h）为0．555 a．i．mg・ L-1，对鹌鹑的经口LD50（7 d）为148．369 a．i．mg・ kg-1，对斑马鱼的LC50（96 h）为0．368 a．i．mg・ L-1，对家蚕的急性摄入毒性LC50（96 h）为0．005 a．i．mg・ L-1，对大型溞的运动抑制毒性EC50（48 h）为0．020 a．i． mg ・ L-1，对蚯蚓的急性毒性LC50（14 d）为18．397 a．i．mg・ kg-1。
该农药对家蚕和大型溞均为剧毒，对蜜蜂和斑马鱼均为高毒，对鹌鹑中毒，对蚯蚓低毒。
总体而言，甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂对环境生物危害大，在使用过程中要注意。
%Background Emamectin benzoate is a novel antibiotic insecticide and acaricide .Its extensive use may lead to serious ecological risks .It is necessary to evaluate its biological toxicity in relation to untargeted species .[Method]The acute toxicity of 5% emamectin benzoate on six representative untargeted species , i.e.honeybee ( Apis mellifera) , Japanese quail ( Coturnix japoni-ca) , zebra fish ( Danio rerio) , silkworm ( Bombyx mori) , Daphnia magna and earthworm ( Eisenia fetida) , was tested in laborato-ry.[Result]The results showed that the LC50(48 h) for acute oral toxicity (microemulsion) on bee was 0.555 a.i.mg・ L-1(high-lytoxic).The LD50(7 d) for quail was 148.369 a.i.mg・ kg-1(moderately toxic);the LC50(96 h) for zebra fish was 0.368 a.i. mg・ L-1;the LC50(96 h) for silkworm was 0.005 a.i.mg・ L-1(extremely toxic), the EC50(48 h) for Daphnia magna was 0.020 a.i.mg・ L-1(extremely toxic);and the LC50(14 d) for earthworm was 18.397 a.i.mg・ kg-1(weakly toxic).[Conclusion and significance]In general, the emamectin benzoate can be considered of high risk to untargeted organisms and should be used with caution .【期刊名称】《生物安全学报》【年(卷),期】2014(000)001【总页数】6页(P40-45)【关键词】甲氨基阿维菌素苯甲酸盐;环境生物;急性毒性【作者】游泳;林涛;李建宇;史梦竹;郑丽祯;傅建炜;魏辉【作者单位】福建省农业科学院植物保护研究所，福建福州350013;福建省农业科学院植物保护研究所，福建福州350013;福建省农业科学院植物保护研究所，福建福州350013;福建省农业科学院植物保护研究所，福建福州350013;福建省农业科学院植物保护研究所，福建福州350013;福建省农业科学院植物保护研究所，福建福州350013;福建省农业科学院植物保护研究所，福建福州350013【正文语种】中文甲氨基阿维菌素苯甲酸盐(emamectin benzoate)，化学名称4′-脱氧-4-表甲氨基阿维菌素B1苯甲酸盐，是1984年美国Merk & C.公司(Demchak &Dybas,1997)对阿维菌素进行衍生化合成，1994年又经优化改进开发得到的半合成农药品种，是一种新型的抗生素类杀虫剂、杀螨剂。
3种农药对大型溞的急性毒性比较
3种农药对大型溞的急性毒性比较杨淞霖;尹晶;王会利;郭宝元【摘要】采用“半静态法”测定了3种农药及其混剂对大型溞的24 h、48 h急性毒性,根据我国《化学农药环境安全评价实验准则》中的毒性等级标准,它们对大型溞的毒性等级如下:精甲霜灵悬浮种衣剂对大型溞的24 h、48 h-EC50均大于10 a.i.mg·L-1,属“低毒”级,咯菌腈悬浮种衣剂对大型溞的24 h、48 h-EC50分别是0.339 mg·L-1、0.246 mg·L-1,根据0.1 a.i.mg· L-1 ＜EC50(48 h)≤1.0 a.i.mg·L-1判断,属“高毒”级.嘧菌酯水分散粒剂对大型溞的24 h、48 h-EC50分别是0.389 mg·L-1、0.286 mg·L-1,根据0.1a.i.mg· L-1 ＜EC50(48 h)≤1.0a.i.mg· L-1判断,属“高毒”级.精甲霜灵·咯菌腈·嘧菌酯悬浮种衣剂对大型溞的24 h、48 h-EC50分别是0.292 mg·L-1、0.228 mg.L-1,根据0.1 a.i.mg· L-1 ＜EC50(48 h)≤1.0 a.i.mg·L-1判断,属“高毒”级.精甲霜灵·咯菌腈·嘧菌酯悬浮种衣剂和嘧菌酯水分散粒剂都属“高毒”,但比较具体数值,发现精甲霜灵·咯菌腈·嘧菌酯悬浮种衣剂毒性相对更大,原因是其中还含有“高毒”的咯菌腈.