HBV感染患者病毒载量对细胞因子、外周血T淋巴细胞及肝功能的影响分析

doi：10. 396./j.issn.1005 -0264. 2018.04. 002
HBV感染患者病毒载量对细胞因子、外周血T淋巴细胞 及肝功能的影响分析
黄春燕1江海强1张秀英2严志涵3
1.江阴市中医院检验科（江苏江阴，214400)
2.常州市第三人民医院检验科
3.无锡市第五人民医院
摘要目的:探讨H B V感染患者病毒栽量对细胞因子、外周血T淋巴细胞及肝功能的影响。

方法：选取2015年3月至2017
年3月我院收治的H B V感染患者120例，分别使用酶联免疫吸附法、流式细胞术和酶偶联法进行检测，依据血清H B V D N A的拷贝
数可分为阴性组、低拷贝组、中拷贝组以及高拷贝组。

比较4组患者细胞因子、外周血T淋巴细胞、肝功能情况。

结果：高拷贝组几-2、I L-6、T N F-!水平均高于阴性组、低拷贝组和中拷贝组，差异有统计学意义（！<0.05)。

四组C D4+、C D8 +水平相比，差异无统计学
意义（！>0.05)。

高拷贝组患者A L T、A S T、G G T水平均高于阴性组、低拷贝组和中拷贝组，差异有统计学意义（！<0.05)。

依据
P e a r s o n检验，H B V感染患者A L T、G G T、A S T水平与I L-2、I L-6、T N F-!水平呈显著相关性（！<0.05)。

结论:H B V感染会引起患者肝 功能损害，随病毒栽量提高，细胞因子与肝功能指标均上升，但对外周血T淋巴细胞分布影响较小。

关键词H B V感染；病毒栽量；细胞因子；外周血T淋巴细胞;肝功能
Effect of viral loadon cytokine，peripheral blood Tlymphocyte and liv HBV infected patients
Abstract Objective：T o investigate the effects of viral load o n cytokines，peripheral blood T lymphocyt with HBVinfe c t i o n.Methods:120 cases of patients with infection f r o m M a r c h 2015 to M a r c h 2017 in our hospital H B V，using enzyme-linked i m m u n o s o r b e n t assay，flow cytometry a n d e n z y m e coupling m e t h o d，o n the basis of the copy n u m b e r of s e r u m H B V D N A c a n b e divided into negative g r o u p，low cop y g r o u p，c opy group a n d high cop y group. T h e cytokines，peripheral blood T lymphocyte a groups were compared. Results:T h e levels of I L-2，IL-6 a n d TNF-ct in the high copy group wer e higher tha l o w c o p y group a n d the m e d i u m copy g r o u p，the difference w a s statistically significant (!<0. 05). T h e differencc b etween the four groups of
C D4+ a n d C D8 + levels w a s not statistically significant (! >0.05).T h e levels of A L T，A S T a n d G G T in the high copy group were higher than those in the negative g r o u p，the low c opy group a n d the m e d i u m copy g r o u p，the diference w a s statistically significant (! <0.05).A c­cording to the Pearson test，the levels of A L T，G G T a n d A S T in patients witli H B V infection wer e significantly correlated witli the levels of II,- 2，IL-O) a n d TNF-ct (! <0.05)
. Conclusion：H B V infection m a y cause liver d a m a g e in patients. W i t h the increase of viral load，cytokines
a n d liver function indexes all increased，but the distribution of T lymphocytes in peripheral blood w a s less affected.
Keywords:H B V i n f e c t i o n$viral load $cytokine $peripheral blood T lymphocyte $liver function
乙型肝炎病毒简称HBV，是一种DNA病毒[1〜2(。

HBV感染者随病程发展，会逐渐发展为慢性乙型肝
炎、肝硬化甚至肝癌，对人们生命健康带来严重威
胁[3]。

据资料显示'4〜5(，HBV本身对肝细胞无直接伤 害，但在感染过程中，患者机体免疫系统将对HBV形成一系列免疫应答反应，从而对肝细胞造成损害，其中 以T淋巴细胞为主的细胞免疫为主要作用。

