天津市天津中学2023-2024学年高三第五次模拟考试生物试卷含解析

天津市天津中学2023-2024学年高三第五次模拟考试生物试卷
考生须知：
1．全卷分选择题和非选择题两部分，全部在答题纸上作答。

选择题必须用2B铅笔填涂；非选择题的答案必须用黑色字迹的钢笔或答字笔写在“答题纸”相应位置上。

2．请用黑色字迹的钢笔或答字笔在“答题纸”上先填写姓名和准考证号。

3．保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，在草稿纸、试题卷上答题无效。

一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。

每小题只有一个选项符合题目要求）
1．某研究小组进行某植物的栽培试验，图1表示在适宜的光照、CO2浓度等条件下测得的光合曲线和黑暗条件下的呼吸曲线；图2为在恒温密闭玻璃温室中，连续24h测定的温室内CO2浓度以及植物CO2吸收速率的变化曲线。

据图分析，下列说法中错误的是
A．图1中，当温度达到55℃时，植物光合作用相关的酶失活
B．6h时，图2叶肉细胞产生[H]的场所有叶绿体、线粒体和细胞质基质等
C．18h时，图2叶肉细胞中叶绿体产生的O2量大于线粒体消耗的O2量
D．该植株在进行光合作用且吸收CO2的量为0时，在两图中的描述点共有4个
2．下列有关性别决定的叙述，正确的是
A．XY型性别决定的生物，Y染色体都比X染色体短小
B．同型性染色体决定雌性个体的现象在自然界中比较普遍
C．含X染色体的配子是雌配子，含Y染色体的配子是雄配子
D．各种生物细胞中的染色体都可分为性染色体和常染色体
3．下列关于免疫细胞或免疫过程的叙述，正确的是（）
A．牛痘病毒进入人体能诱发出抵抗天花病毒的免疫力
B．巨噬细胞呈递抗原时需要将抗原降解成抗原-MHC复合体
C．B淋巴细胞的致敏需要来自辅助性T细胞的白细胞介素-2刺激
D．效应细胞毒性T细胞发挥免疫作用后脱分化为细胞毒性T细胞
4．菌根真菌与植物的根系生活在一起形成菌根。

其中，菌根真菌R（R菌）帮助植物甲从土壤中吸收N、P等营养，
R菌只能以脂肪酸为能源物质，但其自身不能合成脂肪酸，所需脂肪酸由与其共同生活的植物甲提供。

下列对这两种生物的叙述，错误的是
A．植物甲与R菌存在竞争关系B．植物甲为R菌提供能源物质
C．R菌与植物甲代谢类型不同D．植物甲与R菌共同（协同）进化
5．某植物红花和白花这对相对性状同时受多对等位基因控制（如A、a；B、b；C、c……），当个体的基因型中每对等位基因都至少含有一个显性基因时（即A_B_C_……）才开红花，否则开白花。

现有甲、乙、丙、丁4个纯合白花品系，相互之间进行杂交，杂交组合、后代表现型及其比例如下：
根据杂交结果可知，本实验中植物的花色至少受对等位基因的控制。

A．2对B．4对C．3对D．6对
6．下列与实验有关的叙述，正确的是（）
A．用吡罗红甲基绿染色剂作用于洋葱鳞片叶内表皮细胞，将DNA和RNA分别染成红色、绿色
B．利用葡萄糖溶液培养酵母菌可探究细胞呼吸的方式
C．制作根尖细胞有丝分裂装片时用HCl和酒精混合液漂洗根尖
D．通过比较自来水和生物材料在加入酸或碱后pH的变化，推测生物体维持pH稳定的机制
二、综合题：本大题共4小题
7．（9分）养殖池中鱼的排泄物和食物残渣在分解过程中会产生有毒的氨，硝化细菌可以把氨转化为易被植物吸收的硝酸盐以减弱毒性，从而确保鱼的安全。

在养殖池中放置一定数量的生化培养球（由黑色的塑料骨架制成，大小约为3～5厘米直径的空心球体）为硝化细菌创造生活环境。

请回答下列有关问题：
（1）硝化细菌能够利用氨氧化释放的化学能，将二氧化碳和水合成糖类，这种合成作用叫做_________；硝化细菌等生产者在生态系统中的作用是________________________________。

