一种马来酸氯苯那敏注射液有关物质的高效液相检测方法[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202011426282.3
(22)申请日 2020.12.09
(71)申请人 南京斯泰尔医药科技有限公司
地址 210000 江苏省南京市栖霞区仙林街
道纬地路9号29幢111、113室
(72)发明人 唐晶晶　
(51)Int.Cl.
G01N 30/02(2006.01)
G01N 30/06(2006.01)
G01N 30/34(2006.01)
(54)发明名称
一种马来酸氯苯那敏注射液有关物质的高
效液相检测方法
(57)摘要
本发明公开了一种马来酸氯苯那敏注射液
有关物质的检测方法，它包括以下步骤：分析溶
液的制备、色谱条件、上机检测。

目前关于马来酸
氯苯那敏注射液有关物质研究的检测方法不能
有效分离杂质。

本方法能够有效的测定马来酸氯
苯那敏中各种相关杂质存在，能实现色谱图中氯
苯那敏峰与杂质峰的分离。

该检测方法具有高准
确度、高灵敏度、节约成本等优点，能确保对产品
质量的有效控制。

权利要求书1页 说明书4页CN 112526025 A 2021.03.19
C N 112526025
A
1.一种对马来酸氯苯那敏注射液有关物质进行检测的高效液相色谱法，其特征在于，包括下列步骤：配置分析溶液；色谱条件；上机检测。

2.根据权利要求1所述的高效液相检测方法，其特征在于，步骤①配置样品分析溶液具体方法：用流动相（磷酸盐溶液‑乙腈）溶解样品，制成分析溶液；步骤②色谱条件中，设定高效液相流速为0.9‑1.3ml/min；柱温为25‑40℃，采用检测波长为200‑260nm紫外检测器。

3.根据权利要求1所述的色谱条件，其特征在于，所述色谱柱选自十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱。

4.根据权利要求3所述的高效液相检测方法，其特征在于，所述色谱柱的规格为：柱长为150‑250mm，色谱柱内径为1‑10mm，粒径为1‑10µm。

5.根据权利要求4所述的高效液相检测方法，其特征在于，所述色谱柱的规格为：柱长为150mm，色谱柱内径4.6mm，粒径为5µm。

6.根据权利要求1所述的色谱条件，其特征在于，所述磷酸盐溶液为磷酸二氢铵溶液，其浓度为50mM、pH 3.0。

7.根据权利要求1所述的高效液相检测方法，其特征在于，所述磷酸盐溶液与乙腈的比例按0、3‑9、10‑21、24‑32、35‑44min时间点，有机相体积比为10‑26%、10‑26%、18‑36%、21‑34%、40‑45%，进行梯度洗脱。

8.根据权利要求1所述的高效液相检测方法，其特征在于，所述样品为马来酸氯苯那敏或其相关制剂。

9.权利要求1‑8任一项方法的用途，其特征在于，所述方法用于分离样品中氯苯那敏、杂质A、杂质B、杂质C、杂质D。

权　利　要　求　书1/1页CN 112526025 A
一种马来酸氯苯那敏注射液有关物质的高效液相检测方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种马来酸氯苯那敏有关物质注射液的高效液相色谱检测方法，属于分析技术领域。

背景技术
[0002]药品研发和评价所遵循的一个基本原则是保证药品安全有效；保证药品安全有效的基础是药品质量的稳定可控性，因此杂质研究是药品研究的一个重要方面。

[0003]马来酸氯苯那敏为白色结晶型粉末，是一种抗组胺类药，主要用于过敏性鼻炎、荨麻疹及过敏性皮肤炎等症状，有良好的抗过敏作用。

在药物合成或制剂过程中，容易导致药物的有关物质发生变化，因此对于有关物质的控制过程非常重要。

[0004]马来酸氯苯那敏(C
16H
19
Cl N
2
• C
4
H
4
O
4
)，为2‑[对‑氯‑α‑[2‑(二甲氨基）乙基]苯
基]吡啶马来酸盐，其结构式如下：
马来酸氯苯那敏有关物质如下：杂质A、杂质B、杂质C和杂质D，上述杂质见表1。

[0005]表1 马来酸氯苯那敏杂质名称及结构
序列名称结构
1杂质A
2杂质B
3杂质C
4杂质D
有关马来酸氯苯那敏注射液有关物质测定方法，杂质分离效果较差。

本试验建立高效液相色谱法测定马来酸氯苯那敏注射液的有关物质，使各杂质达到有效分离。

发明内容
[0006]本发明的目的在于提供一种高效液相色谱检测马来酸氯苯那敏注射液有关物质的方法，为有效检测马来酸氯苯那敏注射液的有关物质，通过调整洗脱梯度、色谱柱长度等色谱条件，解决氯苯那敏峰与各杂质峰的分离问题，可以较好的控制药物质量问题，该方法具有高准确度、高灵敏度等优点，且操作简便、节约成本。

[0007]本发明的马来酸氯苯那敏注射液有关物质高效液相的检测方法，包括以下步骤：
，以酸或磷酸盐溶配置分析溶液；色谱条件：色谱柱为Agilent ZORBAX SB‑C
18
液为流动相，所述的有机相为乙腈，所述的洗脱方式采用梯度洗脱；上机检测：取步骤
制成的分析溶液10μl注入高效液相色谱仪，进行色谱分析，并记录色谱图。

[0008]在一些实施案例中，所述色谱柱规格为柱长为150‑250mm，色谱柱内径为1‑10mm，
（150mm×4.6mm,5µm）的十八烷基硅烷键合硅粒径为1‑10µm。

