5HTTLPR与精神分裂症攻击行为的关联分析

中山大学
硕士学位论文
5-HTTLPR与精神分裂症攻击行为的关联分析
姓名：***
申请学位级别：硕士
专业：法医学
指导教师：***
2002.5.28
５－ＨＴｒＬＰＲ与精神分裂症攻击行为的关联分析
摘要
｝
ｆ５．羟色氨转运体（５ＨＴＴ）基因在５－ＨＴ回吸收入５一ＨＴ神经元内的过程中，ｒ
起重要作用√近年来，关于其启动子区的一个插入／缺失多态性（５．ＨＴＴＬＰＲ）与精神疾病、攻击行为的相关性研究报道较多，得出的结论也不尽相同。

为了
进一步研究５．ＨＴＦＬＰＲ与精神分裂症、攻击行为的关系，探讨精神分裂症攻击行为的遗传学病因基础，寻找精神分裂症攻击行为的预测措施．我们选择中国南方（广东省）的汉族人群作为研究对象，设计了该研究。

本研究将非精神病人的攻击行为定为攻击他人致人轻伤以上的行为，将精神分裂症组的攻击行为定为根据ＫＡＹ氏１９８８年编制的外显攻击行为评定量表（ＭＯＡＳ）对他人躯体攻击或物品攻击方面至少有一个３分以上者（包括３分）。

、采用四组病例一对照的研究方法，收集了３４２例样本，其中包括无攻击行为的非、
精神病组样本９６例，有攻击行为的非精神病组样本８９例，无攻击行为的精神分裂症组样本８７例和有攻击行为的精神分裂症组样本７０例。

对５－ＨＴｒＬＰＲ和精神分裂症、攻击行为的关联性进行了分析。

同时对该群体中５４个精神分裂症核心小家系进行５一ＨＴＴＬＰＲ等位基因的传递不平衡检验（ＴＤＴ）。

结果显示：非精神疾病者的攻击行为、精神分裂症的攻击行为、精神分裂症与５．｝ｒ几ＬＰＲ没有关联。

即在中国南方（广东省）汉族人群中，该多态位点与攻击行为、精神分裂症不相关，不能作为精神分裂症攻击行为的预测因子。

可作进一步的重复研究来验证。

‘ｏ一
同时，将本研究的结果与文献所报道的其他种族进行５－ＨＴｒＬＰＲ基因型频
率和等位基因频率分布的结果进行了比较。

发现５－ＨＴＩ＇ＬＰＲ的基因频率分布存／
在种族差异。

（中国人群与同本人群的分布频率相似，ｓ短片段频率较高；而欧洲高加索人、美国黑人与以色列犹太人的基因型分布相似，ｓ短片段的频率显著低于中国人群与ＦＩ本人群。

已往的研究认为：…Ｓ’能减少５．ＨＴＴ基因的转录和５一ｍｒｒ蛋白的表达，使５．ＨＴ的回吸收率减少，从而影响５一ＨＴ系统的功能。

根据这种观点，种族之间５．ＨＴＴＬＰＲ等位基因频率分布上的这种差异，可能预
示着中国人群与同本人群在５．ＨＴＴ功能上相对欧洲高加索人、美国黑人与以色列犹太人较弱。

