丫蕊花甾体皂苷YB16促进A549细胞凋亡及其机制研究

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中草番ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌＤｒｕｇｓ第４７卷第２３期２０１６年ｌ２月

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丫蕊花甾体皂苷ＹＢ１６促进Ａ５４９细胞凋亡及其机制研究
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｅｔｉｖｅＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆｓｔｅｒｏｉｄａｌｓａｐｏｎｉｎＹＢ１６ｏｆＹｐｓｉｌａｎｄｒａｔｈｉｂｅｔｉｃａｏｎｃｅｌｌａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆＡ５４９ｈｕｍａｎｌｕｎｇ
Ａ５４９细胞，给予不同浓度的ＹＢ１６干预，采用ＭＴＴ比色法检测Ａ５４９细胞增殖：荧光显微镜观察吖啶橙（ＡＯ）、５，５ｗ，６，６＇－四氯．１，１３，３＇－四甲基咪唑并羰花青碘化物（ＪＣ．１）染色的细胞荧光变化；流式细胞术检测碘化丙啶（ＰＩ）单染、ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ／ＰＩ双染、细胞线粒体膜电位（ＪＣ．１染色）的变化；采用２，７．二氯荧光黄双乙酸盐（ＤＣＦＨ．ＤＡ）法检测细胞活性氧（ＲＯＳ）量的变化，免疫印迹法（Ｗｅｓｔｅｎｒｂｌｏｔｔｉｎｇ）检测ＹＢ１６对细胞凋亡相关蛋白表达的影响。结果丫蕊花甾体皂苷ＹＢ１６显著抑制Ａ５４９细胞的生长（Ｐ＜０．０５），呈量效关系；随着药物浓度的增加，与对照组相比，细胞形态有显著变化；不同浓
ＳｔｕｄｙｏｎｐｒｏｍｏｔｉｏｎｏｆＡ５４９ｃｅｌｌｓａｐｏｐｔｏｓｉｓｂｙｓｔｅｒｏｉｄｓａｐｏｎｉｎＹＢ１６ｏｆＹｐｓｉｌａｎｄｒａ
ｔｈｉｂｅａｃａａｎｄｉｔｓｍｅｃｈａｎｉｓｍ
赵珍东一，夏黎１，２杨炳伟１，２邓晓迎１，２段
５１０５２０５１０５２０
体外培养
启，
１．广东食品药品职业学院，广东广州
２．南药资源保护与利用工程技术开发中心，广东广州
摘要：目的
观察丫蕊花甾体皂苷ＹＢ１６对人肺癌细胞Ａ５４９凋亡的影响，并探讨其促凋亡的作用机制。方法
ＺＨＡＯＺｈｅｎ — ｄｏｎｇ一，ＸＩＡＬｉ一，ＹＡＮＧＢｉｎｇ－ｗｅｉ一，ＤＥＮＧＸｉａｏ — ｙｉｎｇ一，ＤＵＡＮＱｉ ’
１．ＧｕａｎｇｄｏｎｇＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＶｏｃａｔｉｏｎａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０５２０，Ｃｈｉｎａ２．ＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＣｅｎｔｅｒｆｏｒＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎａｎｄＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＨｅｒｂａｌＭｅｄｉｃｉｎａｌＲｅｓｏｕｒｃｅｓｉｎＳｏｕｔｈＣｈｉｎａ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０５２０，Ｃｈｉｎａ
度ＹＢ１６作用Ａ５４９细胞后，细胞凋亡率上升（Ｐ＜０．０５）；细胞线粒体膜电位下降明显；细胞内ＲＯＳ水平上升，具有显著性差异（尸＜０．０５）；ＹＢＩ６作用Ａ５４９细胞２４ｈ后，抗细胞凋亡蛋白Ｂｃ１．２表达下降，促细胞凋亡蛋白Ｂａｘ的表达增加，激活型半胱氨酸蛋白酶．３（ｃｌｅａｖｅｄ．Ｃａｓｐａｓｅ．３）表达增加（尸＜０．０５）。结论丫蕊花甾体皂苷ＹＢ１６能抑制细胞增殖，降低细胞线粒体的膜电位，提升细胞ＲＯＳ水平，促进细胞凋亡，具有良好的抗肿瘤活性。关键词：丫蕊花甾体皂苷ＹＢ１６；细胞凋亡；肺癌；Ａ５４９细胞；细胞增殖中图分类号：Ｒ２８５．５文献标志码：Ａ文章编号：０２５３．２６７０（２０１６）２３．４２１１－０７ＤｏＩ：１０．７５０１￣．ｉｓｓｎ．０２５３－２６７０．２０１６．２３．０１６
ｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ。ｎｄａｅｘｐｌｏｒｅｈｅｔｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＣｅｌｌｓｗｅｒｅｃｕｌｔｕｒｅｄｉｎｖｉｔｒｏｎｄａｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｄｉｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｒｔａｔｉｏｎｏｆＹＢ１６；ＴｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＡ５４９ｃｅｌｌｓｗａｓｅｘａｍｉｎｅｄｂｙＭＴＴｍｅｔｈｏｄ；ＣｅｌｌｓｌｆｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｃｈｎｇａｅｓｏｆＡ５４９ｗｅｒｅｅｘａｍｉｎｅｄｂｙａｃｉｄｒｉｎｅ