中药萃取超导透入治疗兔膝骨关节炎疗效的实验研究

增生 。此动物 ＯＡ模型的病理学变化与人类 Ｏ 相似 。 Ａ
１ 动 物 分 组 ． ４
２ ４只新西兰大 白兔 随机分为模型组 、中药组和治疗组，每 组 ８ ，随机取 ８只兔健侧膝关节 为正 常对 照组 。模型动物建 只
立后 开始外涂 药物，每 日３次 ，共计 ８周 。模型组每 日以生理 盐水患膝外涂 ；中药组每 日患膝外涂 中药组方萃取物 ；治疗组 在患膝外涂 中药萃取物后采用超 导透入 患处。各组在用药 治疗
［ ｓ ａ ｔ Ｏｂｅｔ ｅ Ｔ ｂｅｖ ｈ ｆ ｃ ｎ ｔ ａｉｇｋ ｅ ｓ ｏｒ ｒ ｉ ｗｉ Ｃ ｅｔ ｃ ｂ ｓｅ ｔｎ ｌｏｐｒ ａ ｙ ｔｅ Ａｂｔ ｃ］ ｒ ｊｃｉ ： ｏｏ ｓｒｅｔｅｅｆ ｔｏ ｒ ｔ ｎ ｅｏｔ ａ ｈｉｓ ｔ Ｔ Ｍ ｘｒ ｔ ｕｈｎｏ ｇｕ ｅｍｅｔ ｂ ｖ ｅ ｅ ｎ ｅ ｔ ｔ ｈ ａ ｅ ｈ
Ｃ Ｃ 中医临床研究 ２ １ 年 第 ３ 第 ３期 ＪＭ ０１ 卷
中药 萃 取 超 导 透 入 治 疗
兔 膝 骨 关 节 炎 疗 效 的 实 验 研 究
Ｅｆｅ ｔ ｅｅ ｐ ｒｍ ｅ ｔ ｌ ｔ ｄ ｎ ｔｅ ｔ ｇｒ ｂ ｉ ｆ ｃｉ ｘ ｅ ｉ ｎ ａ ｕ ｙ ｏ ａｉ ａ ｂ ｔ ｖ ｓ ｒ ｎ ｋ ｅ ｓｅ ａ ｔ ｒｔｓｗｉ ｎ ｅｏ ｔ ｏ ｒ ｉ ｔ ＴＣＭ ｘ ｒ ｃ ｕ ｅ ｃ ｎ ｕ ｔ ｇ ｐ ｎ ｔａ ｉ ｎ ｈ ｉ ｈ ｅ ｔａ ｔ ｐ ｒ ｏ ｄ ｃ ｉ ｅ ｅｒ ｔ ｓ ｎ ｏ
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玄参 ，五加皮 ，鸡血 藤，骨碎补 ，桑寄生 ） Ｏ 超 临界萃取 ，Ｃ 机 （ 美国 Ｓ Ｔ公司 ，如图 ２ ，光 学显微镜 （ ＹＭＰ ）机及 Ｆ ） ＯＬ ＵＳ
一
１． ２
Ｃ ｉｉ ｌｏ ｒａｏ ｈｎ ｓ Ｍｅ ｉｎ ０ Ｖ ． ） ＮＯ． ｌ ｃ ｕ ｌ ｆ ｉｅｅ ｄｃ ｅ １ ｎ ａＪ ｎ Ｃ ｉ ２ １ ＯＬ（ ３ ３
谭庆远 王黎 明 曲洪雪 刘云鹏 张 岩
（ 山东省 烟台市中医医院，山 东 烟台，２ ４ ０ ６ ０ ０）
中图分类 号：Ｒ ８ ６１ 【 摘
文献标 识码；Ａ
文 章编号 ：１７．８０（０１ ０ ． １． 证型 ：Ａ Ｉ ６４ ６ ２ １ ） ３０ １ ３ ７ ０ ０ Ｄ
要 】 目的：研 究 中药组方补 肾通络方萃取物 经超导 透入 治疗膝骨性关节 炎的疗效 ，探讨其 防治骨性 关节炎的可行性 。
一
石蜡切 片机 （ ＥＣ ，木瓜蛋 白酶 （ Ｌ Ｉ Ａ） 武汉博士德 ） 。
１ ＿ ３动物 ＯＡ模型制备 提前一天将 兔子关节处剔 毛， ２ ％乌 拉坦经耳缘静脉将 用 ０
兔轻度麻醉 ， 关节碘伏 消毒，将关节轻弯，经髌腱两侧进针， 膝
关节腔 内注射 １ ％木瓜 蛋 白酶生理盐水溶液 ０５ ，隔天注射 ． ６ ． ｍｌ １ 次，共注射 ３次 ，正常组给予相 同体积 的生理 盐水 ，６周后 进行实验【 】 ２。 ０ 建模成功标准 ：造模 侧膝 关节间隙较健侧变窄 ，患膝关节 主 、被 动活动受限；大体解剖 可见 关节 滑膜 充血，关节表面失 去光泽 、粗糙、溃疡 形成；镜下滑膜细胞增 生、滑膜下层纤维
