贮存条件对肉桂叶精油中各微量成分相对含量的影响(Ⅰ)——萜类化合物

贮存条件对肉桂叶精油中各微量成分相对含量的影响(Ⅰ)——
萜类化合物
张笮晦;童永清;黄广智;邓家刚;沈芳
【摘要】研究不同贮存条件下,肉桂叶精油中微量萜类化合物的种类和相对百分含量变化.采用水蒸气蒸馏法对鲜肉桂叶及分别在不同贮存温度(15℃、20℃、25℃、30℃、室温)下贮存不同时间(0～90d)肉桂叶中的挥发性成分进行提取,得到的肉桂叶精油采用气相色谱-质谱联用技术进行分析测定,以面积归一法计算其中微量(相
对含量0.1％～1.0％)萜类化合物的相对百分含量.在贮存过程中共检测到13种微
量萜类成分,分别为(-)-龙脑、γ-依兰油烯、β-杜松烯、香树烯、(-)-α-蒎烯、α-人
参烯、石竹烯、喇叭烯、桉油烯醇、库贝醇、毕橙茄醇、α-红没药醇、绿花白千
层醇.不同贮存条件下肉桂叶精油微量萜类成分的种类和含量均有较大差异,贮存
80d以上的肉桂叶中基本不含萜类成分.该研究为肉桂采摘后植物体内的生物合成
途径及机理等方面的研究提供依据,为肉桂油的产业化生产提供参考.
【期刊名称】《大众科技》
【年(卷),期】2019(021)002
【总页数】3页(P29-31)
【关键词】肉桂叶;肉桂油;贮存时间;贮存温度;萜类化合物
【作者】张笮晦;童永清;黄广智;邓家刚;沈芳
【作者单位】广西中医药大学药学院,广西南宁 530200;广西庚源香料有限责任公司,广西东兴 538100;广西中药药效研究重点实验室,广西南宁 530200;广西庚源
香料有限责任公司,广西东兴 538100;广西庚源香料有限责任公司,广西东兴538100;广西中药药效研究重点实验室,广西南宁 530200;广西大学化学化工学院,广西南宁 530004
【正文语种】中文
【中图分类】Q946;TQ654
1 引言
随着人们生活水平的提高，木本香料日益受到重视，从木本植物中提取的天然精油广泛用于香料、动物和医药工业以及芳香疗法。

木本植物精油在工业上大多通过水蒸气蒸馏法提取而得，如肉桂油、桉叶油、互叶白千层精油、香樟精油、山苍子油、八角茴香油等，其中肉桂是木本香料中贸易活动最为活跃的产品之一[1]。

肉桂精
油化学成分复杂，除主要成分肉桂醛、邻甲氧基肉桂醛、乙酸肉桂酯、香豆素等外，还含有种类繁多的萜类化合物，这些微量萜类化合物对肉桂精油的品质、药效等方面均有一定贡献[2]。

肉桂叶挥发油中的α-红没药醇是一种低毒性的倍半萜，其香气清淡愉快，并具有消炎、保护和治愈皮肤、致凋亡及抗癌活性、抑制胶质母细胞瘤细胞迁移和侵袭等作用，广泛应用于化妆品及医药行业[3-5]。

石竹烯可用于调
配丁香、胡椒、肉豆蔻等食用香精，也可用于合成其它香料，如乙酰基石竹烯等，存在于肉桂枝叶、桉叶、八角茴香及苍子中[6-11]。

目前对肉桂精油的研究主要集中在其主要成分肉桂醛，及相对含量＞1.00 %的邻甲氧基肉桂醛、香豆素、乙酸
肉桂酯等成分的提取及含量方面，缺乏对其微量成分的种类及在贮存过程中含量变化等方面的研究。

笔者采用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）首次对肉桂叶中微量萜类成分（相对含量0.1%～1.0%）在肉桂叶贮存过程中的变化进行了研究，以期为进一步研究肉桂采摘后植物体内的生物合成途径及机理提供依据。

2 实验部分
2.1 材料与仪器
GC-2010 Plus型气相色谱仪（日本 Shimadzu 公司）；SPX-B 型生化培养箱（恒宇仪器(中国)有限公司）；数控电热套（上海恒科学仪器有限公司）；无水乙醇（西陇化工股份有限公司，AR）；无水碳酸钠（天津市科密欧化学试剂有限公司，AR）；实验用水为自制蒸馏水。