这种种族之问５－ＨＴＴ存在功能差异的假想，以及５一ＨＴＴＬＰＲ基因型频率分布上的不同，是否引起种族之｜’日Ｊ情绪、行为方面的差异，还需迸一步研究。

！—７
关键词：５－ＨＴＴＬＰＲ精神分裂症攻击行为关联分析
ＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆ５·ＨＴＴＬＰＲｗｉｔｈ
ＡｇｇｒｅｓｓｉｏｎｉｎＳｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ
Ｍａｊｏｒ：ＦｏｒｅｎｓｉｃＭｅｄｉｃｉｎｅ
ＭＤ：ＺｕｏＳｕｅ
Ｗｕ
Ｓｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．Ｘｉｎｙａｏ
ＴｈｅｓｅｒｏｔｏｎｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅｐｌａｙｓａⅡｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｓｅｒｏｔｏｎｉｎｕｐｔａｋｅｉｎｔｏｆｌｅｎｒｏｎｓ．Ｒｅｃｅｎｔｌｙ，ｍａｎｙｓｔｕｄｉｅｓａｂｏｕｔａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｉｎｓｅｒｔｉｏｎ／ｄｅｌｅｔｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｉｎｔｈｅｓｅｒｏｔｏｎｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅｐｒｏｍｏｔｅｒｒｅｇｉｏｎ（５－１ｔ＇ＩＷＬＰＲ）ｗｉｔｈａｖａｒｉｅｔｙｏｆｍｅｎｔａｌｉｌｌｎｅｓｓａｎｄａｇｇｒｅｓｓｉｏｎ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｃｏｎｄｕｓｉｏｕｓａｒｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔ．Ｈｅｒｅ，ｗｅｍａｄｅａｓｔｕｄｙａｍｏｎｇＨａｒｔＣｈｉｎｅｓｅｉｎＳｏｕｔｈＣ帖ｎａ．Ｔｈｅｐｕｒｐｏｓｅｉｓｔｏｅｘａｎｌｉｎｅｗｈｅｔｈｅｒｔｈｉｓｐｏｌｙｍｏｒｐｈｌｅｌｏｃｕｓｉｓａｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｆａｃｔｏｒｆｏｒａｇｇｒｅｓｓｉｏｎ，ａｇｇｒｅｓｓｉｏｎｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａａｎｄｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａｉｎＨａｎＣｈｉｎｅｓｅ．
Ｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ，ｔｈｅｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎｏｆａｇｇｒｅｓｓｉｏｎｉｎｎｏｎ－ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａｉｓｔｈｅｐｈｙｓｉｃａｌｈａｒｍｆｕｌｂｅｈａｖｉｏｒｄｉｒｅｃｔｌｙｔｏｗａｒｄｏｔｈｅｒｓ，ｗｈｉｃｈｃａｕｓｅｄａｔｌｅａｓｔｍｉＵｉｎｊｕｒｙ．Ａｎｄｔｈｅａｇｇｒｅｓｓｉｏｎｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａｉｓｂｅｈａｖｉｏｒａｓｓｅｓｓｅｄｂｙｍｏｒｅｔｈａｎ３ｓｃｏｒｅｓｉｎｈａｒｍｉｎｇｏｔｈｅｒｓｏｒｄｅｓｔｒｕｃｔｉｎｇａｎｏｂｊｅｃｔａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｈｅＭＯＡＳ，ｄｅｓｃｒｉｂｅｄｂｙＫａｙ＇ｓｉｎ１９８８．
Ｃｎｓｅ－ｃｏｎｔｒｏｌｓｔｕｄｙｏｆｆｏｕｒｇｒｏｕｐｓｗａｓｃａｒｒｉｅｄｏｕｔ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ９６ｓａｍｐｌｅｓｏｆｎｏｎ·ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａｗｉｔｈｏｕｔａｇｇｒｅｓｓｉｏｎ．８９ｓａｍｐｌｅｓｏｆｎｏｎ－ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａｗｉｔｈａｇｇｒｅｓｓｉｏｎ，８７ｓａｍｐｌｅｓｏｆｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａｗｉｔｈｏｕｔａｇｇｒｅｓｓｉｏｎａｎｄ７０ｓａｍｐｌｅｓｏｆｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａｗｉｔｈａｇｇｒｅｓｓｉｏｎ．Ａｎｄｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ／ｄｉｓｅｑｕｉｌｉｂｒｕｉｍｔｅｓｔ（ＴＤＴ）ａｎａｌｙｓｉｓｗａｓｄｏｎｅｉｎ５４ｆａｍｉｉ－ｅｓ，ｅａｃｈｉｎｃｌｕｄｉｎｇｌｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａｐｒｏｂａｎｄａｎｄｈｉｓｐａｒｅｎｔｓ．ＡｌｌｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄｆｒｏｍＨａｎＣｈｉｎｅｓｅｉｎＳｏｕｔｈＣｈｉｎａａｎｄｇｅｎｏｔｙｐｅｄｆｏｒ５－ＨＴＴＬＰＲ．
Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｔｈａｔ５－ＩＴＩＴＬＰＲｉｓｎｏｔａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈａｇｇｒｅｓｓｉｏｎ．
ａｇｇｒｅｓｓｉｏｎｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａｏｒｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ．Ｔｈｉｓｉｎｄｉｃａｔｅｓｔｈａｔ５－ＨＴＴＬＰＲ
ｃａｎｎｏｔｂｅｒｅｇａｒｄｅｄａｓａｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｏｆａｇｇｒｅｓｓｉｏｎｉｎｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ．Ｔｈｅｇｅｎｏｔｙｐｅｆｒｅｑｕｅｎｃｉｅｓａｎｄａｌｌｅｌｅｆｒｅｑｕｅｎｃｉｅｓｏｆ５－ＨＴＴＬＰＲｉｎＨａｎＣｈｉｎｅｓｅａｃｑｕｉｒｅｄｆｒｏｍｔｈｉｓｓｔｕｄｙｗａｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｏｓｅｉｎＨａｎＣｈｉｎｅｓｅｆｒｏｍＳｉｃｈｕａｎｐｒｏｖｉｎｃｅＪａｐａｎｅｓｅ，ＡｆｒｉｃａｎＡｍｅｒｉｃａｎ，ＥｕｒｏｐｅａｎＣａｕｃａｓｉａｎａｎｄＩｓｒａｅｌｉＪｅｗ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗ：（１）ｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｏｆｇｅｎｏｔｙｐｅ
ｆｒｅｑｕｅｎｃｉｅｓｏｒａｌｌｅｌｅｆｒｅｑｕｅｎｃｉｅｓｏｆ５－ＨＴＴＬＰＲｂｅｔｗｅｅｎＨａｎＣｈｉｎｅｓｅａｎｄ
Ａｍｅｒｉｃａｎ，ＥｕｒｏｐｅａｎＪａｐａｎｅｓｅ，ａｎｄｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｏｆｔｈａｔａｍｏｎｇＡｆｒｉｃａｎ
ＣａｕｃａｓｉａｎａｎｄＩｓｒａｅｌｉＪｅｗ；（２）ｈｏｗｅｖｅｒ，Ｔｈｅｒｅｗａｓａｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｈｉｇｈｅｒｆｒｅｑｕｅｎｃｙｏｆａｌｌｅｌｅ“Ｓ”ｉｎＨａｎＣｈｉｎｅｓｅａｎｄＪａｐａｎｅｓｅｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｏｔｈｅｒｔｈｒｅｅｅｔｈｎｉｃｇｒｏｕｐｓ．Ｓｏｍｅａｕｔｈｏｒｓｓａｙｔｈａｔｔｈｅｓｈｏｒｔａｌｌｅｌｅ“Ｓ”ｓｈｏｗｓｒｅｄｕｃｅｄｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｈｅｓｅｒｏｔａｎｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ，ｉｆｓｏ，ｔｈｉｓｉｎｄｉｃａｔｅｓｔｈａｔｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆ５一ｍＴｉｎＨａｎＣｈｉｎｅｓｅａｎｄＪａｐａｎｅｓｅｉｓｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｏｔｈｅｒｔｈｒｅｅｅｔｈｎｉｃｇｒｏｕｐｓａｎｄｔｈａｔＣｈｉｎｅｓｅａｎｄＪａｐａｎｅｓｅｍａｙｈａｖｅｓｏｍｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｍｏｏｄｏｒａｃｔｉｏｎｓｆｒｏｍｏｔｈｅｒｔｈｒｅｅｅｔｈｎｉｃｇｒｏｕｐｓ．Ｆｕｒｔｈｅｒｓｔｕｄｉｅｓａｒｅｒｅｑｕｉｒｅｄｔｏｖａｌｉｄａｔｅｔｈｉｓｈｙｐｏｔｈｅｓｉｓ．
Ｋｅｙｗｏｒｄ：５－ＨＴＩ＇ＬＰＲ；ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ；ａｇｇｒｅｓｓｉｏｎ；ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ
ＩＶ—
５－ＨＴＩ］＿，ＰＲ与精神分裂症攻击行为的关联分析
第１章前言
精神分裂症是精神疾病里发病率最高的一类【”，其攻击行为的发生率高，有的表现为对他人躯体造成伤害，有的表现为对财物的毁坏，常常给社会及家庭造成严重损害１２Ｉ。

