人工合成目的基因的大致过程（1）

⼈⼯合成⽬的基因的⼤致过程（1）
如果⼰知某种基因的核苷酸序列，或根据某种基因产物的氨基酸序列推导出了该多肽编码基因的核苷酸序列，就可以利⽤DNA合成仪通过化学合成原理合成⽬的基因。

利⽤该法合成的基因有rGH释放抑制因⼦基因、胰岛素原基因及⼲扰素基因等。

化学合成DNA与细胞中DNA分⼦的合成不同，化学合成DNA分⼦是把新的脱氧核糖核苷酸加到DNA链的5'羟基末端，与所在细胞中DNA分⼦合成的⽅向恰恰相反。

整个DNA的化学合成过程可以在⼀个反应柱上连续进⾏，并且可对合成过程进⾏计算机控制。

⽬前，⼀般都采⽤β-⼄腈亚磷酸胺化学合成法，使⽤全⾃动合成仪，将⼀个个不同的单核苷酸按照需要连接起来再经脱保护基处理、纯化，获得⼀个特定的DNA⽚段。

Oligo DNA合成是由3' 向5'进⾏合成的，⼀般3'端的第⼀个碱基结合在Glass单体(CPG)上。

对在CPG单体上附加的第⼀个碱基进⾏脱保护(DMT基)反应，⽤以准备附加下⼀个新的碱基。

活化新的碱基，准备和前⼀个碱基进⾏反应。

第⼆个碱基附加反应到第⼀个碱基上。

把第⼀个碱基即没有和第⼆个碱基反应上的部分(反应失败部分)加帽封死(Capping反应)，不让其进⾏进⼀步延伸反应。

对第⼆个碱基和第⼀个碱基的连接部分进⾏氧化反应，使3价磷变成5价磷，使合成产物变得更加稳定。

循环往复⾄合成结束，然后从CPG单体上⽤氨⽔切离合成好的OligoDNA。

为了保证DNA化学合成的产量，要求每步的效率都在98%以上，所以在反应过程中要对偶联效率加以监控。

常⽤的⽅法是利⽤分光光度计检测在每步反应中脱下的三苯甲基的浓度，从⽽推算出反应的效率。