3.1 微生物发酵及其应用 精品课件(人教版选修2)

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例的核酸
D.根据微生物对抗菌素敏感性的差异,在培养基中加入
不同的抗菌素
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解析 微生物生长所必需的营养物质有碳源、氮源、无机 盐、水和生长因子,不同微生物对营养物质的要求不同 (水除外),可以根据微生物的生长对碳源、氮源、无机盐 和生长因子的需求来配制特殊的选择培养基,以便获得单 一的菌种;也可以根据微生物对不同抗菌素的敏感性的差 异,加入不同的抗菌素来获得单一的目的纯种。核酸虽然 是微生物的组成成分,但不是它们所需要的营养成分,微 生物不会因为培养基中加入的核酸不同,而培养出不同的 物质。 答案 C
[思维激活1] 微生物发酵一定是在无氧条件下进行的吗? 提示 不是。微生物发酵有的是无氧发酵,有的是有氧发 酵。
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发酵工业大致经历的时期 (1)原始发展时期 人类有意无意地利用微生物已经有几千年的历史,在长期的 生产实践中,积累了丰富经验。最初可能是人类发现储存水 果会自然发酵变酒,而逐渐形成酿酒技术。相传,在埃及和 中亚两河流域,在公元前40世纪至公元前30世纪已开始酿 酒。我国利用微生物进行谷物酒类发酵,至少是在四千年前 的龙山文化时期。在夏禹时期已有了关于仪侠酿旨酒,夏少 康(即杜康)造秫酒的记载。随着社会的发展,又出现制酱和酱 油、醋、泡菜、奶酒、干酪技术和面团发酵。
发酵工程史话
1. 1857年,法国微生物学家巴斯德通过实验证明,酒精发酵 是由活的_酵__母__引起的。
2. 1897年,德国的毕希纳进一步发现了_酶_在酵母发酵中的作 用。
3. 20世纪30年代传统发酵工业生产的新产品:酒精、乳酸、 面__包__酵__母__、丙酮、丁醇、柠檬酸、淀__粉___酶_和_蛋__白__酶_等。
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与温度对微生物的影响类似,微生物存在最低生长pH、 最适生长pH和最高生长pH。不同微生物对环境pH适应的 范围不同。一般微生物生长的最适pH在4.0~9.0范围内。 真菌生长的范围宽,细菌较窄(pH在3.0~4.0范围内),细 菌、放线菌一般适应于中性偏碱性环境,而酵母菌、霉菌 适应于偏酸性环境。 (6)溶氧的影响 工业上大部分为好氧发酵,如抗生素、氨基酸、维生素、 多糖、有机酸(细胞发酵生产乳酸例外)等发酵均需要往发 酵液中通入无菌空气,以满足微生物生长代谢过程对氧的 需求;而酒精、丙酮、丁醇和乳酸的细菌发酵为厌氧发 酵,发酵过程不需要氧。
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20世纪50年代的氨基酸发酵工业,60年代的酶制剂工业, 70年代的多糖、维生素发酵工业,70年代以后生物大分子 发酵技术相继诞生。这个时期生产技术要求高(由于多为 好氧纯种发酵,需要通入无菌空气和保持无菌条件);生 产规模大(用于青霉素生产的搅拌通气发酵罐的体积达到 500 m3,单细胞蛋白生产用的气升式发酵罐已达到2 000 m3);技术发展速度快。因此,菌种的生产能力大幅度提 高,新产品、新技术、新设备的应用达到前所未有的程 度。
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4. 20世纪40年代大规模生产_青__霉__素__、链霉素、金霉素、土 霉素等,抗生素工业兴起。
5. 20世纪50年代起: _氨__基__酸__发酵工业、酶制剂工业、多糖 和维生素发酵工业相继诞生。
6. 20世纪70年代以后:有特殊生产能力的基因工程菌发酵产 生_胰__岛__素__、_生__长__激__素__等。
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(3)配制培养基 在菌种确定之后,要根据培养基的配制原则,选择原料制备培养 基。培养基中应包含微生物需要的营养物质如碳源、氮源、生长 因子、无机盐和水等。 配制培养基的原则:目的明确、营养物质协调、pH值适宜。如 培养基中C/N比影响代谢:C/N=4时,细菌繁殖较快;真菌在 C/N=10时,生长较快。谷氨酸发酵生产时,C/N=4时,菌体繁 殖快、产物少;C/N=3时,菌体繁殖慢、产物多。细菌适宜 pH≈4.5~6.0。 (4)灭菌 现代发酵工业绝大多数采用单一菌种发酵,培养基和发酵设备都 必须经过严格的灭菌,并进行无菌操作,一般采用高压蒸汽灭菌 法。