%Semi-static method was applied to determine the 24 h,48 h-EC50 values of three pesticides and their compounds to Daphnia magna Straus.And according to experimental criteria for environmental safety evaluation of chemical pesticides in China,the 24 h and 48 h-ECs0 values of mefenoxam seed coating agent are both above 10 a.i.mg· L-1 so it is of lowtoxicity.Fludioxonil seed coating agent is highly toxic because its 24 h and 48 h-EC50 values are 0.339 mg· L-1 and 0.246 mg· L-1 according to the standard of 0.1 a.i.mg· L-1 ＜EC50(48 h)≤ 1.0 a.i.mg·L-1.Azoxystrobin water dispersible granule is of high toxicity because its 24 h and 48 h-EC50values are 0.389 mg·L-1 and 0.286 mg· L-1 according to the standard of 0.1 a.i.mg· L-1 ＜EC50(48 h) ≤ 1.0 a.i.mg· L-1.Mefenoxam-fludioxonil-azoxystrobin seed coating agent is of high toxicity because its 24 h and 48 h-ECs0 values are 0.292 mg· L-1 and 0.228 mg·L-1 according to the standard of 0.1 a.i.mg· L-1 ＜EC50(48 h)≤ 1.0 a.i.mg-L-1.Mefenoxam-fludioxonilazoxystrobin seed coating agent and azoxystrobin water dispersible granule are both of high toxicity.However,considering the EC50 values,mefenoxam-fludioxonil-azoxystrobin seed coating agent is more toxic because it contains fludioxonil besides azoxystrobin.【期刊名称】《生态毒理学报》【年(卷),期】2017(012)002【总页数】5页(P238-242)【关键词】农药;大型溞;急性毒性;半静态法【作者】杨淞霖;尹晶;王会利;郭宝元【作者单位】中国科学院生态环境研究中心中国科学院环境生物技术重点实验室,北京100085;中国科学院大学,北京100049;中国科学院生态环境研究中心中国科学院环境生物技术重点实验室,北京100085;中国科学院大学,北京100049;中国科学院生态环境研究中心中国科学院环境生物技术重点实验室,北京100085;中国科学院大学,北京100049;中国科学院生态环境研究中心中国科学院环境生物技术重点实验室,北京100085;中国科学院大学,北京100049【正文语种】中文【中图分类】X171.5自20世纪40年代以来，农药工业蓬勃发展，一方面提高了农产品产量和质量，另一方面化学农药的不规范使用在全球范围内也带来了一系列残留和污染问题[1]。
5种药剂对大型溞的急性活动抑制毒性研究
5种药剂对大型溞的急性活动抑制毒性研究马德君;冯磊;蒋红云;李传仁;张燕宁;何伟志;张兰【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2012(040)017【摘要】[目的]比较5种药剂对大型溞(Daphnia magna Straus)的急性活动抑制毒性.[方法]测定了5种药剂对大型溞的急性活动抑制中浓度EC50,并评价了5种药剂对大型溞的毒性.[结果]5种药剂对大型溞的毒性大小表现为:20％甲氰菊酯水乳剂(EC50=0.002 8a.i.mg/L)＞ 10％高效氯氟氰菊酯可湿性粉剂(EC50=0.008 9 a.i.mg/L) ＞7.5％鱼藤酮乳油(EC50=0.189 9 a.i.mg/L)＞7.5％除虫菊素水乳剂( EC50=0.202 0 a.i.mg/L) ＞0.5％大黄素甲醚水剂(EC50=0.640 1 a.i.mg/L).[结论]为大型溞应用于环境污染监测研究提供了理论依据.【总页数】2页(P9331,9366)【作者】马德君;冯磊;蒋红云;李传仁;张燕宁;何伟志;张兰【作者单位】长江大学农学院,湖北荆州434025;中国农业科学院植物保护研究所,农业部作物有害生物综合治理综合性重点实验室,北京100193;中国农业科学院植物保护研究所,农业部作物有害生物综合治理综合性重点实验室,北京100193;长江大学农学院,湖北荆州434025;中国农业科学院植物保护研究所,农业部作物有害生物综合治理综合性重点实验室,北京100193;中国农业科学院植物保护研究所,农业部作物有害生物综合治理综合性重点实验室,北京100193;中国农业科学院植物保护研究所,农业部作物有害生物综合治理综合性重点实验室,北京100193【正文语种】中文【中图分类】S481+.9【相关文献】1.不同磷脂组成的莪术油包合物脂质体的药剂学性质与急性毒性研究 [J], 陈军;程娜娜;陆兔林;陈志鹏;严书霞;蔡宝昌2.防治黏虫药剂对日本鹌鹑的急性毒性研究 [J], 张燕宁;唐敬新;张兰;毛连纲;冯磊;蒋红云3.农药助剂和实验室常用有机溶剂对大型溞的室内急性毒性研究 [J], 宋伟华;刘茜;张燕;姜辉;林荣华4.4种新烟碱类杀虫剂对大型溞的急性活动抑制 [J], 邓丽;张兰;张燕宁;何伟志;冯磊;蒋红云5.微塑料对大型溞的急性毒性研究 [J], 李勤;李尚谕;熊雄;张榜军;刘洋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大型水蚤测试标准方法
大型水蚤测试标准方法本标准部分参照国际标准ISO6341：1982《水质——大型水蚤(甲壳纲、枝角目)活动抑制的测定》(UDC 617.777：576.097.2)及美国标准法“水和废水标准检验法”804B.水蚤(Daphnia)的生物检测步骤。
