反相高效液相色谱法测定盐酸普萘洛尔片中盐酸普萘洛尔的含量

天津药学 Tianjin Pharmacy 2021年 第33卷 第1期
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反相高效液相色谱法测定盐酸普蔡洛尔片中盐酸普蔡洛尔的含量
郑风敏，王繁华，李彬
(鹤壁市食品药品检验检测中心，河南458030)
摘要目的:建立反相高效液相色谱法测定盐酸普萘洛尔片中盐酸普萘洛尔的含量。

方法:Waters e2695高效液 相色谱仪,waters 2998二极管阵列检测器，Agilent 20Rbax C j 7色谱柱(250 mm x 4.6 mm,5 "m ),流动相为乙睛-水(含1%
庚烷磺酸钠)(45 : 55),检测波长为290 nm ，进样体积:20 "1,流速：1.0ml/min ,柱温：35 $。

结果：盐酸普萘洛尔在5.84~
246.47 "g/ml 浓度范围内线性关系较好(r = 0.999 9),平均回收率99.92%,RSD 为0.17%。

结论:该方法实验条件简单，回 收率高，重复性好。

关键词反相高效液相色谱法;盐酸普萘洛尔片;盐酸普萘洛尔
中图分类号:R927.2 文献标识:A 文章编号：1006-5687( 2021 )01-0009-03
盐酸普萘洛尔作为非选择性的！
受体阻断剂,临 床上常用做高血压、心绞痛、心率失常等疾病的常用
药!1"2#。

随着我国人口老龄化的到来，特别是老年性高 血压的增加，该药用量呈增加的趋势。

《中国药典》
2015年版中规定，盐酸普萘洛尔片中的含量测定采用
紫外-可见分光光度法⑶,该方法没有高效液相色谱法 的分离功能，所测定的结果容易受片剂中的各种辅料
的影响，因此，采用高效液相色谱法可以有效去除辅料 的干扰，更准确地测定盐酸普萘洛尔的含量。

本试验通
过采用反相高效液相色谱法来测定盐酸普萘洛尔片中 盐酸普萘洛尔的含量,方法简单，回收率高,重复性好, 可以做为一种测定盐酸普萘洛尔含量的方法。

1仪器和试药
1.1 仪器 Waters e2695高效液相色谱仪，waters
2997二极管阵列检测器，Agilent 20Rbax C 18色谱柱
(250 mm "
4.6 mm ,5 "
m ),赛多利斯 CPA225D 电子分 析天平,FRQ-1007HT 型超声波清洗机(杭州法兰特超
声波科技有限公司)，赛多利斯mini 超纯水系统(德国 赛多利斯集团)。

1.2试药盐酸普萘洛尔对照品(中国食品药品检定
研究院,批号100783-201202,100%)；色谱纯乙腈(德 国默克),色谱纯磷酸(天津市科密欧化学试剂有限公
司)，分析纯磷酸二氢钾(天津市科密欧化学试剂有限公 司)，水为试验室自制超纯水。

盐酸普萘洛尔片(江苏亚
邦爱普森药业有限公司，10 mg ,批号200102、190915、
190706)。

2方法和结果
2.1色谱条件 Waters e2695高效液相色谱仪‘waters
2997二极管阵列检测器,Agilent 20Rbax C 18色谱柱
(250 mm "
4.6 mm ,5 "
m ),流动相为乙月青-水(含1% 庚烷磺酸钠)(45:55),检测波长为290 nm ,进样体积:
20 "
l ,流速：1.0 ml/min ,柱温：35 $。

2.2 溶液的制备
2.2.1对照品贮备液与对照品溶液的制备精密称取
盐酸普萘洛尔对照品约20 mg,置于20 ml 棕色量瓶中， 加入流动相10 ml,超声使溶解，自然放冷，继续加流动 相并定容至刻度作为对照品贮备液。

精密量取对照品
贮备液2 ml ,置于100 ml 的棕色量瓶中，加流动相稀
释并定容至刻度,作为对照品溶液，备用。

2.2.2供试品溶液的制备取重量差异项下的盐酸普
收稿日期：2020-10-19
荼洛尔片20片，研细，精密称取约20mg,置于100ml 棕色量瓶中，加流动相60ml,超声使溶解，自然放冷,继续加流动相并定容至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml,置于100ml的棕色量瓶内，用流动相稀释至刻度,作为供试品溶液,备用。

2・2・3阴性对照溶液制备按该药的处方，取各辅料适量，按照该药处方比例和制备方法制成阴性对照药品。

取此种药品，按照文中上述“222”项下方法制成阴性对照溶液。

2・3系统适用性试验取文中上述的对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液，按照“2.1”项下设置的色谱条件分别进样，根据试验的色谱图可知,该试验条件下的色谱峰峰形较好,出峰时间较短，理论板数为17488,试验结果所得的参数符合《中国药典＞2015年版的相关规定。

色谱图见图1o
024680
%/min
A 246.47!g/ml的浓度内线性关系良好。

2・5精密度试验取文中上述“221”项下制备的对照品溶液，按照“2.1”项下色谱条件连续进样6次，记录色谱图，通过计算可得其RSD为0.84%（$二6）,结果表明，在该色谱条件下,盐酸普荼洛尔的精密度较高。

