血清谷丙转氨酶标准曲线
生化检测方法汇总
一、血清谷丙转氨酶（SGPT）赖氏改良法器材:试管及试管架、移液器或吸量管、恒温水浴锅、721型分光光度计、温度计、动物血清试剂:（1）0.1mol/L pH7.4磷酸盐缓冲液：①0.1mol/L磷酸氢二钠溶液：称取Na2HPO414.22g或Na2HPO4·2H2O17.8g溶解于蒸馏水中，并稀释至1 000ml,4℃保存。
②0.1mol/L磷酸二氢钾溶液：称KH2PO413.61g溶解dH2O中，稀释至1000ml,4℃保存。
③将0.1mol/L磷酸氢二钠溶液420ml和0.1mol/L磷酸二氢钾溶液80ml混和即为0.1mol/L pH7.4的磷酸盐缓冲液。
加氯仿数滴，4℃保存。
（2）标准丙酮酸（含丙酮酸2.0μmol/mL）：取标准丙酮酸钠10mg，用上述缓冲液准拟定容为50mL。
此液须当天用当天配。
（3）SGPT底物液(含α-酮戊二酸2μmol/ml及DL-丙氨酸200μmol/ml) : 取α-酮戊二酸29.2mg，DL-丙氨酸7g ,用试剂1溶成100ml，在稀释到刻度前，以1mol /L NaOH调pH 7.4（由于转氨酶在pH7.3以下或7.6以上的环境中酶活性下降），加数滴氯仿防腐。
此液于冰箱保存可使用4天。
（4）GOT底物液(DL–天冬氨酸200mmol/L ,α-酮戊二酸 2mmol/L):称取α- 酮戊二酸29.2mg 和DL-门冬氨酸2.66g置于一小烧杯中,加入1mol/L氢氧化钠20.5ml使溶解,并校正pH 至7.4,然后将溶液移入100ml容量瓶内,用0.1mol/L磷酸盐缓冲液定容至刻度。
放置冰箱内保存。
（5）2.4-二硝基苯肼溶液:取分析纯2,4-二硝基苯肼19.8mg，用1mol/L HCl溶于100ml，置棕色瓶中保存。
（6）0.4mol/L NaOH溶液:称取16g固体NaOH，用蒸馏水溶解，冷却至室温，定容至1000mL，备用。
操作环节：1、标准曲线绘制：取试管18支按下表操作。
血清谷丙转氨酶实验报告
血清谷丙转氨酶实验报告背景介绍血清谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，简称ALT）是一种存在于肝脏中的酶类物质，主要参与蛋白质的代谢过程。
正常情况下，ALT的活性较低，而当肝脏受到损伤时，ALT会释放到血液中，血液中的ALT水平也会升高。
因此，检测血清中ALT的水平可以作为评估肝脏功能以及肝脏疾病的重要指标之一。
实验目的本实验旨在通过检测血清中ALT的水平，了解被检测个体的肝脏功能状态，提供诊断肝脏疾病的参考依据。
实验材料1.血清样本：被检测个体的血清样本，需通过静脉采血获取。
2.ALT试剂盒：包含必要的试剂和材料，用于检测血清中ALT的水平。
实验步骤1.获取血清样本：用无菌的注射器从被检测个体的静脉中采集足够的血液样本，约5-10毫升即可。
2.处理血清样本：将采集到的血液样本放置在无菌离心管中，离心约10分钟以分离血清和血细胞。
将分离得到的血清转移至干净的试管中。
3.准备实验室试剂：取出ALT试剂盒，按照说明书中的指引，准备所需的试剂和材料。
4.进行实验操作：根据ALT试剂盒的说明，将一定量的血清样本与试剂盒中的试剂混合，进行反应。
反应时间和条件需根据试剂盒的要求进行。
5.反应结果读取：按照ALT试剂盒说明，使用光度计等设备测量反应体系的吸光度。
吸光度的数值与血清中ALT的浓度成正比。
6.数据分析和结果解读：根据测定结果，比较样本中ALT的浓度与正常范围进行对比。
若ALT浓度超过正常范围，可能提示存在肝脏损伤或疾病。
结果与讨论本实验的结果即为测定得到的血清中ALT的浓度。
根据测定结果，我们可以初步判断被检测个体的肝脏功能状态。
若ALT浓度超过正常范围，可能存在肝脏疾病，需要进一步的检查和诊断。
值得注意的是，ALT浓度的升高不一定说明肝脏疾病，还可能受到其他因素的影响，如药物的使用等。
结论通过本实验，我们可以通过检测血清中ALT的水平来评估被检测个体的肝脏功能状态。
ALT浓度的升高可能提示肝脏损伤或疾病，但需要结合其他临床检查和诊断方法来进行综合分析和判断。
血清谷丙转氨酶ALT(精)
光度。由测得的吸 A 光度在曲线上查得
试样溶液中待测组
分的浓度，最后计
算得到试样中待测
组分的含量。
0
浓度C
几点注意：
(1) 理想的标准曲线应为：用不同浓度标准 溶液所测得的吸光度对浓度作图时，是 一条斜率接近于1通过原点的直线；
