ELISA实验中的这些坑你别跳

ELISA实验中的这些坑你别跳
1971年瑞典学者Engvail和Perlmann，荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定⽅法，即酶联免疫吸附测定法 (ELISA) 。

ELISA技术经过40多年的历史演变，⽬前仍然是⽤于定量检测⼤分⼦抗原常⽤的⼀种免疫测定技术。

⽆论你是实验室⼩⽩还是PhD⼤拿，只要是进⾏与免疫学相关的研究，⼀定离不开ELISA这门⼜⽼⼜实⽤的技术。

然⽽，说起ELISA实验，每个⼈都有⾃⼰不同的观点，有⼼酸也有喜悦。

为此，索莱宝列出部分ELISA实验中的⼩诀窍，告诉你：这些坑以后不必再跳了，让你成为师妹眼中的暧昧。

师妹
师兄，ELISA实验最近⽼是问题不断，快帮我⽀⽀招吧。

什么问题？
师兄
师妹
太多了，空⽩板；整板阳性或跳孔；标曲好样本值没结果等等。

不要着急，让我看看你的实验步骤和⽅案。

师兄
师妹
这个试剂盒购⾃国内***⼚家，按照说明书操作的啊。

我前⼏天⽤过索莱宝公司⽜MMP-9 ELISA试剂盒（Bovine MMP-9 ELISA Kit），结果还不错。

针对你实验过程中的问题，需要注意的有以下⼏点：
1、样本：⾸先需要确认商品化试剂盒说明书中所述检测样本类型，⾎清、⾎浆和细胞上清还是组织裂解液等，样本禁⽤叠氮钠作防腐剂，避免反复冻融；
2、样本稀释倍数：根据预实验的不同稀释梯度来确定正式实验样本的稀释倍数。

⼀般情况下，为了消除复杂基质中⼲扰成分的影响，⾄少进⾏2倍因⼦稀释；
3、为了试验结果的准确性，尽量每个样本都做双孔重复；数据分析采⽤4-相参数曲线拟合（4-pI或sigmoidal曲线拟合）；
4、如出现空⽩板的结果，请重复试验，确认每个步骤均正确操作，每步加样准确⽆误；
5、如出现整板阳或跳孔的结果，请重复试验，避免每个步骤可能引起的污染，确保正确⽆误的操作，特别是洗涤过程；
6、如果标曲好但是样本值没结果，说明试剂盒和操作均没有问题，可能原因：⼀是样本中⽬标分析物的含量太低，低于试剂盒的检测限，建议可选⽤更⾼灵敏度的产品或其他的⽅法检测；⼆是实验处理的⽅案需要调整优化；三是实验处理对样本中靶标物的含量⽆影响。

师兄
师妹
这么简单的技术，套路还很深。

请告诉我如何可得到理想的ELISA实验结果，怎样才是理想的结果？
这个不能简单概括，只有确保每个环节都OK的情况下，结果才可以保证。

最重要的有这些⽅⾯：
1、所有试剂组分必须回温后，开始使⽤；
2、精确配制各个组分且混匀，避免由于不准确稀释⽽造成的浓度误差，准确加样；
3、酶标板在温育时应加膜覆盖以避免液体蒸发；
4、洗板次数需严格按照说明书，彻底洗净残留的⼯作液，洗板后应尽快进⾏下⼀步操作，避免酶标板长时间处于⼲燥状态；
5、读数前，打开酶标仪，检查参数设定，使之稳定10分钟以上；
6、理想的实验结果应该是标曲线性关系好，样本值在标曲的范围之内，且实验组和对照组有显著的差异。

师兄
师妹
(⊙o⊙)哦，快告诉我你⽤的谁家的产品来着，我也试下。

北京索莱宝科技有限公司，他们家的ELISA试剂盒品质有保证，都是⾃主研发。

⽬前产品种类有500多种针对⼈、⼩⿏、⼤⿏等常见物种靶标和400多种针对⽜、⽺、兔、猪、鸡等⾮常见物种靶标，共1000多种ELISA试剂盒。

师兄
师妹
知道了，谢谢师兄的悉⼼指导啊，那我去联系⼚家了（400-968-6088）
我们ELISA试剂盒研发实⼒和产品优势有：
⼈才优势：若⼲名资深专家，博⼠和硕⼠研究⽣组成的研发和检测团队；
研发平台：1000级洁净实验室，最⾼规格的⼲房，冷冻和冷藏库，知名品牌⾼端仪器设备；
精选原料：国外⾎统，多级筛选，⾼端品质；
技术⼯艺：专业制造，严格执⾏全⾯规范的SOP；
严格质控：批批质检，数据真实，可追溯与重复；
种类齐全：400+⼩物种，500+常见物种，共1000多种；
性能卓越：线性范围⼴，⾼灵敏度，⾼特异性，⾼重复性，⾼均⼀性；
国际品质：与国外进⼝知名品牌同类产品平⾏性⾼；
应⽤⼴泛：检测分析物全⾯覆盖表⾯分⼦，信号转导等各领域；
畅销国外：产品已出⼝欧洲、美国、⽇本和韩国等发达国家；
⽀持服务：现货供应，完善的售前售后服务，极具竞争⼒的价格。

师妹
⽬前有什么优惠活动？
我们现在正在双12和年终盛典促销优惠，前所未有。

96T试剂盒价格为：促销价1212元（原价2600元）。

另有刮刮卡相送（2张），100%中奖哦。

最重要的是，我们可以提供：
1、免费代测（直接给您提供⽤于⽂章发表的数据和图⽚）；
2、ELISA试剂盒开发服务（如果您的检测指标不在⽬录产品范围内）；
3、索莱宝专项奖学⾦计划（您⽤ELISA试剂盒发表⽂章，可获⼀定⾦额的奖励⾦）。

索莱宝
师妹
太好了，我现下单订购（*个⼈IL-1 ELISA试剂盒；*个鸡IL-6 ELISA试剂盒......）
⾮常感谢您的⽀持！......。