这种攻击行为，由于精神症状的影响，病人丧失或部分丧失了对自己行为的辨认力和控制力，不能为行为的后果承担责任。

因而对精神分裂症攻击行为采取医疗防范措旌尤为重要。

为此，有必要深入细致的研究其发生原因、发展趋势，寻找对其发生攻击行为的征兆作好预测、预防的措施。

１．１５．ＨＴ系统与精神疾病攻击行为的关系
对精神病人攻击行为的相关因素豹研究，国内、国外精神病学者都在进行１３’坷。

早期，有研究认为青年男性与攻击行为密切相关：有学者认为精神疾病分类中的精神分裂症，尤其是偏执型精神分裂症的攻击行为发生率晟高：一般认为幻觉、妄想症状与攻击行为有关１９１。

在二十世纪八十年代末，一些研究者就开始了精神疾病攻击行为的神经生化方面的研究，企图寻找一些生物学方面的相关因素。

这些研究发现攻击行为与脑内５．羟色胺（５－ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ，５－ＨＴ）系统功能低下有关【２１１１瑚】。

１９９５年，Ｈａｒｔｎａ等人对１８例有强迫观念与行为障碍（ｏｂｓｓｅｓｉｖｅａｎｄｃｏｍｐｕｌｓｉｖｅｄｉｓｏｒｄｅｒ）的个体外周血的５．ＨＴ浓度进行荧光分析，发现其中１２个有破坏性行为障碍（ｄｅｓｔｒｕｃｔｉｖｅｂｅｈａｖｉｏｒｄｉｓｏｒｄｅｒ）的个体外周血的５－ＨＴ浓度较低ｕＯｌ。

同时有大量的动物实验也证明了攻击行为与５．ＨＴ系统的功能有关【２１．捌。

如给动物服用５－ＨＴ分解代谢药物麦角二乙酰胺（ＬｓＤ）后，脑中５－ＨＴ含量降低，５．羟吲哚乙酸ｆ５．ｈｙｄｒｏｘｙｉｎｄｏｌｅａｃｅｔｉｃａｃｉｄ，５．ＨｔＡＡ）的含量稍有升高，此时动物出现明显的行为紊乱现象．其中包括出现攻击行为。

人体内约有ｌ％的５－ＨＴ存在于中枢神经系统中，主要分布于下丘脑、丘脑内侧核、中脑、脑干等多处【１３Ｉ。

对多种生理功能均有影响，参与调节摄食行为、性行为、心血管功能，影响睡眠、疼痛
和精神活动ａＭｅｌｚｔｅｒ认为５－ＨＴ与多巴胺（ｄｏｐａｍｉｎｅ，ＤＡ）之『自Ｊ存在相互抑制作用，共同影响人的情绪和精神活动。

５一ＦＩＴ功能低下，则个体容易产生攻击行为【”Ｉ。

１．２５－ＨＴ的代谢
５一ＨＴ主要在脑干的５．ＨＴ神经元内合成，其前体物质是色氨酸（ｔｒｙｐｔｏｐｈａｎ．ＴｒＰ）。

该物质只能从食物中摄取，人体内不能合成，血中的色氨酸进入５．羟色胺能神经元后，先经色氨酸羟化酶（ｔｒｙｐｔｏｐｈａｎｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｃ，ＴＰＨ）作用生成５．羟色氨酸（５一ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｙｏｐｈａｎ，５－８ＴＰ），然后再经５一羟色氨酸脱羧酶（５一ｈｙｒｏｘｙｔｒｙｐｙｏｐｈａｎｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｃ，５一ＨＴＰ－ＤＣ）脱羧成５一ＨＴ，储存于５．ＨＴ能神经终末的囊泡中，在神经调节中，这些５．ＨＴ沿着神经通路传递释放并与突触后膜的５．ＨＴ受体结合而发挥作用。

释放于突触间隙的５一ＨＴ与受体结合后又迅速分离，大部分又被突触前膜上的５一ＨＴ转运体（５－ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｃＬ５一ＨＴｒ）重摄取，摄取入神经终末的５一ＨＴ一部分进入囊泡储存和再利用，另一部分被线粒体表面的单胺氧化酶（ｍｏｎｏａｍｉｎｃｏｘｉｄａｓｅ，ＭＡＯ）和依赖ＮＡＤ＋的醛脱氢酶作用生成５．ＨＩＡＡ。

上述各环节就组成Ｙｓ－ｔｒｒ系统Ｉ埘。

因而，在５－ｌｆｒ代谢途径（如图１．１所示）中的每一个环节的改变都有可能影响脑内５．ＨＴ的量，从而影响５．ＨＴ系统功能。

不少的研究证明，食物中色氨酸的缺乏、５．ＨＴ分解代谢药的使用、５．ＨＴ回吸收抑制以及其受体活性的改变等，都会影响体内５一ＨＴ和ＤＡ的浓度，使得人的情绪异常【１１，１５，１８，１９】。

