CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
CTAB(⼗六烷基三甲基溴化铵)
⼗六烷基三甲基溴化铵
别称西曲溴铵、溴棕三甲基铵、溴烷铵,鲸熔三甲基溴化铵;CTAB;CTMAB;HTAB;CTABr;
分类季铵盐
分⼦式 C16H33(CH3)3NBr
分⼦量 364.446
熔点: 250-237℃
⽔溶性 13 g/L (20°C)
纯度(含量) >99%
性质
本品呈⽩⾊或浅黄⾊结晶体⾄粉末状,易溶于异丙醇,可溶于⽔,震荡时产⽣⼤量泡沫,能与阳离⼦、⾮离⼦、两性表⾯活性剂有良好的配伍性。
具有优良的渗透、柔化、乳化、抗静电、⽣物降解性及杀菌等性能。
本品化学稳定性好,耐热、耐光、耐压、耐强酸强碱。
⽤途
本品为天然、合成橡胶、硅油和沥青乳化剂;合成纤维、天然纤维和玻璃纤维的抗静电剂、柔软剂;护发素的调理剂;相转移催化剂;乳液起泡剂、表⾯活性剂,分析试剂,涤纶真丝化剂,⽪⾰加脂剂,它还⽤于助焊剂、焊锡膏⽣产⾥起表⾯活性剂作⽤,活性强,对亮点、虚焊、焊电饱满都有⼀定作⽤。
CTAB法提取DNA
试剂:
1)2×CTAB 提取液(PH 8.0):2% CTAB,1.4MNacl,0.02MEDTA,0.1MTris-cl,0.2%巯基⼄醇。
即称取CTAB 2 g加蒸馏⽔40ml,加1M Tris-cl(PH8.0)10ml,0.5M EDTA(PH 8.0)4ml和5M NaCl 28ml,待CTAB溶解后⽤蒸馏⽔定容到
100ml(提取前加⼊2%的巯基⼄醇,100ml加0.2ml巯基⼄醇)
2)1M Tris-cl(PH 8.0)100 ml:12.11g Tris碱;ddH2O ,80ml;HCl,4.9 ml三者混匀充分溶解后,滴加浓盐酸调PH⾄
8.0,定容⾄100ml
3)0.5M EDTA(PH 8.0) 100ml:在80ml⽔中加⼊18.01g EDTANa2.2H2O搅拌溶解,⽤NaOH调PH⾄8.0(约2gNaOH颗粒),定容⾄100ml
4)5M NaCl 100ml:称取29.22g NaCl ,⽤ddH2O定容到100ml
5)3M NaAc 10ml:称取2.46g NaAc,⽤ddH2O定容到10ml
操作步骤:
1、称取1.0g幼嫩的叶⽚,在研钵中加⼊液氮预冷,将叶⽚放到液氮中研磨均匀,直⾄全部研磨⾄粉末,转⼊1.5ml离⼼管中,加⼊600 ul 65℃预热的CTAB溶液(⽤前加⼊2%的巯基⼄醇)
2、将装有CTAB和样品的EP管放⼊65℃⽔浴,约1h
3、冷却后,加⼊600ul 的酚:氯仿:异戊醇(25:24:1=300:288:12),混匀,12000rpm,离⼼15min
4、吸上清,装⼊⼀新的EP管
5、加⼊600ul 氯仿:异戊醇(24:1=576:24),12000rpm。
离⼼15min
6、吸上清,转⼊⼀新的离⼼管中,加⼊1/3体积的NaAc(3mol/l)
7、加⼊1ml-20℃预冷的⽆⽔⼄醇,混匀后置于-20℃(-80℃,30min)3-4h
8、 12000rpm,10min弃上清
9、向离⼼管中加⼊75%的⼄醇洗涤2-3次,置于吸⽔纸上倒置晾⼲
10、加⼊ddH2O(10-20ul)溶解
药品:Tirs碱、浓盐酸、EDTANa2.2H2O、NaOH、NaCl、CTAB、酚、氯仿、异戊醇、⽆⽔⼄醇、NaAc、液氮、巯基⼄醇研钵、恒温⽔浴、离⼼机、离⼼管。