微生物的生长繁殖及其控制
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每ml活菌数＝同一稀释度平均数×稀释倍数×5
注意：要三个以上重复平板平均计数；不适合丝状菌
C，比浊法 在一定波长下，测定菌悬液的光密度，以光密度 (optical density, 即O.D.)表示菌量。 注意： 测量应在菌浓度与O.D.成正比的线性范围内，否则不准
2.重量法 测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法。 以干重（105℃）、湿重直接衡量微生物群体
P146
1.个体计数法 A.直接法
利用血球 计数板， 在显微镜 下计算一 定容积里 样品中微 生物的数 量。
缺点：
不适于1对m运m动2 细菌2的5（计1数6）；中格 需要相对高1的6（细2菌5浓）度小；格， 个体小的细共菌4在00显小微格镜下难以观察；
B.简接法
原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可 以通过生长形成菌落。
• 高密度培养常用于重组蛋白质药物的生产; • 主要的优势:节约成本.
六、微生物培养法概论
• 实验室培养法; • 生产实践中微生物培养法;
实验室培养法
固体培养法
好氧菌：斜面、琼脂平板等
厌氧菌：高层琼脂柱、、厌氧 培养皿、厌氧罐等
液体培养法
试管液体培养 三角瓶液体培养 摇瓶培养 台式发酵罐
生产实践中微生物培养法
μ ：比生长速率，每单位数量细菌
在单位时间增加的量 t：培养时间
重要参数:
（1）繁殖代数（n）
x2=x1·2n 以对数表示： lgx2=lgx1+nlg2
n= 3.322 (lgx2-lgx1)
（2）比生长速率常数（μ）
lgNt - lgN0) μ=
t - t0
（3）代时（G）:在群体生长里,细菌数量增加一
度大于新生速度的时期。特点： 细菌代谢活性降低； 细菌衰老并出现自溶； 产生或释放出一些产物，如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗
生素 菌体细胞也呈现多种形态，有时产生畸形，细胞大小悬殊； 有些革兰氏染色反应阳性菌此时会变成阴性反应
二、生长数学模型
dN ＝μN
dt
N：每毫升培养液中细胞数
微
等对微生物生长的影响；
生
物Hale Waihona Puke 评价不同的抗菌物质对微生物
生
产生抑制(或杀死)作用的效果；
长
客观地反映微生物生长的规律；
微生物生长的测定方法
个体计数
直接计数法 间接计数法
生物量测定：重量测定、生理指标测定
个体计数法通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生 长情况或样品中所含微生物个体的数量；
原因： （1）营养物耗尽。 （2）营养的比例失调。 （3）有害代谢产物积累（酸、醇、H2O2 ） （4）pH值、氧化还原电势不适宜。
稳定期于生产上的意义： 生产菌体和与菌体平行生长的代谢产物（单细胞
蛋白,乳酸）的最佳收获期。
4、衰亡期（decline phase） 定义：由于营养物耗尽，代谢产物积累，细菌死亡速
恒浊器连续培养
一般用于菌体以及与菌体生长平行的代谢产物生产的发酵 工业
连续发酵优点：
缩短发酵周期，提高设备利用率； 便于自动控制； 降低动力消耗及体力劳动强度； 产品质量较稳定；
缺点：
杂菌污染和菌种退化
恒化器连续培养
使培养液流速保持不变，并使微生物始终在低于其最 高生长速率下进行生长繁殖。 恒化连续培养中，必需将某种必需的营养物质控制在 较低的浓度，作为限制性因子，而其他营养物均过量。
第六章 微生物的生长繁殖
及其控制
本章内容
• 细菌的个体生长； • 微生物生长的测定； • 细菌的群体生长繁殖； • 环境对微生物生长的影响； • 微生物生长繁殖的控制。
概论
生长：细胞物质不可逆地增加，体积增大的过程。 （量变过程）
繁殖：生命个体数量增加的过程。 （质变过程）
在单细胞微生物中，生长繁殖的速度很快，而且两者 始终交替进行，个体生长与繁殖的界限难以划清，因 此实际上常用群体生长作为衡量微生物生长的指标。