供试肉桂叶采自广西壮族自治区东兴市广西庚源香料有限责任公司林场，经广西中医药大学韦松基教授鉴定为樟科植物肉桂（Cinnamomum Cassia presl.）的叶，采集时间为2018年4月。

2.2 实验方法
2.2.1 肉桂叶的处理
将新鲜肉桂叶随机分成48份，每份160g。

3份用于鲜叶提油，余下45份分为5组，每组9份，分别于15℃、20℃、25℃、30℃的4个培养箱中贮存，剩余1组于室内室温贮存。

2.2.2 肉桂叶精油的提取
分别于贮存的第10d、20d、30d、40d、50d、60d、70d、80d、90d，取贮存于5种温度下的肉桂叶各1份，剪成1cm×1cm规格，置于2L圆底烧瓶中，加入1L蒸馏水，浸泡 1h，水蒸气蒸馏提取5h，静置分液，无水硫酸钠干燥，得到相应的桂叶油。

用移液枪分别桂叶油各100µL，丙酮定容于2mL容量瓶，即得GC-MS待测样品。

2.2.3 GC-MS分析
色谱条件：色谱柱 Rxi-5Sil（30m×0.25mmid×0.25μm），载气为高纯度氦气，流速 1.0mL/min-1；柱前压 47.0Kpa，分流比60∶1；进样口温度250℃，接口温度250℃。

程序升温过程：柱初温100℃，保留1min，以5℃/min-1升至
200℃，保留1min，再以8℃/min-1升至250℃；进样量0.6μL。

质谱条件：电子轰击（EI）离子源，电离能量70eV，电子倍增器电压 1.5kV，溶剂延迟 3min，质量扫描范围33u～550u，全扫描方式。

3 结果与讨论
3.1 15℃下不同贮存时间肉桂叶精油微量萜类成分分析
根据2.2.3中条件对在15℃下贮存0d～90d的肉桂叶中所含精油进行GC-MS分析，用NIST标准谱库检索各化合物，利用峰面积归一化法计算各萜类化合物所占的相对百分含量，结果如表1所示。

从15℃下贮存90d内的肉桂叶中共鉴定出9种相对含量0.1%～1.0%的微量萜类化合物，其中在鲜叶油中鉴定出 4种，分别是桉油烯醇（0.64%）、库贝醇（0.36%）、α-红没药醇（0.13%）及绿花白千层醇（0.57%）。

在贮存过程中产生的 5种微量萜类化合物为(-)-龙脑、γ-依兰油烯、α-人参烯、石竹烯及Α-毕橙茄醇。

表1 15℃下贮存时间对肉桂叶精油中微量萜类成分相对百分含量的影响微量萜类成分鲜叶油贮存时间10d 20d 30d 40d 50d 60d 70d 80d 90d(-)-龙脑 (-)-Bomeol /% - 2.26 - - - - - - - -γ-依兰油烯γ-muurolene /% - 0.1 - - - - - - - -β-杜松烯β-Cadinene /% - - - - - - - - - -香树烯Alloaromadendren /% - - - - - - - - - -(-)-α-蒎烯 (-)-a-Copaene /% - - - - - - - - - -α-人参烯α-Panasinsanene /% - - 0.05 - - - - - - -石竹烯 Caryophyllene /% - 0.12 - - - - - - - -(+)-喇叭烯 (+)-Ledene /% - - - - - - - - - -桉油烯醇 Espatulenol /% 0.64 0.64 1.66 1.5 - - - 0.51 - -库贝醇 Cubenol /% 0.36 0.2 0.21 - - - 0.13 - - -Α-毕橙茄醇 a-Cadinol /% - 0.14 - - - - - - - -α-红没药醇α-Bisabolol /% 0.13 0.13 0.08 - - - - - - -绿花白千层醇 Himbaccol /% 0.57 0 0.39 - - - - - - -
3.2 20℃下不同贮存时间肉桂叶精油微量萜类成分分析
在20℃下贮存0d～90d的肉桂叶精油中微量萜类化合物如表2所示。

