高二生物选修三基因工程导学案

基因工程导学案
导：肯德基用转基因大豆磨豆浆出售，遭曝光。

提问：什么是转基因，对人有什么影响？
思：
一、基因工程的概念理解
1．供体：提供目的基因。

2．操作环境：______。

3．操作水平：___________ 水平。

4．原理：基因重组。

5．受体：表达目的基因。

6．本质：性状在___________体内表达。

7．优点：克服________________障碍，定向改造生物的遗
传性状。

二、DNA重组技术的基本工具
1．限制性核酸内切酶(简称：限制酶)
(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。

(2)作用：识别双链DNA分子的某种特定____________并使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。

(3)结果：产生_________或平末端。

2．DNA连接酶
(1)种类:按来源可分为E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。

(2)作用：恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的
_____________以连接运载体和目的基因。

点拨提取目的基因和切割载体使用同一种限制酶，目的是能形成相同的黏性末端，形成重组DNA分子。

3.载体
有____________、____________、____________
质粒作为载体的条件：____________、____________、____________、____________
议：
2．(2012·高考新课标全国卷)根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有________和________。

(2)质粒运载体用EcoR Ⅰ切割后产生的片段如下：
AATT C……G
G……CTTAA
为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoR Ⅰ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是
____________________________________________。

(3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即________DNA 连接酶和________DNA连接酶。

(4)反转录作用的模板是________，产物是________。

若要在体外获得大量反转录产物，常采用________技术。

(5)基因工程中除质粒外，________和________也可作为运载体。

(6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是____________________________________。

1．(2013·温州适应性测试)若要利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DNA(图丙),限制性核酸内切酶的酶切位点分别是Bgl Ⅱ(A↓GATCT)、EcoR Ⅰ(G↓AATTC)和Sau3A Ⅰ(↓GATC)。

下列分析合理的是()
A．用EcoR Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体
B．用Bgl Ⅱ和EcoR Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体
C．用Bgl Ⅱ和Sau3A Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体
D．用EcoR Ⅰ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
展：
评：
检：
(2012·高考江苏卷)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。

现有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ 4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。

请问答下列问题：
(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由________________连接。

(2)若用限制酶Sma Ⅰ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是________末端，其产物长度为________________。

(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T—A碱基对替换，那么基因D就突变为
基因d。

从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶Sma Ⅰ完全切割，产物中共有________种不同长度的DNA片段。

(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是________。

在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加________的培养基进行培养。

经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是____________________。