1 主题内容与适用范围本标准规定了大型水蚤生物测试技术中生存及运动影响(急性试验)和生长及繁殖试验方法(慢性效应)。
本标准适用于评价可溶性化学物质的毒性；评价工业废水及工业固体废物浸出液的综合毒性；评价废水处理效果；也适用于地面水、地下水的毒性评价及水中沉积物的毒性评价。
2 方法原理2.1 测定初始浓度EC50值，此浓度是指在本标准规定的条件下，24h及48h内使50%暴露在试验液中的大型水蚤失去活动能力的浓度，并指出使所有实验水蚤失去活动能力的最低浓度，及不能使任何实验水蚤丧失活动能力的最高浓度。
2.2 测定初始浓度LC50值，此浓度是在本标准规定的条件下24h及48h内使50%暴露在试验液中的大型水蚤心脏停止跳动能力的浓度，并指出使所有大型水蚤死亡的最低浓度及不引起死亡的最高浓度。
2.3 测定生长曲线，不同浓度下实验水蚤生长的速度不同，其生长曲线也不同，与对照组生长曲线比较判断其生长影响。
2.4 测定生殖量，相同条件的实验水蚤在不同浓度实验液中由于毒性作用，其每胎生出的幼水蚤数量不同，与对照组比较判断其毒性。
3 试剂和材料3.1 试验生物采用大型水蚤(Daphnia magna straus)62Dm纯品系生物株，为同龄同母体后代。
EC50及LC50试验用1龄～3龄水蚤，每容器10个，平行2～3组；繁殖及生长试验用刚出生的幼水蚤，每浓度组5～6个水蚤。
3.2稀释水可采用未被有毒物质污染的天然水(地面水或地下水)及自来水(自然暴气的)，pH值为7～8.6，溶解氧4mg/L以上，或空气饱和氧的60%以上，水的硬度为250±22mg/L(以CaCO3表示)，也可用符合上述条件的人工配制水。
微塑料对大型溞的急性毒性研究
doi: 10.7541/2021.2019.180微塑料对大型溞的急性毒性研究李 勤1李尚谕2熊 雄2张榜军1刘 洋1, 3(1. 河南师范大学生命科学学院, 新乡 453007; 2. 中国科学院水生生物研究所, 武汉 430072;3. 河南师范大学学报编辑部, 新乡 453007)摘要: 为了解微塑料对淡水生态环境的影响, 选择了大型溞作为受试生物, 研究了聚氯乙烯(PVC)对其产生的急性毒性效应与恢复试验。
研究设置了7个 PVC 浓度梯度, 范围是0—400 mg/L, 等比系数为2, 对其进行急性毒性处理, 测定96h LC 50, 并对大型溞心率变化和抗氧化指标进行测定。
同时, 对其进行清水21d 恢复实验。
96h LC 50为130.132 mg/L, 95%置信区间为82.864—234.989 mg/L 。
处理组与对照组相比, 高浓度组心率具有显著性差异(P <0.05), 低浓度组无显著性差异(P >0.05); 高浓度组摄食率具有极显著差异(P <0.01), 低浓度组无显著性差异(P >0.05); 高浓度组SOD 、GSH 值具有显著性差异(P <0.05), 低浓度组并不显著(P >0.05)。
处理组与对照组相比, 处理组的生育力明显提高, 首次产幼时间提前, 但后代体长变短, 出现畸形个体; 处理组的后代死亡数高于对照组, 母溞体长缩短, 但并不显著。
结果表明, PVC 的暴露对大型溞具有一定的毒性效应, 短期暴露会对其后续生长和繁殖产生不利影响。
关键词: 微塑料; 大型溞; PVC; 急性毒性; 恢复试验中图分类号: Q178.1 文献标识码: A 文章编号: 1000-3207(2021)02-0292-07微塑料是指粒径从几微米到几毫米、形状不一的塑料混合体的总称, 定义为小于5 mm 的塑料,其形状有碎片、纤维、颗粒和小球等多种, 分为初级塑料和次级塑料[1]。
《铈对大型溞的急性毒性效应和环境因素的影响》范文
《铈对大型溞的急性毒性效应和环境因素的影响》篇一铈对大型溞的急性毒性效应及环境因素影响的研究一、引言随着工业化的快速发展，重金属污染问题日益严重，其中稀土元素如铈（Ce）的毒性效应逐渐受到广泛关注。
大型溞作为一种常见的淡水生物，常被用作水生生态系统中重金属污染的指示生物。
本文旨在研究铈对大型溞的急性毒性效应以及其可能对环境造成的影响。
二、研究方法（一）实验材料与试剂实验选用纯度较高的铈盐（如硝酸铈）作为实验试剂，以及大型溞作为实验生物。
同时，收集并分析不同环境背景的水样，以评估环境因素对铈毒性效应的影响。
（二）实验方法采用急性毒性实验法，通过不同浓度的铈盐溶液暴露大型溞，观察其生理行为变化、生长状况及死亡率等指标，以评估铈对大型溞的急性毒性效应。
同时，结合环境因素（如pH值、温度、溶解氧等）进行综合分析。
三、铈对大型溞的急性毒性效应（一）生理行为变化实验结果表明，铈盐溶液浓度越高，大型溞的游泳速度越慢，活动范围减小，躲避障碍物的能力减弱。
这表明铈对大型溞的运动能力产生了明显的抑制作用。
（二）生长状况随着铈盐溶液浓度的增加，大型溞的生长速度明显减缓，体长和体重增长均受到抑制。
高浓度铈盐溶液暴露下，大型溞甚至出现生长发育迟缓、畸形等现象。
（三）死亡率实验发现，铈盐溶液对大型溞具有一定的致死作用。
在较高浓度的铈盐溶液中，大型溞的死亡率随着暴露时间的延长而增加。
四、环境因素对铈毒性效应的影响（一）pH值实验结果表明，在不同pH值的水环境中，铈对大型溞的毒性效应存在差异。
在酸性或碱性环境下，铈的毒性效应可能加剧，导致大型溞的生理行为变化和生长状况受到更严重的影响。
（二）温度温度对铈的毒性效应也有一定影响。
在较低或较高的温度下，铈对大型溞的急性毒性效应可能更加显著。
这可能与温度影响铈在水中溶解度和生物体代谢速率有关。
（三）溶解氧溶解氧水平对铈的毒性效应具有一定影响。
低氧环境下，铈对大型溞的毒性效应可能加重，这可能与缺氧条件下生物体代谢紊乱、抵抗力下降有关。
苯扎溴铵对几种淡水水生动物的急性毒性