２ 统计 学 处 理 ． ４
中药组 ： 关节腔 内有较多炎性渗出物。 关节软骨中度破坏，
软骨 细胞排列 有紊乱 及软骨剥 脱表现 ，软骨基 质 出现 出现裂 隙。关节滑膜 细胞轻度变性 、增生，少许呈短绒毛状伸入关节 腔 内。滑膜 炎细胞浸润及 肉芽组织较少 ，周围软组织可见 炎细 胞浸润 （ 图 ３ 。 如 ）
图 ２ 对 照 组关 节囊腔 表 面
注 ：图二 Ｈ 染色 Ｘ１０ Ｅ ，ａ关节 软骨 中到 重度 破坏 ，软 骨碎 块状 剥脱 。ｂ ０
缺损 的修 复情 况。
２３ －Ｎ０ 测 定
关节 滑膜 细胞 有轻 到 中度 变性 、 中度增 生 ，呈 短绒 毛状 或指 突状 伸入 关节
腔 内。
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应用 Ｓ Ｓ ． 统计学软件进行统计学分析 ，计量资料采 Ｐ Ｓ ０ １ １ 用ｔ 检验 。统计结果采用均数 ±标准差 （ ± ）表示 ， ＜ ．５ Ｐ ００ 表示差异具有统计学意义 。 ３ 结 果
直得 到临床的应用和验证 ｌ 实验 自拟中药方超 临界萃 取物 ｌ 】 本
经超导透入 技术 治疗膝 关节骨性关节炎疗效 的观察 。 １ 资料 与方法
１１实验动物 ．
５月龄新西兰大 白兔 ２ ４只 ，雌雄不 限，平 均体重 （ ．± ２０
０２ ｇ ．）ｋ ，由烟 台大学实验动物 中心提供 。室温 下笼 内饲养 ，自 由摄食 、饮水 ， 自由活动 。动物 实验编号为 ：鲁 Ｇ０ ０ １ 。 ８ ７ ０ １ ． ２主要试剂 和设备 中药组方 （ 大黄 ，牛膝 ，桂枝，川乌 ，杜仲 ，仙茅 ，川芎 ，
２ 观察项 目
２１大 体观 察 ． 观察各组动物模型膝关节关节软骨表面光滑度 、完 整性 、
光泽 、有 无裂 纹，裂纹 的深浅 ，关节边缘有无增生，关节液 的
颜色 、形状、滑膜充血 、增生情况等 。 ２２组织切片观察 ． 观察各组关节软骨 的各层 的排列情况 ，软骨细胞 的形态及 染色情况 。观 察用 药前 后关节软骨 的发展变化情况 ，关节软骨
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Hale Waihona Puke 采用硝酸 酶还 原法测定 。 首先测 定蛋 白含量 ， 样本稀释 ５ ０ 倍，加考 马斯亮蓝 ，然后配标准管，以双蒸馏水为 空白管 ，调 零，比色计读数。蛋 白值＝ 定值／ 测 标准管值 ×１ ５ ｍｇｍｌ ． ６ ／ 。再 ２
取样 本及 标准液，加入 ＮＯ试剂 ，３ ￣ ７Ｃ水浴 ６ ｍｉ，离心 ，取 ０ ｎ 上清，加显色剂 ，蒸馏水调零 ，比色计读卡。ＮＯ含量： 样本测 定值． 白管读数／ 空 标准管读数． 白管读数 ×２ ／ 本蛋 白含量 。 空 ０样
期 间，所有动物均 未出现皮肤过敏反应 、皮肤溃 疡或者其他不