(2) 标准溶液浓度范围应在被测物质浓度的 一半到二倍之间；
(3) 吸光度在0.05---1.0之间为宜。
A样 = KC样L
A标
KC标L
则：
C样 =
A样 A标
C标
2. 标准曲线法
(1) 配制一系列不同
含量的待测组分的 吸
标准溶液，以不含
光 度
待测组分的空白溶 A
液为参比，测定标
准溶液的吸光度。
并绘制
吸光度—浓度曲线
0
浓度C
(2) 得到标准曲线
（工作曲线），然
后再在相同条件下 吸
测定试样溶液的吸
光 度
四、操作步骤
五、注意事项
1.血清样品的测定需在显色后30分钟内完 成。
2.在血清中加入底物后，应准确记时。
பைடு நூலகம்
六、实验的结果
• 1.第一组同学绘制标准曲线 • 2.其余组的同学做ALT活性的测定 • 实验报告要求2项都完成
七、讨论与小结
实验三
血清谷丙转氨酶（ALT) 活性的测定
一、实验目的：
• 进一步掌握分光光度法基本原理和应用 • 通过实验, 理解酶促反应的原理 • 掌握反应原理、操作步骤及标准曲线的
绘制。
二、原 理
三、方法
分光光度法----标准曲线法
定量分析方法
1. 对比法
将标准与样品分别在相同条件下显色，测 定其吸光度。因是相同物质在相同条件下 测定，故可按下式计算出样品的浓度：
谷丙转氨酶（ALT7.0L）——肝功能损害最敏感的检测指标。
谷丙转氨酶（ALT7.0L）——肝功能损害最敏感的检测指标。
谷丙转氨酶(又名谷氨酸转氨酶、丙氨酸氨基转移酶，简称GPT、ALT)升高在临床是很常见的现象。
肝脏是人体最大的解毒器官，该脏器是不是正常，对人体来说是非常重要的。
GPT升高是肝脏功能出现问题的一个重要指标。
在常见的因素里，各类肝炎都可以引起GPT升高，这是由于肝脏受到破坏所造成的。
一些药物如抗肿瘤药、抗结核药，都会引起肝脏功能损害。
大量喝酒、食用某些食物也会引起肝功能短时间损害。
谷丙转氨酶长期升高会引发病变，严重者会引发肝癌。
基本信息基本信息谷丙转氨酶，ALT是由两条相同的多肽链亚单位组成的二聚体，分子量为110 kD。
5′-磷酸吡哆醛（P-5′-P）即Vit B6是ALT的辅酶。
血浆ALT的半衰期为37~57h，从血管内空间消除的速率常数为0.43~0.70 U/h。
ALT二种同工酶，一种为可溶性胞浆ALT（s-ALT），另一种为线粒体ALT（m-ALT）。
正常人血清ALT以s-ALT为主，m-ALT只占一小部分（约11%）。
s-ALT至少有20多种变异体。
人肝s-ALT的3种普通型变异体分别是s-ALT1、s-ALT2-1和s-ALT2。
s-ALT1和s-ALT2由常染色体ALT位点上的Gpt1和Gpt2等位基因表达，s-ALT2-1为其杂合子。
三种s-ALT变异体的分子量相同，均为110±5 kD。
但是，它们的电泳和酶动力学特性存在明显差别。
在等电聚焦电泳上s-ALT1和s-ALT2均为单一条带，等电点（PI）分别为6.45和6.1，而s-ALT2-1为3条带，PI分别为6.1、6.2、和6.45。
P-5′-P对三种s-ALT变异体均有激活作用，但程度有异，以s-ALT1增高幅度最大（54.1%以上），而s-ALT2-1次之（48.5%以上），s-ALT2最小（13.7%以上）此外，三种变异体的表现Km值以及对热和尿素处理的稳定性也存在明显差别。
生化试验观察血清中谷丙转氨酶的活力变化讲解
= SALT活力
测定管微克数—对照管微克数 （单位） 2.5×0.1
五、注意事项
1. 2，4-二硝基苯肼可与有酮基的化合物作用形成苯腙 2. 吸量应准确，严格控制反应时间和温度。 3. 在测定SALT活力时，应事先将底物、血清在37℃水浴中恒 温 4. 溶血标本不宜采用，因血细胞内转氨酶活力较高，影响测定 结果。 5．在测定时，如酶活力较大（大于100单位），应将样品稀释 后再进行测定。
serum Aminotransferase/ transaminase
catalyze alanine α-ketoglutarate glutamic acid pyruvic acid alkali substrate
ABSTRACT
Observing Enzyme Activity Changes of Alanine Aminotransferase in Sample
三、实验原理
COOH
C H3
CH2 α-ketoglutarate C H2
