反相高效液相色谱法测定巧克力中香兰素

表 ｌ 标准曲线方程 组分名称 香兰索 标 准曲线方程 线性相关系数（ ） ｌ（Ｏ Ｄ
基苯 甲醛） 在 于香 荚 兰豆 、 息 香膏 中， 香 草 的特 殊 气 存 安 有 味” ， 目前世界上 生产量 和使用 量最大 的人工台 成香 料， 是 Ａ Ｉ ０—１ｍ ／ ｇ Ｆ Ｏ￣］Ｏ，９４ 。Ⅱ １８ ／ｇ 其在 Ｄ值 ０ ｇ ｋ （Ａ ， ｔ １ ） ９ ５０ ｇｋ ， ｎ 巧克力中的最大使用量 为 ９０ ｓｋ ， ７ｍ ／Ｓ 目前尚无 高效 液相色谱 法方祛测定食 品中香兰索。故本实验 以 Ｃ ３ Ｈ： Ｏ＝ ５６ ＨＯ ３： ５为 流动相 ， ｅａｌ 为分折柱 ， Ｒ ｌｓ Ｊｉ 使巧克 力 中香 兰索很 好的分离测 定． 样品中其它成分 不干扰被 测组份 的准确定 量 ， 结果々 人满
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中 国卫 生 检验 杂 志 ２ Ｏ Ｏ ２年 ４月 第 １ 第 ２ ２昔
【 测定方法】
文章编号￣ ￣－ ｓ ５（ ） ｔ４ ６ ２ ｃ ８ ∞２ ㈣ Ｉ ｌ
反 效 色 法测 巧 中 素 相高 液相 谱 定 克力 香兰
黄越 卢忠魁 卢刚 ， ，
进行实验。结果 当 Ｃ ３ Ｈ： ０＝ ：５时保 留时 间很长 ， ｌ ｉ ＵＯ ５９ Ｒ舌 ＞２ｒｎ ５ ｉ且峰形较差 。随 着 Ｃｔ Ｈ体 积分数 的提 高， ａ ｔ０ ３ 香兰素保
ｉ 材料与方法 １ｉ 仪 器及试剂 ． Ｈ Ｉ｛ 高效液相色谱仪 ： Ｐｉ０ ３ 在线 脱气机 ， 四元 泵， 智能化柱相 ， 紫扑 可变 波长检 测器 （ 国 ｋ 美 ｉ 司）１ ３６ Ｐ公 ；－ ３５ ／ Ｐ 化学工作站（ 美国 Ｈ Ｐ公司）双重石英蒸馏水 （ ； 上海亚荣） 恒温 ，
度洗脱。以保留时同定性 ， 以峰面积定量。 １３ 样品制备 称取样 品 ２ ∞ｇ于 １０ ｌ ． ０ ｍ 小烧 杯 中， 入 ３ｍ 加 ０ｌ 水 ． 柏 恒温 水沿 ｔｍｎ 冷却后 ， 于 ０ ｉ， 移八 ５ｍ 容量瓶中， ０ｌ 加水至
劐度 ， 离心 ． 上 清 液过 ０４ｔｎ 膜 ， 液备 用 取 ５ 滤 ｚ 滤
在 本 实 验条 件 下 ， 香兰 索 在 ０５ ．ｒ 喈
１００ Ｓｋ 范 围 内 有 良好 的 线 性 关 系 。 最 低 检 测 淮 度 为 ０ ｍ ／
０ ５罂 。对 ６ ．ｎ ／ ．Ⅱ ／ ００， Ｌ的香 兰紊标准溶液平行测 定 ６捷． 对 ｇ 相
标 准 偏差 为 ｉ２ ％。 ．４
３２ 线 性 范 围与 捡 出限
一
解， 人 １ ｍ 移 ０ ｌ容 量 瓶 中， 容 至 刻 度 ． 当 于 香 兰 索 ０ 定 相
