食品中细菌总数的测定
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菌落数在100以内时,按其实有数பைடு நூலகம்告,大于100时, 采用二位有效数字,在二位有效数字后面的数值,以四舍 五入方法计算。为了缩短数字后面的零数,也可用10的指 数来表示。
思考题及实验作业
选取菌落数在30~300之间的平板作为菌落总数测定 标准。一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数, 其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应 以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状 菌落不到平板的一半,而其余的一半中菌落分布又很均匀, 即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链 状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链, 可视为一个菌落数;如果有不同来源的几条链,则应将每 条链作为一个菌落计。
若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度 最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
若所有稀释度均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀 释倍数报告之。
若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间,其 中一部分大于300或小于30时,则以最接近30或300的平 均菌落数乘以稀释倍数报告之。 ③菌落数的报告
固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均质器中以
8000r/min~100000r/min 的 速 度 处 理 1min , 做 成 1 : 10 的 均匀稀释液。
(2)用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁徐徐 注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释的试管内(注意吸 管尖端不要触及管内稀释液,下同),振摇试管混合均 匀,做成1:100的稀释液。 (3)另取1ml的灭菌吸管,按上项操作顺序作10倍递增 稀释液,如此每递增稀释一次,即换用1支1ml灭菌吸管。
(6)等琼脂凝固后,翻转平板,置(36±1)0C恒温箱 内培养(48±2)h取出,计算平板内菌落数目乘以倍数, 即得1g(1mL)样品所含菌落总数。
3、菌落计算方法 (1)菌落计数方法
做平板菌落计数时,可用肉眼观查,必要时用放大镜
检查,以防遗漏。在记下各平板的菌落数后,求出同稀释 度的各平板平均菌落总数。 (2)菌落计数的报告 ①平板菌落数的选择
食品中细菌总数的 测定
三、实验方法 1、检验程序 菌落总数检验程序:
检样→做成几个适当倍数的稀释液→选择2-3个适宜稀释度 各以1ml之量分别入灭菌平皿内→每皿内加入460C适量营养 琼脂→菌落数→报告
2、检样稀释及培养 (1)以无菌操作,将检样25g(或25ml)剪碎以后,放 于含有225ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内 (瓶内预先置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充 分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。
②稀释度的选择 应选择平均菌落数在30~300之间的稀释度,乘以稀
释倍数报告之。若有两上稀释度,其生长的菌落数均在 30~300之间,则视两者之比如何来决定。若其比值小于 或等于2,应报告其平均数;若大于2则报告其中较小的数 字。
若所有稀释度平均菌落数均大于300,则应按稀释度 最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
(4)根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计, 选择2~3个适宜稀释度,分别在作10倍递增稀释的同时, 即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内,每 个稀释度作两个平皿。
(5)稀释液移入平皿后,应及时将凉至460C营养琼脂培 养基[可放置在((46±1)0C)水浴锅内保温]注入平皿 15ml~20mL,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培 养基倾入加有1ml稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空 白对照。
思考题及实验作业
选取菌落数在30~300之间的平板作为菌落总数测定 标准。一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数, 其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应 以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状 菌落不到平板的一半,而其余的一半中菌落分布又很均匀, 即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链 状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链, 可视为一个菌落数;如果有不同来源的几条链,则应将每 条链作为一个菌落计。
若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度 最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
若所有稀释度均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀 释倍数报告之。
若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间,其 中一部分大于300或小于30时,则以最接近30或300的平 均菌落数乘以稀释倍数报告之。 ③菌落数的报告
固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均质器中以
8000r/min~100000r/min 的 速 度 处 理 1min , 做 成 1 : 10 的 均匀稀释液。
(2)用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁徐徐 注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释的试管内(注意吸 管尖端不要触及管内稀释液,下同),振摇试管混合均 匀,做成1:100的稀释液。 (3)另取1ml的灭菌吸管,按上项操作顺序作10倍递增 稀释液,如此每递增稀释一次,即换用1支1ml灭菌吸管。
(6)等琼脂凝固后,翻转平板,置(36±1)0C恒温箱 内培养(48±2)h取出,计算平板内菌落数目乘以倍数, 即得1g(1mL)样品所含菌落总数。
3、菌落计算方法 (1)菌落计数方法
做平板菌落计数时,可用肉眼观查,必要时用放大镜
检查,以防遗漏。在记下各平板的菌落数后,求出同稀释 度的各平板平均菌落总数。 (2)菌落计数的报告 ①平板菌落数的选择
食品中细菌总数的 测定
三、实验方法 1、检验程序 菌落总数检验程序:
检样→做成几个适当倍数的稀释液→选择2-3个适宜稀释度 各以1ml之量分别入灭菌平皿内→每皿内加入460C适量营养 琼脂→菌落数→报告
2、检样稀释及培养 (1)以无菌操作,将检样25g(或25ml)剪碎以后,放 于含有225ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内 (瓶内预先置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充 分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。
②稀释度的选择 应选择平均菌落数在30~300之间的稀释度,乘以稀
释倍数报告之。若有两上稀释度,其生长的菌落数均在 30~300之间,则视两者之比如何来决定。若其比值小于 或等于2,应报告其平均数;若大于2则报告其中较小的数 字。
若所有稀释度平均菌落数均大于300,则应按稀释度 最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
(4)根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计, 选择2~3个适宜稀释度,分别在作10倍递增稀释的同时, 即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内,每 个稀释度作两个平皿。
(5)稀释液移入平皿后,应及时将凉至460C营养琼脂培 养基[可放置在((46±1)0C)水浴锅内保温]注入平皿 15ml~20mL,并转动平皿使混合均匀,同时将营养琼脂培 养基倾入加有1ml稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空 白对照。