C H N H2 COOH
CO
alanine
COOH
COOH GPT
SUBSTRATE
C H2 CH2
C H N H2 COOH
pyrivic acid
C H3 CO COOH
pyruvic acid glutamic acid
0.50 0.50
0.50
0.50
0.50
0.50
37℃水浴保温20min
氢氧化钠ml
5
5
5
5
5
5
室温下静置10min
蒸馏水调零点，于520nm处测吸光度
生物化学实验谷丙转氨酶活性的鉴定及活力单位的测定
谷丙转氨酶活性的鉴定及活力单位的测定一、[实验目的]1.用纸层折法观察肝脏丙转氨酶ALT的转氨作用；2.用分光光度法测定血清丙转氨酶的活力；3.学习治疗检测SGPT的方法及原理；4.了解检测肝损伤模型的制备及SGPT在科研中的应用。
二、[仪器与试剂]1．实验材料动物肝脏2．实验试剂（1）0.9%NaCl溶液（2）海砂（3）1%谷氨酸溶液（1%KOH溶液中和）（4）1%丙酮酸钠溶液（用1%KOH溶液中和）（5）0.1%KHCO3溶液（6）0.025%一溴乙酸溶液（用1%KOH中和）（7）2%乙酸溶液（8）酚的饱和水溶液：将2份酚和2份水（按重量计算）混合，放入分液漏斗中，振荡。
静止24h以后分层，将下部酚层放入瓶中备用。
新配制的酚展层剂可以反复使用1周。
（9）0.1%水合茚三酮的正丁醇溶液（10）0.1%标准谷氨酸溶液（11）0.1%标准丙氨酸溶液（12）1%KOH溶液谷丙转氨酶活性的鉴定（纸层析法）一、[实验原理]观察肌肉糜中谷丙转氨酶所催化的氨基移换反应。
通过纸层析法检查底物谷氨酸的减少和产物丙氨酸的生成。
为防止丙酮酸被肌肉糜中的其它酶所氧化或还原，在反应系统中加入了抑制剂溴乙酸。
二、[实验操作]1.谷丙转氨酶提取液制备：2g肝脏+0.9%NaCL 6mL+海砂 200mg，在低温下，研磨成浆，用稀薄的脱脂棉过滤，得提取液（滤液不清）。
2.转氨作用取试管2支，按下表加入试剂，加入试剂的单位为mL加脱脂棉塞，45℃水浴，1.5h，时时振荡内容物沸水浴2min，使蛋白质完全沉下，过滤，作层析3.纸层析操作方法取圆形层析滤纸1张，在圆心处用圆规绘出直径为3cm的同心圆（滤纸不可以折），通过中心将滤纸绘成四等分扇形。
用毛细管点样2-4次（直径不超过2mm），在滤纸的圆心上剪一小孔，直径约1-2mm，取一小滤纸条，将下端剪成刷状，在卷成灯芯插入圆形小孔，不能使灯芯突出纸面，将圆形滤纸平放在盛有层析液（水饱和酚）培养皿上，使灯芯向下与溶剂接触，用大小相同的培养皿盖在滤纸上，溶剂通过灯芯上升到滤纸上向四周展层，直到溶剂前沿移至距滤纸边缘约1cm处时停止（展层时间为1h），80-100℃烘箱干燥，喷洒水合茚三酮的正丁醇溶液，80-100℃显色。
血清ALT标准曲线法课件
13. 如图输入公式 “=31.46*B11-0.0897”, 回
车即得出所求浓度值，如图13；
14. 下拉即可得出其他值，如图14。
正常值=0～38 U/L单位
❖【临床意义】
❖ 肝细胞中含ALT最丰富，因此当肝脏疾病致肝细胞 受损伤时，ALT即大量释放入血液，致使血清中 ALT活性增高。测定ALT是检查肝功能的重要指标 之一。ALT显著增高见于各种急性肝炎及药物中毒 性肝细胞坏死，中等程度增高见于肝癌、肝硬化、 慢性肝炎及心肌梗塞，轻度增高则见于阻塞性黄 疸及胆道炎等疾病。骨骼肌损伤、多发性肌炎亦 可引起转氨酶活性升高。
❖ 【思考题】
❖ 1.血清中谷丙转氨酶的测定有何临床意义？
❖ 2.血清谷丙转氨酶的测定有何注意点？
谢谢！
丙酮酸标准液的制备和样品测定
加入物(mL)
空白管 标准1 标准2 标准3 标准4 标准5 测定管
校准品
0 0.05
0.1 0.15
0.2 0.25
丙氨酸氨基转移酶基质 液
0.5 0.45
0.4 0.35
10.点击“确定”，标准曲线画好，如图10：
11.计算回归方程：点击趋势线（也就是标准曲线）然后 按右键，选趋势线格式，在显示公式和显示R平方值
（直线相关系数）前点一下，勾上。如图11：
12.点击“确定”，公式和相关系数都出来了。如图12：
13. 如图输入公式 “=31.46*B11-0.0897”, 回
【如何用excel制作标准曲线】
1.先作出标准曲线: 测出标准溶液的A值及待测溶液的A值, 输入excel(B列所示), 输入对应的标准溶液浓度, 如图1:
