宠物源性大肠杆菌耐药性调查

宠物源性大肠杆菌耐药性调查
师志海;王文佳;兰亚莉;陈朝喜
【摘要】To understand drug resistance of Escherichia coli isolated from pets in Guangzhou,broth microdilution method was used for antimicrobial agent susceptibility testing of 120 clinical E. coli isolates to ceftiofur, enrofloxacin and other 11 antibiotics and the experimental data were statisticized by WHONET 5. 4 software. Based on the results of drug resistance pattern analysis, it can guide the clinical use of drugs for pets and provide a theoretical basis for drug resistance surveillance.%本试验采用微量肉汤稀释法对120株宠物医院分离的大肠杆菌进行头孢噻呋、恩诺沙星等13种抗生素的最小抑菌浓度(MIC)值测定,并利用WHONET 5.4软件对数据进行处理,以了解广州市宠物源性大肠杆菌的耐药情况.通过对其耐药谱型的调查,为指导宠物临床用药和耐药性及耐药性监测提供理论依据.
【期刊名称】《中国畜牧兽医》
【年(卷),期】2012(039)007
【总页数】2页(P244-245)
【关键词】微量肉汤稀释法;耐药谱型;耐药监测
【作者】师志海;王文佳;兰亚莉;陈朝喜
【作者单位】河南省农业科学院畜牧兽医研究所,河南郑州450002;华南农业大学兽医学院,广东广州 510642;河南省农业科学院畜牧兽医研究所,河南郑州450002;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041
【正文语种】中文
【中图分类】S851.4+3
犬大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌所引起的犬的急性肠道传染病，当饲养管理不当、犬舍卫生不良、气候剧变、仔犬哺乳不足及在其他某些应激因素的作用下，使仔犬体质变差、抵抗力降低时，便可引起大肠杆菌内源性感染，或经消化道或脐带感染（高文鑫等，2009）。

由于抗菌药物在宠物的滥用造成大肠杆菌耐药现象越来越
严重，使宠物大肠杆菌病的防制越来越难。

因此，对宠物源性大肠杆菌进行耐药谱型调查分析，不仅有助于对其耐药机制的分析和研究，同时为指导宠物临床用药和耐药性及耐药性监测提供理论依据。

1 材料与方法
1.1 样本和试剂 120例样本为2007年11月－2008年2月期间采自华南农业大
学动物医院就诊的宠物（狗、猫等）的肛拭子、鼻咽拭子、尿液、创伤感染部位及部分病死宠物的肠内容物。

培养基购自广州环凯生物公司，生化鉴定管购自杭州天和微生物试剂有限公司。

1.2 样本分离培养及鉴定按照常规病原分离方法对临床采集样本进行病原菌培养
及生化鉴定。

质控菌株为大肠埃希菌ACTT25922由河南省农业科学院畜牧兽医研究所小动物疫病实验室保存。

1.3 药物的配制分离菌株对卡那霉素、多西环素、头孢噻呋、阿米卡星、利福平、恩诺沙星、左氧氟沙星、庆大霉素、头孢噻肟、安普霉素、氟甲砜霉素、头孢曲松钠和阿莫西林＋克拉维酸13种药物进行药敏试验，参照陈朝喜等（2011）介绍
的方法对试验参试药物进行配制，具体方法如下:根据药物的理化性质先称量适量
的药物，溶解后定容，经微孔滤膜过滤，最终配成5120μg／mL的母液。

试验使
用的药液直接将母液适当稀释即可。

1.4 微量肉汤稀释法进行MIC值测定根据NCLLS指导原则和标准（NCCLS，2003）对120株临床分离株采用微量肉汤稀释法进行最小抑菌浓度（MIC）值测定，同时以ATCC25922作为质控菌。

