溶出度分析方法验证

• 合适的最小平方衰退程序
• r2>0.98
• Ｙ轴截距在95﹪置信区间必须不明显偏离 0
浓度水平(﹪) 制剂规格的溶 出度 40﹪
药物浓度 (ug/ml) 3.2315 3.4924
平均吸收值 （n=2） 0.12680 0.13705 0.20000ห้องสมุดไป่ตู้
0.19335
吸收单一值
0.1268 0.1250 0.1378 0.1363 0.2022 0.1978 0.1949 0.1918 0.3600 0.3531 0.3561 0.3485 0.5350 0.5215 0.5139 0.5058 0.6180 0.6039 0.6175 0.6078
• • • •
◆随机因素对方法精密度的影响 ◆覆盖药品规格范围 ◆至少两个分析员在不同日期测定 ◆使用含量均匀度高且品质好的药品
• ◆永远不要使用一种已经成功上市的商业 样品
• ◆两个分析员溶出结果的平均值相差不得 超过 • 10%，当该时间点的溶出量小于85%时； • 5%，当该时间点的溶出量大于85%时 • 可接受标准可根据特定产品规定
◆这是个有意义的验证吗？ ◆这可以是方法开发的一部分吗？ ◆请提供论据
◆HPLC 1 流动相组分的差异 ２ 流速 ３ ＰＨ值 ４ 色谱柱类型 ５ 分离温度 ６ 波长 ◆光谱分析 波长
◆对照品溶液 ◆过一定时间再分析
◆在每个时间间隔点与新鲜配制的对照品比 较
◆结果是原始结果的98%至102%
◆ 样品溶液 ◆室温保存 ◆过一定时间再分析 ◆结果与原始结果比较 ◆结果是原始结果的98%至102% ◆必要时溶液可以避光保存
• 如空白干扰超过2﹪ １替代的检测波长 ２替代的分析方法 ３扣除参比波长的读数 ４使用扫描光谱的二阶导数 ５基线扣除(校正因子) ６干扰物的去活性
• HPLC分析
• 和药物在相同保留时间处出峰
• 外来峰－注入标准溶液并比较保留时间
• 如保留时间太接近，向药物中加入空白溶 液
• HPLC分析 • 延长空白，标准和样品溶液的运行时间获 得色谱图来识别洗脱晚的化合物
81.88
106.45
131.80
98.55 96.85 97.33
平均 下限95 ﹪ CL 上限95 ﹪ CL
97.58 95.40 99.75
平均(n=12)[﹪] RSD [﹪] 95﹪CI平均
97.75 0.70 ±0.44﹪
篮法，100rpm,HPLC
由线性实验中导出：线性关系
标准
线性斜率： Y截至： 相关因子： 斜率比例(点样 ／标准) 11.1905 -7.0650 0.9999 99.67﹪
分析程序类别
含量测定 -溶出度(仅指测定) -含量/效价
+ + +(1)
参数 精确度
精密度 重复性 中间精密度 专属性 检测性
定量限
+ - 不需要 + 需要 (1)如果做了重复性就无需 做中间精密度
线形
范围
+
+
• 举例 １空白：所有辅料包括包衣
２三批空白混合样品，与最大规格和最小 规格比例一致 ３适当时加入墨印，沉降篮，胶囊壳 ４转移至装有37℃溶出介质的单个溶出杯中 ５采用该方法装置在150rpm转动30至60 分钟
120﹪
12.5259 15.6553
• 通常为释放过程中药物粉末最低期望浓度 的-20﹪到最大浓度的+20﹪ • 至少３个浓度水平，每个水平测试３次 • 合适时加入空心胶囊，混合包衣，墨印和 沉降篮 • 空白中混合量应与制剂中一致
• 装置１和２－根据方法中规定的条件测试 辅料和药物粉末的混合物
平均 下限95 ﹪ CL 上限95 ﹪ CL 平均 下限95 ﹪ CL 上限95 ﹪ CL
97.25 95.22 99.29
97.86 97.21 98.52 98.31 97.20 99.41
１ 篮法， 100rpm,HPLC ２ 制备对照品溶液 ３ 溶出杯中加入不多于 1000mL的溶出介质，加 入一片空白片 ４ 溶液介质加热到37℃ 5 加入ＸmL对照品溶液 ６ 45分钟后取样，过滤， 分析
８ 进行全面的内部(和外部)验证试验 ９ 必要时调整方法参数或／和可接受标准 10 在验证报告中记录验证试验和结果 11 制定再验证的可接受标准 12 制定常规执行方法的标准 13 制订常规系统适用性试验的类型和频率
参数 专属性 准确度 －系统精密度 －重复性 －中间精密度 重现性 线性 范围 溶液的稳定性 过滤 操作参数的耐受性 溶液的转移 保存HPLC
Abs
0.3 0.2 0.1 0 0 5 10 Concentration ug/ml 15
0.7 0.6 0.5 0.4
60﹪
5.0262 4.9064
80﹪
9.0030 8.8412
0.35655 0.35230 0.52825 0.50985 0.61095 0.61265
100﹪
13.2927 12.9117