从中共鉴定出8种微量萜类化合物，在贮存过程中产生的4种微量萜类化合物为(-)-龙脑、α-人参烯、石竹烯及Α-毕橙茄醇。

表2 20℃下贮存时间对肉桂叶精油中微量萜类成分相对百分含量的影响微量萜类成分鲜叶油贮存时间10d 20d 30d 40d 50d 60d 70d 80d 90d(-)-龙脑 (-)-Bomeol /% - - 3.21 - 1.29 1.5 0.71 - - -γ-依兰油烯γ-muurolene /% - - - - - - - - - -β-杜松烯β-Cadinene /% - - - - - - - - - -香树烯Alloaromadendren /% - - - - - - - - - -(-)-α-蒎烯 (-)-a-Copaene /% - - - - - - - - - -α-人参烯α-Panasinsanene /% - - 0.17 - - - - - - -石竹烯Caryophyllene /% - 0.2 0.21 - - - - - - -(+)-喇叭烯 (+)-Ledene /% - - - - - - - - - -桉油烯醇 Espatulenol /% 0.64 0.53 - - - - - - - -库贝醇Cubenol /% 0.36 0.21 0.18 - 0.3 0.3 0.17 - - -Α-毕橙茄醇 a-Cadinol /% - 0.12 - - - - - - - -α-红没药醇α-Bisabolol /% 0.13 0.15 0.11 - 0.14 0.1 0.08 - - -绿花白千层醇 Himbaccol /% 0.57 - 0.44 - - - - - - -
3.3 25℃下不同贮存时间肉桂叶精油微量萜类成分分析
在25℃下贮存0d～90d的肉桂叶精油中微量萜类化合物如表3所示。

从中共鉴定出10种微量萜类化合物，在贮存过程中产生的6种微量萜类化合物为γ-依兰
油烯、β-杜松烯、香树烯、(-)-α-蒎烯、石竹烯及(+)-喇叭烯。

表3 25℃下贮存时间对肉桂叶精油中微量萜类成分相对百分含量的影响微量萜类成分鲜叶油贮存时间10d 20d 30d 40d 50d 60d 70d 80d 90d(-)-龙脑 (-)-Bomeol /% - - - - - - - - - -γ-依兰油烯γ-muurolene /% - - 0.28 - - - - - - -β-杜松烯β-Cadinene /% - - 0.15 0.1 0.14 - - - - -香树烯Alloaromadendren /% - - 0.19 - - - - - - -(-)-α-蒎烯 (-)-a-Copaene /% - - 0.3 - - - - - - -α-人参烯α-Panasinsanene /% - - - - - - - - - -石
竹烯 Caryophyllene /% - - 0.18 0 0.27 0.22 - - - -(+)-喇叭烯 (+)-Ledene /% - - 0.33 0.23 0.21 - - - - -桉油烯醇 Espatulenol /% 0.64 0.56 0 0.9 - - - - - -库贝醇 Cubenol /% 0.36 0.12 0.12 0.11 0.15 0.14 - - -Α-毕橙茄醇 a-Cadinol /% - - - - - - - - - -α-红没药醇α-Bisabolol /% 0.13 - - - 0.18
- - - - -绿花白千层醇 Himbaccol /% 0.57 - - - - - - - - -
3.4 30℃下不同贮存时间肉桂叶精油微量萜类成分分析
在30℃下贮存0d～90d的肉桂叶精油中微量萜类化合物如表4所示。

从中共鉴
定出9种微量萜类化合物，在贮存过程中产生的 5种微量萜类化合物为(-)-龙脑、
γ-依兰油烯、β-杜松烯、(-)-α-蒎烯及(+)-喇叭烯。

表4 30℃下贮存时间对肉桂叶精油中微量萜类成分相对百分含量的影响微量萜类
成分鲜叶油贮存时间10d 20d 30d 40d 50d 60d 70d 80d 90d(-)-龙脑 (-)-Bomeol /% - 2.33 1.47 - - - - - - -γ-依兰油烯γ-muurolene /% - 0.19 - - - - - - - -β-杜松烯β-Cadinene /% - 0.2 - - - - - - - -香树烯Alloaromadendren /% - - - - - - - - - -(-)-α-蒎烯 (-)-a-Copaene /% - 0.23 - - - - - - - -α-人参烯α-Panasinsanene /% - - - - - - - - - -石
竹烯 Caryophyllene /% - - - - - - - - - -(+)-喇叭烯 (+)-Ledene /% -
0.09 - - - - - - - -桉油烯醇 Espatulenol /% 0.64 0.3 - - - - 0.53 - - -库
贝醇 Cubenol /% 0.36 0.14 0.17 0.2 - - 0.11 - - -Α-毕橙茄醇 a-Cadinol /%
- - - - - - - - - -α-红没药醇α-Bisabolol /% 0.13 - 0.13 0.13 - - - - - -
绿花白千层醇 Himbaccol /% 0.57 - - - - - - - - -
3.5 室温下不同贮存时间肉桂叶精油微量萜类成分分析
在室温下贮存 0d～90d的肉桂叶精油中微量萜类化合物如表5所示。