１９９７年，美国ｃ（，ｃｃａｍ等人分别用５．ＨＴ受体激动剂氛氟拉明和传统的抗精神病药给两组有非犯罪性攻击行为的人格障碍的个体服用，发现前者的攻击行为明显减少，且伴有催乳素（ｐｒｏｌａｃｔｉｎ，ＰＲＬ）和５．ＨＩＡＡ水平的改变：同年，美国Ｕｎｉｓ等人将４３名１３．１７岁有行为障碍的男孩分为有攻击行为和无攻击行为两组，分别测定外周血５．ｍ哼茛度和血小板中【３Ｈ】标记的帕罗西汀（ｆ３Ｈ１．Ｐａｒｏｘｃｔｉｎｃ）５－Ｈ１ｆｒ结合情况，发现两组有显著差异；另外，大量的动物模型实验揭示攻击行为与５．ＨＴ功能系统的５．ＨＴ受体（５一ＨＴＡｌ．５一ＨＴＢｌ）的缺失，单胺氧化酶的异常’５．ＨＴ回吸收受阻都相关联１２１。

２ｔ圳。

显然，５．ＨＴ对人的情绪、行为的调节方面起着非常重要的作用。

１．３５－Ｉ－ＩＴｌ＂启动子区多态性与５．ｆｌｉｔ表达的关系
近１０年来，开始了精神疾病与攻击行为的分子遗传学研究，主要是探讨５－ＨＴ
．２．
功能系统的一些相关基因（包括５．ＨＴ受体基因、５．ＨＴ转运体基因、色氨酸羟化酶基因、单胺氧化酶基因等）与精神疾病患者及其攻击行为的相关性。

研究表明：人类５一｝ｒ兀’基因是较好的研究指标Ｉ２７１，该基因位于１７ｑｌｌ一１２，编码５一ｍ厂ｒ蛋白，在５一ＨＴ重摄入突触前膜神经元内的过程中起重要作用【２８】。

现已发现该基因第二内含子内存在一个可变数目串联重复序列（ＶＮＴＲ），包括１６．１７个碱基的９／１０／１２个拷贝数的三种片段御。

３０１，以及该基因转录点上游ｔＫｂ处启动子区有一个４４ｂｐ片段插入／缺失的长度多态性（ｓｅｒｏｔｏｎｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｌｉｎｋｅｄｐｒｏｍｏｔｅｒｒｅｇｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，５·Ｉ－ＩＴＴＬＰＲ，Ｓ，１），如１．２图所示：目前的研究已证实，这个多态
Ｉ非６ｐｄｅｌｅｔｉｏｎｏｌ＂ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ田Ｉ．．．．．．．．．．．．．．．Ｊ
５—１婴野——————］＿一日５．Ｈ１１甲
一一阳Ｉ．．．．．．．一
图１－２５－ＨＴ转运体基因启动子区示意图（ＥＭＢＬ－ＧｅｎＢａｎｋａｃｃｅｓｓｉｏｎｎｕｍｂｅｒＸ７６７５３）性位点与人类许多精神疾病相关联【¨ｔ３１ｊ副。

Ｌｅｓｃｈ等人于１９９７年提出５一Ｈ１ｒｒ基因启动子区的这个多态性位点，是人类和灵长类所特有，在人类情绪的调节方面有非常重要的作用Ｉ“。

１９９５年，Ｈｅｉｌｓ等研究者发现，具有“ｓｎ”或“ｓ，ｓ”基因型者与具有“ｌ／ｌ”基因型者比较，前者的淋巴细胞５一Ｈ兀基因的转录较少，蛋白的表达较弱，同时，５．ＨＴ代谢途径中释放入突触间隙的５一ＨＴ的回吸收率比“ｖＩ”基因型者降低。

因此认为，５－Ｈ＇ＩＴＬＰＲ可能通过影响基因的转录活性和５．｝玎ｒｒ蛋白的功能，从而影响５－ＨＴ的回吸收速率，使得５．ＨＴ系统功能不同，…Ｓ’等位基因能减少５．Ｈ］ｒｒ基因的转录和５．Ｈｒｒ蛋白的表达，从而使５．ＨＴ的回吸牧率减少１３４１。

１９９６年，
Ｌｅｓｃｈ等人选择了德国本土有焦虑相关人格特征的人中，选取了分别具有ｌ／ｌ、ｓ／ｌ
和ｓ／ｓ基因型的个体，用淋巴细胞株培养的方法，通过观察ｆ３Ｈ１５．ＨＴ的回吸收率、ｍＲＮＡ的量以及【“ＩＩＲＴＩ－５５ｄ蛋白结合力来探讨５一ＨＴＴＩＪＰＲ与５．｝ｒｒｒ功能的关系，结果也显示：纯合子Ⅵ的上述三个指标比具有其他两种基因型个体的有明显增高。

而具有虮和ｓ／ｓ基因型的个体之间在上述三个指标上的差异无显著性。

如图１．３所示［３５１。

因而认为“Ｓ”与“Ｉ”在５．ｍ广ｒ基因的转录和转运体蛋白的表达上有不同的功能，而且，“ｓ”相对“ｌ”呈显性。

１９９９年，ＧｆｅｃｎｂｅＩ譬等人，研究了４１名高加索男性的５－Ｈ１ＴｒＬＰＲ与外周血小板ｒＨ］５一ＨＴ回吸收率的关系，得出了与Ｈｅｉｌｓ等人类似的结果。

如图１．４所示１３“。

从这些研究来看．５．Ｈ１ＴＬＰＲ与外周血小板５．ＨＴ的回吸收率之间存在相关性，５－ＨＴｒＬＰＲ究竟通过何种途经来影响５．Ⅲ盯功能，目前还不清楚。

认为５－Ｉ－ＩＴｒＬＰＲ与５．Ｈ丌的功能有关，“Ｓ”等位基因能降低５．ＨＴＴ的功能的假说有一定的合理性。

但是，１９９９年，ＮｏｂｉＭ等人同时对一组抑郁症患者和～组非抑郁症者进行了５－ＩＴＩ＇Ｉ＇ＬＰＲ基因分型和外周血小扳５．ＨＴ回吸收率的测定，发现对照组具有价基因型的个体的血小板５．ＨＴ的回吸收率比同组内具有ｓ／ｌ或ｓ，ｓ基因型的个体显著增高，同时比抑郁症组具有相同基因型ｌ，ｌ的个体也显著增高。