稀释平板计数法
先将待测菌液作一系列10倍稀释，使平皿上长出的菌落数在 30-300个之间→ 单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖 → 肉眼可见的菌落 → 对菌落数目的计数推测样品中的微生 物细胞数
涂布平板法
使用较多的常规方法，但有时涂布不均匀！（一般0.2ml）
要求： 样品充分混匀； 每支移液管及涂布棒只能接触一个 稀释度的菌液； 同一稀释度三个以上重复,取平均值； 每个平板上的菌落数目合适，便于 准确计数；
细胞平衡生长，菌体内各种成分最均匀。 酶活性活跃，代谢旺盛。
影响指数期微生物增代时间的因素:
①菌种：不同菌种的代时差别极大
E.coli
肉汤中37℃
代时17分钟。
②N营itro养ba成cte分r.ag：ilis同一组种合细培菌养基，中在27营℃养物代时丰12富00的分钟培养 基（中活生化长硝化，杆其菌代） 时较短，反之则长。
二、细胞壁的扩增
1、球形菌的细胞壁扩增方式：在赤道板附近插入； 2、杆形菌的细胞壁扩增方式：新老细胞壁间隔分布； 3、细胞壁扩增的分子基础：短肽中第三位双氨基氨基
酸的作用。G＋菌：L－赖氨酸；G－菌：二氨基庚二酸 4、作用于细胞壁的酶：
作用于双糖单位的：N－乙酰葡萄糖胺酶和N－乙酰胞壁 酸酰胺酶 肽聚糖短肽链的：转肽酶、内肽酶和羧肽酶
E.coli
牛奶 37 ℃ 12.5分钟。
③营养物浓度：肉营汤养中物3的7 ℃浓度可17分影钟响。微生物的 生长速率和总生长量。
④培养温度：
温度对微生物的生长速率有极其明显的影响
应用:
指数期的微生物因其整个群体的生理特性较一致、细 胞成分平衡发展和生长速率恒定，故 ①作为代谢、生理等研究的良好材料; ②是增殖噬菌体的最适宿主菌龄;
群体生长指在一定时间和条件下细胞数量的增加；实 质上包含着个体细胞生长与繁殖交替进行的过程
第一节 细菌个体生长
一、物质的复制－DNA 1、在细菌个体生长过程中，DNA以双向的方式进
行复制. 2、生长迅速的细菌中，新产生的子细胞中已
经有复制着的染色体DNA，即DNA复制与 细胞分裂并非同步。
P128
连续培养两种类型： 恒化器连续培养、恒浊器连续培养 恒化：某种营养物质维持恒定 恒浊：菌恒定
恒浊器连续培养
测定所培养微生物的光密度值
自动调节新鲜培养基流入和培养物流出培养室的流速
使培养物维持在某一恒定浊度
当培养室中的浊度超过预期数值时，流速加快，使浊度降低； 当培养室中的浊度低于预期数值时，流速减慢，使浊度升高；
同一生长期细菌与膜结合牢固程度相当。
四、连续培养
连续培养：指在微生物的整个培养期间，通过一定处理 使其能以恒定比生长速率生长并持续生长下去的培养方 法。
通过认识稳定期到来的原因，采取相应措施实现微生物 长期保持在指数生长平衡状态和稳定的生长速率。即对 数生长后期，以一定速率补充新鲜培养液，再以同样速 率移去培养物。
在种子培养中加入发酵培养基的某些营养成分
采用最适种龄(即处于对数期的菌种)的健壮菌种 接种以及选用繁殖快的菌种等措施，以缩短延迟 期，加速发酵周期，提高设备利用率。
2、对数期（logarithmic phase）又称指数期 定义：延滞期之后细胞以几何级数速度分裂的一段时期。 特点：
生长速率常数最大。细胞代时（分裂 一次）或倍增时间 （原生质增加一倍）最短。
感。
延迟期出现的原因：可能是为了调整代谢。当细 胞接种到新的环境(如从固体培养接种至液体培养 基)后，需要重新合成必需量的酶、辅酶或某些中 间代谢产物，以适应新的环境。
采 取影缩响短延延迟迟期期的的因措素施：：菌种的遗传性、菌龄以及移种 前后所处的环境条件等。
在生产实践中，通常采取的措施有增加接种量；
物的群体繁殖生长。
一、细菌群体的生长规律
生长曲线：细菌接种到定量的液体培养基中，定时取 样测定细胞数量，以培养时间为横座标，以菌数为纵 座标作图，得到的一条反映细菌在整个培养期间菌数 变化规律的曲线。
曲线特征：根据微生物每小时的分裂代数（R）不同，一般可 把生长曲线分成迟缓期（延滞期）、对数生长期、稳定期、 衰亡期。
倍所需的时间.