每个药物做3次重复，以不出现浑浊的孔
所对应的最低药物浓度作为该药的最小抑菌浓度。

试验结果利用WHONET 5.4软件对数据进行分析处理。

2 结果与分析
通过细菌分离培养和生化鉴定，共分离到120株大肠杆菌。

120株大肠杆菌的药
敏试验结果见表1。

试验结果显示，临床分离的大肠杆菌对13种兽医临床常用的
抗生素表现出不同的耐药性，而且不同来源的大肠杆菌也呈现不同的耐药谱型（图1）。

其中猫源大肠杆菌因采集数量较少（24株），因此其耐药谱型的规律性不
如犬源大肠杆菌明显，且以耐1和4种药物为主；而分离的犬源大肠杆菌的耐药
谱型以耐2、7、9和11种药物较多。

综合来说，分离的120株大肠杆菌表现为
中等耐药性，其中对利福平的耐药率最高，为72.5%，对阿米卡星、安普霉素和
氟甲砜霉素的耐药率较低，均低于30%。

由图1可知，分离菌株已表现出多种耐
药谱型，21.7%（26／120）的菌株对10种以上药物表现出耐药性，其中6株对所有的药物耐药，因此应引起重视，在宠物临床合理选择和应用抗菌药物来进行宠物疾病预防和治疗。

表1 120株大肠杆菌耐药水平统计分析注:R表示耐药，I表示中介，S表示敏感。

药物R菌株数（%）I菌株数（%）S菌株数（%）卡那霉素45（37.5%）4
（3.33%）71（59.17%）多西环素58（48.33%）22（18.33%）40（33.33%）头孢噻呋63（52.5%）4（3.33%）53（44.17%）阿米卡星26（21.67%）2（1.67%）92（76.67%）利福平87（72.5%）27（22.5%）6（5%）恩诺沙星
43（35.83%）8（6.67%）69（57.5%）左氧氟沙星37（30.83%）10（8.33%）
73（60.83%）庆大霉素58（48.33%）4（3.33%）58（48.33%）头孢噻肟41（34.17%）5（4.17%）74（61.67%）安普霉素14（11.67%）0 106（88.33%）氟甲砜霉素34（28.33%）29（24.17%）57（47.5%）头孢曲松钠47（39.17%）3（2.5%）70（58.33%）阿莫西林＋克拉维酸37（30.83%）73（60.83%）10（8.33%）
图1 120株临床分离宠物源性大肠杆菌的耐药谱型分布规律
3 小结
大肠杆菌是一种重要的人畜共患病的病原菌，近年来由于临床上抗生素尤其是人和动物共用抗生素的不合理使用，致使大肠杆菌逐渐产生了耐药性，并且对抗生素的耐药呈逐年上升的趋势，势必会影响到人类的健康。

同样大肠杆菌的耐药问题也越来越引起国内外的广泛关注，大量学者对其耐药机制进行了大量研究。

本研究药敏试验结果表明，临床所分离的宠物源大肠杆菌对临床上多种常用的抗菌药物已经产生耐药性。

对部分病例的用药状况进行跟踪调查，反馈结果表明宠物患病期间不合理用药的观念和作法是伴随分离菌株耐药谱型呈现多样化的主要原因。

由于大肠杆菌对抗菌素产生耐药性是随着临床药物的广泛应用主要是不合理使用而产生的，并能通过耐药质粒的转移而使耐药菌株不断蔓延扩大，因此及时开展大肠杆菌的药敏检测，选择细菌敏感的药物来进行该病原菌的预防和临床上的治疗用药具有十分重要的意义。

参考文献
1 陈朝喜，王华，朱晓霞，等.山羊源绵羊肺炎支原体的耐药谱型分析［J］.中国畜牧兽医，2011，38（1）:179～181.
2 何嘉仪，卢沛炯，赖红青.肉类大肠杆菌耐药性调查［J］.中国畜牧兽医，2009，36（3）:201～202.
3 高文鑫，高鑫龙，曹兰平，等.关于犬大肠杆菌病的诊疗体会［J］.北方牧业，
2009（22）:46.
4 National committee for clinical laboratory standards.Performance standards for antimicrobial disk and dilution susceptibility tests for bacteria isolated from animal approved standard［M］.2nd ed.Wayne，NCCLS，2003，M31－A2.。