而对照组具有虮或啪基因型的个体和抑郁组具有相同基因型的个体之间却不存在上述这种差劓３７１。

这个结果与前几位学者的结果相比，有了新的发现，即在不同人群中（抑郁症和非抑郁症），具有同样基因型ｌ，ｌ的的个体，５。

ＨＴ回吸收率可能会有不同。

这是否说明５－ＨＴ回吸收率除了受５－ＨＴＴＬＰＲ影响外，还会受到其他因素（如某种精神疾病相关因素）的影响，还需要进一步的研究来说明。

１．４精神分裂症的分子遗传学基础
精神分裂症在世界人口中发病率约为１％１圳。

到目前为止，其发病原因仍不明确，根据对一些家系、双胞胎、寄养子女的研究，证明有家族聚集性，说明精神分裂症的发病因素里，遗传因素大于环境因素【１３”。

目前研究者认为可能是有多个基因之间以及各基因与环境之间的共同作用所致．这些基因包括了，５．ＨＴ２ａ受体基因．ＤＡ的Ｄ３受体基因，以及分别位于染色体６ｐ’６ｑ，８ｐ，１３ｑ，２２ｑ上的一些功能没有完全弄清的一些基因ｌ川。

精神分裂症患者有５．ＨＴ功能的低下和ＤＡ功能亢进已被证实。

１９７８年，ｏｗｃｎ等提出精神分裂症患者脑内伏隔核和尾状核
中ＤＡ受体密度增高，后来的正电子发射扫描技术也证明了这一点ｌ“。

５－ＨＴＴＬＰＲ是否为精神分裂症相关性因素，目前不同的研究得出了不同的结果｛３９“】。

１９９８年，Ｓｔｏｂｅｒ等人同时对１８０个精神分裂症患者和２３３个『Ｆ常个体，进行了５－ＨＴＦＬＰＲ位点的测定，结果发现两组在５－ＨＴＴＬＰＲ与等位基因和基因型频率分布无显著性差异．５一ＨＴＴＬＰＲ与精神分裂症无关联。

而同年，Ｍａｌｈｏｔｒａ等人又发现５－ＨＴＴＬＰＲ与精神分裂症的精神症状严重程度相关，他们对５０例精神分裂症患者进行５－ＨＴＴＬＰＲ基因分型，又对他们在停药四周后做简明精神症状评分（ＢＰＲＳ），发现具有ｌ／ｌ基因型者得分明显高于具有虮或啪基因型者的得分【４２ｌ。

因此．５．ｍ厂ｒＬｊＰＲ与精神分裂症之间的关系，还没有明确的结论。

１．５５．ＨＴＴＬＰＲ与攻击行为相关性研究的现状和本研究的目的近年来，５－Ｈ＇ＩＴＬＰＲ与攻击行为的相关性研究，在国外较多。

但是有关５－ＨＴＩ＇ＬＰＲ与精神分裂症患者攻击行为的相关性研究报道较少见。

目前的研究主要涉及了药物滥用、情感障碍、多动症、强迫症等多种精神疾病患者和非精神疾病者对他人、物体或自身攻击的行为与５－Ｈ＇ＩＴＬＰＲ的关系［６－ｓ，４３１。

１９９９年，｝七ｄｌｉｋａｉｎｅｎ等人对高加索白种人群中，５１个具有累次发作的（ｒｅｃｉｄｉｖｉｓｔｉｃ）冲动性暴力行为的早发性嗜酒者，１５４个无暴力行为的迟发性嗜酒者以及５４个健康个体进行了５．ＨＴＩＺ，ＰＲ等位基因频率的比较，发现在有累次发作的冲动性暴力行为的早发性嗜酒者中，“ｓ”频率明显增高：２０００年，法国Ｂｅｌｌｉｖｉｅｒ等人，对２３７例有单向或双向情感障碍的病人，其中９９例至少发生过一次自杀行为，２６例有暴力企图，以及１８７例无自杀行为和情感障碍的正常人进行５－ＨＴＴＬＰＲ与攻击行为之间的相关性研究，结果提示：５一ＨＴＴＬＰＲ与自杀行为无关联，而与极端暴力形式的自杀可能有关联；同年，德国的Ｂｏｎｄｙ等人对５８例没有明确诊断为精神疾病但有自杀行为的高加索人和１１０例健康人进行５－ＨＴＴＬＰＲ基因分型，结果发现在自杀者中，ｓ／ｓ和ｓ＾的基因型频率明显增高。

２００１年，Ｍａｎｏｒ等人用ＨＲＲ（ｈａｐｌｏｔｙｐｅｒｅｌａｔｉｖｅｒｉｓｋ，见附录说明）设计方法，在以色列犹太人中，对６９个含有既有过多冲动行为ｆｈｙｐｅｒａｃｔｉｖｅ—ｉｍｐｕｌｓｉｖｅ）ｊ７．有注意缺陷多动症（ａｔｔｅｎｔｉｏｎｄｅｆｉｃｉｔｈｙｐｅｒａｃｔｉｖｉｔｙｄｉｓｏｒｄｅＬＡｍｉＤ）的先证者家系，以及９８个含有一个注意缺陷多动症（ａｔｔｅｎｔｉｏｎｄｅｆｉｃｉｔｈｙｐｅｒａｃｔｉｖｉｔｙｄｉｓｏｒｄｅｒ，ＡＤＨＯ）的先症者家系进行了５．Ｉ－ｒｌＴＬＰＲ基
因型频率和等位基因频率的分析，发现既有过多冲动行为又有注意力缺陷多动症这类患者与其Ｊ下常父母相比，基因型“ｓ，ｓ”和等位基因…Ｓ频率显著减低。