三、细菌的同步培养
1、同步培养与同步生长 同步培养：是一种培养方法，它能使群体中不同步 的细胞转变成能同时进行生长或分裂的群体细胞。 同步生长：通过同步培养而使细胞群体处于分裂步 调一致的状态。
同步培养的方法： （1）机械法：在不同生长阶段的细胞体积与质量或同某种材
料结合能力不同 ① 离心法（密度梯度离心）：处于同一生长期的细胞 体积与质量相当。 ② 过滤法： 使用孔径大小不同的滤器（微孔滤器） ③ 硝酸纤维素滤膜法（Helmstetter-cummings技术）
二、水 适宜的aw值。 aw值不同 造成渗透压不同 影响微生物生长速率
三、温度
温度对微生物的影响具体表现在： 根据最适温度的不同，可将微生物分为嗜冷、 影响酶的活性：微生物生长过程中的化学反应
兼性嗜冷、嗜温、嗜热、超嗜热； 绝大多数是在特定酶的催化作用下完成的；每 各种微生物都有其生长繁殖的最低温度、最 种酶都有最适反应温度。 适温度、最高温度和致死温度。 影响细胞质膜的流动性：温度高，流动性大，
1、迟缓期（lag phase）
定义：少量微生物接种到新鲜培养基，开始的一段时间 内数目不增加的时期。
特点： 生长速率常数等于零。 细胞形态变大或增长（巨大芽孢杆菌 接种3.4μm，培
养5.5小时，19.8μm） 胞内RNA尤其是rRNA含量增高; 合成代谢活跃（核糖体、酶类、ATP合成加快）。 对外界不良条件（氯化钠浓度、温度）抗生素等反应敏
限制性因子必须是机体生长所必需的营养物质，如aa和氨等氮 源，或G、麦芽糖等碳源或者是无机盐，一定浓度范围内决定 细菌生长速率。
五、微生物的高密度培养
• 微生物的高密度培养指在液体培养中细胞群体密度 超过常规培养10倍以上时的生长状态或培养技术.