（2）若要从养殖池中筛选出高效硝化细菌，则培养基中的氮源应为____________；为了观察硝化细菌的菌落大小、隆起程度、__________等菌落特征，常用__________法在固体培养基表面获得单个菌落进行观察，该过程需要对菌液进行一系列的梯度稀释。

（3）养殖池中利用生化培养球（空心球体）培养硝化细菌的主要优点是__________________；为降低致病菌对鱼的危害，工作人员向养殖池中施放了一定量的抗生素，这反而可能在短期内导致养殖池中的鱼大量死亡，请结合题中信息分析，其原因可能是____________________________。

8．（10分）请阅读科普短文，并回答问题。

研究发现，一种生长在盐湖里的嗜盐细菌（异养需氧型）在低氧和日光下生长时，其细胞膜可产生明显的紫色斑块（紫膜）。

紫膜中仅含一种蛋白质，其结构与人眼的感光物质视紫红质相似，因而被命名为细菌视紫红质。

每一分子细菌视紫红质含有一分子视黄醛．由它吸收光子并引起一系列光化学反应循环。

在吸收光子引起光化学反应循环的同时，能产生跨紫膜的质子泵作用，即当光照射时，视黄醛放出H+到细胞膜外，失去H+的视黄醛又从细胞质内获得H+，在光照下又被排出。

这样反复进行，形成膜内外H+梯度，当膜外的H+通过膜中的H+-ATP酶返回时，合成ATP，为嗜盐细菌的生命活动供能。

（1）绿色植物和蓝藻都靠_______________捕获光能，而嗜盐细菌则依赖于______________分子捕获光能。

（2）该嗜盐细菌在有氧的条件下，可通过_____________过程合成ATP，为其生命活动供能。

（3）资料中描述的H+由膜外进入细胞内的方式是_______________，判断依据是___________________________。

（4）与绿色植物的光合作用过程相比，嗜盐细菌不能进行________________等反应。

9．（10分）[生物——选修3：现代生物科技专题]
中国科学院上海神经科学研究所仇子龙研究员等通过构建携带人类自闭症基因MECP2的转基因猴模型及对MECP2转基因猴进行分子遗传学与行为学分析，发现MECP2转基因猴表现出类似人类自闭症的刻板行为与社交障碍等行为。

在该研究中，研究人员先通过精巢异种移植，将幼年食蟹猴的精巢移植到裸鼠的背部，实现了食蟹猴精巢提早成熟，从中获得精子，让其完成受精作用，并进一步培养，操作过程如图，从而获得了携带人类自闭症基因MECP2的转基因猴（Z症食蟹猴）。

该工作加速了食蟹猴的精子生成速度，缩短了食蟹猴的繁殖周期，对于推动非人灵长类动物模型的应用具有重大意义。

回答下列问题：
（1）图中将精子注入____________细胞，该细胞处于____________期。

（2）将CRISPR/Cas9基因编辑系统注入受精卵后，Cas9蛋白能在特定部位切割MECP2基因（下图虚线所示），使该基因特定部位的两个核苷酸之间的____________断开，经其切割后产生具有____________末端的DNA片段。

（3）乙过程对受精卵的培养是在____________中进行的，丙表示的过程是____________。

（4）上述获得的Z症食蟹猴，可通过体细胞核移植技术进一步得到克隆Z症食蟹猴。

该技术的原理是
___________________。

所得到的克隆Z症食蟹猴的性状表现为_____________________________。

10．（10分）在适宜温度和适宜CO2浓度的条件下，某实验小组测得某森林中4种主要乔木（马尾松、苦槠、石栎、青冈）的幼苗叶片的生理指标如图所示，其中光补偿点是指光合速率等于呼吸速率时的光照强度，光饱和点是指达到最大光合速率所需的最小光照强度。