2. 选好两列数值,点取”图表向导”按钮(如图 1),先在图表类型中选“XY散点图”，并选图表
血清转氨酶(GPT、GOT)活性的测定
血清转氨酶（GPT、GOT）活性的测定【原理】酶的活性即酶的催化效能，在一定条件下酶活性的高低代表酶的含量的多少，故酶活性的测定也即相当于酶含量的测定。
酶的活性通常都是在一定条件下（最适温度、最适的pH、必要的激动剂等），一定的时间内，测定该酶所催化的反应系统中底物的消耗量或产物生成量来确定的。
血清谷丙转氨酶（SGPT）及血清谷草转氨酸（SGOT）分别以丙氨酸和α-酮戊二酸；天冬氨酸和α-酮戊二酸为底物，催化它们进行如下反应：在SGOT催化下所生成的草酰乙酸又可在β脱羧酶和枸橼酸苯胺作用下脱羧，生成丙酮酸，而丙酮酸则可与2，4二硝基苯肼作用，生成丙酮酸2，4二硝基苯腙，后者在碱性溶液中呈棕色，在520nm比色时，α-酮戊二酸二硝基苯腙之光吸收远丙酮酸二硝基苯腙为低。
在反应后，α-酮戊二酸减少而丙酮酸增加，故520nm处光密度增加之程度与反应体系中丙酮酸与α-酮戊二酸之克分子比例成线性关系。
一般临床上用以测定SGPT及SGOT活性的方法有改良的穆氏法、金氏法及赖氏法，这些方法都是基于上述原理而设计的，操作也基本相同，只是这些实验的某些条件、活性单位的规定和计算有所差异。
改良的穆氏法（Mohun）规定血清在37（pH7.4）的条件下，与底物作用30分钟后，每生成2.5μg丙酮酸为一个转氨酶活性单位。
金氏法（King）则规定在同上条件下，与底物作用60分钟后，每生成1μM丙酮酸为一个转氨酶活性单位。
赖氏法（Reitman）本身并未对转氨酶活性单位提出规定，他是用卡门氏法（Karman）来定单位的。
卡门氏法是在紫外分光光度计中用1毫升血清，反应溶液总量为3毫升，在340nm波长下，用内径为1.0cm的比色皿，25℃ 1分钟内所产生的丙酮酸，在乳酸脱氢酶作用下，使NADH变成NAD+，而引起光密度下降0.001为1个转氨酶活性单位。
而赖氏法则是用卡门氏法所测出的单位数相当于赖氏法所产生的丙酮酸量的相关系数，套用卡门氏单位而来。
血清谷丙转氨酶的测定实验结果和结论
血清谷丙转氨酶的测定实验结果和结论
血清谷丙转氨酶（ALT）是一种肝脏酶，可以在血液中进行检测。
血清ALT测定是检查肝脏功能的常见方法之一。
实验结果显示，受试者的血清ALT值为50 U/L，高于正常范围。
正常成年男性的ALT值通常在10到40 U/L之间，女性在7到35 U/L 之间。
这表明受试者的肝脏功能有一定损害。
结合临床病史，受试者近期饮食不规律，经常吃油炸、辛辣等刺激性食物，并有明显的腹泻和腹痛症状。
这些因素可能导致肝脏负担加重，从而导致ALT升高。
ALT升高也可能是肝脏疾病的早期指标，如肝炎、脂肪肝等。
因此，及时进行肝脏功能检查和相关疾病的筛查十分必要。
另外，生活习惯也是影响肝脏健康的重要因素。
保持规律的作息和饮食习惯，适当运动，戒烟限酒等行为都有益于肝脏健康。
总之，血清ALT值的升高提示肝脏功能异常，需要及时进行检查和治疗。
同时，保持健康的生活方式也是保护肝脏健康的重要手段。
谷丙转氨酶测定方法
谷丙转氨酶测定方法一、赖式比色法赖氏法并没有自己的酶活为单位定义。
作者以当时卡门氏的速率法为准，测得多份不同ALT活力血清的ALT卡门氏单位。
然后在赖氏比色法条件下，测得各份血清反应显色的吸光收值。
将每份血清的卡门氏单位和对应比色法吸光值在坐标纸上作图。
经过大量实验，对所有实验点以最佳曲线拟合，形成了比色法在某指定比色计上的标准曲线。
坐标横轴为卡门氏单位，纵轴为吸光值，比色法结果和卡门氏速率法结果一致。
继后作者以底物溶液及丙酮酸标准溶液，按照酶反应实际情况配制成不同浓度的丙酮酸标准溶液系列与2．4二硝基苯肼显色，并与速率法的结果比较。
经多年反复实验，最后作者正式报告可通用于各种比色计的结果为ALT28卡门单位的鼍清在比色法条件下产生相当于0．1μmol丙酮酸，ALT57卡门单位的血清产生相当于0．2μmol丙酮酸，ALT97卡门单位? 的血清产生相当于0．3μmol丙酮酸。
这样就使赖氏法标准曲，线上丙酮酸量和对应卡门单位确定下来。
1970年将曲线延伸至150卡门单位。
赖氏法报告的结果与速率法结果一致。
没有条件采用速率法的实验室可以采用此法。
（一）赖氏比色法测定血清ALT1、试剂（1）Imol／L磷酸氢二钠：称取磷酸氢二钠(含两个结晶水)17.6g溶解于水中，并加水至1000ml，冰箱内保存。