为探讨
HBV感染患者病毒载量对细胞因子、外周血T淋巴细 胞及肝功能的影响效果，本文选取120例HBV感染患 者，比较其细胞因子、外周血T淋巴细胞以及肝功能情
!基金项目：南京医科大学科技发展基金项目（No.2013NJMu 197)
况。

进一步HBV感染者的临床发病机制。

1资料与方法
1.1 一般资料选取2015年3月至2017年3月我院 收治的HBV感染患者120例，其中男69例、女51例; 年龄17 ~70岁，平均年龄(51. 31 ±11.63)岁；病程6 ~ 18月，平均病程（1
2. 74 ±4.60)月0依据血清HBV DNA的拷贝数分为阴性组(0 ~ 103c〇Pies/m l)、低拷贝 组（103~105copies/ml)、中拷贝组（105~107copies/ ml)、高拷贝组（#107copie/ml)。

4组患者性别、年 龄、病程比较，差异无统计学意义(！>0.05)。

见表1。

表1四组患者一般资料比较
组别阴性组低拷贝组中拷贝组高拷贝组//F (n u23)(n:34)(n:31)(n:32)
性别(例）0.2460.620男12201719
女11141413
平均年龄51.63 ±54.89 ±56.51 ±52.18±
1.2800.206
(岁）9.889.1210.238.99
平均病程10.69±12.11 ±13(8±15.73 ±
1.2250.226
(月） 3.57 4.36 4.50 5.21
1.2研究方法采取实时荧光定量P C R检测仪（型号7500)，对所有患者H B V D N A进行检测。

采取酶偶联法对肝功酶学进 行检测，包括谷丙转氨酶（A L T)、谷氨酸转移酶（G G T)以及谷草 转氨酶(A S T)，使用全自动生化分析仪和相关配套试剂作为检 测仪器（贝克曼库尔特A U2700全自动生化分析系统）。

使用流 式细胞术对T淋巴细胞表面标志物检测，检测指标包括C D4k、C D8k，选择流式细胞仪和相关抗体检测（B D F A C S C a n t o流式细 胞仪）。

使用酶联免疫吸附方法对白细胞介素O(IL-2 )、白细胞 介素O(I L O)以及肿瘤坏死因子o(T N F o)检测，使用由美国 R D公司制造的试剂盒实施检测。

以上所有检测操作，严格遵 循相关说明书操作指示。

1.3观察指标检测四组细胞因子水平，包括I L-2、I L-6以及 T N F o。

B淋巴细胞表面标志，包括C D4+和C D8+。

肝功酶学 指标，包括A L T、A S T以及G G T。

1.4统计学方法使用S P S S 18.0作为数据分析软件，计量资 料用（A±:表示，组间比较用《检验，！<0.05为差异有统计学 意义。

2结果
2.1四组患者细胞因子情况见表2。

表2四组患者细胞因子情况比较（*±:ng/L)组别n I L-2IL-6T N F-
阴性组238(4 ±15310(9 ±2(011(3 ±4(7
低拷贝组341121 ±2(215(3 ±3(417(8 ±5(3
中拷贝组3114(5 ±2(921(5 ±4(822(0 ±6.24
高拷贝组3219(8 ±3(7*28(5 ±5(9*30(8 ±7(9*与阴性组，低拷贝组，中拷贝组比较，*!<〇.052.24组患者外周血T淋巴细胞数情况详见表3
表34组外周血T淋巴细胞数比较(A± :% )组别n C D4+C D8+
阴性组2338(9 ±7(229(5 ±5(1
低拷贝组3436(3 ±6(828.66 ±5.19
中拷贝组3135(7 ±6(027(9 ±4(4
高拷贝组3234(9 ±5(527(1 ±4(3与4组C D4k、C D8k水平相比，差异无统计学意义,P> 0. 05
2.34组患者肝功能情况见表4。

表4四组肝功能指标对比（A±:U/L)组别n A L T A S T G G T
阴性组2331.67 ±11.2319.66 ±8.7245.99 ±14.36低拷贝组3462.39 ±19.3748. 75 ±13.6987.51 ±22.69中拷贝组31 96.51 ±31.5086.90 ±21.78154. 17 ±41.93高拷贝组32231.63 ±69.28*196.40 ±52.37'224.78 ±62.84*与阴性组，低拷贝组，中拷贝组比较，0.05
2.4肝功能与细胞因子相关性依据P e a r/n检验，H B V感染 患者A L T、G G T、A S T水平与IL-2、I L O、T N F〇水平呈显著相关 性（！ <0.05)。