请回答下列相关问题：
（1）光反应阶段光合色素吸收的光能有两方面用途：一是将水分解成氧气和[H]；二是_______。

（2）当光照强度为39 μmol·m-2·s-1时，青冈叶肉细胞消耗ADP的场所有___。

（3）研究的4种植物中，最适合在较弱的光照环境中生长的是___，判断的依据是___。

（4）研究发现，空气中氧气浓度不同时，对受冷害的植物的光合作用速率的影响是不同的。

某实验小组欲探究低氧浓度（1%）对受冷害青冈幼苗的光合作用速率的影响，请简要写出实验思路和实验结论。

（实验所需材料及条件都充足。

）实验思路：___________。

实验结论：_______________。

11．（15分）为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。

（1）将草甘膦抗性基因作为_____，与Ti质粒用相同的_____和DNA连接酶处理构建基因表达载体。

（2）用_____处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加_____的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。

（3）利用PCR技术，可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有草甘膦抗性基因。

草甘膦抗性基因的部分序列如下：
5'﹣﹣﹣ATGGCT………AGGAAC﹣﹣﹣3'
3'﹣﹣﹣TACCGA………TCCTTG﹣﹣﹣5'
根据上述序列应选择引物_____（填字母）进行PCR。

A．引物：5'﹣TACCGA﹣3'
B．引物：5'﹣GTTCCT﹣3'
C．引物：5'﹣AUGGCU﹣3'
D．引物：5'﹣ATGGCT﹣3'
（4）PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计_____种引物，其原因是_____。

（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否_____。

两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的_____过程，获得转基因水稻。

参考答案
一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。

每小题只有一个选项符合题目要求）
1、D
【解析】
A、图1中的虚线始终为二氧化碳的释放，因此表示呼吸速率随温度变化的情况。

而实线会低于0，因此表示净光合速率随温度变化的情况。

图中看出，当温度达到55℃时，光合作用不再吸收二氧化碳，只剩下呼吸作用消耗二氧化碳的曲线，表示植物不再进行光合作用，只进行呼吸作用，A正确；
B、分析图2可知，6h时，二氧化碳的吸收速率为0，此时密闭小室内二氧化碳浓度达到最大值，此时光合作用强度与合成作用强度相等，因此叶肉细胞产生[H]的场所有叶绿体、线粒体和细胞质基质等，B正确；
C、分析图2可知，18时，二氧化碳的吸收速度等于0，说明此时植株的光合作用强度等于有氧呼吸的强度。

因为植株的光合作用等于呼吸作用，所以植株的叶肉细胞的叶绿体产生的O2量就必须大于线粒体消耗的O2量，这样才能保证非叶肉细胞的O2供应，而使植株的光合作用强度等于有氧呼吸的强度，C正确；
D、图2中当光合速率等于呼吸速率时，净光合速率为0，处于室内二氧化碳浓度曲线的拐点，因此图2中光合速率和
呼吸速率相等的时间点有2个，图1中，光合作用与呼吸作用相等的温度条件是40℃，共3个，D错误。

故选D。

2、B
【解析】
1、XY型性别决定方式的生物，Y染色体不一定比X染色体短小，人类的Y染色体比X短小，但果蝇的Y染色体比X长；
2、染色体包括常染色体和性染色体，无论是体细胞还是生殖细胞都同时含有常染色体和性染色体。

【详解】
A、XY型性别决定的生物，Y染色体不一定比X染色体短小，比如果蝇的Y染色体就比X染色体长，A错误；
B、在雌雄异体的生物中，绝大部分属于XY型，XX为雌性，XY为雄性，同型性染色体决定雌性个体的现象在自然界中比较普遍，B正确；
C、含有X染色体的配子可能是雌配子，也可能是雄配子，但含有Y染色体的配子一定是雄配子，C错误；
D、雌雄同体和没有性别之分的生物细胞中的染色体不能分为性染色体和常染色体，D错误。