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2. 影响发酵的因素 (1)菌种 发酵是利用微生物来生产产品,因此菌种至关重要。现在 工业上用于生产青霉素的微生物主要是青霉菌,生产味精 的微生物是谷氨酸棒状杆菌,生产柠檬酸的微生物主要是 黑曲霉。这是因为每一种微生物的代谢特征不同,它们产 生特定产物的能力也不同。为了利用发酵生产所需的产 物,不是随便拿来一个菌种就行。直接从自然界分离到的 微生物不一定具有生产特定产物的能力,须在实验室里对 几百株、数千株微生物进行筛选。
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(6)分离、提纯产物:如果产品是菌体,可采用_过__滤__、沉 淀等方法;如果产品是_代__谢__产__物_,可采用提取、_分__离_和纯 化措施来获得产品。 [思维激活2] 利用酵母菌发酵生产酒精时,应如何控制氧气 条件? 提示 先通空气,后密封。
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(4)生物技术产业时代 现在人们可以将源于动物或植物,甚至源于人的基因转移到 诸如大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌等微生物中,获得具有特 殊生产能力的基因工程菌。由于基因表达的产物均为蛋白 质,因此在工业上利用基因工程菌大规模生产的产品,主要 是用于治疗各种疾病的药物,又称为基因工程药物(如人胰岛 素、人干扰素、人生长激素等,大约有40多种),同样也可以 用于不同目的的酶(比如用于将葡萄糖转化为高果糖糖浆的葡 萄糖异构酶,用于生产青霉素母核的青霉素酰化酶,用在洗 衣粉中的碱性蛋白酶等等)。除了利用基因工程开发新的产品 外,利用基因工程对传统发酵和现代发酵工业上使用的菌种 进行改造,也获得了巨大成功。
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热点考向示例 随堂达标检测(5)接种 将多次扩大培养后的菌种接入工业发酵罐中,菌种的体积与发酵 罐的体积比约为1∶10。 (6)发酵罐内发酵 发酵过程中,要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等, 以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分,以满足微生物 的营养需求。同时,要严格控制温度、pH、溶解氧等发酵条 件。这是因为环境条件的变化,不仅会影响微生物的生长繁殖, 而且会影响微生物代谢产物的形成。 (7)分离、提纯产物 将发酵液中的发酵产物进行分离纯化,是制取发酵产品不可缺少 的阶段。产品不同,分离提纯的方法也不同。如果发酵产品是微 生物细胞本身,可在发酵之后,采用过滤、沉淀等方法将菌体分 离,干燥即可得到产品。如果产品是代谢产物,可根据产物的性 质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。
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【巩固3】 发酵工程的第一重要工作是选择优良的单一纯种,
消灭杂菌,获得纯种的方法不包括
( )。
A.根据微生物对碳源需求的差别,使用含有不同碳源的
培养基
B.根据微生物需要生长因子的种类,在培养基中增减不
同的生长因子
C.根据微生物遗传组成的差异,在培养基中加入不同比
第1节 微生物发酵及其应用
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举例说出发酵与食品生产。
1.说出微生物发酵生产的基本过程。 2.举例说出微生物发酵与食品生产的关系。 3.参与有关微生物发酵的调查活动。 4.通过发酵工程发展的历史,体验科学、技术、社会三
者间的紧密联系和互动。
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这个时期,发酵技术原始,顶多是家庭小制作,技术进步 缓慢,完全是经验式的。在几千年的文明史中,人们只知 道这样做可以得到所需的东西,并不知道其中的原理。 (2)传统发酵工业时期 1857年法国微生物学家巴斯德通过实验证明了酒精发酵是 由活的酵母引起的。1897年德国的毕希纳进一步发现,即 使将酵母磨碎,仍然能使糖发酵形成酒精,他将这种具有 发酵能力的物质称为酶。从而人们才开始了解发酵现象的 本质。