• 现在报道的最高记录是:E. coli W3110的174g(湿 重)/L;
的生物量；
通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算 微生物群体的生物量；
蛋白质含量测定法：从一定量培养物中分离出细菌，洗 DNA涤含，量以测除定去法培：养利基用带D入NA的与含D氮A物BA质-2。H再Cl用(即凯新氏配定制氮的法法 20%测W定/W总，含3氮，量5-二。氨基苯甲酸-盐酸溶液)能显示特殊荧光反 应的一总原般 量理细=而含菌设氮的计量含的%氮。×量因6约.2为5为每原个生细质菌干平重均的含1D4N%A。8故.4×，1蛋0白-5纳质克， 可根蛋据白D质NA含含量量占计细算菌出总细重菌的的～数6量5％。，故细胞总量＝蛋白质
总量×1.54
3.生理指标测定法
微生物的生理指标，如呼吸强度，耗氧量、酶活性、 生物热等与其群体的规模成正相关。
样品中微生物数量多或生长旺盛，这些指标愈明显， 因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量 热计等设备来测定相应的指标。
常用于对微生物的快速鉴定与检测
第三节 细菌群体的生长繁殖
研究细菌群体培养的原因： 由于个体微小； 微生物接种是群体接种，接种后的生长是微生
固体培养法
好氧菌：曲法培养（料薄、通气） 厌氧菌：堆积培养
液体培养法
浅盘培养
发酵罐：最大的1500吨
第四节 影响微生物生长的重要因素
生命的存在依赖于外界环境提供营养、水分、合适的环境因 素（如：pH、氧化还原电位、温度、氧气）同时又受到外界 环境因子的制约，二者是一致的。
一、营养 针对营养缺乏，微生物往往采取： 1、减少甚至停止合成细胞物质。 2、加速代谢（非必要成分或失效成分的降解）。
三、细菌生长与分裂的调节
各种物质复制后，质膜内陷伴随新肽聚糖插入，导致 横隔壁向心生长，最后会合，一分为二。
对细菌生长与分裂起调节作用的主要是于转肽酶和 D,D－羧肽酶活性比。 转肽酶活性高些，利于CW扩增，导致细菌生长。
羧肽酶高些，利于横隔壁形成，导致细胞分裂。
第二节 微生物生长的测定
评价培养条件、营养物质
③也是发酵生产中用作“种子”的最佳种龄。
3、稳定期（stationary phase） 定义：对数期后，生长速率降为零的生长期。 特点：
（1）生长速率为零，新产生细胞数＝死亡细胞数。 （2）菌体产量（活菌数最大） （3）细胞开始贮存糖原、异染粒、脂肪；多数芽孢杆菌开
始产生芽孢；有的微生物开始合成次生代谢产物。
注意：要三个以上重复平板平均计数；不适合丝状菌
C，比浊法 在一定波长下，测定菌悬液的光密度，以光密度 (optical density, 即O.D.)表示菌量。 注意： 测量应在菌浓度与O.D.成正比的线性范围内，否则不准
2.重量法 测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法。 以干重（105℃）、湿重直接衡量微生物群体
P146
1.个体计数法 A.直接法
利用血球 计数板， 在显微镜 下计算一 定容积里 样品中微 生物的数 量。
缺点：
不适于1对m运m动2 细菌2的5（计1数6）；中格 需要相对高1的6（细2菌5浓）度小；格， 个体小的细共菌4在00显小微格镜下难以观察；
B.简接法
原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可 以通过生长形成菌落。
• 高密度培养常用于重组蛋白质药物的生产; • 主要的优势:节约成本.