从中共鉴定
出7种微量萜类化合物，在贮存过程中产生的 3种微量萜类化合物为(-)-龙脑、β-
杜松烯及(-)-α-蒎烯。

表5 室温下贮存时间对肉桂叶精油中微量萜类成分相对百分含量的影响微量萜类成分鲜叶油贮存时间10d 20d 30d 40d 50d 60d 70d 80d 90d(-)-龙脑 (-)-Bomeol /% - - - - - 0.74 - - - -γ-依兰油烯γ-muurolene /% - - - - - - - - - -β-杜松烯β-Cadinene /% - 0.06 - - - - - - - -香树烯Alloaromadendren /% - - - - - - - - - -(-)-α-蒎烯 (-)-a-Copaene /% - - 0.24 - - - - - - -α-人参烯α-Panasinsanene /% - - - - - - - - - -石竹烯 Caryophyllene /% - - - - - - - - - -(+)-喇叭烯 (+)-Ledene /% - - - - - - - - - -桉油烯醇 Espatulenol /% 0.64 0.4 1.16 1.15 0.97 - - 0.41 - -库贝醇 Cubenol /% 0.36 0.19 0.24 0.14 0.11 0.12 0.14 - - -Α-毕橙茄醇 a-Cadinol /% - - - - - - - - - -α-红没药醇α-Bisabolol /% 0.13 0.12 - - - - - - - -绿花白千层醇 Himbaccol /% 0.57 0.37 - - - - - - - -
4 结论
本文研究不同贮存条件下，肉桂叶精油中微量萜类化合物的变化。

在5种温度下贮存90d内的肉桂叶中共检测到13种微量萜类成分，分别为(-)-龙脑、γ-依兰油烯、β-杜松烯、香树烯、(-)-α-蒎烯、α-人参烯、石竹烯、喇叭烯、桉油烯醇、库贝醇、毕橙茄醇、α-红没药醇、绿花白千层醇。

其中桉油烯醇、库贝醇、α-红没药醇及绿花白千层醇存在于鲜叶中，其余9种为不同贮存条件下通过肉桂叶中生物合成途径产生。

不同贮存条件下肉桂叶精油中微量萜类化合物的种类和含量均有较大差异，贮存 80d以上的肉桂叶中基本不含微量萜类化合物。

本研究首次对肉桂叶精油中微量萜类化合物在不同贮存条件下的种类及含量变化进行分析报道，为阐明肉桂枝叶提油加工前的“陈化”过程中发生的生物合成途径及机理研究提供参考。

【参考文献】
【相关文献】
[1] 刘庆博,刘俊昌,陈文汇.中国木本香料的贸易竞争力及影响因素分析——以肉桂为例[J].林业经济问题,2013,33(1):18-22.
[2] 侯小涛,郝二伟,秦健峰,等.肉桂的化学成分、药理作用及质量标志物(Q-marker)的预测分析[J].中草药,2018,49(1):20-34.
[3] 陈伟.α-红没药醇对人肝癌 HepG2细胞凋亡作用的研究[D].武汉:武汉大学,2010:1-8.
[4] 闫海斌,徐如祥.α-红没药醇对胶质母细胞瘤细胞迁移和侵袭的影响[J].解放军医学院学
报,2018,39(8):699-706.
[5] 邓倩,何春茂,李鸿山,等.双戊烯合成α-红没药醇的工艺研究[J].轻工科技,2017,33(2):34-36.
[6] 刘红星,林森,黄初升,等.肉桂三个不同部位提取肉桂油的化学成分比较分析[J].中国调味
品,2011,36(4):102-104,110.
[7] 陈婷婷,周晓农,朱丹,等.广东尾叶桉叶挥发油化学成分的气相色谱-质谱分析[J].广东药学院学报,2011,27(5):464-467.
[8] 梁雯华,李先文.桉树叶挥发油的 GC-MS分析研究[J].安康学院学报,2016,28(1):99-102.
[9] 刘瑜新,吴宏欣,田璞玉,等.八角茴香种子和果壳挥发油成分[J].河南大学学报(医学
版),2009,28(2):107-109.
[10] Yan J H,Xiao X X,Huang K ponent analysis of volatile oil from Illicium Verum Hook.f.[J].Journal of Central South University of Technology,2002,9(3):173-176.
[11] 邓楠,旷春桃,王玲芝,等.山苍子油的提取、化学成分及其动力学的研究[J].中国食品添加
剂,2014(9):80-84.。