故选B。

3、A
【解析】
免疫接种或预防接种是以诱发机体免疫应答为目的，预防某种传染性疾病的方法。

18 世纪，詹纳用接种牛痘来预防天花。

牛痘病毒能在人体内诱发出抵抗天花病毒的免疫力。

现有的疫苗有三种类型：①灭活的微生物；②分离的微生物成分或其产物；③减毒的微生物。

这三类疫苗通过注射或口服进入体内，使体内产生初次免疫应答，再次接种则引发二次免疫应答。

两次或更多次数的接种可以使机体产生更多的效应细胞和记忆细胞，提供对相关疾病的长期保护。

这种免疫方式称为主动免疫。

另一种免疫方式是被动免疫，就是通过接种针对某种病原体的抗体（抗血清）而获得免疫力。

【详解】
A、由分析可知，牛痘病毒进入人体能诱发出抵抗天花病毒的免疫力，A正确；
B、巨噬细胞吞噬入侵的病原体并将它们消化，病原体上的抗原分子被降解成肽，然后与巨噬细胞的MHC蛋白结合，形成抗原—MHC复合体，然后这种复合体移动到细胞的表面呈递出来，B错误；
C、当B淋巴细胞的受体分子两臂遇到相应的抗原并将它锁定在结合位点后，这个B淋巴细胞便被致敏了，同时还需要来自活化的辅助性T细胞的白细胞介素-2刺激，以促进致敏B淋巴细胞分裂，C错误；
D、效应细胞毒性T细胞发挥免疫作用后不会脱分化为细胞毒性T细胞，D错误。

故选A。

4、A
【解析】
1、生物种间关系包括捕食、竞争、寄生、互利共生。

2、互利共生是指两种生物共同生活在一起，相互依赖、彼此有利，一旦分开，两者都不能独立生活的现象。

【详解】
A、由题中信息“菌根真菌R（R 菌）帮助植物甲从土壤中吸收N、P 等营养，R 菌所需脂肪酸由与其共同生活的植物甲提供”可知，植物甲与R菌之间的关系为互利共生，A错误；
B、分析题意可知，植物甲为R菌提供能源物质脂肪酸，B正确；
C、由于R菌的能源物质为脂肪酸，故R菌同化作用类型为异养型，植物甲同化作用类型为自养型，C正确；
D、植物甲与R菌的互利共生关系是在长期的共同（协同）进化中形成的，D正确；
故选A。

5、B
【解析】
根据题意“当个体的基因型中每对等位基因都至少含有一个显性基因时（即A_B_C_……）才开红花，否则开白花”，若子代红花占3/4，说明F1含一对等位基因，其它各对基因为显性纯合，若子代红花占3/4×3/4=9/16，说明F1含两对等位基因，其它各对基因为显性纯合，以此类推，根据乙×丙和甲×丁两个杂交组合中，F2代中红色个体占全部个体的比例为81/（81+175）=（3/4）4，可推知F1含有4对等位基因。

【详解】
根据上述遗传图解可知，乙×丙和甲×丁两个杂交组合中，F2代中红色个体占全部个体的比例为81÷（81+175）=81÷256=（3/4）4，根据n对等位基因自由组合且完全显性时，F2代中显性个体的比例为（3/4）n，可判断这两个杂交组合中都涉及到4对等位基因，即本实验中植物的花色至少受4对等位基因的控制，所以B正确，ACD错误。

故选B。

6、B
【解析】
部分观察类实验的试剂及现象：
【详解】
A、用植物细胞代替人口腔上皮细胞观察DNA与RNA，甲基绿将DNA染成绿色、吡罗红染色剂将RNA染成红色，A错误；
B、利用葡萄糖溶液培养酵母菌可探究细胞呼吸的方式，B正确；
C、制作根尖细胞有丝分裂装片时用HCL和酒精混合液解离根尖，漂洗应选用蒸馏水，C错误；
D、生物机体维持pH稳定是多方因素影响，通过比较自来水和生物材料在加入酸或碱后pH的变化，不能直接推断生物体维持pH稳定的机制，D错误。

故选B。

【点睛】
本题重点考察教材中的实验的选材和实验现象，属于基础知识记忆和运用层次的考察。

选择材料和方法时应注意对实验的结果和现象的影响。

二、综合题：本大题共4小题
7、化能合成作用为生态系统提供物质和能量铵盐（或氨）形状、颜色稀释涂布平板生化培养球具有很大的表面积可供硝化细菌附着抗生素在杀灭致病菌的同时，使硝化细菌大量死亡，导致水体中对鱼毒性很强的氨含量剧增
【解析】
硝化细菌是自养型生物，属于生产者，可以把无机物转变成有机物，并且储存能量。