2・6重复性试验取批号200102的供试品6份，按“222”项下的条件制成供试品溶液，按照“2.1”项下色谱条件进样，分别记录其色谱图。

盐酸普荼洛尔峰面积的RSD为0.84%（$二6）。

计算结果表明，在该色谱条件下供试品重复性良好。

2・7稳定性试验取批号200102的供试品配置成的供试品溶液，室温下避光放置。

分别在0、1、3、5、8、12和24h分别取样，取样后立即检测，分别记录其液相色谱图，根据盐酸普荼洛尔的峰面积计算其RSD为0•94%o 结果表明，供试品溶液室温避光放置24h内稳定。

2.8回收率试验取批号200102的供试品（含量已知）9份（每份约含盐酸普荼洛尔20mg）,分别加入盐酸普荼洛尔对照品适量，按“222”项下方法制成供试品加标回收溶液1@9,按文中“2.1”项下的色谱条件进样,以盐酸普荼洛尔的峰面积计算其回收率。

结果盐酸普荼洛尔的平均回收率为99.92%,RSD为0•17%o见表1。

024680
%/min
B
表1盐酸普8洛尔回收率试验结果
样品含量（mg）对照品加入量（mg）测得量（mg）回收率（％）
19.8516.0435.8499.69
19.9616.0435.9499.63
20.0316.0436.08100.06
20.1220.0540.1599.90
19.9720.0540.03100.05
19.8920.0539.95100.05
20.0724.0644.15100.08
19.9624.0644.0099.92
20.0824.0644.1299.92
0246810
%/min
C
1•盐酸普萘洛尔
图1阴性对照（A）
对照品（B）供试品（C）高效液相色谱图
2.4线性关系试验分别精密量取“221”项下的对照品贮备液0.5,1和2ml,分别放置于100ml的量瓶中，另取对照品贮备液3和5ml分别放置于20ml的量瓶中，用流动相稀释并定容，按照“2.1”项下色谱条件进行试验，记录其色谱图。

以峰面积（！）对浓度（"）进行线性回归分析,计算可得回归方程为!二7368"+ 14587（厂80.9999）,结果表明盐酸普荼洛尔在5.84〜2・9样品含量测定对比取批号为200102、190915、190806的3批供试品各2份，按照“222”项下方法分别制成供试品溶液，按“2.1”项下的色谱条件进样。

另取批号为200102,190915,190806的3批供试品各2份，按照2015年版《中国药典》中规定的方法测定盐酸普荼洛尔的含量。

分别计算其含量，对结果进行比较。

见表2。

表2不同试验方法测定盐酸普8洛尔含量结果
批号紫外-可见分光光度法（％）高效液相色谱法（％）
20010298.7299.02
190915100.62100.53
19080699.8499.97
（下转第18页）
3讨论
3.1配伍溶媒的选择酚磺乙胺注射液说明书中用法用量没有明确要求选择何种溶媒,故选取氯化钠注射
液、5%和10%的葡萄糖注射液作为配伍溶媒进行考查。

3.2药物用量的选择酚磺乙胺注射液说明书中用
法与用量为静脉滴注时0.25-0.75g/次,2~3次/d,稀释后滴注。

但通常临床为达到更好的止血效果,静脉滴
注时普遍使用1.5-2g/次,1~2次/d,故选取0.75、1.5和2.0g三个用量对其进行配伍稳定性考查,为临床使用的安全性提供参考。

3.3放置条件的选择酚磺乙胺注射液说明书中贮藏要求遮光，密闭保存,但在临床应用的酚磺乙胺静脉输液成品并未采取任何遮光措施，为保证临床应用的安全、有效，分别在遮光、日光灯及自然光放置条件下，考查其在8h内的配伍稳定性。

超说明书用药是指药品使用的适应症、给药方法、剂量或疗程不在具有法律效力的说明书之内的用法。

基于患者病情需要,超说明书用药在医院中普遍存在,
在给患者带来一定收益的同时也存在一定风险!2#7"。

本研究从本院临床实际应用出发，考查3种不同用量的酚磺乙胺注射液与3种溶媒配伍后，在遮光、日光灯和自然光的条件下于室温放置8h后，其溶液外观、H值、不溶性微粒和含量随时间的变化情况,结果显示各项考查指标均未见明显变化，表明在不同放置
条件下，不同用量的酚磺乙胺注射液在3种配伍溶媒中的配伍稳定性较好,为酚磺乙胺注射液的静脉配置提供了参考依据。

但为保障患者用药安全,同时规避医疗机构和医务人员的执业风险，建议在临床实践过程中医生仍应首先参照药品说明书进行治疗⑷。

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(上接第10页)
3讨论
3.1流动相的选择通过查询相关文献，笔者发现有采用甲醇-盐、甲醇-乙腈-盐、甲醇-磷酸二氢钾等系
统［4-6］作为流动相,本文也对这些条件进行了试验,但结果没有在笔者设置的条件下峰形对称，出峰时间也没有该条件下的快。

本文设置的条件下，出峰时间快,峰形对称,理论板数较高，因此，流动相最后采用了乙腈-水(含1%庚烷磺酸钠)(45：55)。

3.2检测波长的选择按照“222”项下方法制备供试品溶液，对其进行了紫外-可见扫描检测，最后发现在290nm的波长处有最大吸收，因此选用290nm为最后的检测波长。

3.3结果分析通过含量测定结果比较，发现紫外和液相所测得结果基本相同，但是高效液相色谱法可以有效地去除药品中辅料的干扰，自动化程度也高。

因此,本文通过试验所得到的高效液相色谱方法可以作为测定盐酸普萘洛尔片含量的一种方法。

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