UV 法和HPLC 法测定盐酸左氧氟沙星注射液及滴眼液的含量

UV法和HPLC法测定盐酸左氧氟沙星注射液
及滴眼液的含量
韩保萍钱雪李金泉贺艳丽
盐酸左氧氟沙星（LVFX-HCl）为喹诺酮类抗菌药，其有效成分为左氧氟沙星（LVFX）。

LVFX系氧氟沙星（ofloxacin）的光学活性S-(-)异构体，其体外抗菌活性是氧氟沙星的两倍，为右旋体的8～128倍，具有抗菌谱广，高效低毒等特点。

盐酸左氧氟沙星的片剂、胶囊剂和注射剂已在国内上市，其滴眼剂正在研制中，本文对LVFX-HCl注射液（100ml：100mg）及滴眼液（5ml：15mg）的含量测定方法进行了探讨。

1 仪器与试药
岛津UV-265FW紫外可见分光光度计，Waters高效液相色谱仪，Waters-996PAD检测器，Waters-Millennium-32色谱数据处理机。

LVFX-HCl对照品（自行精制，纯度>99.5％）；LVFX-HCl注射液（100ml：100mg，市售）；LVFX-HCl滴眼液（5ml：15mg，自行配制）；乙腈为色谱纯，其它试剂均为分析纯。

2 实验方法与结果
2.1 紫外分光光度法
2.1.1 溶液的配制
标准溶液：精密称取经105℃干燥至恒重的LVFX-HCl对照品适量（约相当于LVFX10mg），置50ml量瓶中，加入0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀。

样品溶液：按处方比例分别配制出注射液和滴眼液的样品溶液。

空白辅料液：按处方比例，不加LVFX-HCl，配制注射液和滴眼液空白辅料液。

2.1.2 测定波长的选择
精密量取标准溶液和样品溶液适量，分别加0.1mol/L盐酸溶液使成含LVFX 约6μg/ml的溶液，同法稀释其相应的空白辅料液。

以0.1mol/L盐酸溶液作参比，在400nm～200nm波长范围内扫描，对照品与样品均在293nm波长处有最大吸
收峰，空白溶液无吸收，故选择293nm为测定波长。

2.1.3标准曲线的绘制
精密量取标准溶液0.5ml、1.0ml、2.0ml、6.0ml、8.0ml、10.0ml，分别置100ml 量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，以0.1mol/L盐酸溶液作参比，在293nm 波长处测定吸收度。

将吸收度（A）与波长（C）进行线性回归，回归方程为A=0.07313C-0.0082，r＝0.9999（n＝5）。

LVFX在1.03μg/ml～20.6μg/ml范围内吸收度与浓度的线性关系良好。

2.1.4 稳定性试验
将2.1.3项下的溶液置避光处，分别在0h、12 h、24h测定吸收度，结果基本无变化。

2.1.5 回收率试验
精密称取经105℃干燥至恒重的对照品适量，置100ml量瓶中，按处方比例加入空白辅料，加水溶解至刻度，摇匀。

取本品适量，加0.1mol/L盐酸溶液稀释使成含LVFX约6μg/ml的溶液，按2.1.2的方法操作并计算，求得平均回收率为100.10％，RSD＝0.49％。

2.1.6 精密度
准确量取注射液和滴眼液的样品溶液适量，加0.1mol/L盐酸溶液使成含LVFX约6μg/ml的溶液，各配制6份，按上述方法操作，测定其含量，测定RSD 分别为0.53％和0.47％。

2.1.7 样品测定
取注射液和滴眼液的样品溶液适量，精密量取。

用0.1mol/L盐酸溶液稀释成含LVFX约6μg/ml的溶液，按上法操作并计算含量，结果见表。

表LVFX注射液及滴眼液含量测定结果（标示量％）（n=3）
编号UV法HPLC法
注射液1 100.2 99.98
注射液2 99.47 99.79
注射液3 98.91 99.16
滴眼液1 101.5 100.8
滴眼液2 99.85 99.57
滴眼液2 100.13 99.82
2.2 高效液相色谱法
2.2.1 溶液的配制
同2.1.1。

2.2.2 色谱条件
色谱柱：Waters Symmetry C18柱（150mm×3.9mm、5μm）；流动相：0.05mol/L 枸橼酸（用三乙胺调节pH至4.0）-乙腈（79：21）；流速：1ml/min；检测波长293nm；柱温：35℃。

理论塔板数按LVFX峰计算应不低于2500。

2.2.3标准曲线
精密量取标准溶液0.1ml、1.0ml、2.0ml、4.0ml、6.0ml、8.0ml、10.0ml分别置25ml量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，制成不同浓度的溶液。

分别量取20μl，注入液相色谱仪。

以LVFX峰面积（S）对浓度（C）进行线性回归，得回归方程为S=103727.64C+4693.8，r=0.9999（n＝5）。

表明LVFX 在0.8μg/ml～80μg/ml浓度范围内呈良好线性关系。

2.2.4 稳定性试验
将2.2.3项下的溶液置避光处，分别在0h、12h、24h测定峰面积，结果基本不变。

2.2.5 回收率试验
取LVFX-HCl对照品适量，精密称定，置100ml量瓶中，按处方比例加入空白辅料，加水至刻度，摇匀。

取供试品适量，加0.1mol/L盐酸溶液使成含LVFX 约30μg/ml的溶液，按上述方法操作并计算，其平均回收率为99.34％，RSD为0.63％。

取辅料同法测定，实验结果表明辅料对测定无干扰。

2.2.6样品测定
精密量取注射液及滴眼液的样品溶液适量，置100ml量瓶中，加0.1mol/L 盐酸溶液至刻度使成含LVFX约30μg/ml的溶液。

取20μl溶液注入液相色谱仪，记录峰面积，按外标法计算含量。

结果见表。

3 讨论
由UV法和HPLC法测定盐酸左氧氟沙星注射液及滴眼液含量的结果可知：
二种方法测定结果基本一致。

HPLC法在实际工作中应用繁琐，并易受客观条件的限制，而UV法具有经济、方便、快速的特点，尤其适用于制药企业进行内控质量检测。

[原文发表于：山东医药工业，2000，19（6）：5～7]。