不同免疫程序ND抗体消长规律及免疫保护临界值的测定

防检技术
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不同免疫程序 ＮＤ 抗体消长规律 及免疫保护临界值的测定
贾松涛，刘 星，刘 炜，张凌燕，王 辉，程 遥，周婷婷，宋庆华 （郑州市动物疫病预防控制中心，河南郑州 ４５００５２）
摘 要：应用新城疫 IV 系（Lasota 株），新城疫油乳剂灭活苗，设计不同免疫程序，并对不同分组的鸡群进行免疫， 免疫后每隔 1 周抽取 20 只鸡测定抗体，并分别选择抗体水平为 31og2、41og2、51og2、61og2 和 71og2 时进行攻毒。结 果表明：第二免疫程序免疫鸡群效果优于第一组免疫程序免疫效果，鸡群后在二免第 4 周抗体都可以达到高峰，而后逐 渐下降，二免第 14 周抗体降至 5.81og2。攻毒试验表明，能够完全抵抗 NDV 攻击的 ND 抗体临界值为 61og2。
体，食管和腺胃交界处常见有出血斑 高水平的时间也不相同。通过表 1 可 一定关系。ND 抗体水平只是影响免
或出血带，腺胃乳头肿胀，乳头出血， 以看到在鸡群生长的前 4 周，这两组 疫保护率的一个重要因素，品种、管
严重者乳头间腺胃壁出血，肌胃角质 免疫程序所生的 ND 抗体没有明显 理水平以及个体的健康状况也是不
临界值以下，此时正值鸡因为开产容 合，才能避免新城疫的发生。
２．３．３ 病死鸡病毒分离情况
易产生生理性应激的时期，如果没有 ３．３ 本研究可以作为新城疫疫苗免
取病死鸡肝脏、脾脏、肾脏等进 一个高水平抗体的保护，此时鸡群很 疫效果评价和免疫程序制定的理论
行处理，接种鸡 胚后取尿囊液，用 容易发生 ND 感染。而第二组虽然维 依据，对于指导临床生产实践具有重
生产实践中，我们建议养殖户可以根
免后第 4 周左右抗体水平达到高峰 ２．３．４ 不同 ND 抗体水平与免疫保 据当地 ND 流行情况有选择的进行
而后开始逐渐下降，三免后第 4 周达 护率的关系
ND 免疫程序的制定，以取得最佳的
到高峰，且抗体水平在高峰的时间比
从表 2 可以看出，能够 100％抵 免疫效果。
养禽业带来严重的经济损失。ND 的 （Lasota 株） 点眼滴鼻 1 羽份同时注
病原为新城疫病毒（NDV），属副黏病 射灭活疫苗 0.2 mL；70 日龄左右，饮
毒科腮腺炎病毒属的成员，是一种具 水或滴鼻免疫 3 羽份同时注射灭活
有囊膜的 RNA 病毒，严重地危害着 苗 0.5 mL。
养鸡业的发展。疫苗接种是防治该病
二免后分别选择抗体水平为
临界值，为临床上的免疫接种提供科 31og2、41og2、51og2、61og2 和 71og2
学的理论依据 。
１ 材料与方法
１．１ 新城疫病毒毒种来源及 ELD50 测定
鸡 ND F48E9 强毒株购自中国
兽药监察所。
毒种以无菌生理盐水进行 10-6、
10-7、10-8、10-9、10-10 稀释，尿囊液接种
２．１ ELD50 测定结果 病毒对鸡胚的半数致死量为 10-7.