（2）0.1mol／L磷酸二氢钾溶液：称取磷酸二氢钾13.6g溶解于水中，加水至1000ml，冰箱内保存。
（3） 0.1mol／l磷酸缓冲液(pH7.4)：将420ml 0.1ml／L磷酸氢二钠溶液和80ml 0.1mol／L磷酸二氢钾溶液混匀，置冰箱内保存。
（4）底物缓冲液(DL—丙氨酸200mmol／L，α-酮戊二酸2m—mol／L)：精确称取1.79g DL-丙氨酸和29．2mgα-酮戊二酸，先溶于约50ml 0.1mol／L磷酸缓冲液中，用lmol／L氢氧化钠(约0.5m1)调到pH7.4，再加磷酸缓冲液至100ml，置冰箱保存，可稳定两周。
谷丙转氨酶、谷草转氨酶等肝细胞指标分布、损伤相关血清指标参考值及临床意义
谷丙转氨酶、谷草转氨酶等肝细胞指标分布、损伤相关血清指标参考值及临床意义
谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）是临床应用最广泛的反映肝细胞损伤的生化指标。
ALT主要分布于肝细胞胞浆，肝内浓度较血清高3000倍，是肝细胞损害的敏感指标；AST主要分布于肝细胞线粒体，少数分布于胞浆，如肝功能试验中发现AST浓度升高，说明肝细胞损伤的比较重，或者说主要损侵犯肝细胞的线粒体为主。
测定血清AST、ALT水平及AST/ALT比值有利于肝功能异常的诊断和鉴别。
参考范围
对于血清ALT和AST的正常值上限（ULN），目前尚无一致意见。
正常情况下，血清ALT和AST的浓度低于30-40U/L。
一般按照国际惯例，ALT ULN：男40U/L，女35U/L。
临床意义
急性肝炎和慢性肝炎的轻型：肝细胞虽有损伤，但细胞内的线粒体仍保持完整，故释放入血的主要是存在于肝细胞浆内的ALT和AST，以ALT的升高为主，AST/ALT＜1。
重型肝炎和慢性肝炎的中型和重型：肝细胞内的线粒体也遭到了破坏，AST从线粒体漏出，表现出AST/ALT＞1。
但当肝脏损伤发展到一定严重程度，症状恶化时，肝细胞大量坏死导致ALT枯竭，而胆红素进行性升高，表现为黄疸进行性加深，即出现“酶胆分离”现象，提示肝细胞严重破坏，预后不佳。
肝硬化和肝癌患者：线粒体的破坏程度更加严重，AST升高更加
明显，AST/ALT＞1，甚至＞2。
酒精性肝病患者：AST升高明显，ALT可正常，AST/ALT常＞2，可伴γ-谷氨酰转肽酶（GGT）明显升高。
自身免疫性肝炎：ALT、AST明显升高，同时γ-球蛋白或IgG≥1.5倍正常值上限。
血清ALT标准曲线法
辅助诊断其他疾病
除了肝脏疾病外，血清ALT水平异常 还可能与其他疾病如心肌梗死、肌肉 疾病等有关。通过标准曲线法可以为 这些疾病的诊断提供辅助信息。
健康体检中的应用
在健康体检中，血清ALT是常规检测 项目之一。通过标准曲线法可以准确 测定ALT水平，为评估受检者健康状 况提供参考。
05 血清ALT标准曲线法优缺 点分析
血清ALT标准曲线法简介
定义
血清ALT标准曲线法是一种通过绘制标准 曲线来定量检测血清ALT水平的方法。该 方法使用已知浓度的ALT标准品，在相同 条件下与待测样品同时进行检测，通过 比较标准品与待测样品的信号强度，可 以计算出待测样品中ALT的浓度。
VS
原理
血清ALT标准曲线法的原理是基于酶促反应 的动力学原理。在特定条件下，ALT能够催 化丙氨酸和α-酮戊二酸之间的转氨反应， 生成丙酮酸和谷氨酸。通过检测反应体系 中丙酮酸的生成量，可以间接测定ALT的活 性。在标准曲线法中，使用一系列已知浓 度的ALT标准品绘制出标准曲线，然后根据 待测样品的信号强度在标准曲线上找到对 应的浓度值。
根据待测样本的吸光度值，在 标准曲线上查找对应的ALT浓 度，进而计算出待测样本的 ALT活性。
注意事项及常见问题解决方案
试剂保存
试剂应避光保存于4℃冰箱中，避免反复冻融。使 用前应检查试剂是否过期或变质。
仪器校准
分光光度计等仪器应定期进行校准和保养，确保 测量结果的准确性。
操作规范
实验操作过程中应严格遵守无菌操作规范，避免 交叉污染。同时要保证加样准确性和反应时间的 控制。
操作规范
实验操作过程中应严格遵守无菌操作规范，避免 交叉污染。同时要保证加样准确性和反应时间的 控制。
谷丙转氨酶标准值
谷丙转氨酶标准值谷丙转氨酶（ALT）是一种存在于肝脏细胞中的酶，其主要功能是将氨基酸转移至α-酮戊二酸，参与氨基酸代谢。
正常情况下，ALT的活性是相对稳定的，但当肝脏受损时，ALT会释放到血液中，导致血清ALT水平升高。