苯扎溴铵对几种淡水水生动物的急性毒性余伟楠;陆宏达;朱磊;操艮萍【摘要】采用静水生物毒性试验方法测试了苯扎溴铵对大型溞(Daphnia magna)、团头鲂(Megalobrama amblycephala)幼鱼、草鱼(Ctenopharyngodon idellus)幼鱼、田螺(Cipangopaludina cathayensis)、中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)Ⅲ期仔蟹和幼蟹的半致死浓度(LC50)及安全浓度(SC).结果显示:大型溞的24、48、72、96 h的LC5o分别为0.56、0.34、0.19、0.13 mg/L,团头鲂幼鱼的为1.53、1.44、1.38、1.31 mg/L,草鱼幼鱼的为4.59、4.42、4.36、4.23 mg/L,田螺的为15.21、10.52、7.76、5.01 mg/L,Ⅲ期仔蟹的为10.33、6.73、5.41、5.02 mg/L,幼蟹的为17.95、12.42、8.67、6.22 mg/L;SC分别为0.04、0.38、1.23、1.51、0.86、1.78 mg/L.根据SC高低,耐苯扎溴铵毒性能力依次为幼蟹＞田螺＞草鱼幼鱼＞Ⅲ期仔蟹＞团头鲂幼鱼＞大型溞.苯扎溴铵在防治固着类纤毛虫病泼洒浓度为0.35 mg/L下时,不会对团头鲂幼鱼、草鱼幼鱼、田螺、Ⅲ期仔蟹和幼蟹产生毒性作用,而对大型溞会产生毒性杀死作用,池塘中可通过适量增加投饵量或投放其他饵料以补充减少的大型溞饵料生物数量.【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷),期】2014(041)015【总页数】6页(P111-115,120)【关键词】苯扎溴铵;水生动物;急性毒性;半致死浓度;安全浓度【作者】余伟楠;陆宏达;朱磊;操艮萍【作者单位】上海海洋大学水产与生命学院/上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室,上海201306;上海海洋大学水产与生命学院/上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室,上海201306;上海海洋大学水产与生命学院/上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室,上海201306;上海海洋大学水产与生命学院/上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室,上海201306【正文语种】中文【中图分类】S948固着类纤毛虫病是中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）等虾、蟹类的主要疾病，该类寄生虫属于单细胞的原生动物[1]，主要包括聚缩虫（Zoothamnium）、累枝虫（Epistylis）、钟形虫（Vorticella）、单缩虫（Carchesium）等。
《2024年铈对大型溞的急性毒性效应和环境因素的影响》范文
《铈对大型溞的急性毒性效应和环境因素的影响》篇一铈对大型溞的急性毒性效应及其对环境因素影响的高质量范文一、引言铈是一种稀土元素，广泛应用于各种工业领域，如冶金、玻璃制造、陶瓷和电子工业等。
然而，随着工业的快速发展，铈元素可能通过废水排放等途径进入水生生态系统，对水生生物和环境产生潜在的影响。
大型溞是一种常见的淡水浮游生物，其个体大、繁殖速度快，常被用作水生态毒理学研究的模式生物。
因此，研究铈对大型溞的急性毒性效应及其对环境因素的影响具有重要意义。
二、铈对大型溞的急性毒性效应1. 实验方法本部分采用实验室模拟实验方法，将不同浓度的铈溶液暴露于大型溞群体中，观察其生存、生长和繁殖等生物学指标的变化。
2. 实验结果实验结果显示，铈对大型溞具有明显的急性毒性效应。
随着铈浓度的增加，大型溞的生存率显著降低，生长速度减缓，繁殖能力受到抑制。
高浓度的铈还会导致大型溞出现行为异常、体色变化等生理生化指标的改变。
3. 毒性机制分析铈对大型溞的毒性机制可能与铈离子在细胞内的积累有关。
铈离子可以与细胞内的酶、蛋白质等生物大分子结合，干扰其正常功能，从而对大型溞的生理生化过程产生负面影响。
此外，铈还可能通过破坏细胞膜结构、影响基因表达等途径对大型溞产生毒性效应。
三、铈对环境因素的影响1. 对水生生态系统的影响铈进入水生生态系统后，可能通过食物链对其他水生生物产生间接影响。
此外，铈还可能改变水体的物理化学性质，如改变水体的pH值、溶解氧含量等，从而影响水生生态系统的稳定性。
2. 对土壤环境的影响铈通过废水排放等途径进入土壤环境后，可能对土壤微生物、植物等产生一定影响。
例如，铈可能抑制土壤微生物的生长和繁殖，影响土壤的生物活性；同时，铈还可能对植物的生长和发育产生负面影响，如抑制植物的光合作用、降低植物的生物量等。
四、结论与建议本研究表明，铈对大型溞具有明显的急性毒性效应，可对水生生态系统的稳定性和土壤环境产生潜在影响。
因此，应加强对稀土元素排放的监管和管理，减少工业废水等污染源的排放，保护水生生态系统的健康和土壤环境的稳定。
《2024年镧铈镝混合物对大型溞的联合毒性效应》范文
《镧铈镝混合物对大型溞的联合毒性效应》篇一一、引言近年来，稀土元素如镧、铈和镝等在各种工业应用中得到了广泛的关注和利用。
然而，这些稀土元素的潜在环境影响也引发了公众的广泛关注，尤其是在水生生物如大型溞（Daphnia magna）中的毒性效应。
本篇论文旨在研究镧、铈、镝混合物对大型溞的联合毒性效应，以期为环境保护和生态安全提供科学依据。
二、材料与方法1. 实验材料本实验选用的镧、铈、镝混合物为市售产品，经过纯化处理后用于实验。
大型溞选自本地淡水环境，并在实验室条件下进行繁殖和培养。
2. 实验方法将大型溞分为若干组，分别暴露在不同浓度的镧、铈、镝混合物中。
通过观察并记录大型溞的生存率、生长状况、繁殖能力等指标，分析混合物对大型溞的毒性效应。
三、结果与分析1. 生存率实验结果显示，随着混合物浓度的增加，大型溞的生存率逐渐降低。
在较高浓度下，大型溞的死亡数量显著增加。
这表明镧、铈、镝混合物对大型溞具有一定的毒性效应。
2. 生长状况混合物对大型溞的生长状况也产生了显著影响。
在混合物浓度较高时，大型溞的生长速度明显减缓，体长和体重均低于对照组。
这表明混合物对大型溞的生长具有抑制作用。
3. 繁殖能力混合物对大型溞的繁殖能力也产生了负面影响。
在混合物暴露下，大型溞的繁殖数量明显减少，且后代存活率也较低。
这表明混合物可能通过影响大型溞的生殖系统，降低其繁殖能力。
4. 联合毒性效应通过对各组数据的综合分析，发现镧、铈、镝混合物对大型溞的联合毒性效应较为显著。
不同元素之间的相互作用可能导致毒性效应的叠加或增强，从而对大型溞产生更大的影响。
四、讨论本实验结果表明，镧、铈、镝混合物对大型溞具有一定的毒性效应。
