RNA干涉技术抑制骨肉瘤细胞MG63中Survivin基因表达的研究

RNA干涉技术抑制骨肉瘤细胞MG63中Survivin基因表达
的研究
杨彤涛;张志培;李存孝;高杰;张勇;周勇;范清宇;马保安
【期刊名称】《中华肿瘤防治杂志》
【年(卷),期】2007(14)10
【摘要】目的:构建人Survivin基因的si RNA真核表达载体,探讨其对骨肉瘤细胞MG63中Survivin基因表达的干涉作用。

方法:应用pSilencer3.0-H1neo构建Survivin特异性RNA干涉载体,转染MG63细胞,G418筛选稳定转染的细胞。

HE 染色观察细胞形态学变化,透射电镜观察细胞超微结构。

应用RT-PCR、间接免疫荧光和western blot等方法检测Survivin的mRNA和蛋白水平变化。

流式细胞仪检测细胞周期变化。

结果:成功构建了Survivin基因si RNA真核表达载体Ps-vA和PsvB,获得了稳定转染的MG63细胞。

与野生型MG63、阴性对照和
MG63/PsvA细胞相比,MG63/PsvB细胞增殖反应明显减弱,差异有统计学意义,P<0.01。

MG63/PsvB细胞中Sur-vivin mRNA和蛋白表达减少。

与野生型MG63、阴性对照和MG63/PsvA细胞相比,MG63/PsvB凋亡率增加7倍
(P<0.01)。

结论:特异性si RNA能够明显抑制Survivin基因在MG63细胞中的表达,为进一步研究survivn在MG63细胞中的生物学功能和作用机制奠定了基础。

【总页数】5页(P744-748)
【关键词】骨肉瘤/病理学;微管相关蛋白质类/代谢;基因表达
【作者】杨彤涛;张志培;李存孝;高杰;张勇;周勇;范清宇;马保安
【作者单位】第四军医大学唐都医院全军骨科中心
【正文语种】中文
【中图分类】R738.3
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