从以上研究来看，有以下几个方面的特点：①多数研究是在不同人群中进行，同一人群中重复实验少。

②多数研究中，病例组样本量偏小，可能造成统计学偏差。

⑧攻击行为与５－ＨＴＴＬＰＲ的相关性研究，大部分只是在精神疾病患者之间比较，或者只是在非精神疾病者之间进行比较，即两组对照。

那么，５－ＨＴＴＬＰＲ究竟是否为攻击行为的相关因素．精神病人的攻击行为与正常人的攻击行为是否有相同机理，或前者是因为精神疾病的病理学因素（如５一ＨＴ、ＤＡ等神经递质的改变）所致，目前还不能肯定。

④对攻击行为或暴力行为的定义不同，因此也得出了不同的结论。

那么，对自身的攻击和对他人的攻击，其发生机理是否一致，是否有相同的相关基因？目前还不清楚。

另外，样本的纳入标准不同（如暴力程度的评分范围不同等），也有可能得出不同的结论。

综上所述，有必要在同一种族中增大样本量，科学合理设计，来验证５．Ｉ－ＩＴＩＬＰＲ与无精神疾病史者的攻击行为、精神疾病患者的攻击行为之间的关系。

因此，本研究选择中国南方（广东省）的汉族人群作为研究对象，通过在同一人群中，采用四组病例．对照实验（即无攻击行为的非精神疾病组ＮＳＮＡ，有攻击行为的非精神疾病组ＮＳＡ，无攻击行为的精神分裂症组ＳＮＡ和有攻击行为的精神分裂症组ＳＡ），来探讨５一ＩＴＩＴＬＰＲ与攻击行为、精神分裂症之间有无关联，探讨非精神疾病者的攻击行为和精神疾病患者的攻击行为与５－ＨＴｒＬＰＲ的相关性。

此外，攻击行为的界定对本研究选择对象关系重大，目前不同的研究者之间有些差异。

如１９８５年，Ｂａｒｏｎ将攻击行为定义为任何形式的有目的地伤害另一个生物体的行为．其极端形式称为暴力ｌ删。

而有些作者将他定义为基于愤怒、敌意、憎恨及不满等情绪，对他人、自身及其他目标采取的破坏性行为【２】。

可以表现为语言文字的攻击，也可以是具体的行动，如对他人或自己的伤害或对物体的毁坏。

在此，我们采用Ｂａｒｏｎ对攻击行为的定义，并严格划定攻击行为的暴力程度，将非精神疾病组的攻击行为定义为攻击他人致人轻伤以上的行为；将精神分裂症的攻击行为定义为：根据ＫＡＹ氏１９８８年编制的修订外显攻击行为评定量表（ＭＯＡＳ）对他人躯体攻击或物品攻击方面评分为３分以上（包括３分）的行为。

同时取同一群体的精神分裂症核心小家系进行分析，以避免单纯的病例一对照研究可能出现的假阳性，提高本研究结论的科学性，旨在从分子生物学的角度来分析精神分裂症攻击行为病因中的遗传学基础，为精神分裂症患者攻击行为的预
测、预防和治疗提供理论依据。

第２章材料和方法
２．１研究对象
２．１．１病例．对照研究的样本
１．样本的纳入标准为：
（１）中国南方地区（广东省）的汉族人群
（２）年龄在１８．６０岁之『自Ｊ
（３）非精神病者的攻击行为定义为给他人身体造成轻伤以上后果的行为
（４）精神分裂症组的攻击行为是根据ＫＡＹ氏１９８８年编制的精神分裂症患者修订外显攻击行为评定量表（ＭＯＡＳ）对他人躯体攻击或物体攻击方
面评分为３分以上（包括３分）的行为
（５）精神分裂症组符合中国精神疾病分类与诊断标准第二版修订版的精神分裂症诊断标准（ＣＣＭＤ．ＩＩ．Ｒ）
（６）同意参加本研究。

２．样本总数为３４２例，其中无攻击行为的非精神疾病组９６例；有攻击行为的非精神疾病组８９例；无攻击行为的精神分裂症组８７例；有攻击行为
的精神分裂症组７０例。

２．１．２家系样本
１．核心家系共５４个，每个家系包括先证者一人和其父母。

２．所有的先证者，都符合下列要求：
（１）年龄在１８．６０岁之间
（２）符合中国精神疾病分类与诊断标准第二版修订版的精神分裂症诊断标准（ＣＣＭＤ．ＩＩ．Ｒ）
（３）同意参加本研究。