ｉ０【 ｍＩ 甲醇 为 Ｈ Ｌ ０ 。 ｒ Ｐ Ｃ级试 剂 ； 用 水 为双 重 石 英 蒸馏 水 。 所 】２ 色 谱 务 件 甲 醇 ： ＝３ ： ５为 流 动 相 ， 速 为 水 ５６ 流 ｉ０ ｈ ｌ ｉ， 温 为 ３ ℃ ， 外 可 变 波 长检 测 器 ， ２ ｎ， 梯 （ ｎ ｍ ｎ柱 Ｘ ／ ５ 紫 ：舯ｎ－等
相 当于 ０ ５ １，０５ ，Ｃ，／ ， ，０ ２ ，０ ｔ０ ｅ Ｌ香兰索 。分别 取标 准置样 品各 ￣ １ｒ ０ｄ注人高教液相色谱仪测定 ， 香兰索 Ｒ ＝ ．８ 以峰面积为纵 ｔ ７５ １
水浴（ 上海 ） 。 香兰素 固 体 纯 品 ． 取 Ｏ ｌ０ｇ于 ５ｍ 烧 杯 中 ， 甲 醇 溶 称 Ｃ０ ０ｌ 以
留时间均减少 ， 且峰形逐渐变好 。当 Ｃ ３ Ｈ： Ｈ Ｏ 坞Ｏ＝ ：Ｄ ， 柏 ６ 时 虽
然保留时间仍在碱步 ． 但香兰素峰出现向前伸舌 ， 表明流动相洗 脱强度过失。Ｃ ３Ｈ： ０＝ ０７ ＵＯ ３ ：０时， 香兰紊略有拖 尾。根据色 谱分 析理论， 应将容量因子应控制在 １ ０ 分离度 Ｒ）１５ ＜Ｋ ＜２ ， ． 的范围 内。 ， ： 并控 制 适 当的 系统 操 作 压 力。 本 实验 选择 ～・ 故 Ｃ ３ Ｈ： ２ ３ ： ． ＨＯ Ｈ ０＝ ５ ６ 流速 １ ３ｍ／ｒ ｔ ５ ０ ｌＩｒ 柱温 ３℃． ｆ ｄ． ５ 进样量 Ｉ出。 Ｏ
ｉ４ 标 准 曲 线制作 ．
吸取 ｉ０ｍ ／ ｌ 兰索 标准 储 备液 ０ ．０ ｇ ｍ 香 ，
对市 售 的巧 克力样 品按本实验
０５ １０ ２０ ５０ １．ｍ 于 １ ｒ 容 量 瓶 中 ． 水 至 刻度 分 别 ， ，．，．，００ ｌ ０ｎ ０ｌ 加
方法进行样品制备， 并进 行测定 ， 结果令人 满意 ， 加标 回收试验 表 ２ 样品加标 回收率（ ＝６ ｎ
（ 吉林 市 疾 病 预 防控 制 中心 ， 春 １２ １； １ 长 ３０ １２吉林 铁 路 中 心卫 生 防 疫站 ）
［ 中囤分类号］ ０ ５ ６ ７２ ７ ［ 文献标识码 ］ Ａ
食品添加剂 的监测是食 品卫生监测 的重要内容 。食品中香
兰索 尚无 国家 标 准 方 法 （ 国标香 兰索 化 学 名 ： ３一甲氧 基 一４ 一羟
３３ 干扰 实验
样品中的常 见组分 ， 各种有机酸（ 如柠檬酸 、 苹
果酸 、 酒石 ） 甜 昧剂 （ 、 如甜 蜜 索 、 糖精 钠 、 Ｋ糖 等） 维 生索 Ａ 、 （ 、 ）蔗塘等均不干扰样品 中香兰索 的准确定 量。 、 ３４ 样品测定及 回收率试验 ．
见 袁 ２ 。
意。
＝ ７ ＋０３ａ ｔ ＋ｉ０ ｅ ０３ ７４ ｅ ０（ｍ ） ７ 一 １
注 ： 为 峰 面 积 ，ｍ 为 被钡 分 浓 度 ｒ ａｔ ｆ ３ 结 果 与讨 论
３ ｌ 流 动瑁、 流速及 柱温的 选择
本实验初 步 以 Ｃ ３Ｈ： ０ ＨＯ
体 积分 数蔓 ５９ ，Ｏ９ ，０８ ，０ ７，０回 ， 速 为 １２０ ｌｍ ：５ Ｉ：ｏ２ ：Ｄ３ ：０４ ： 流 ０ｍ ／ ￣