六、微生物培养法概论
• 实验室培养法; • 生产实践中微生物培养法;
实验室培养法
固体培养法
好氧菌：斜面、琼脂平板等
厌氧菌：高层琼脂柱、、厌氧 培养皿、厌氧罐等
液体培养法
试管液体培养 三角瓶液体培养 摇瓶培养 台式发酵罐
生产实践中微生物培养法
μ ：比生长速率，每单位数量细菌
在单位时间增加的量 t：培养时间
重要参数:
（1）繁殖代数（n）
x2=x1·2n 以对数表示： lgx2=lgx1+nlg2
n= 3.322 (lgx2-lgx1)
（2）比生长速率常数（μ）
lgNt - lgN0) μ=
t - t0
（3）代时（G）:在群体生长里,细菌数量增加一
度大于新生速度的时期。特点： 细菌代谢活性降低； 细菌衰老并出现自溶； 产生或释放出一些产物，如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗
生素 菌体细胞也呈现多种形态，有时产生畸形，细胞大小悬殊； 有些革兰氏染色反应阳性菌此时会变成阴性反应
二、生长数学模型
dN ＝μN
dt
N：每毫升培养液中细胞数
微
等对微生物生长的影响；
生
物Hale Waihona Puke 评价不同的抗菌物质对微生物
生
产生抑制(或杀死)作用的效果；
长
客观地反映微生物生长的规律；
微生物生长的测定方法
个体计数
直接计数法 间接计数法
生物量测定：重量测定、生理指标测定
个体计数法通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生 长情况或样品中所含微生物个体的数量；
原因： （1）营养物耗尽。 （2）营养的比例失调。 （3）有害代谢产物积累（酸、醇、H2O2 ） （4）pH值、氧化还原电势不适宜。
稳定期于生产上的意义： 生产菌体和与菌体平行生长的代谢产物（单细胞
蛋白,乳酸）的最佳收获期。
4、衰亡期（decline phase） 定义：由于营养物耗尽，代谢产物积累，细菌死亡速
恒浊器连续培养
一般用于菌体以及与菌体生长平行的代谢产物生产的发酵 工业
连续发酵优点：
缩短发酵周期，提高设备利用率； 便于自动控制； 降低动力消耗及体力劳动强度； 产品质量较稳定；
缺点：
杂菌污染和菌种退化
恒化器连续培养
使培养液流速保持不变，并使微生物始终在低于其最 高生长速率下进行生长繁殖。 恒化连续培养中，必需将某种必需的营养物质控制在 较低的浓度，作为限制性因子，而其他营养物均过量。
第六章 微生物的生长繁殖
及其控制
本章内容
• 细菌的个体生长； • 微生物生长的测定； • 细菌的群体生长繁殖； • 环境对微生物生长的影响； • 微生物生长繁殖的控制。
概论
生长：细胞物质不可逆地增加，体积增大的过程。 （量变过程）
繁殖：生命个体数量增加的过程。 （质变过程）
在单细胞微生物中，生长繁殖的速度很快，而且两者 始终交替进行，个体生长与繁殖的界限难以划清，因 此实际上常用群体生长作为衡量微生物生长的指标。
稀释平板计数法
先将待测菌液作一系列10倍稀释，使平皿上长出的菌落数在 30-300个之间→ 单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖 → 肉眼可见的菌落 → 对菌落数目的计数推测样品中的微生 物细胞数
涂布平板法
使用较多的常规方法，但有时涂布不均匀！（一般0.2ml）
要求： 样品充分混匀； 每支移液管及涂布棒只能接触一个 稀释度的菌液； 同一稀释度三个以上重复,取平均值； 每个平板上的菌落数目合适，便于 准确计数；