【详解】
（1）硝化细菌能够利用氨氧化释放的化学能，将二氧化碳和水合成糖类，这种合成作用叫做化能合成作用；硝化细菌作为生产者在生态系统中的作用是为生态系统提供物质和能量。

（2）硝化细菌可以把氨转化为易被植物吸收的硝酸盐，则培养基中的氮源应为铵盐（或氨）；菌落特征包括的菌落大小、隆起程度、形状、颜色等，对菌液进行一系列的梯度稀释用稀释涂布平板法在固体培养基表面获得单个菌落进行
（3）因为生化培养球具有很大的表面积可供硝化细菌附着，因此养殖池中利用生化培养球（空心球体）培养硝化细菌；根据信息可知抗生素在杀灭致病菌的同时，使硝化细菌大量死亡，这样会导致水体中对鱼毒性很强的氨含量剧增。

【点睛】
硝化细菌与植物都是生产者，不同点是硝化细菌利用的化学能，植物利用的是光能。

8、叶绿素细菌视紫红质有氧呼吸协助扩散顺浓度梯度运输、转运蛋白（Ｈ＋－ATP酶）协助水的光解、生成NADPH、暗反应
【解析】
绿色植物和蓝藻都因为含有叶绿素和相关的酶从而可以进行光合作用。

该题属于信息题，从题干中获取与问题相关的信息是本题的解题重点。

题中描述这种嗜盐细菌的代谢类型为异养需氧型，推测其可以进行有氧呼吸从而获得生命活动必要的ATP，同时也可以通过H+的跨膜运输来获得ATP。

【详解】
（1）绿色植物和蓝藻两者都含有的色素是叶绿素，因此两者都靠叶绿素吸收传递转化光能；而嗜盐细菌由题意可知则依赖于细菌视紫红质分子捕获光能；
（2）嗜盐细菌是异养需氧型，所以在有氧条件下，进行有氧呼吸合成ATP；
（3）由题意可知，细胞内外H+外高内低，当膜外的H+通过膜中的H+-ATP酶返回时，合成ATP，为嗜盐细菌的生命活动供能，由于是顺浓度梯度，同时需要H+-ATP酶的协助，所以是通过协助扩散；
（4）通过与绿色植物的光合作用过程相比，嗜盐细菌只是通过H+的顺浓度梯度和逆浓度梯度的运输中合成ATP，不能进行水的光解、生成NADPH、暗反应等反应。

【点睛】
本题的难点是通过题干中的信息判定H+的跨膜运输方式，需要在题干中分析吸收了光子的视黄醛将H+排到细胞膜外，造成了膜内外的浓度差，使得膜外H+多，因此H+进入细胞属于顺浓度梯度。

9、次级卵母减数第二次分裂中磷酸二酯键平发育培养液胚胎移植动物细胞核具有全能性绝大多数性状与Z症食蟹猴相同，少数性状与受体的性状相同
【解析】
胚胎的早期培养：精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。

胚胎移植实际上是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。

供体胚胎获得的途径可以指转基因、核移植或体外受精方式得到的。

限制酶能够识别DNA中特定的核苷酸序列，切割的部位是核苷酸之间的磷酸二酯键，从而将DNA分子切成两段，出现黏性末端或平末端。

（1）受精时所用的卵母细胞是处于减数第二次分裂中期（MⅡ中期）的次级卵母细胞。

（2）结合题中信息分析，Cas9蛋白能在特定部位切割MECP2基因，推测Cas9蛋白为限制酶，由图示可知该基因特定部位断开的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键，经其切割后产生的DNA片段具有平末端。