因此，谷丙转氨酶标准值对于评估肝功能和诊断肝脏疾病具有重要意义。
根据世界卫生组织（WHO）的标准，成年男性的正常血清ALT水平应该在10-40单位/升之间，而成年女性的正常血清ALT水平应该在7-35单位/升之间。
这些数值是通过大量的临床实验和统计分析得出的，具有较高的参考价值。
然而，需要指出的是，不同实验室和医疗机构可能会有略微不同的正常范围。
因此，在进行肝功能检查时，应该参考具体实验室提供的正常参考范围。
此外，个体差异、年龄、性别、体重等因素也可能会对血清ALT水平产生影响，因此在进行检查时需要综合考虑这些因素。
除了性别和年龄因素外，某些疾病和药物也可能会影响血清ALT水平。
例如，肝炎病毒感染、脂肪肝、酒精性肝病、药物性肝损伤等都会导致血清ALT水平升高。
因此，在进行肝功能检查时，医生需要综合患者的临床症状、病史、体格检查等信息，以确定是否存在肝脏疾病，并进行进一步的诊断和治疗。
另外，需要注意的是，血清ALT水平的升高并不一定意味着肝脏疾病。
在一些情况下，如剧烈运动、肌肉损伤、急性溶血等，也会导致血清ALT水平升高。
因此，在进行肝功能检查时，需要结合临床情况进行综合分析，以避免误诊。
总的来说，谷丙转氨酶标准值对于评估肝功能和诊断肝脏疾病具有重要意义。
了解正常的血清ALT水平范围，可以帮助医生及时发现肝脏疾病，并进行有效的治疗。
然而，在进行肝功能检查时，需要综合考虑个体差异、年龄、性别、体重、疾病和药物等因素，以确定是否存在肝脏疾病，并进行进一步的诊断和治疗。
1分钟教你，了解肝功能化验单1、谷丙转氨...
1分钟教你，了解肝功能化验单1、谷丙转氨...
1分钟教你，了解肝功能化验单
1、谷丙转氨酶（ALT）——参考值0~40，其高低往往与病情轻重相平行。
偏高多提示肝脏不同程度受损，如肝炎、肝硬化、肝癌等；
2、谷草转氨酶（AST）——参考值0~40，如果出现偏高，且远远高于谷丙转氨酶，多提示肝细胞损伤、坏死程度较为严重；
3、谷草/谷丙（AST/ALT）——参考值0.80~1.5，比值偏高说明肝存在实质的损害；
4、谷氨酰转移酶（GGP）——参考值7~32，当肝内合成亢进或胆汁排除受阻时，血清中GGT增高；
5、碱性磷酸酶（ALP ）——参考值53~128，偏高多见于骨骼疾患、胆道疾患；
6、总胆红素（TBILI ）——参考值5.1~19.0，肝脏发生炎症、坏死、中毒等损害时均可引起胆红素偏高；
7、直接胆红素（DBILI）——参考值0.1~5.1，如明显升高，则提示肝内及肝外阻塞性黄疸等；
8、间接胆红素（IBILI ）——参考值5.0~12.0 ，衰老虹吸高被破坏后传声出来的血红蛋白衍化而成；
9、总蛋白（TP）——参考值 60~80 ，主要是血清中水分减少，使总蛋白浓度相对增高，如呕吐、大量出汗；
10、白蛋白（ALB）——参考值35~55，主要是由于血液浓缩而致相对性增高，如严重脱水和休克；
11、球蛋白（GLB）——参考值15.0~35.0，球蛋白是机体免疫器官制造的，当体内存在病毒抗原（敌人）时，球蛋白就会升高；
12、白球比（ALB/GLB）——参考值1.00~2.00，白球比值偏低、倒置，提示可能有慢性肝实质性损害，预后较差。
#健康2021# #你的骨骼老了么# #为爱呐罕#。
谷丙转氨酶标准曲线
谷丙转氨酶标准曲线谷丙转氨酶标准曲线的制备是一个重要的实验步骤，它需要准备好一系列不同浓度的谷丙转氨酶标准溶液，然后通过检测这些标准溶液的吸光度和浓度之间的关系，绘制出标准曲线。
一般来说，标准曲线是通过将不同浓度的标准品溶液分别进行检测，得到吸光度和浓度的对应数值，然后利用这些数据绘制出一条曲线，通过这条曲线可以准确地推断出待测样本中的谷丙转氨酶含量。
在进行谷丙转氨酶标准曲线的制备过程中，有一些关键的注意事项需要我们特别留意。
首先，我们需要严格按照实验操作规程进行操作，尽量减小实验误差。
其次，选择合适的标准品浓度范围，确保标准曲线的线性范围覆盖待测样本的浓度范围。
同时，还需要重复测定，确保实验结果的准确性和可靠性。
在实际操作中，我们可以选择商业化的谷丙转氨酶标准品溶液，这样可以节省实验时间和提高实验效率。
另外，我们还可以利用分光光度计或酶标仪等设备进行吸光度的测定，这些设备可以帮助我们更加准确地获取实验数据。
在绘制标准曲线时，可以利用专业的数据处理软件进行曲线拟合和计算，这样可以减小人为误差，提高实验结果的可靠性。