模 型组：关节腔 内大量炎性渗 出物 。关节软骨中到重度破 坏 ，软骨细胞排列紊乱 ，软骨细胞 肿胀 崩解 ，数量减少 ，软骨
基质出现不规则裂隙，软骨碎块状剥脱 。关节滑膜细胞有轻到
中 度 变 性 、 中度 增 生 ，呈 短 绒 毛状 或指 突状 伸 入 关 节 腔 内 。滑
ｄｖｄｄ ｉ ｏｍｏ ｅ ｇｏ ｐ（） Ｔ Ｍ ｒｕ ８， ｅｔ ｎ ｒｕ ８． ａ ａ ｊｃｅ ｔ ｉｈ ｅ ｉｔ ｏｅｔｂｉ ａ ｂ ｄ ｌ ｆ ｉｉｅ ｔ ｄ ｌ ｒｕ ８， Ｃ ｇｏｐ（） ｔ ａｍｅｔｇｏ ｐ（） Ｐ ｐ ｉ ｉ ｅｔｄｉ ｏｒ ｔｋ ｅｊ ｎ ｓ ｌ ｈｒｂ ｉ ｍｏ ｅ ｏ ｎ ｒ ｎｎ ｎ ｇ ｎ ｏ ｔ ａ ｓ ｔ
方 法：２ 只新 西兰大白兔随机 分为模 型组 （ 只 ） ４ ８ 、中药组 （ 只 ） ８ 、治疗组 （ 只 ） ８ 。右膝 关节内注射木瓜蛋 白酶建 立兔膝骨性 关 节 炎模 型，左膝 为正常对照组 。成模后 中药组 患膝 外涂 中药组方萃取 物，治疗组将 中药萃取物经超导透入 患膝 ，８周后镜 下观察 各组动物模 型关节软骨 、滑膜组织形 态学变化及硝 酸还 原酶法测 Ｎ 浓度 。结果： 中药组滑膜及软骨组织形 态学改变略轻 于模型 Ｏ 组 ，治疗组 关节改变较模型组 明显减轻 ，且滑膜组织 Ｎ Ｏ浓度 明显降低 （ ＜ ． ） Ｐ ０ １；结论 中药萃取物超导透入较传统外敷用 药更能 ０ 够减轻兔膝 骨性 关节炎的软骨退行性 变和滑膜 炎症 。 【 关键词 】 膝 关节骨性 关节炎；萃取 物； 中药
ｐ ｎ ｔａｉ ｎ ｉ ｒ ｈ ｅ ｔ ｄ ｔ ｎ ｌ ｔ ｐ ｃ ｌｍｅ ｉａ ｉ ｎ ｔ ｅ ｉｖ ｓｅ ａ ｔ ｒ ｉ ｏ ａ ｂ ｔｋ ｅ ａ ｉ ｇ ｅ ｅ ｅ ａ ｉｎ ａ ｄ ｓ ｎ ｖ ｔ ｅ ｅ ｔ ｓ ｍｏ ｅ ｔ ａ ｔ ａ ｉ ｏ ａ ｏ ｉ ａ ｄ ｃ ｔｏ ｏ ｒ ｌ ｅ ｏ ｔｏ ｒ ｉ ｓ ｆ ｒ ｂ ｉ ｎ ｅ ｃ ￣ ｌ ｅ ｄ ｇ ｎ ｒ ｔ ｒ ｏ ｎ ｈ ｒ ｉ ｅ ｈ ｔ ａ ｏ ｎ ｙ ｏ ｉｓ ｉ ｄｓ ａ ｅ ｉｅ ｓ ．
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膝 关节骨性关节炎 （ ｎ ｅｏｔｏｒ ｒｉ，Ｋ Ａ）是中老年 Ｋ ｅ ｓ ａｔ ｉｓ Ｏ ｅ ｈｔ 人 的常见病多发病之一 ，临床 表现为膝关节疼痛 、关节僵 硬和 活动 障碍 ，症状可随着年龄增 长逐 年加 重，严重影 响患者 的健 康水平 和生活质量 。ＫＯ 治疗上除少数 患者需手术治疗外 ， Ａ 多主张保 守治疗 ，医药治疗本病有 其独 特的优势 ，中药外 治也
良反应 。 实验动物取材后常规苏木精． 红染 色， 伊 中性树胶封片 ，
镜下组织 学检 查，并进行滑膜 中 ＮＯ含量测定。 １ ． ５耳缘静脉栓塞法处死动物 ，取膝关节股骨髁软骨和滑膜制 作光镜标本 。
膜有多量炎细胞浸润及 肉芽组织形成 ，周 围软组织可见炎细胞
浸润 （ 图 ２ 。 如 ）
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