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(4)温度对微生物生长的影响 温度主要是通过影响微生物细胞内生物大分子的活性来影响微生 物的生命活动。一方面,随着温度的升高,细胞内的酶反应速度 加快;另一方面,随着温度的进一步升高,生物活性物质(蛋白 质,核酸等)发生变性,细胞功能下降,甚至死亡。所以,每种微 生物都有最适生长温度。 (5)pH对微生物生长的影响 培养基的pH对微生物生长的影响主要是引起细胞膜电荷变化,以 及影响营养物离子化程度,从而影响微生物对营养物的吸收;pH 也会影响生物活性物质,如酶的活性。
【巩固2】 1857年,微生物学家发现了发酵原理后才逐步形成
了发酵工程,这位微生物学家是
( )。
A.巴斯德 B.拉马克 C.列文虎克
D.科赫
解析 1857年,微生物学家巴斯德通过实验证明酒精是由
活的酵母引起的,发现了发酵的原理。
答案 A
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发酵生产过程探秘
1.发酵 是利用_微__生__物__在适宜的条件下,将原料经过特定的_代__谢__途__径_ 转化为人类所需要的产物的过程。
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(2)纯种发酵与灭菌 现代发酵工业绝大多数采用纯种发酵,可以保证高产及生产过 程和产品质量的稳定。污染是发酵工业的大敌,它会使发酵失 败,造成巨大损失。因此,灭菌和无菌操作成为发酵工业的重 要环节。 (3)发酵培养基 现在大规模工业发酵产品的生产,多采用液体培养基进行深层 发酵。使用的培养基必须满足微生物细胞生长、繁殖的需要, 因为没有大量的细胞就不可能产生大量的产物;但是细胞的过 分生长会消耗大量的营养物,有时又会影响细胞的生产能力, 会使产物的产量和产率下降。使用的培养基还必须有利于微生 物大量合成产物。因此,培养基的组成十分关键。
2.原理 不同的微生物具有产生不同_代__谢__产__物__的能力。例如:谷氨酸 棒状杆菌发酵可以生产_味__精_,黄色短杆菌发酵可以生产_赖__氨__ _酸_。
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3. 发酵过程 (1)选育菌种:可采用自然界选种、_诱__变__育种、_基__因__工__程__ 育种等。 (2)配制培养基:根据微生物的营养需要提供_碳__源_、氮源、 _生__长__因__子_、无机盐和水。 (3)灭菌:培养基和发酵设备均需严格灭菌。 (4)扩大培养和接种:大规模生产中需要使_菌__种__达到一定 数量,将菌种接种到培养基上,接种时防止杂菌污染。 (5)发酵罐内发酵:要随时检测发酵进程,要及时满足菌种 的_营__养__需求,还要严格控制_温__度__、pH、_溶__解__氧__等发酵 条件。
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【巩固1】 19世纪初,德国一位科学家发明了微生物分离与纯 化技术,开创了人为控制微生物的时代。这位科学家是 ( )。 A.科赫 B.施莱登 C.施旺 D.达尔文 解析 1905年德国微生物学家科赫建立了微生物的培养技 术,故选A。 答案 A
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1.好氧微生物发酵生产的流程图及其分析说明
(1)选育菌种 根据微生物遗传变异的特点,人们在生产实践中已经试验 出一套行之有效的微生物育种方法。主要包括自然选育、 诱变育种、杂交育种、原生质体融合、基因工程等。 (2)扩大培养
生产用菌种 (或种子)
―接―入→种子培养罐
足够菌种
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从19世纪末到20世纪30年代,随着人们对微生物世界认识的不断 深入和发展,利用微生物生产的新产品不断出现,例如,酒精、 乳酸、面包酵母、丙酮、丁醇、柠檬酸、淀粉酶和蛋白酶等。这 些产品的生产,采用开放式的发酵方式,生产过程较为简单,对 生产设备要求不高,规模一般不大,因此被称为传统发酵工业。 (3)现代发酵工业时期 1928年,弗莱明发现青霉素能杀菌。青霉素的发现和工业化生 产,给人们带来巨大启迪。不久,链霉素、金霉素、土霉素等相 继问世,从而兴起了一个新的工业——抗生素工业。生产抗生素 的经验和设备很快被引用到其他发酵产品的生产上,极大地促进 了这些产业的迅速发展,从而形成了一个全新的产业——现代发 酵工业。
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