第1天/仪器1/分析员1 制剂规格 200mg ［％］药物溶出度 100.8 104.1 103.9 102.5 104.5 103.4 400mg 100.9 98.6 102.9 100.2 100.9 100.0
第2天/仪器1/分析员2 制剂规格 200mg ［％］药物溶出度 106.2 104.9 101.0 105.6 105.4 105.5 400mg 98.9 101.0 99.8 100.4 98.9 99.5
◆方法可说明溶液的有效期
◆必要时溶液要避光
◆必要时使用玻璃仪器替代塑料容器
采取方法 ◆配制溶出介质并室温保存28天 ◆采用相似因子比较曲线
１ ２ ３ ４ ５ ６ ７
确认仪器的有关性能参数 确证材料，如对照品和试剂 说明采用的方法，目的和范围 进行仪器的预验证 规定性能参数和可接受标准 制定验证方案或验证操作规程 制定验证试验
开发阶段１ 开发阶段２ 上市前 + + + + + + + + +
+ +
+ +
+ +
+ +
+ +
+ +
+
+
上市 + + + + + + + + + + + + +
◆ 高度可变的溶出数据不允许根据预设的质量标准比较结 果 ◆差异的主要来源 １ 产品 ２ 方法 ◆ 溶出度测试的验证是一个复合流程 ◆ ICH Q2(R1)提供了方法验证指南
• 系统重复性 １一份对照品溶液多次测定 ２计算RSD
• 方法重复性 １制备相同浓度的样品溶液多份 ２从准确度和线性数据推出
NO. 200mg 1 2 3 4 5 6 制剂规格[mg] 数据个数 平均值[%] 标准值 相对标准偏差 （%） 最小值（%） Q 取样时间 100.8 104.1 103.9 102.5 104.5 103.4 200 6 103.2 1.36 1.32 100.8 80% 30min 400mg 100.9 98.6 102.9 100.2 100.9 100.0 400 6 100.6 1.41 1.41 98.6 80% 30min
• 难溶性药物－储备液－药物溶解在有机溶 剂中(最大不超过最终体积的5﹪) • 储备液转移至溶出杯中 • 回收率通常为称样量的95﹪-105﹪ • 缓释制剂的酸化阶段
﹪理论值
16.38
﹪回收率
97.50 96.34 97.92
97.94 98.08 97.57 98.78 98.24 97.90
平均 下限95 ﹪ CL 上限95 ﹪ CL
平均回收率 ［％］（n=12）
103.98%
100.17%
◆篮法，100rpm,HPLC ◆通过不同方法参数的差异，根据统计学设计测试溶出度的耐受性 (方法中的“样品制备部分”)：
因素 转篮速度 表面活性剂浓度 温度 酸浓度 分析员 仪器 制剂规格 低水平 95rpm 0.20% 36℃ 0.9mM A 1 1 中水平 100rpm 0.25% 37℃ 1.0mM n/a n/a n/a 高水平 105rpm 0.30% 38℃ 1.1mM 8 2 2
• 溶出介质，过滤的空白溶液，标准溶液和 过滤溶出样品的典型色谱图 • 在空白图谱中未出现干扰峰
• 不超过5﹪(V/V)的有机溶剂来增强制备标 准溶液的药物稳定性
• 制备５份药物的标准溶液，范围覆盖该制 剂规格溶出曲线从最低期望浓度的－20﹪ 至最高浓度的+20﹪ • 至少双份 • 最高浓度应不超过仪器的线性范围
◆ 考虑设定整个流程总体偏差的可接受标准时，其应大于 单个流程的偏差(如HPLC精密度2%, 量取溶出介质的精 密度1%，稀释的精密度)考虑到传递的随机误差 ◆ USP通则＜1092＞给出具体解释 ◆ 产品生命周期的不同阶段验证内容可不同．
谢谢大家
溶出度高级课程
验证－化学分析
• • • • • •
验证总体的一部分 ICH Q2(R1)规定参数 USP<1092>提供额外帮助 验证参数 验证标准 贯彻药品生命的验证理念
• • • • •
验证总体的一部分 期望高精密度值 差异总体影响因素 ICH Q2(R1)提供了清晰的指南 不要忘记溶出程序的其他部分： 溶出测试本身 取样方法 转移，处理和保存 分析结果的计算
30分钟后药物溶出度[%]标示量
600mg 100.8 103.0 100.5 102.5 102.3 101.2 600 6 101.7 1.02 1.00 100.5 80% 30min 97.7 97.7 104.6 105.1 101.5 98.3 800 6 100.8 3.43 3.40 97.7 80% 15min 800mg 99.0 96.8 100.7 103.4 100.5 99.2 800 6 99.9 2.20 2.20 96.8 80% 30min
处方中加入标准
11.1540 -7.5006 0.9995
• 基线对API的干扰
• 基于不同剂型的不同假设： １辅料溶于API-即恒定的比例关系 ２辅料在API溶出前悬浮并溶解－即辅 料量恒定， API逐渐增加(标准加入技术) ３辅料难溶或不溶－即机质不溶， API 溶出 • 所有适用的概念可参照制剂技术判定