这可能与混合物中的元素在环境中难以降解和排放有关，长期积累可能对水生生物产生持续的毒性影响。
此外，不同元素之间的相互作用也可能导致联合毒性效应的出现，使得混合物的毒性效应更加显著。
五、结论镧、铈、镝混合物对大型溞的生存、生长和繁殖等方面均产生了显著的负面影响。
《铈对大型溞的急性毒性效应和环境因素的影响》范文
《铈对大型溞的急性毒性效应和环境因素的影响》篇一铈对大型溞的急性毒性效应及环境因素的影响一、引言近年来，随着工业的快速发展，铈（Ce）作为一类重金属污染物，其广泛存在与工业排放、农业生产、废弃物处理等多个领域，并对环境造成了严重影响。
其中，大型溞作为一种常见的水生生物，对环境中的污染物非常敏感，因此其成为研究铈的急性毒性效应的理想模型。
本文旨在探讨铈对大型溞的急性毒性效应以及其对环境的影响。
二、铈对大型溞的急性毒性效应1. 实验设计实验中我们选择了大型溞作为实验对象，将其暴露于不同浓度的铈溶液中，以观察其生存状况和生理反应。
同时，我们设置了对照组，以便更准确地评估铈的毒性效应。
2. 实验结果实验结果显示，铈对大型溞具有明显的急性毒性效应。
在较高浓度的铈溶液中，大型溞的生存率显著降低，其活动力减弱，生长速度减缓。
此外，我们还观察到大型溞的生理指标如呼吸频率、心率等也发生了明显变化。
3. 毒性机制分析铈的急性毒性效应可能与其在生物体内的积累有关。
铈可以与生物体内的蛋白质、酶等生物大分子结合，破坏其结构与功能，进而影响生物体的正常生理活动。
此外，铈还可能通过影响生物体的氧化还原平衡、能量代谢等途径，进一步加剧其毒性效应。
三、铈对环境的影响1. 水生生态系统铈广泛存在于水生环境中，对水生生态系统产生了严重影响。
铈可以通过食物链进入水生生物体内，破坏其生理平衡，进而影响整个生态系统的稳定性。
此外，铈还可能改变水体的pH值、溶解氧等理化性质，进一步影响水生生物的生存。
2. 土壤环境铈在土壤环境中的积累也可能对土壤生态系统产生负面影响。
铈可以与土壤中的微生物、植物等生物体结合，影响其正常生长与发育。
此外，铈还可能改变土壤的理化性质，如土壤的pH值、有机质含量等，进一步影响土壤生态系统的平衡。
四、结论与建议通过本文研究表明，铈对大型溞具有明显的急性毒性效应，并可能对水生生态系统和土壤环境产生负面影响。
因此，我们提出以下建议：首先，应加强对铈的排放管理，减少工业、农业等领域的铈排放，以降低其对环境的污染。
化学品毒性试验小鼠LD50及大型溞LC50结果比较分析
化学品毒性试验小鼠LD50及大型溞LC50结果比较分析广东卫生防疫1998年第24卷第4期2l?苎染.1户竺要参考文献使用前应冲洗一段时间,这可能会提高净水器.''.的过滤效能,以保证各种状态下的滤后水都可1孙江城.等净水器和纯净水.山西预防医学达到饮用水卫生要求.1,2:98化学品毒性试验小鼠LD5o及大型蚤LC5o结果比较分析陆凌霞钵锦炎粱雪梅蔡玟用水生生物大型强进行化学物质毒性实验是新的生物技术.为了解大型涵48hLc50和小鼠经口LDso毒性试验结果的可比性,进而为化学物质安全性评价方法提供探讨性意见,现通过lO种化学品经小鼠经ElLDso和大型强48hLC50毒性实验,将其结果按毒性分级进行比较.现将实验结果报道如下:1材料与方法1.1实验样品二氯化汞,亚砷酸钠,重铬酸钾,乙醇,丙酮,家居安(喷雾杀虫剂),香伴(空气清新剂),洗洁液,染洗香波,太阳露.l,2实验方法1.2.1大型~481aLC6o按大型涵生物测试技术方法和程序….实验生物选用中国预防医学科学院培养的单克隆纯品系62Da大型搔涵种,在本实验室用无机盐培养液培养的绿藻喂养,培养三代以上的72～96h幼强,其敏感度符合国际标准组织要求(重铬酸钾24h—Ee5o为1.02mg/L).实验用稀释水按国际标准组织(1.50)统一方法配制标准水,配制各个实验浓度,水温度恒定在20±l℃,PH为7.6±0.2,在体视显微镜下观察大型僵的运动和存活情况,以大型活心跳停止为死亡指证,用直线内插法在半对数座标纸上求出48小时半数致死浓度(Lc),实验重复二次.1.22小鼠经I:1LJ)50用冠氏法,参照化妆作者单位;广东省卫生防疫站510300品安全性评价程序和方法…1.动物选用NⅡ{小鼠,18—20g,雌雄各半,灌胃.1.3评价指标.毒性分级见表l表1化学物质的急性毒性分级毒性分级小鼠一次经口u矗蚤誊48bI.(mKg)(H1) 2结果与分析结果表明1O种化学品小鼠经ElⅡ与大型t~48hLC试验毒性分级相近,具有较好的可比性.尤其是对乙醇,丙酮,二氯化汞,太阳露等较单一的水溶性化学品,两者的毒性分级完全一致:对重铬酸钾,家居安,洗洁液等金属,日用化学品的毒性,大型灌较小鼠更为敏感;虽小鼠对亚砷酸钠,染发香波,香伴的毒性较大型强敏感,但也仅只高一个级别,仍具可比性(表2).据报道,由于动物的种属,个体机能状况,毒物浓度及实验条件不同,其测得的LI可有l3倍的波动【.可见,本实验用大型,蚕与传统食品,化妆品,日用化学品的安全性评价毒性试验常用的大鼠或小鼠进行毒性试验比较,其结果差异不大.22广东卫生防疫1998年第24卷第4期表2小鼠经口LD,大型浯48}IL实验毒性分级样品名称小g毒性分级大墨嚣岛毒性分级乙—面一l丽———面————砸一丙酮>10000微毒<560礅毒二氯化汞10剧毒0023剧毒太阳露2OOOO徽毒184徽毒重铬酸卸166中等毒O92高毒家居安7173低毒3.8中等毒洗洁渡3150低毒103中等毒亚砷酸钠41高毒482中等毒染发香波58.4高毒518中等毒壹竖墅堑垂堡墼童实验结果显示大型潘中毒症状与实验动物中毒症状基本相同,如家居安小鼠中毒症状是运动不灵,行走不稳,出汗,最后抽搐,昏迷死亡;大型强中毒也是运动异常,首先运动剧烈, 肢颤动,然后失去自由游动能力,壳膨胀,沉于水底,最后停止心跳而死亡.所以用大型强作为急性毒性实验的生物是可行的,同样可以取得较理想的结果.尤其是水环境污染,水体污染是一个较复杂的问题,往往是一系列毒物的综合体,用化学法测出单项毒物含量或用经典的哺乳动物小鼠或大鼠u试验仍不能确切表达出包括毒物联合作用的综合毒性.由于大型强是一种接水生物,生活在水中,其繁殖快,生活周期短,培养简便,且对许多毒物(特别是重金属和有机磷农药)敏感,能快速反应毒物毒效应,也是无脊椎动物中少数能在实验室成功培养的种类之一L.