谷丙转氨酶标准曲线的制备是临床检验中一个非常重要的环节，它直接关系到我们对待测样本中谷丙转氨酶含量的准确测定。
只有准确的标准曲线才能保证我们得到准确的检测结果，从而为临床诊断和治疗提供可靠的依据。
因此，在进行谷丙转氨酶检测时，我们要严格按照标准操作规程进行实验操作，保证实验结果的准确性和可靠性。
总的来说，谷丙转氨酶标准曲线的制备是一个重要的实验步骤，它需要我们严格按照操作规程进行实验操作，选择合适的标准品浓度范围，并利用专业设备和软件进行数据测定和处理。
只有这样，我们才能得到准确可靠的标准曲线，为谷丙转氨酶检测提供可靠的实验依据。
血清谷丙转氨酶测定
的活性均较高。在正常的新陈代谢过程中，血清内两种
酶维持一定水平的转氨酶活性（即正常值）。
谷丙转氨酶 glutamic-pyruvic transminase GPT
谷草转氨酶 glutamic oxaloacetic
transaminase GOT
– 当肝、心、肾等组织发生病变时，由于组织细胞肿
King氏法谷丙转氨酶活性单位：每毫升血清在37℃
与pH7.4的基质液作用60分钟，生成1umol丙酮酸为一 个活力单位。临床检验取血清量为0.1，报告数据以 100ml血清计算，因此实际侧得结果乘1000即可。
实验材料及试剂
–实验材料：动物或人血清 –实验试剂：丙酮酸标准液要求临用前配制；
四、实验操作
品稀释后再进行测定。
四实验操作标准曲线的绘制试剂丙酮酸标准液ml基质液溶液ml磷酸缓冲液ml相当于酶活力卡门氏单位00005001000504501028010040010570150350109702003001015002502501020024二硝基苯肼ml05005005005005005037水浴保温20min氢氧化钠ml505050505050室温下静置10min0号管调零于520nm处测吸光度标准曲线的制作520为纵坐标酶活性单位为横坐标绘制标准曲线
COOH C NH2 CH3 Ala +
COOH C O
谷丙转氨酶
COOH C O +
COOH C NH2
(CH2)2
COOH α-KG NO2
CH3
丙酮酸
(CH2)2
COOH Glu NO2
COOH C NO2 CH3 N HN
COOH C O +
H2N HN
血清谷丙转氨酶活性的测定
注意事项
1) 为防止溶血及其他因素对酶活性测定的影响，实验过程所用的一切器皿（注射器、 试管等）应清洗干净，干燥后方能使用。
2) 空腹取血，避免血脂干扰。迅速分出血清，及时测定。
3) 作为标准物质的丙酮酸钠极易变质。配试剂时应选择外观洁白干燥者。若颜色变黄 或潮解，则应重结晶，干燥至衡重后再用。
丙酮酸钠重结晶：取纯丙酮 8 份与蒸馏水 2 份混合，加入变质的丙酮酸钠使其达到饱 和。此时溶液上层无色，下层有棕黄色油状物。取出上层无色液体置烧杯中，加入两 倍体积的丙酮（无水）混匀后，置冰箱中数小时，则有白色丙酮酸钠析出，用布氏漏 斗收集沉淀，并用纯丙酮洗涤两次，抽干后，置干燥器内，保存、备用。
3) 样品测定
结果计算
标准曲线测定法
根据样品管 A520 值（已减去空白管 A520） 查标准曲线，即得每 100mL 血清中转氨酶 活性单位数。
标准管测定法
每次测定酶活性时，同时用丙酮酸标准液 （2μmol/mL）0.1mL，平行操作，即按上表 操作，不做标准曲线，测定A520按下公式 计算：
血清谷丙转氨酶活性 的测定（King法）
【目的要求】
1.掌握血清谷丙转氨酶活性测定的基本原理。 2.熟悉血清谷丙转氨酶活性测定的具体操作
方法。
3.了解血清谷丙转氨酶活性测定的临床意义。
【原理】
生物机体内转氨基作用是α -氨基酸的氨基通过酶促作用转移到 α －酮酸的酮基位置上，生产相应的酮酸和氨基酸的化学反应。 催化这反应的酶称为转氨酶（transaminase），其辅酶为磷酸 吡哆醛。转氨酶广泛存在于机体的各种组织中，在肝、心、肾 等组织中的谷丙转氨酶（glutamic pyruvic transaminase , GPT），谷草转氨酶（glutamic oxalacetic transaminase , GOT）活性较高。在正常的新陈代谢过程中，血清内维持一定水 平的转氨酶活性（即正常值）。当肝、心、肾等组织发生病变 时，由于组织细胞肿胀，坏死导致大量的酶释放至血流中，从 而引起血清谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）活性显著 升高。因此测定这些酶的活性对某些疾病的临场诊断具有重要 的参考价值。