细胞平衡生长，菌体内各种成分最均匀。 酶活性活跃，代谢旺盛。
影响指数期微生物增代时间的因素:
①菌种：不同菌种的代时差别极大
E.coli
肉汤中37℃
代时17分钟。
②N营itro养ba成cte分r.ag：ilis同一组种合细培菌养基，中在27营℃养物代时丰12富00的分钟培养 基（中活生化长硝化，杆其菌代） 时较短，反之则长。
二、细胞壁的扩增
1、球形菌的细胞壁扩增方式：在赤道板附近插入； 2、杆形菌的细胞壁扩增方式：新老细胞壁间隔分布； 3、细胞壁扩增的分子基础：短肽中第三位双氨基氨基
酸的作用。G＋菌：L－赖氨酸；G－菌：二氨基庚二酸 4、作用于细胞壁的酶：
作用于双糖单位的：N－乙酰葡萄糖胺酶和N－乙酰胞壁 酸酰胺酶 肽聚糖短肽链的：转肽酶、内肽酶和羧肽酶
E.coli
牛奶 37 ℃ 12.5分钟。
③营养物浓度：肉营汤养中物3的7 ℃浓度可17分影钟响。微生物的 生长速率和总生长量。
④培养温度：
温度对微生物的生长速率有极其明显的影响
应用:
指数期的微生物因其整个群体的生理特性较一致、细 胞成分平衡发展和生长速率恒定，故 ①作为代谢、生理等研究的良好材料; ②是增殖噬菌体的最适宿主菌龄;
群体生长指在一定时间和条件下细胞数量的增加；实 质上包含着个体细胞生长与繁殖交替进行的过程
第一节 细菌个体生长
一、物质的复制－DNA 1、在细菌个体生长过程中，DNA以双向的方式进
行复制. 2、生长迅速的细菌中，新产生的子细胞中已
经有复制着的染色体DNA，即DNA复制与 细胞分裂并非同步。
P128
连续培养两种类型： 恒化器连续培养、恒浊器连续培养 恒化：某种营养物质维持恒定 恒浊：菌恒定
恒浊器连续培养
测定所培养微生物的光密度值
自动调节新鲜培养基流入和培养物流出培养室的流速
使培养物维持在某一恒定浊度
当培养室中的浊度超过预期数值时，流速加快，使浊度降低； 当培养室中的浊度低于预期数值时，流速减慢，使浊度升高；
同一生长期细菌与膜结合牢固程度相当。
四、连续培养
连续培养：指在微生物的整个培养期间，通过一定处理 使其能以恒定比生长速率生长并持续生长下去的培养方 法。
通过认识稳定期到来的原因，采取相应措施实现微生物 长期保持在指数生长平衡状态和稳定的生长速率。即对 数生长后期，以一定速率补充新鲜培养液，再以同样速 率移去培养物。
在种子培养中加入发酵培养基的某些营养成分
采用最适种龄(即处于对数期的菌种)的健壮菌种 接种以及选用繁殖快的菌种等措施，以缩短延迟 期，加速发酵周期，提高设备利用率。
2、对数期（logarithmic phase）又称指数期 定义：延滞期之后细胞以几何级数速度分裂的一段时期。 特点：
生长速率常数最大。细胞代时（分裂 一次）或倍增时间 （原生质增加一倍）最短。
感。
延迟期出现的原因：可能是为了调整代谢。当细 胞接种到新的环境(如从固体培养接种至液体培养 基)后，需要重新合成必需量的酶、辅酶或某些中 间代谢产物，以适应新的环境。
采 取影缩响短延延迟迟期期的的因措素施：：菌种的遗传性、菌龄以及移种 前后所处的环境条件等。
在生产实践中，通常采取的措施有增加接种量；
物的群体繁殖生长。
一、细菌群体的生长规律
生长曲线：细菌接种到定量的液体培养基中，定时取 样测定细胞数量，以培养时间为横座标，以菌数为纵 座标作图，得到的一条反映细菌在整个培养期间菌数 变化规律的曲线。
曲线特征：根据微生物每小时的分裂代数（R）不同，一般可 把生长曲线分成迟缓期（延滞期）、对数生长期、稳定期、 衰亡期。
倍所需的时间.
