SysmexXE2100全自动血液分析仪复检规则的制定及应用评价

SysmexXE2100全自动血液分析仪复检规则的制定及应用评价
目的制定适合本实验室的Sysmex XE-2100全自动血液分析仪复检规则。

方法参照国际血液学实验室41条血细胞复检规则，根据Sysmex XE-2100血液分析仪的特点，建立Sysmex XE-2100血液分析仪的复检规则，并在规则指导下对1400份标本检测结果和显微镜复检结果进行数据分析。

结果血液分析仪的准确率为79.4%，复检率为26.4%。

结论实验室建立的复检的规则，能够对标本进行有效筛选，提高工作效率，保证血液分析结果的准确性。

标签：全自动血液分析仪复检规则应用评价假阴性率
自自动化血液分析仪问世以来，全自动血液分析仪在计数白细胞、红细胞、血小板和成熟的白细胞分类方面具有快速、准确、重复性好的优势。

但由于血细胞分析仪尚不具备识别异常细胞形态的能力。

手工技术，尤其是显微镜下观察染色血片的技术，补充了血液分析仪的结果，使病人的血液标本结果全面。

血液分析仪分析标本能力强，但高复检率与临床即时检验、快速检验的要求相矛盾，任何根据医院的条件制定有效的复检规则已所广泛关注[1] 。

2005年国际血液学复检专家组推荐了41条自动血液分析仪和分类复检规则（以下简称41条复检规则）[2] ，2008年国内XE-2100血液分析仪复检标准制定协作组推荐了23条复检规则（以下简称23条复检规则）[3] ，在借鉴其他实验室的经验基础上，结合本实验室的具体情况，制定出适合本实验室的复检规则，并进行了临床评估。

1 材料和方法
1、仪器与试剂
日本Sysmex公司生产的XE-2100血液分析仪流水线，所用试剂均为Sysmex 公司原装配套试剂，染液为BASO吉姆萨染液A液（主要成分：曙红、甲醇和亚甲兰）、B液（缓冲液）。

该仪器经原装配套校准品校准，双目光学显微镜购自日本Olympus光学工业株式会社。

2、标本来源
2012年5-10月我院门诊患者1400例，血常规由乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）真空
抗凝管采集。

3、方法
3.1 所有标本按本科检测流程和方法对血常规进行检测，收到标本2小时内完成检测，仪器根据预设的复检规则对异常或可疑结果进行标记，操作人员根据提示进行手工推片和染色。

3. 2 显微镜镜检法：由2名经验丰富、技术熟练的中级以上检验人员采用双盲法，按美国临床和实验室标准化协会（CLSI）推荐方法进行WBC分类，在显微镜油镜下，分类计数200个白细胞，以2人结果的均值作为靶值，并作全片观察，记录有无血细胞大小、形态、结构异常等情况。

4、质量控制
检测前由Sysmex公司提供配套校准品进行校准，检测期间每日室内质控在控，参加江苏省临床检验中心室间质控，也全部再控。

5、复检规则的建立
5.1仪器复检标准
依照ISO15189《医学实验室质量和能力认可准则》在血液学领域的应用要求，参考国际血液学委员会（ICSH）专家组推荐的国际41条复检规则，借鉴其他实验室的经验，在Sysmex推荐XE-2100血液分析仪23条复检规则的基础上，结合本实验室的具体情况，制定出了适合本实验室的16条复检规则，见表1，并进行了临床评估。

5.2显微镜镜检阳性判定标准
参考国际血液学复检专家组制定的阳性标准作为本次评估标准：红细胞形态有中度或更大改变；血片中发现有疟原虫；血小板形态有中度或更大改变；原始细胞≥1%；早/中粒细胞≥1%；晚幼粒细胞>2%；杆状核粒细胞>5%；嗜酸性粒细胞>5%；嗜碱性粒细胞>1%；异型淋巴细胞>5%；有核红细胞>1%；浆细胞>1% [4]。

首先是观察全片，有无寄生虫，估计白细胞、血小板数量与仪器结果是否大致相符，红细胞、白细胞、血小板的形态染色有无异常。

如与仪器报告结果相符，可按仪器的结果报告。

如发现任何细胞形态（染色）异常，应加以描述并报告。

5.3复检规则评估
以镜检结果评价自建复检规则。

对每份标本的仪器检测结果、旗标提示和显微镜复检结果进行统计分析，真阳性为符合复检规则且涂片发现有阳性结果；假阳性为符合复检规则而涂片中没有发现任何阳性结果；假阴性为不符合复检规则而涂片中发现了阳性结果；真阴性为不符合复检规则且涂片又是阴性结果，并计算百分比。