３．所有先证者都用精神分裂症修订外显攻击行为量表（ＭＯＡＳ）评分，见附录表２．１。

凡是在对物体的物理性攻击或对他人的物理性攻击方面得分３
分或３分以上者列入病例．对照的有攻击行为的精神分裂症组，低于３分
的列入无攻击行为的精神分裂症组。

２．２实验仪器和试剂２．２．１主要实验仪器
１．ＰＣＲ仪
２．冷冻离心机
３．高速微量离心机
４．微量加样器
５．电热恒温水温箱
６．电子天平
７．高压电泳仪
８．超纯水器
９．ＤＮＡ定量仪
１０．扫描仪
１１．ＤＮＡ紫外检测仪
２．２．２主要试剂
１．ＤＲＲ２０ＡＧＰＣＲ试剂盒２．２ｍＭｏｌ／ＬｄＮｒＰ混合液３．丙烯酰胺
４．Ｎ，Ｎ‘一亚甲双丙烯酰胺５．过硫酸铵
６．甲醛
７．＂Ｉｒｉｓ
８．ＥＤ呵Ａ
９．硼酸
１０．琼脂糖
１１．十二烷基磺酸钠，
１２．蛋白酶Ｋ
１３．重蒸酚
１４．氯仿ＭＷＧ··ＡＧ·－ｐｒｉｍｅｕｓ
ＴＧＬ－１６Ｇ—Ａ上海安婷科学仪器厂Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ
ＡＡ－１６０ＤｅｒｉｖｅｒＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔ
ＤＹ．Ｗ２型北京生化仪器厂
Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ
ＧｅｎｅＯｕａｎｔＰｒｏ
Ｈｅｍａ
辽宁宝生（ＴＡＫＡＲＡ）
上海生工
Ｂｉｏ．Ｒａｄ
Ｂｉｏ．Ｒａｄ
Ｂｉｏ．Ｒａｄ
北京鼎国生物公司
中山医遗传教研室
广州试剂厂
１５．无水碳酸钠
１６．上样缓冲液
１７．正向引物：５一‘ＧＧＣＧＴＩ’ＧＣＣＧＣＴＣＴＧＡＡＴＧＣ一３’
１８．反向引物：５一‘ＧＡＧＧＧＡＣＴＧＡＧＣＴＧＧＡＣＡＡＣＣＡＣ．３’
１９．ＤＮＡＭａｒｋｅｒ河南华美生物工程公司
２０．硝酸银
２１．无水乙酸
２２．无水乙醇
２３．枸椽酸钠
２４．异丙醇
２５．二甲基亚砜
以上所有试剂均为分析纯。

２．３方法
２．３．１ＤＮＡ的提取
有攻击行为的非精神分裂症组采用口腔粘膜拭子，其余三组都取外周血，３．８％ＡＣＤ抗凝。

所有样本均采用常规酚．氯仿法提取ＤＮＡ。

１．全血提取步骤如下：
（１）取５００ｕｌ全血置于１．５ｍｌ的离心管中，加入蒸溜水致２／３管，轻轻倒转混匀，立即用１０×ＳＳＣ恢复等渗，８０００ｒｐｍ离心１０分钟，弃去上清。

（２）重复步骤（１）两次
（３）加入４００ｕｌ细胞核裂解液．４０ｕｌ１０％ＳＤＳ，６ｍｇＰｒｏｔｅｉｎａｓｅＫ，５６０Ｃ过夜（４）加等体积饱和酚，混匀１０ｍｉｎ，８０００ｒｐｍ离心５分钟，转移上清至新管（５）加等体积饱和酚／氯仿（１：１），混匀５ｍｉｎ，８０００ｒｐｍ离心５分钟，转移上清至新管
（６）加等体积氯仿，混匀５ｍｉｎ，８０００ｒｐｍ离心１０分钟，转移上清至新管（７）加２倍体积无水冰乙醇，封盖，轻轻来回倒置摇匀１００００ｒｐｍ离心１０分钟。

弃上清
（８）晾干后．加０．１ＸＴＥ３００ｕｌ溶解，４０Ｃ冰箱保存备用
２．口腔黏膜细胞ＤＮＡ提取如下：
（１）黏膜拭子两根，置于干净试管中，加入超纯水浸泡并不断晃动１分钟：（２）８０００ｒｐｍ离心５ｍｉｎ，弃去上清；
（４）加入４００ｕｌ细胞核裂解液，４０ｕｌ１０％ＳＤＳ，６ｍｇＰｒｏｔｅｉｎａｓｅＫ，５６０Ｃ过夜：
（５）加等体积饱和酚，混匀１０ｍｉｎ．８０００ｒｐｍ离心５ｍｉｎ，转移上清至新管；（６）加等体积饱和酚／氯仿（１：１）．混匀５ｍｉｎ，８０００ｒｐｍ离心５ｍｉｎ，转移上清至新管
（７）加等体积氯仿，混匀５ｍｉｎ，８０００ｒｐｍ离心５ｒａｉｎ，转移上清至新管（８）加２倍体积无水冰乙醇，封盖．轻轻来回倒置摇匀１００００ｒｐｍ离心１０ｍｉｎ，弃上清
（９）晾干后，加０．１×ＴＥ３００ｕｌ溶解，４０Ｃ冰箱保存备用
２．３．２ＰＣＲ反应
１．ＰＣＲ反应体系：
２０ｕＬ反应体系
超纯消毒水
２×缓冲液
２ｍＭｏＩ／ＬｄＮＴＰ
１０ｕＭｏＩ／Ｌ正向引物
１０ｕＭ０１／Ｌ反向引物
ＴａｑＬＡ
ＤＮＡ聚合酶模板ＤＮＡ
２．ＰＣＲ６．１ｕＬ６ｕＬ１．５ｕＬ０．６ｕＬ０．６ｕＬ０．２ｕＬ
５０ｎｇ（１ｕＬ）
２．３．３ＰＣＲ产物的检测
１．５×ＴＢＥ的配制
清洗玻璃瓶后，用次强清洁液（重铬酸钾１２０９，浓硫酸１２０ｍｌ，蒸馏水１０００ｍ的混合液），浸泡数小时，然后取出用蒸馏水洗净，高温消毒。

称取５４９Ｔｒｉｓ，２７．５９ＢｏｒｉｃＡｃｉｄ，２０ｍｌ０．５ｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ（ＰＨ８．３）加蒸馏水定容至１Ｌ（５ＸＴＢＥ）
２．电泳上槽液的配制
清洗玻璃瓶后，用次强清洁液浸泡数小时，然后取出用蒸馏水洗净。