所以利用大型}i生物测试方法可以对水环境中毒物的联合毒性给以综合评价,与化学测定法互相补充,共同说明问题,为水环境污染,工业排出物排放和治理提供科学依据.参考文献l修瑞琴,等.大型淹生物测试技术方法和程序.卫生研究,1989,6:19—222中华人民共和国国家标准GB7919—87化妆品安全性评价程序和方法3张毓琪,陈叙龙编.环境生物毒理学.天津:天津大学出版社,1993,7:10一ll4国家环保局《水生生物监测手册)编委会编.永生生物监测手册.南京:东南大学出版社,1993,6:201,62广东省1997年传染病疫情及流动人口发病概况分析陈茂香撩勇为掌握广东省传染病发病趋势,进一步加强流动人口传染病管理,及时制订切合实际的防治措施,控制和降低我省传染病发病,我们对1997年广东省法定报告甲,乙类传染病发病情况进行了分析,现报告如下:1材料与方法资料来源于1997年广东省急性传染病综合年报表2结果与分析2.1疫情概况1997年2l市121个县(市,区)共报告甲,乙类传染病21种,报告发病103032例,死亡作着单位:广东省赢行病防治研究所51锄296例.报告发病率142.44%,死亡率0.41/十万,病死率O.29%.由于1997年肺结核由丙类传染病调整为乙类,故1997年与1996年相比, 发病率,死亡率,病死率均上升,分别上升37.05%,41.38%和7.4l%,如除去肺结核,发病率和病死率则分别下降2.08%和7.4l%,死亡率上升28.57%.2.2痛谱情况发病率相对较高的前八位传染病分别是新生儿破伤风(106.95%/十万),病毒性肝炎(49.38/十万),肺结核(41.38/十万),痢疾(19.39/十万),淋病(15.29/十万),麻疹(4.07/。
2,2’,4,4’-四溴二苯醚(BDE-47)对大型溞(Daphnia magna)的毒性效应
2,2’,4,4’-四溴二苯醚(BDE-47)对大型溞(Daphniamagna)的毒性效应熊勤犁;史雅娟;吕永龙;李秋爽;Gosens Jorrit【摘要】2,2’,4,4’-四溴二苯醚(BDE-47)在水体及各种水生生物(鱼类、海洋哺乳动物以及水生无脊椎动物)中被广泛检出,但BDE-47对水生无脊椎动物毒性效应的研究还处于起步阶段.以大型溞(Daphnia magna)为受试生物,通过急性(48 h)和慢性(21 d)毒性暴露实验,考察了BDE-47对大型溞活动抑制率、心率、产仔情况和酶活性等指标的影响.结果显示,BDE-47对大型溞活动抑制率的48 h-EC50为112.5 μg·L-1；高浓度(＞100 μg·L-1)BDE-47显著诱导提高大型溞的心率.21 d慢性暴露实验中,8 μg· L-1处理组中大型溞全部死亡；其他各浓度处理组(0.5、1、2、4μg·L-1)中,母溞第1胎产仔时间延后,第1胎子代数量减少,总产仔数量大幅减少,这表明大型溞的繁殖能力受到抑制.BDE-47在一定程度上抑制了母溞胆碱酯酶(ChE)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)的活性,大型溞体内的代谢机制没有被诱导,神经活性虽被抑制,但抑制率不高.BDE-47大幅诱导过氧化氢酶(CAT)的活性,并呈现一定的剂量效应关系,相对于ChE和GST,CAT对BDE-47暴露更为敏感,可作为BDE-47对大型溞慢性暴露毒性效应的潜在生物标志物.【期刊名称】《生态毒理学报》【年(卷),期】2013(008)001【总页数】8页(P97-104)【关键词】2,2’,4,4’-四溴二苯醚;BDE-47;大型溞;心率;繁殖率;酶活性【作者】熊勤犁;史雅娟;吕永龙;李秋爽;Gosens Jorrit【作者单位】中国科学院生态环境研究中心城市与区域生态国家重点实验室,北京100085;中国科学院研究生院,北京100039;中国科学院生态环境研究中心城市与区域生态国家重点实验室,北京100085;中国科学院生态环境研究中心城市与区域生态国家重点实验室,北京100085;中国科学院生态环境研究中心城市与区域生态国家重点实验室,北京100085;中国科学院研究生院,北京100039;中国科学院生态环境研究中心城市与区域生态国家重点实验室,北京100085;中国科学院研究生院,北京100039【正文语种】中文【中图分类】X171.5多溴联苯醚(PBDEs)是一种防火阻燃化学制剂。
纳米氧化锌致大型溞的毒性效应特征
纳米氧化锌致大型溞的毒性效应特征纳米氧化锌（ZnO NPs）是一种重要的纳米材料，广泛应用于各个领域，如太阳能电池、光电器件和生物医学。
然而，越来越多的研究表明，ZnO NPs的存在可能对生态系统造成危害。
最近的研究表明，ZnO NPs的存在可能导致大型溞（Daphnia magna）的毒性影响。
大型溞是一种重要的淡水生态系统生物，广泛分布于淡水湖泊和河流中。
它们是底栖动物，是淡水生态系统中食物链的一个重要组成部分。
因此，对大型溞的毒性效应进行研究对于掌握纳米材料对生态系统的影响非常重要。
实验研究表明，ZnO NPs可以通过大型溞的口部和鳃进入其体内。
一旦进入体内，ZnO NPs会沉积在肠道和内脏组织中，并与其它细胞和生物分子相互作用，导致生物毒性反应的发生。
ZnO NPs可以通过生成游离基、破坏膜的结构和功能、影响线粒体功能、抑制细胞呼吸氧化酶的活性等多种机制导致细胞的死亡。
此外，ZnO NPs还可以引起大型溞行为的改变。
研究表明，暴露在ZnO NPs中的大型溞其运动速度和游泳能力受到影响。
这些行为的变化可能导致大型溞的生命周期和繁殖能力受到影响。
最后，ZnO NPs的暴露还会对大型溞产生遗传毒性。
实验表明，暴露在ZnO NPs中的大型溞其遗传基因发生了明显的变化，并且这种变化可能对其后代产生影响。
综上所述，ZnO NPs的存在对大型溞的生物毒性效应具有以下特征：1）影响细胞的健康状态和死亡；2）影响大型溞的行为；3）影响大型溞的生理功能，如匀毛和咀嚼；4）影响大型溞的遗传信息。
因此，为了保护生态系统的健康，我们需要对纳米材料的毒性效应进行深入的研究，并采取有效的监管和管理措施。
水质物质对蚤类(大型蚤)
水质 物质对蚤类（大型蚤） 急性毒性测定方法编制说明（征求意见稿）环境保护部南京环境科学研究所二00八年三月一、任务来源2006年国家质检总局（国质检财函[2006]909号）和2007年国家质检总局（国质检财函[2007]971号）下达了《水质物质对蚤类（大型蚤）急性毒性测定方法》国家环保标准制修订计划，项目统一编号为991，任务承担单位为环境保护部南京环境科学研究所。