三、细菌的同步培养
1、同步培养与同步生长 同步培养：是一种培养方法，它能使群体中不同步 的细胞转变成能同时进行生长或分裂的群体细胞。 同步生长：通过同步培养而使细胞群体处于分裂步 调一致的状态。
同步培养的方法： （1）机械法：在不同生长阶段的细胞体积与质量或同某种材
料结合能力不同 ① 离心法（密度梯度离心）：处于同一生长期的细胞 体积与质量相当。 ② 过滤法： 使用孔径大小不同的滤器（微孔滤器） ③ 硝酸纤维素滤膜法（Helmstetter-cummings技术）
二、水 适宜的aw值。 aw值不同 造成渗透压不同 影响微生物生长速率
三、温度
温度对微生物的影响具体表现在： 根据最适温度的不同，可将微生物分为嗜冷、 影响酶的活性：微生物生长过程中的化学反应
兼性嗜冷、嗜温、嗜热、超嗜热； 绝大多数是在特定酶的催化作用下完成的；每 各种微生物都有其生长繁殖的最低温度、最 种酶都有最适反应温度。 适温度、最高温度和致死温度。 影响细胞质膜的流动性：温度高，流动性大，
1、迟缓期（lag phase）
定义：少量微生物接种到新鲜培养基，开始的一段时间 内数目不增加的时期。
特点： 生长速率常数等于零。 细胞形态变大或增长（巨大芽孢杆菌 接种3.4μm，培
养5.5小时，19.8μm） 胞内RNA尤其是rRNA含量增高; 合成代谢活跃（核糖体、酶类、ATP合成加快）。 对外界不良条件（氯化钠浓度、温度）抗生素等反应敏
限制性因子必须是机体生长所必需的营养物质，如aa和氨等氮 源，或G、麦芽糖等碳源或者是无机盐，一定浓度范围内决定 细菌生长速率。
五、微生物的高密度培养
• 微生物的高密度培养指在液体培养中细胞群体密度 超过常规培养10倍以上时的生长状态或培养技术.
• 现在报道的最高记录是:E. coli W3110的174g(湿 重)/L;
的生物量；
通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算 微生物群体的生物量；
蛋白质含量测定法：从一定量培养物中分离出细菌，洗 DNA涤含，量以测除定去法培：养利基用带D入NA的与含D氮A物BA质-2。H再Cl用(即凯新氏配定制氮的法法 20%测W定/W总，含3氮，量5-二。氨基苯甲酸-盐酸溶液)能显示特殊荧光反 应的一总原般 量理细=而含菌设氮的计量含的%氮。×量因6约.2为5为每原个生细质菌干平重均的含1D4N%A。8故.4×，1蛋0白-5纳质克， 可根蛋据白D质NA含含量量占计细算菌出总细重菌的的～数6量5％。，故细胞总量＝蛋白质
总量×1.54
3.生理指标测定法
微生物的生理指标，如呼吸强度，耗氧量、酶活性、 生物热等与其群体的规模成正相关。
样品中微生物数量多或生长旺盛，这些指标愈明显， 因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量 热计等设备来测定相应的指标。
常用于对微生物的快速鉴定与检测
第三节 细菌群体的生长繁殖
研究细菌群体培养的原因： 由于个体微小； 微生物接种是群体接种，接种后的生长是微生
固体培养法
好氧菌：曲法培养（料薄、通气） 厌氧菌：堆积培养
液体培养法
浅盘培养
发酵罐：最大的1500吨
第四节 影响微生物生长的重要因素
生命的存在依赖于外界环境提供营养、水分、合适的环境因 素（如：pH、氧化还原电位、温度、氧气）同时又受到外界 环境因子的制约，二者是一致的。
一、营养 针对营养缺乏，微生物往往采取： 1、减少甚至停止合成细胞物质。 2、加速代谢（非必要成分或失效成分的降解）。
三、细菌生长与分裂的调节
各种物质复制后，质膜内陷伴随新肽聚糖插入，导致 横隔壁向心生长，最后会合，一分为二。
对细菌生长与分裂起调节作用的主要是于转肽酶和 D,D－羧肽酶活性比。 转肽酶活性高些，利于CW扩增，导致细菌生长。
羧肽酶高些，利于横隔壁形成，导致细胞分裂。
第二节 微生物生长的测定
评价培养条件、营养物质
③也是发酵生产中用作“种子”的最佳种龄。
3、稳定期（stationary phase） 定义：对数期后，生长速率降为零的生长期。 特点：
（1）生长速率为零，新产生细胞数＝死亡细胞数。 （2）菌体产量（活菌数最大） （3）细胞开始贮存糖原、异染粒、脂肪；多数芽孢杆菌开
始产生芽孢；有的微生物开始合成次生代谢产物。