（3）乙过程为早期胚胎培养的过程，受精卵在发育培养液中培养为早期胚胎。

丙表示的过程是胚胎移植。

（4）利用以上技术获得的Z症食蟹猴，可通过体细胞核移植技术得到克隆Z症食蟹猴可知，该技术利用的原理是动物细胞核具有全能性。

克隆Z症食蟹猴的性状中，绝大多数性状与Z症食蟹猴相同，少数性状与受体的性状相同。

10、合成ATP 细胞质基质、线粒体和叶绿体青冈青冈的光补偿点和光饱和点均最低，在较弱光照强度下即可生长实验思路：将受冷害的青冈幼苗植株均分成两组，标记为甲、乙，将甲组置于低氧浓度（1%）、适宜光照环境下培养，将乙组置于正常氧浓度、与上述相同光照环境下培养，其他条件相同且适宜，一段时间后测定两组植株的平均光合速率实验结论：若甲组的光合速率大于乙组的，则说明低氧浓度对受冷害的青冈幼苗的光合作用有一定促进（保护）作用；若甲组的光合速率小于乙组的，则说明低氧浓度对受冷害的青冈幼苗的光合作用有一定抑制作用
【解析】
影响植物光合作用的因素主要是光照强度，光补偿点时呼吸作用速率等于光合作用速率，光饱和点以后时影响各种植物的光合作用速率的因素不再是自变量光照强度，而是温度或二氧化碳浓度等。

真正的光合作用速率=呼吸作用速率+净光合作用速率，据图可知，青冈的光补偿点和光饱和点最低，最适合在光照不足的环境下生长。

据此分析作答。

【详解】
（1）光反应阶段光合色素吸收的光能有两方面用途：一是将水分解成氧气和[H]；二是利用ADP和Pi合成ATP。

（2）青冈的光补偿点为23μmol·m-2·s-1，当光照强度为39μmol·m-2·s-1时，光合速率大于呼吸速率，光合作用的光反应阶段消耗ADP合成ATP，有氧呼吸的三个阶段都要消耗ADP合成ATP，所以青冈叶肉细胞消耗ADP的场所有细胞质基质、线粒体和叶绿体。

（3）研究的4种植物中，青冈的光补偿点和光饱和点最低，在较弱光照强度下即可生长，所以最适合在较弱的光照环境中生长。

（4）某实验小组欲探究低氧浓度（1%）对受冷害青冈幼苗的光合作用速率的影响，则实验的自变量为氧气浓度的不同，实验材料应为受冷害的青冈幼苗，因变量为受冷害青冈幼苗的光合作用速率，其它无关变量要保持适宜且相同，所以实验思路为：将受冷害的青冈幼苗植株均分成两组，标记为甲、乙，将甲组置于低氧浓度（1%）、适宜光照环境下培养，将乙组置于正常氧浓度、与上述相同光照环境下培养，其他条件相同且适宜，一段时间后测定两组植株的平均光合速率。

实验结论为：若甲组的光合速率大于乙组的，则说明低氧浓度对受冷害的青冈幼苗的光合作用有一定促进（保护）作用；若甲组的光合速率小于乙组的，则说明低氧浓度对受冷害的青冈幼苗的光合作用有一定抑制作用。

【点睛】
本题考查光合色素的作用、ATP合成的场所和低氧对光合速率的影响，意在考查考生对所学知识的理解和应用能力以及实验的分析、设计能力。

11、目的基因限制性核酸内切酶CaCl2潮霉素BD 2 保证基因的两条反向平行的链都做模板，且其上碱基序列不同表达再分化
【解析】
基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。

将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；
（4）目的基因的检测与鉴定：
分子水平上的检测：
①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子杂交技术；
②检测目的基因是否转录出了mRNA﹣﹣分子杂交技术；
③检测目的基因是否翻译成蛋白质﹣﹣抗原﹣抗体杂交技术。

个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】
（1）用相同的限制性内切酶切割目的基因和质粒后露出相同的黏性末端再用DNA连接酶连接，从而构建基因表达载体，题中以草甘膦抗性基因作为目的基因。

（2）依据图中信息，农杆菌用CaCl2处理后变成感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在含有标记基因表达的潮霉素培养基中筛选，从而获得含目的基因表达载体的农杆菌。

（3）根据已知草甘膦抗性基因的部分序列以及双链DNA分子的结构特点（反向平行），再结合DNA复制（PCR中）的特点，即子链合成的方向是从5’到3’，应选择引物B、D进行PCR扩增。

（4）为使基因的两条反向平行的链都做模板，而且其碱基序列不同，所以，PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计2种引物。

（5）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否表达。

两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过再分化过程，获得转基因水稻。

【点睛】
本题主要考查基因工程的应用相关知识，识记和理解目的基因的获取、表达载体的构建以及目的基因的检测等知识是。