二、编制目的和意义GB/T 13266-91《水质物质对蚤类急性毒性测定方法》的修订，将推进我国环境执法和监督管理工作的进一步规范化、科学化和法制化，全面健全环境保护法规，完善环境保护技术法规和标准体系，科学确定环境基准，努力使环境保护标准与新形式下的环保目标相衔接。
国际标准化组织（ISO）已向各国推荐了蚤类急性毒性的标准测定方法。
我国也颁布了GB/T 13266-91《水质 物质对蚤类（大型蚤）急性毒性测定方法》，内容基本等同于ISO 6341:1982。
GB/T 13266-91规定了测定方法的适用范围、原理、试验材料、试验液的制备、试验容器和仪器、预试验、正式试验、数据结果的处理及有效性，以及试验报告等内容。
但由于对试验材料准备、测试环境条件，以及限度试验等方面的规定模糊或未规定，试验结果的精确性和重现性需要进一步提高。
《水质 物质对蚤类（大型蚤）急性毒性测定方法》的修订将提高实验数据互认程度，为我国水质安全提供了科学的检测方法依据，在保护生态环境，尤其是水生生态环境，减少污染物危害中具有十分重要的意义。
三、编制标准的基本原则、依据及技术路线3.1 基本原则本标准的编制原则是既参考国外最新的方法技术，又考虑国内现有监测机构的监测能力和实际情况，确保方法标准的科学性、先进性、可行性和可操作性。
3.2 编制依据本标准编制的主要依据包括有：中华人民共和国环境保护法中华人民共和国水法中华人民共和国水污染防治法GB/T 6682-92 分析实验室用水规格和试验方法GB 12997-91 水质采样方案设计技术规定GB 12998-91 水质采样技术指导GB 12999-91 水质采样样品的保存和管理技术规定3.3 技术路线自修订工作下达后，国家环保总局南京环境科学研究所成立了标准修订小组。
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采用生长面积法( 国家环保局, 2002) 计算96h EC50 , 计算公式如下:A =( N1 - N0) /2 ×t1 +( N1 + N2 - 2N0) /2 × ( t2 - t1) + … +( Nn- 1 + Nn - 2N0) /2 × ( tn - tn- 1)(1)其中: A: 生长曲线以下面积; tn : 实验开始后第n 次计数时间; N0 : 初始细胞密度; Nn : tn 时刻细胞密度.生长抑制率( IA) 通过以下公式计算:IA =( Ac - At) /Ac ( 2)IA: 受试组与对照组相比细胞生长抑制率; Ac :对照组生长曲线以下面积; At : 受试组浓度生长曲线以下面积.以IA 为纵坐标, 浓度对数为横坐标作图, IA =50%所对应的浓度即为EC50 值相对抑制率= (1 - NΠN0 ) ×100 % ,其中N 为试验组的藻密度; N0 为对照组的藻密度土壤提取液)配置方法取花园土未施过肥0。
5kg置于烧杯或三角瓶中，加入蒸馏水1000毫升，瓶口用透气塞封口，在水浴中沸水加热2小时，冷却数小时，在无菌条件下过滤，取上清液，将灭菌蒸馏水加入上清液至总体积1000毫升。
土壤提取液保存在4ºC备用。
在蒸馏过后只能使用过滤的方法灭菌，不能经过高压高温灭菌水质物质对蚤类（大型蚤）急性毒性测定方法GB/T13266-91本标准参照采用国际标准ISO 6341—1982《水质——大型蚤运动抑制的测定》。
本标准用大型蚤（Daphnia magna straus（Cladocera Crustacea））为试验生物。
测定物质或废水的半数抑制浓度，半数致死浓度（24h-EC50、24h-LC50或48h-EC50、48h－LC50），用于判断物质或废水的毒性程度。
1 适用范围本标准适用于以下范围；a.在试验条件下可溶的化学物质（包括工业原料和产品、食品添加剂、农药、医药等）。
b.工业废水。
C.生活污水。
d.地表水、地下水。
2 原理2.1 24h－EC50、48h－EC50指在24或48 h内百分之五十的受试蚤运动受抑制时被测物的浓度。
2.2 运动受抑制（Immobilization）反复转动试验容器，15s之内失去活动能力的大型蚤，被认为运动受抑制。
即使其触角仍能活动，也应算做不活动的个体。
2.3 24h－LC50、40h－LC50指在24或48h内百分之五十的受试蚤死亡时被测物的浓度，以受试蚤心脏停止跳动为其死亡标志。
3 试验材料3.1试验生物为大型蚤（（Daphnia magna straus）（甲壳纲，枝尼亚目））。
保持良好的培养条件，使大型蚤的繁殖被约束在孤雌生殖的状态下（见附录A）。
选用实验室条件下培养3代以上的、出生6～24 h的幼蚤为试验蚤。
试验蚤应是同一母体的后代。
3.2试验用水：3.2.1配制人工稀释水为试验用水。
新配制的标准稀释水PH为7.8±O.2，硬度250±25 mg ／L（以CaCO3计）Ca／Mg巴比例接近4:1，溶解氧浓度在空气饱和值的80％以上，并不含有任何对大型蚤有毒的物质。
人工稀释水用电导率10 µs／cm（lms／m）以下的蒸馏水或去离子水（以下简称水）按下述方法配制。
a.氯化钙溶液将11.76g氯化钙（CaC12·2H2O）溶于水中稀释至1L。
b.硫酸镁溶液将4.93g硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中稀释至1L。
c.碳酸氢钠溶液将2.59 g碳酸氢钠（NaHCO3）溶于水中稀释至1L。
d.氯化钾溶液将0.25g氧化钾（KCI）溶于水中稀释至1L。
各取以上四种溶液25mL混合，稀释至1L。
必要时可用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节pH值，使其稳定在7.8±0.2。
标准稀释水应容许大型蚤在其中生存至少48h，并尽可能检查稀释水中不含有何已知的对大型蚤有毒的物质。
例如：氯、重金属、农药、氨或多氯联苯。
3.2.2如果所进行的试验需要使用其他稀释水或改变稀释水的PH，应在试验报告中往明所用的性质。
要求稀释水的硬度在150～300 mg／L（以CaCO3计）范田内，Ca／Mg比例接近4:于6.5或不得高于8.5，同一试验PH波动pH波动不得大于0.5。
