血糖标准曲线实验报告

一、实验目的
1. 理解血糖测定的原理和方法。

2. 学习并掌握3,5-二硝基水杨酸法测定葡萄糖的原理。

3. 建立血糖标准曲线，用于未知血糖样品的定量分析。

二、实验原理
本实验采用3,5-二硝基水杨酸法测定葡萄糖。

该法基于葡萄糖的还原性，在碱性条件下，3,5-二硝基水杨酸与葡萄糖反应生成棕红色化合物。

通过测定该化合物的吸光度，可以计算出葡萄糖的浓度。

三、实验器材
1. 实验室天平
2. 100ml容量瓶
3. 移液管
4. 烧杯
5. 恒温水浴锅
6. 分光光度计
7. 3,5-二硝基水杨酸试剂
8. 氢氧化钠溶液
9. 标准葡萄糖溶液
10. 未知血糖样品
四、实验步骤
1. 配制标准葡萄糖溶液：
- 准确称取1.0g无水葡萄糖，溶解于100ml蒸馏水中，配制成10mg/ml的标准葡萄糖溶液。

- 分别取0.0、0.5、1.0、1.5、2.0ml标准葡萄糖溶液，加入9.5ml蒸馏水，配制成浓度为0、0.5、1.0、1.5、2.0mg/ml的系列标准溶液。

2. 显色反应：
- 向每个标准溶液中加入1.5ml 3,5-二硝基水杨酸试剂和1.5ml氢氧化钠溶液。

- 将混合液置于沸水浴中加热5分钟。

3. 吸光度测定：
- 冷却后，用分光光度计在540nm波长下测定各溶液的吸光度。

4. 绘制标准曲线：
- 以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

5. 未知血糖样品测定：
- 按照步骤2和3对未知血糖样品进行显色反应和吸光度测定。

- 根据标准曲线，计算未知血糖样品的葡萄糖浓度。

五、实验结果
1. 标准曲线绘制：
- 通过实验数据，绘制标准曲线，得出线性方程为：A = 0.0568C + 0.0031
（R² = 0.9986）。

2. 未知血糖样品测定：
- 对未知血糖样品进行测定，得到吸光度为0.85。

- 根据标准曲线，计算未知血糖样品的葡萄糖浓度为1.7mg/ml。

六、实验讨论
1. 3,5-二硝基水杨酸法是一种简单、快速、灵敏的血糖测定方法，适用于临床和
科研领域。

2. 实验过程中，温度、时间等因素对显色反应有较大影响，应严格控制实验条件。

3. 标准曲线的线性范围和精密度对实验结果有很大影响，本实验中标准曲线线性
范围为0-2mg/ml，R²值较高，表明实验结果可靠。

七、实验小结
通过本次实验，我们掌握了血糖测定的原理和方法，学会了3,5-二硝基水杨酸法测定葡萄糖的操作步骤，并成功建立了血糖标准曲线。

实验结果表明，该方法具有简单、快速、灵敏的特点，适用于血糖的定量分析。

在今后的实验和工作中，我们将继续学习和应用该方法，为临床和科研提供有力支持。