详见表5。

表5细胞因子与肝功酶学指标相关性分析
组别IL-2IL-6T N F-
A L T0(660(8640(11
A S T0(070(8420(51
G G T0(460(7730.745
3讨论
全世界约有4亿人感染H B V，且感染人数在逐年上升[64]。

在我国，大于90%的慢性肝衰竭发生原因与感染H B V 有关，是致使慢性乙肝高死亡率的主要原因'8(。

而无论H B V 感染患者病毒拷贝数高低，使用核苷类药物均可有效降低病死率，改善预后[9〜10]。

当患者肝细胞出现损害时，会使细胞内的酶释放至血液 中，引起血清酶含量上升，通过测定血清酶含量可在一定程度 上说明肝功能损坏情况[11〜12]。

H B V感染患者检测H B V D&A 指标，发现约45.3%的患者血清为阳性，H B V D N A阳性组与阴 性组相比，其A L T、A S T水平均明显上升，且指标水平随病毒复 制数量上升而上升[13]。

在本研究中，四组A L T、A S T和G G T水 平相比，差异显著（！ <0.05)，其中以阴性组3个指标水平最 低，以高拷贝组3个指标水平最高，并随着H B V D&A拷贝数不 断增加，患者血清中A S T、A L T、G G T水平也会随之上升，说明随 病毒载量提高，肝功能水平将随之上升。

据资料显示[14〜15]，患者感染H B V后，病情发展、转归不仅 局限于H B V的拷贝数量，同时也受到机体免疫功能影响，其中
主要以T淋巴细胞的细胞免疫为主。

C D4+ T淋巴细胞是一种
辅助性T细胞，其主要作用为激活并杀伤细胞，C D8+ T细胞是
一种具有抑制性和杀伤性的T细胞，主要作用在细胞清理方面。

在正常情况下，机体C D4+与C D8+水平保持一定比例，共
同维持机体免疫能力稳态。

当感染H B V后，毒性T细胞会迅速
增殖分化[16]。

在本研究中，四组C D4+*C D8+水平相比，差异不
明显（！>0.05)。

据鲁晓娟等人'10(研究表明，H B V D N A阳性
和阴性患者C D4k细胞比例会降低，而C D8k T细胞比例会上 升，最终C D4+ /C D8+比值会降低，免疫功能下降。

而H B V D&A
阳性患者与H B V D N A阳性患者相比，C D4+与C D8+比例相比
差异较小，说明H B V复制对T淋巴细胞水平改变影响小，与本
研究结果一致。

随着对细胞因子研究的不断深人，其在免疫应答调节中的
作用受到越来越多的人关注。

I L-2是一种活化T细胞产生的细
胞因子，具有多向性作用，刺激T细胞增殖、生长和分化，起诱
导细胞毒作用。

I L-6是前炎症细胞因子，由淋巴细胞、纤维细 胞、淋巴细胞、单核-巨噬细胞等合成，感染发生后，可促进产生
抗体，合成急性期反应蛋白。

同时，I L O可促进T细胞表面IL-2
受体表达，增强I L-2作用。

T N F o是由一种由单核-巨噬细胞
分泌产生的细胞因子，与机体炎症反应相关，具体多种生物活 性，促进胶原合成，刺激肝星状细胞开始增殖，从而促进释放大
量细胞因子[18]。

T N F o刺激I L O分泌，刺激中性粒细胞聚集与
分化，引发凝血功能障碍、血小板活化、肾小管坏死、肝纤维化，因此细胞因子水平可反应机体肝组织损伤情况。

在本研究中，四组患者I L-2、I L O和T&F〇水平相比，差异显著（！ <0. 05)，且高拷贝组水平最高，阴性组水平最低，说明随病毒载量提高，细胞因子水平将随之上升。

综上所述，H B V感染会引起患者肝功能损害，随病毒载量
提高，细胞因子与肝功能指标均明显上升，但对外周血T淋巴
细胞分布影响较小。

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(修回日期:2017 - 10 - 11 编辑：肖明中）。