１００ｍｌ５ＸＴＢＥ加蒸馏水定容至１Ｌ
３．电泳下槽液的配制
清洗玻璃瓶后，用浸泡数小时，然后取出用蒸馏水洗净。

称取７３．８９ＮａＡｃ，自ＩＩＡ．１２０ｍｌ５ＸＴＢＥ，加蒸馏水定容至９００ｍｌ４．配制６％的非变性聚丙烯酰胺凝胶溶液
取一棕色瓶，清洗后，用次强清洁液浸泡数小时，然后取出用蒸馏水洗净，高温消毒。

３０％的丙烯酰胺凝胶母液：２９９丙烯酰胺，ｌｇＮ，Ｎ＇－亚甲双丙烯酰胺，加超纯水至６０ｍｌ，加热溶解，再加超纯水至终体积１００ｍｌ，４０Ｃ保存。

配胶：超纯水１５ｍｌ
凝胶母液５ｍｌ
５ＸＴＢＥ５ｍｌ
１０％过硫酸铵１８０ｕｌ
ＴＥＭＥＤ】５ｕｌ
５．灌胶
凝胶板大小为２５Ｘ１３ＣＭ，厚０．５ｍｍ
６．上样，用６Ｘｂｌｕｅ／ｏｒａｎｇｅ上样缓冲液潜水上样，ｐＢＲ３２２ＤＮＡ／ＨａｅＨＩＭａｒｋｅｒｓ作参照：
７．电泳，负极接上槽，正极接下槽，４５０Ｖ恒压电泳３小时
８．酸银染色
（１）１０％乙醇固定５．１０ｍｉｎ：
（２）馏水适量清洗一次：
（３）１％的ＨＮ０３浸泡１．５ｍｉｎ：
（４）适量蒸馏水清洗：
（５）１２ｍｍｏｌ／Ｌ的硝酸银溶液染色１５．３０ｍｉｎ；
（６）适量蒸馏水清洗；
（７）显色液（３０９无水碳酸钠溶于蒸馏水中，加入７００ｕ１３７％的甲醛溶液，再用蒸馏水定容至１０００ｍ１）显色至带型清晰为止；
（８）立即用１０％的醋酸停显。

（９）用滤纸将凝胶取出，置温箱中烤干。

２．３．４基因分型
２．３．５统计分析
所有样本的基因型分布都进行Ｈａｒｄｙ—Ｗｅｉｎｂｅｒｇ＇ｓ平衡检验。

核心家系用等位基因的传递不平衡检验（ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ／ｄｉｓｅｑｕｉｌｉｂｒｕｉｍｔｅｓｔ，ＴＤＴ，病例对照样本的等位基因频率和基因型频率分别用ｘ２检验。

第３章结果
３．１样本的一般资料
所有样本都来自广东省。

病例．对照样本的构成情况见表３．１所示，共，３４２例，其中包括无攻击行为的非精神病组９６例．平均年龄为２８＿＋８岁；有攻击行为的非精神病组８９例，平均年龄为２５＋６岁；无攻击行为的精神分裂症组８７例，
平均年龄为３５±７岁，平均病程为１０±５年；有攻击行为的精神分裂症组７０例。

平均年龄为３４＿＋６岁，平均病程为ｉ２＿＋５年。

所有样本都为无血缘关系的个体；所有精神分裂症患者的精神症状都以幻觉、妄想等阳性症状为主，且都来自精神病院的住院病人。

所有非精神疾病组的样本都为无明显精神疾病症状史的个体（正常对照）。

无攻击行为的非精神病者为省职业病防治院和省公安厅门诊部的体检职工。

有攻击行为的非精神病者来自某监狱因伤害罪服刑的犯人。

精神分裂症家系共５４个，先证者中，男性３５例，女性１９例，平均年龄３５＿＋４岁，平均病程１０－＆＿３年。

表３－１病例．对照样本的基本情况
组别性别平均年龄（岁）平均病程（年）合计
男女
３．２Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ’Ｓ平衡检验
基因分型后，各组样本经Ｈａｒｄｙ—Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡检验，表明都符台该平衡定律（ｐ＞０．０５）。

表３－２各组样本基因型频率分布及Ｈａｒｄｙ．Ｗｅｉｎｂｅｒｇ检验结果
３．３病例－ｘ寸照样本的５－ＨＴＴＬＰＲ基因型和等位基因频率的分布的ｘ２检验
本研究中病例．对照样本的的ｘ２检验采用应用程序ＳＰＳＳｌ０．０。

３．３．１四组病例．对照样本的比较
无攻击行为史的非精神病组ＮＳＮＡ、有攻击行为史的非精神病组ＮＳＡ、无攻击行为史的精神分裂症组ＳＮＡ和有攻击行为史的精神分裂症组ＳＡ的基因型和等位基因频率的分布见表３．３，各组之间５一ＨＴｒＬＰＲ基因型啪、非咖，ｌ，ｌ、非ｌ，ｌ频率的分布见表３－４。

各组之间５．ＨＴＴＬＰＲ基因型频率和等位基因频率基本相近，经统计学分析，差异无显著性意义。

即
１．无攻击行为的非精神病组和有攻击行为史的非精神病组之间５－ＨＴＴＬＰＲ各基因型频率和等位基因频率分布无统计学意义的差异；
２．无攻击行为的精神分裂症组和有攻击行为史的精神分裂症组之间５．ＨＴＩ＇ＬＰＲ各基因型和等位基因频率的分布无统计学意义的差异：
３．无攻击行为的非精神病组与有攻击行为史的精神分裂症组之问５一ＨＴＩ＇ＬＰＲ各基因型频率和等位基因频率分布无统计学意义的差异；
４．有攻击行为史的非精神病组与无攻击行为史的精神分裂症组之间５一ＨＴＩ＇ＬＰＲ各基因型频率和等位基因频率分布无统计学意义的差异。