优选为Agilent ZORBAX SB‑C
18
胶色谱柱。

[0009]在一些实施例中，所述样品为氯苯那敏或其相关制剂。

[0010]上述方法分析可用于分离样品中氯苯那敏峰和各杂质峰。

[0011]本发明能够有效分离氯苯那敏溶液中相关杂质，实现了谱图中氯苯那敏峰与各杂质峰的分离。

各个杂质的分离度均大于1.5，理论塔板数均大于2500。

本技术发明一种检测马来酸氯苯那敏有关物质方法，该检测方法能将各杂质进行有效分离，专属性强，灵敏度高，操作简便。

具体实施方式
[0012]下面结合具体的实验案例和实验结果，对本发明作进一步说明。

这些实施例用于说明本发明，但限制本发明的范围。

基于本发明上述内容实现的技术均属于本发明的范围。

[0013]实施例一
（1）仪器与色谱条件
高效液相色谱仪：Agilent 1260 Infinity高效液相色谱系统；
(4.6mm×150mm，5μm）
色谱柱：Agilent ZORBAX SB‑C
18
流动相A相为50mM、pH 3.0磷酸盐溶液，B相为乙腈，磷酸盐溶液与乙腈的比例按0、5、20、33、44min时间点，有机相体积比为10%、10%、31%、40%、40%，进行梯度洗脱，流速0.9ml/ min，柱温30℃，检测波长225nm。

[0014]（2）实验步骤
分别取氯苯那敏、杂质A对照品、杂质B对照品、杂质C对照品、杂质D对照品适量，分
别加流动相溶解并稀释制成每1ml各含0.1mg的样品，按照上述色谱条件，分别量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，确定各色谱峰位置。

再取上述各溶液适量，用流动相稀释制成混合溶液，取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。

[0015]实施例二
（1）仪器与色谱条件
高效液相色谱仪：Agilent 1260 Infinity高效液相色谱系统；
(4.6mm×250mm，5μm）
色谱柱：Agilent ZORBAX SB‑C
18
流动相A相为50mM、pH 3.0磷酸盐溶液，B相为乙腈，磷酸盐溶液与乙腈的比例按0、5、12、26、44min时间点，有机相体积比为10%、10%、31%、31%、45%，进行梯度洗脱，流速1.1ml/ min，柱温40℃，检测波长225nm。

[0016]（2）实验步骤
分别取氯苯那敏、杂质A对照品、杂质B对照品、杂质C对照品、杂质D对照品适量，分别加流动相溶解并稀释制成每1ml各含0.1mg的样品，按照上述色谱条件，分别量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，确定各色谱峰位置。

再取上述各溶液适量，用流动相稀释制成混合溶液，取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。

[0017]实施例三
（1）仪器与色谱条件
高效液相色谱仪：Agilent 1260 Infinity高效液相色谱系统；
(4.6mm×250mm，5μm）
色谱柱：Agilent ZORBAX SB‑C
18
流动相A相为50mM、pH 3.0磷酸盐溶液，B相为乙腈，磷酸盐溶液与乙腈的比例按0、5、12、26、44min时间点，有机相体积比为15%、15%、31%、31%、45%，进行梯度洗脱，流速1.3ml/ min，柱温30℃，检测波长225nm。

[0018]（2）实验步骤
分别取氯苯那敏、杂质A对照品、杂质B对照品、杂质C对照品、杂质D对照品适量，分别加流动相溶解并稀释制成每1ml各含0. 1mg的样品，按照上述色谱条件，分别量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，确定各色谱峰位置。

再取上述各溶液适量，用流动相稀释制成混合溶液，取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。

[0019]实施例四
（1）仪器与色谱条件
高效液相色谱仪：Agilent 1260 Infinity高效液相色谱系统；
色谱柱：Agilent ZORBAX SB‑C
(4.6mm×250mm，5μm）
18
流动相A相为50mM、pH 3.0磷酸盐溶液，B相为乙腈，磷酸盐溶液与乙腈的比例按0、4、12、26、44min时间点，有机相体积比为20%、20%、31%、31%、40%，进行梯度洗脱，流速1.2ml/ min，柱温40℃，检测波长225nm。

[0020]（2）实验步骤
分别取氯苯那敏、杂质A对照品、杂质B对照品、杂质C对照品、杂质D对照品适量，分别加流动相溶解并稀释制成每1ml各含0. 1mg的样品，按照上述色谱条件，分别量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，确定各色谱峰位置。

再取上述各溶液适量，用流动相稀释制成混合溶液，取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。

[0021]实施例五
（1）仪器与色谱条件
高效液相色谱仪：Agilent 1260 Infinity高效液相色谱系统；
(4.6mm×150mm，5μm）
色谱柱：Agilent ZORBAX SB‑C
18
流动相A相为50mM、pH 3.0磷酸盐溶液，B相为乙腈，磷酸盐溶液与乙腈的比例按0、4、12、26、40min时间点，有机相体积比为10%、10%、31%、31%、40%，进行梯度洗脱，流速1.1ml/ min，柱温25℃，检测波长225nm。

[0022]（2）实验步骤
分别取氯苯那敏、杂质A对照品、杂质B对照品、杂质C对照品、杂质D对照品适量，分别加流动相溶解并稀释制成每1ml各含0. 1mg的样品，按照上述色谱条件，分别量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，确定各色谱峰位置。

再取上述各溶液适量，用流动相稀释制成混合溶液，取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。

[0023]试验中，马来酸、杂质A、杂质B、杂质C、氯苯那敏、杂质D依次出峰，各实验案例结果见表2
表2实施例1‑5杂质分离度及理论塔板数情况表。