结核感染t细胞检测呼吸科PPT课件

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流式细胞术
体外刺激: RD1抗原T cell
IFNg
TNFa
CK
活化标志物
细胞因子
TB-IGRA 产品特性
➢ 高灵敏度,检出率90%以上
➢ 高特异性
➢ RD1区编码的ESAT-6和CFP-10两个特异性抗原
➢ 全血样本,体外检测
➢ 采用外周血样本,取样方便,可检测
IFNg
TNFa
CK
➢ 所有结核感染;体外抗原刺激保证平安性
➢结核诊断 影像学方法 细菌学方法 病理学方法 免疫学方法
潜伏性结核感染 免疫学检测阳性,显示结核感 染 体内有活的结核分枝杆菌,但 非活动型 无疾病和病症 不传播给他人 给予药物,防止开展为活动性 结核
潜伏性结核感染的诊断 皮肤结核菌素试验〔TST〕 ≥10mm γ干扰素释放试验〔IGRAs〕
体外γ-干扰素检测结核分枝杆菌不同方法的应用价值比较
90.1%(308/342
干扰素体外释放酶联免疫法在结核潜伏感染诊断中的价值
88.6%(39/44)
国外同类试剂
优势
A Three-Way Comparison of Tuberculin Skin Testing, QuantiFERON-TB Gold and TSPOT.TB in Children
治愈
未根治
细菌全部被清除
不发展为结核病
不需要预防性服药
尹洪云,许家琏. 慢性阻塞性肺病与肺结核的关系. 中国临床医生. 2004年第32卷第8期
➢大量流行病学资料发现,矽肺患者合并结核发生率为 10%~30%。矽肺患者的肺结核患病率为全国平均肺结 核患病率的3.16~28倍。
• 矽肺患者易发生并发症, 并发症会促使矽肺病情的进展、
sensitivity
结核分枝杆菌γ-干扰素体外释放定量试验诊断结核感染的临床应用
90.24%(74/82)
TB-IGRA与TST检测菌培阳性肺结核患者比较
80.3%(118/147)
γ-干扰素释放试验诊断结核分枝杆菌感染的临床意义
88.64%(39/45)
结核分枝杆菌相关γ-干扰素体外释放试验在结核病诊断中的应用价值
结核感染T细胞检测 临床应用
目录
contents
1. 结核病的诊断现状 2. TB-IGRA产品介绍 3. TB-IGRA的临床应用 4. TB-IGRA检测方法及结果解释
结核病现状
•结核病(tuberculosis)是由结核分枝杆菌(tubercle bacillus)引 起的一种慢性肉芽肿性炎。 •以肺结核最常见,死亡人数仅次于艾滋病。也可见于全 身各器官。肺外结核占整个发病率的10%-20%,死亡率占 结核病全部死亡率的14.1%-17.6%。 •全世界约三分之一的人群感染,?2014年全球结核病报告? 显示:2013年有900万新发病例, 150万人死亡。 •中国是结核病高发区,发病数居全球第二,现有600万活 动性肺结核,且患者人数逐年增加,始终位居全国甲乙类 传染病的前列。
ห้องสมุดไป่ตู้TB检出高
Estimating diagnostic accuracy of tests for latent tuberculosis infection without a gold standard among healthcare workers
特异性93.6%
Clinical Utility of Interferon Gamma Assay in the Diagnosis of Tuberculosis
恶化、影响预后, 也是造成矽肺患者死亡的重要原因。
• 1990年至2010年共收治矽肺450 例, 发生并发症310 例,
已死亡140例, 全部死于并发症。
潘宏伟. 矽肺患者的死亡原因分析.中国实用医药. 2010年12月 第5卷第36期
结核诊断方法
活动性结核
➢有临床病症或影像学改变 ➢具传染性 ➢主要的传播源 ➢需及时治疗
90.7%(243/268)
两种结核分枝杆菌相关γ-干扰素定量检测试剂盒检测结核分枝杆菌感染结果比较研究
90.9%(290/319)
体外释放酶联免疫法检测结核杆菌γ-干扰素的实验研究
89.11%(90/101)
干扰素释放酶联免疫法(TB-IGRA)用于检测结核分枝杆菌的优越性
96.12%(99/103)
灵敏度>90%,特异性>97%
IGRA在矽肺合并结核病中的应用
• 廖明等比照了血IGRA、TST、抗酸杆菌、结 核抗体在SCTB中的检测性能: • 敏感度分别为94.4%、52.8%、38.9%、41.7%; 阴性预测值分别为91.7%、52.8%、48.8%、 55.3%
廖明,胡克. 临床肺科杂志. 2014年9月 第19卷第9期
Latent TB检出高
Positive Tuberculin Skin Test or Interferon-Gamma Release Radiographic Lesions Suggesting Old Healed Tuberculosis
Assay
in
Patients
with Latent
电镜下的结核杆菌
3
结核发病机理
活动性结核: 发病状态 潜伏性结核感染〔LTBI〕:是宿主感染结核杆
菌后尚未发病的一种特殊状态
结核分枝杆菌〔MTB〕
注:感染后发病与否和机体易感性有关!