6 统计学分析用Microsoft Excel 2003软件进行。

结果
1 复检规则的临床应用：每份标本在测定时，如果触及制定的复检规则，则
按如下顺序进行，具体则按照如下操作①观察标本情况：标本是否溶血、黄疸、乳糜血、存在凝集等干扰，有必要重新采集后再测试②仪器复检：仪器测不出结果、各类细胞计数超出规定范围、与既往结果有较大波动，重新检测。

③通过涂片、染色，在显微镜下对检测结果评估：检查红细胞、血小板的形态染色有无异常；有无寄生虫；白细胞形态有无异常，还可根据血片中细胞的分布、比例，估计仪器给出的白细胞和血小板计数是否与显微镜下看到的大致相符。

④人工计数各类细胞⑤显微镜下白细胞分类计数[5]。

2. 复检规则的效果评价：对执行复检规则后的1400份标本进行统计分析，检测结果正常可直接发出报告953份，占68.1%。

而需要显微镜人工白细胞计数的占26.4%，这与美国CAP组织的实验室改进计划中血液分析仪血涂片的复检率相近。

结论
近年来，随着医学检验技术的不断发展，大量新技术、新设备不断进入检验科，自动化程度明显提高，细胞形态学随着现代化仪器的进入而被淡化。

在有些情况，特别是病理条件下，其测定结果并不可靠或难以确定，还需要在显微镜下进行复检。

这类仪器仅仅是一种过筛性质的细胞分析仪器。

当仪器所给出的数据或直方图散点图出现异常、有异常报警信息、白细胞不分类时应进行镜下复检，以免造成错误报告或漏检。

显微镜下血涂片检查应当是对血液分析仪检测的一个补充。

按照复检规则，所选1400份样本的需要复检的有370例，复检率为26.4%，准确率为
（真阳性率和真阴性率）为79.4%，假阳性率18.3%，但镜检只发现少量的杆状核细胞和异形淋巴细胞，假阴性率 2.3%，低于国际血液学复检专家组制定5%的最大允许范围，为了避免假阴性，除待仪器性能的提高，进一步完善复检规则，提高检验人员的素质，多与临床沟通，听取临床反馈意见，了解患者病情，做好复检复片工作是必不可少的。

，这次统计真阳性率占16.1%，而假阳性率也高达18.3%，如果我们按照出现可疑旗标就复检的标准，我们每天的复检率在50%以上，如此高的复检率一般实验室是很难安排人员来完成的，通过复检规则的制定，我们现在的复检率可以控制在34.4%，这个比例与文献报道基本相符表[6]，大大提高了工作效率，也确保了那些真正需要复检标本的质量。

由于仪器、型号、校准方法不同，造成检测结果、图型、报警符号出现频率不同，所以复检标准也有差异。

再者，复检标准的制定和实验过程，也是对仪器进一步了解的过程。

我们应以对患者负责的态度，认真做好血细胞分析仪检查后的复检工作，为临床提供更准确的报告，以减少误诊、漏诊的发生。

参考文献
[1]刘文峰，郑慧丽，赵金玲，等，血细胞分析仪形态学复检的思考[J].临床检验杂志，2010，28（5）：394-395
[2] Bames PW，McFadden SL，Machin SJ，et al.The international consensus group for hematology review ：suggested criteria for action following automated CBC and WBC differential analysis [J] .Lab Hematol，2005，11（2）：83-90
[3] XE2100-血细胞分析仪复检标准制定协作组.Sysmex XE-2100自动血细胞分析和白细胞分类的复检规则探讨[J] . 中华检验医学杂志，2008，31（7）：752-757
[4] 彭黎明，邱广斌，赵威，等.自动血细胞计数和细胞分类计数的复检规则[J] . 中华检验医学杂志，2007，30（4）：377-379
[5] 朱建未，朱芳血液分析仪复检规则的建立和临床应用[J].山东医药，2012，52（3）：106
[6]孙芾，王厚芳，于俊峰，等.血细胞显微镜复检标准的制定及临床应用[J].中华检验学杂志，2005，28（2）：155-157。