实验十 血液转氨酶(谷丙转氨酶)活力的测定
实验十、血液转氨酶（谷丙转氨酶）活力的测定（实验：肝脏谷丙转氨酶活力测定）（本实验分2个实验完成：一、制作标准曲线二、测酶活力和总结。
或就做二就可以）【目的和要求】1、了解转氨酶在代谢过程中的重要作用及其在临床诊断中的意义，2、学习转氨酶活力测定的原理和方法。
3、熟悉分光光度计的使用。
【原理】生物体内广泛存在的氨基移换酶也称转氨酶，能催化α-氨基酸的α-氨基与α-酮基酸的α-酮基互换，在氨基酸的合成和分解、尿素和嘌呤的合成等中间代谢过程中有重要作用。
转氨酶的最适pH接近7.4，它的种类甚多，其中以谷氨酸-草酰乙酸转氨酶（简称谷草转氨酶）和谷氨酸-丙酮酸转氨酶（简称谷丙转氨酶）的活力最强。
它们催化的反应如下。
正常人血清中只含有少量转氨酶。
当发生肝炎，心肌梗死等病患时，血清中转氨酶活力常显著增加，所以在临床诊断上转氨酶活力的测定有重要意义。
测定转氨酶活力的方法很多，本实验采用分光光度法。
谷丙转氨酶作用于丙氨酸α-酮戊二酸后，生成的丙酮酸与2，4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸2，4-二硝基苯腙。
丙酮酸2，4-二硝基苯腙加碱处理后呈棕色，其吸收光谱的峰为439—530nm，因此在波长520nm处吸光度度增加的程度与反应体系中丙酮酸与α-酮戊二酸的摩尔比基本呈线性关系，故可藉可用分光光度法测定。
从丙酮酸2，4-二硝基苯腙的生成量，可计算酶的活力。
【试剂和器材】一、试剂1.试管及试管架2.吸管3.恒温水浴4.分光光度计5、移液管6、电子天平7、研钵8、容量瓶9、冰箱二、器材1、标准丙酮酸溶液[标准丙酮酸（500μg/ml）]：准确称取纯化的丙酮酸钠62.5mg，溶于pH7.4 0.1M 的PBS中，定容到100ml。
现用现配。
2、谷丙转氨酶底物：0.90g L-丙氨酸，29.2mg α-酮戊二酸，先溶于pH7.4 0.1M 的PBS中。
然后用1M NaOH调节pH到7.4，再用pH7.4 0.1mol/L的PBS定容到100ml，贮存于冰箱中，可使用1周。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
血清谷丙转氨酶标准曲线
血清谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）是一种存在于细胞质中的酶，主要存在于肝脏、肾脏和心肌等组织中。
血清谷丙转氨酶的检测可以帮助医生判断肝脏功能是否正常，对于诊断肝脏疾病具有重要的临床意义。
而血清谷丙转氨酶的标准曲线则是进行血清谷丙转氨酶测定的重要参考依据之一。
一、实验原理。
血清谷丙转氨酶标准曲线实验是通过将不同浓度的血清谷丙转氨酶标准品加入
到反应系统中，测定其对应的吸光值，然后根据吸光值与血清谷丙转氨酶浓度的关系绘制出标准曲线。
通过标准曲线可以准确地计算出待测样本中血清谷丙转氨酶的浓度，从而判断肝脏功能的健康状况。
二、实验步骤。
1. 准备工作，将实验所需的试剂和仪器准备齐全，并按照实验要求进行预处理。
2. 标准曲线制备，依次取一系列不同浓度的血清谷丙转氨酶标准品，加入到反
应系统中，然后测定其吸光值。
3. 数据处理，将实验得到的吸光值与标准品的浓度进行对应，然后绘制标准曲线。
4. 标准曲线验证，使用已知浓度的血清谷丙转氨酶标准品进行实验，验证标准
曲线的准确性。
5. 待测样本测定，将待测样本加入到反应系统中，测定其吸光值，并利用标准
曲线计算出样本中血清谷丙转氨酶的浓度。
三、实验注意事项。
1. 实验过程中要严格按照操作规程进行，避免操作失误导致实验结果不准确。
2. 实验室操作要注意个人防护，避免接触有害化学品。
3. 实验中使用的试剂和仪器要保持干净整洁，确保实验结果的准确性。
4. 实验结束后要及时清理实验台面和仪器，做好实验室卫生。
四、实验结果分析。
通过血清谷丙转氨酶标准曲线实验，我们可以得到待测样本中血清谷丙转氨酶
的浓度，进而判断肝脏功能的健康状况。
标准曲线的制备和验证是保证实验结果准确性的重要步骤，实验中需要严格按照操作规程进行，确保实验结果的可靠性。
总之，血清谷丙转氨酶标准曲线实验对于肝脏功能的评估具有重要的临床意义，正确的实验操作和准确的数据处理是保证实验结果准确性的关键。
希望本文所述内容对您有所帮助，谢谢阅读！。