5ELD50/0.1 mL。 ２．２ 新城疫疫苗免疫鸡群后 ND 抗 体消长规律
从表 1 可见，免疫时鸡群 ND 母 源抗体水平平均为 2.91og2。疫苗免 疫鸡群后第 1 周抗体产生较慢，从第 2 周开始免疫应答水平明显上升，第 一组至二免第 5 周左右抗体水平达
二免后维持的时间长，下降速度缓慢 抗致死剂量 NDV 攻击的最低 ND 抗 ３．２ 攻毒试验表明，鸡群 ND 抗体
至产蛋前仍可保持抗体的较高滴度。 体水平为 61og2，即临界值为 61og2。 水平在 61og2 时即可以 100％保护，
２．３ 攻毒试验结果
２．３．１ 攻毒鸡发病情况
攻毒 18 h 左右对照组首先出现
病死鸡肉眼可见病变基本一致， 疫免疫程序，通过对鸡 ND 抗体水平 51og2 时就可以得到有效的保护有一
主要表现为机体消瘦、口腔中粘液较 检测表明鸡群进行新城疫疫苗免疫 定的出入。产生这一结果的原因可能
多，嗉囊内充满多量酸臭液体和气 后抗体产生有一定差异，抗体维持在 与鸡的品种、饲养条件、攻毒量等有
10 日 龄 SPF 鸡 胚 ，0.1 mL/ 胚 。 按
Reed-Muench 法计算 ELD50。 １．２ 试验设计
１．２．１ 试验用鸡
白来航鸡，购自河南省新郑市雏
鹰种鸡场。实验室内动物房隔离饲养。
１．２．２ 实验分组
对照组 50 只。
第一组 100 只 14 日龄活苗（La-
sota 株） 点眼滴鼻，1 羽份；45 日龄
基金项目：郑州市科技攻关项目（０９０１ＳＧＹＮ１６２７４） 通讯作者：宋庆华
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到高峰，而后开始逐渐下降，第 14 周 HA-HI 试验，结果只与 ND 阳性血 较费时费力并且增加生产成本。所以
抗体水平降至 5.81og2。第二组至二 清反应。
城疫免疫程序并对免疫后鸡群的 ND 体。第一组首免后检测 4 周，二免后
抗体水平进行测定，同时对具有不同 检测 14 周；第二组首免检测 2 周，二
ND 抗体水平的鸡进行攻毒试验，以 免后检测 8 周，三免后检测 8 周。
了解疫苗免疫鸡群 ND 抗体水平与 １．２．４ 攻毒试验
免疫保护率的关系，确定抗体保护的
NDV、H9、H5 标 准 阳 性 血 清 做 持了高抗体水平，但是实际生产中比 要意义。
其它疫苗接种参考常规免疫程
的重要措施之一，但近年来，ND 并未 序进行 。
得到有效控制，新城疫的迅速蔓延， １．２．３ ND 抗体水平检测
使疫苗免疫接种成为必然的选择。为
免疫前对雏鸡进行新城疫母源
了解新城疫疫苗的免疫效果，制定合 抗体的检测。免疫后在每组，每隔 1
理的免疫程序，我们设计了不同的新 周 随 机 抽 取 20 只 采 血 检 测 ND 抗
ND 灭活苗，肌注 0.5 mL。
时进行攻毒。对鸡群进行编号，逐只 采血检测 ND 抗体。同时设 20 只未 免疫鸡作为阴性对照。用 NDF48E9 强毒株进行攻毒 104ELD50/ 只，肌肉 注射。攻毒后每天观察鸡群，记录发 病 、死 亡 情 况 ，并 进 行 剖 检 ，观 察 病 变，分离病毒。 ２ 结果与分析
关键词：新城疫；免疫程序；抗体；消长规律；临界值 中图分类号：Ｓ８５２．５２ 文献标识码：Ｂ 文章编号：1005－944X（2010）09－0051－02
新城疫（ND）是禽类的一种高度 第二组 100 只 1 日龄活苗（Laso-
接触性、烈性传染病，给许多国家的 ta 株）点眼滴鼻，1 羽份；14 日龄活苗
膜下出血；整个肠道充血或严重出 的差别，但是第二组通过第三次免疫 可忽视的因素。因此，疫苗免疫接种
血，以十二指肠和直肠后段最严重， 后抗体维持的时间长且抗体滴度高。 是预防和控制新城疫的措施之一，它
十二指肠常呈弥漫性出血，直肠粘膜 第一组抗体水平在开产前已经到了 必须与完善的生物安全措施有机结
常密布针大小的出血点。
全群精神沉郁、厌食、拉稀，30 左右各
攻毒组部分鸡群出现相关症状。40 h
左右开始陆续出现死亡，96 h 达到死
亡高峰，144 h 以后鸡群逐渐康复。 ３ 讨 论
免受致死剂量 NDV 的攻击，这一结
２．３．２ 病死鸡主要肉眼病变
３．１ 本研究设计了两组不同的新城 果 与 以 往 报 道 的 ND 抗 体 水 平 在
为了解新城疫疫苗的免疫效果制定合理的免疫程序我们设计了不同的新城疫免疫程序并对免疫后鸡群的nd抗体水平进行测定同时对具有不同nd抗体水平的鸡进行攻毒试验以了解疫苗免疫鸡群nd抗体水平与免疫保护率的关系确定抗体保护的临界值为临床上的免疫接种提供科学的理论依据
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