3.3 重铬酸钾（K2Cr2O7），分析纯。
4 试验液的制备4.1 试验物质溶液的配制4.1.1 试验物质可以是可溶于水的固体、液体或气体，但要求组分一定，具有代表性、重复性。
4.1.2 易溶于水的试验物质可直接加到稀释水里，也可以溶解在蒸馏水或去离子水中配成贮备液加人到稀释水中配成试验液，每升稀释水中的贮备液要少于10mL。
贮备液应当低温保存。
4.1.3 难溶于水的物质，可用适当的方法，将其溶解和分散.包括使用超声波装置及其他低毒溶剂增溶。
如果使用溶剂，溶剂在试验液中的浓度不应超过0.5mg／L，并应在试验的同时设两个对照组，一组用稀释水，另一组用最大浓度的溶剂。
4.2 工业废水试验液的制备4.2.1 样品的采集及处理：采集废水样品时，应将采样瓶充满水样，不留空气。
作品采集后应立即进行试验。
如果样品采集后6h之内不能进行试验，则必需将水样冷冻保存（0～4℃），并应尽可能缩短水样在试验前保存的时间。
4.2.2生产流程用水不稳定的工业废水，应在24h之内，每隔6h瞬时采样一次，分别测定每个求得其最大毒性。
4.2.3 废水样品可以用稀释水稀释配成不同浓度的试验液。
5.试验容器和仪器5.1 试验容器可采用100 mL小烧杯或结晶皿等玻璃制品，加盖表面皿。
为防止被玻璃器的吸附，试验前可用低浓度试验溶液浸泡一天。
试验结束后立即用空容器，刷洗、消除任何微量的溶液。
5.2 量简、容量瓶、移液管、吸管、玻璃缸、尼龙筛网等器皿5.3 溶解氧测定仪、pH计、温度计、电导仪。
6 环境条件6.1 试验温度要求基本稳定，变化不超过±1℃。
试验前的培养温度要求与试验温度基本一致。
毒性试验在20±1℃或25±1℃下进行。
6.2 实验在没有对大型蚤有害的气体、粉尘的大气条件下进行。
6.3 试验在自然光照或相当于自然光照下进行(避免阳光直射)每天光照10h左右。
6.4 大型蚤在试验前应与试验条件一致的环境中驯养7～10d。
6.5 试验操作及试验过程中蚤类不能离开水，转移时要用玻璃滴管。
7 预试验7.1 正式试验之前，为确定试验浓度范围，必须先进行预备试验。
预备试验浓度间距可宽一些(如0.1、1、10)每个浓度至少放5个幼蚤，通过预试验找出被测物使100％大型蚤运动受抑制的浓度和最大耐受浓度的范围，然后在此范围内设计出正式试验各组的浓度。
7.2 预试验中应了解毒物的稳定性，在标准稀释水中是否会出现沉淀、pH等理化性质的改变。
以便确定正式试验是否需要采取流水或更换试验液及改变稀释水pH等措施。
8 正式试验8.1 试验浓度的设计，根据预试验的结果确定正式试验的浓度范围，按几何级数的浓度系列(等比级数间距)设计5～7个浓度(如1、2、4、8、16等比级系数为2；又如1、1.8、3.2、5.6、10等比级数系数为1.778)。
试验浓度要设计合理，浓度系列中以能出现一个60％左右和40％左右大型蚤运动受抑制或死亡的浓度最为理想。
8.2 试验用100mL烧杯(或结晶皿)，装40～50mL试验液，置蚤10个。
每个浓度至少有2～3个平行。
一组试验液设一空白对照，内装相等体积的稀释水。
试验前要用化学方法测定试验液的初始浓度。
8.3 试验开始后应于1、2、4、8、16及24h定期进行观察，记录每个容器中仍能活动的水蚤数，测定0～100％大型蚤不活动或死亡的浓度范围，并记录它们任何不正常的行为。
在计算试验蚤的不活动或死亡的百分数之后，立即测定试验液的溶解氧浓度。
8.4 检查大型蚤的敏感性及试验操作步骤的统一性，定期测定重铬酸钾的24h-EC50，目的是验证大型蚤的敏感性。
在试验报告中报告24h-EC50。
重铬酸钾的24h-EC50为0.5～1.2ppm(20℃条件下)。
按照第8章所叙述的步骤进行验证检查，如果重铬酸钾的24h-EC50在0.5～1.2ppm以外，则应检查使用试验步骤是否严格，并检查大型蚤的培养方式。
如有必要，使用新的符合敏感要求的大型蚤品种。
9 数据结果的处理及有效性9.1 EC50(LC50)的估算试验结束，计算每个浓度中不活动的大型蚤或死亡蚤占试验总数的百分比，用概率单位目测法，计算EC50(或LC50)(见附录C)。
也可用计算机EC50(或LC50)程序处理(寇氏修正法)，获得EC50(或LC50)。
9.2 结果的表示以24h-EC50或48h-EC50表示物质在相应时间内对大型蚤运动受抑制的影响。
以24h-LC50或48h-EC50表示物质在相应时间内对大型蚤生存的影响。
当浓度间距过近仍不能获得足够数据时，可采用使100％大型蚤活动受抑制或心脏停止跳动的最低浓度和使0％大型蚤活动受抑制或心脏停止跳动的最高浓度来表示毒性影响的结果。
检测排水时，以百分数或毫升／升表示。
捡测化学物质时，以毫克／升表示。
9.3试验结果的有效性符合下列条件的试验为结果有效。
a.对照组试验未出现不活动大型蚤。
b.重铬酸钾的24h-EC50在20℃时为8.5～1.2ppm的范围内。
c.试验结束时溶解氧浓度必须大于或等于2mg／L。
d.必须经检测证明被测定的试验物质浓度保持于试验全过程(至少应为计划配制浓度的80％)。
如果浓度偏差＞20％，应以测试浓度结果为准。
10 试验报告试验报告要求包括以下几个方面：a.实验蚤的种名、来源、数目、蚤龄、饵料、驯养时间，对照组是否发生死亡。
b.被测物质的化学性质、来源、样品的保存方法、保存时间及前处理方法。
c.实验用稀释水的性质。
d.试验环境、水温、pH、DO、电导等情况。
e.试验条件下大型蚤的任何不正常行为，包括中毒症状。
f.实验结果、数据处理、结论、讨论。
g.方法依据及参考文献。
附录A 大型蚤的培养繁殖方法(补充件)A1 试验蚤的选育试验蚤(Daphnia magna)可以从其他试验室已有的纯培养中挑取、引种，也可以从野外采集。
野外采集的蚤要经分离、纯化，在显微镜下鉴定后，选择体大、健康的母体数个，用50mL 小烧杯单个培养。
选择繁殖量最大的一代为母蚤，单克隆化，使之成为纯品系。
A2 饵料雌性的大型蚤可以在20℃生存4个月之久。
蚤类喜食藻类、细菌、酵母及有机物碎屑等。
藻类的营养价值高于其他食物，本方法推荐用实验室培养的栅藻为大型蚤的饵料。
栅藻的培养方法见附录B。
A3 容器单个培养母蚤可用50mL小烧杯，繁殖培养用2000mL大烧杯，储备培养用30cm×30cm圆玻璃缸，或类似大小的水簇箱。