暴露 感染
1%
疾病进展
9%
L潜ate伏ncy
LTBI
90%
自愈
复燃
活动性结核病
2-5% 5-10% HIV>10%
一直存在活菌 需预防性服药
抗结核 治疗
• 耐药结核比例逐渐增加,主要由于抗结核治疗不规范;
• TB-IGRA具有宽泛的γ干扰素定量量程,可跟踪抗结核治疗 效果,为临床治疗方案调整做参考。
抗结核治疗效果辅助评估
Kobashi等利用IGRA对50例结核患者的治疗进展追踪检测: • 治疗开场后,结核患者中IGRA的敏感性和反响强度 均有明显的下降趋势
杜岩青 检验医学 2012年12月第27卷第12期
临床应用案例
肺炎与肺结核的鉴别诊断: 某医院呼吸内科,男,59岁 临床病症:肺部有积水,高烧发热,初步认 定肺炎,抗生素治疗1周不见效果,高度疑 心结核。 检测结果:痰涂片〔-〕,结核抗体〔-〕, TB-IGRA〔-〕
临床应用案例
MTB与其他杆菌感染的鉴别诊断: 某院呼吸内科病人,男 临床病症:发热、咳嗽、咳痰、呼吸困难,乏力, 多汗,关节疼痛 检测结果:痰涂片〔-〕,菌培〔-〕,肺部X射线可 见肺结节,胸腔积液 诊断过程:该院诊断为结核但治疗无好转,患者转 院检测IGRAs〔-〕,试管凝集实验++,布病抗体 ++,确诊布氏杆菌感染,与该院打官司胜诉。 结果分析:由于痰涂片和菌培检出率低,阴性也未 17
NTM〔非结核分枝杆菌〕比例增高
2000 年全国流调别离的抗酸杆菌菌株中,NTM 菌株占11. 1% , 其中90% 为非结核分枝杆菌肺病。
NTM 肺病的临床表现与结核病相似, 既可有全身中毒病症,亦有 局部损害表现。但病症和体征缺乏特异性,20%-50% 的病人无明 显病症,除非做菌型鉴定,凭临床表现难与肺结核病相鉴别。
潜伏性感染、抗结核治疗监控
定量检测γ干扰素释放强度,可用于持续监控:
潜伏性 感染
国内潜伏性感染人群占结核感染人群40%以上; 无干预情况下2年内发展成活动性结核的比例为5%-10%; 使用IGRAs可以有效发现潜伏性感染,通过定量检测IGRAs强 度,可以监控病人病情发展状态,防治潜伏性感染发展成为 活动性结核。
TB-IGRA方法介绍
原理: 机体内被结核菌抗原致敏的效 应T细胞,在体外受到一样抗原的 刺激〔在APC辅助下〕后,会分泌 大量IFN- γ(细胞因子)。通过IFN- γ 的检测,判断结核感染情况。
IGRAs
APC
IFN-g release assay
细胞 因子
ELISA
细胞 因子
ELISPOT
活化/细 胞因子
20
潜伏性感染监控
一起小规模结核爆发流行的调查与控制
某中学高三年级小规模结核爆发
疫情开展阶段
结核病例及分布
初始病例
1例〔7班〕
疫情时间 6月初
第一批疫情
5例〔7班〕
8-9月
第二批疫情
10例〔8例7班〕
9月
疫情初处理
自行住院
全年级师生胸透, 胸透阴影预防性
服药
全年级师生PPD试 验
对师生采血进展 IGRA检测
IGRA方法辅助诊断结核性胸膜炎:
天津市海河医院,124例受试者,包括安康对照 者30名、初诊结核性胸膜炎患者37例、恶性胸腔 积液患者32例、非结核性胸膜炎患者25例。
结论:用IGRA方法对结核性胸膜炎诊断的敏感性、 特异性和诊断准确率分别为91.9% 、90.6% 、 91.3% ,优于ADA和TB-Ab。
• 肺外结核的辅助诊断:TB-IGRA取静脉血进展检测,抑制 肺外结核患者痰样找不到结核菌,病灶部位取样难的问题。
• 呼吸系统疾病与结核的鉴别诊断:发热、咳嗽、咳痰>2周; 咯血;胸痛等病症疑似结核,胸片/CT不能明确诊断者; 抗炎治疗治疗效果不佳患者的结核排查,阴性结果在很大 程度上可以排除结核。
TB-IGRA的临床应用
综上,TB-IGRA: 高特异性,高灵敏性,体外,全血,定量检测
应用方向: 肺结核辅助诊断 肺外结核辅助诊断 结核感染排查 潜伏性感染监控,抗结核治疗追踪
TB-IGRA在呼吸科应用汇总
• 肺结核的辅助诊断,尤其是细菌学检测阴性的肺结核的辅 助诊断:TB-IGRA从细胞水平上检测结核感染,检出率高, 早期感染即可检出,实现早诊断早治疗。
Age (years)
Without symptom No. %
15~59 308 46.2
≥60 253 39.8
Total 561 43.1
With symptom
No.
%
358 53.8
382 60.2
740 56.9
Total
No. 666 635 1301
% 100.0 100.0 100.0
IGRA阳性者进展预 防性服药

×
疫情控制
潜伏性感染流调结果
➢ 2010年流调发现的1301例结核感染者中,有病症者740例 (56.9%),无病症者561例〔43.1%〕。
➢ 有病症结核病患者中,60岁及以上年龄组比例高,为60.2%
➢ 有病症就诊的346例肺结核患者,只有124例患者〔35.8%〕被 诊断为肺结核,其次为气管炎〔18.8%〕和感冒〔16.5%〕等
PPD 试验:弱阳性多见,但不能鉴别MTB和NTM感染。 细菌学检查:常规痰涂片无法鉴别MTB和NTM。 培养特性:固体培养基上,NTM菌落常光滑,局部菌落有色素产生
,生长迅速,且在含PNB(对硝基苯甲酸)和含TCH (噻吩二羧酸肼) 选择性培养基上均可生长,而结核分枝杆菌只在TCH选择性培养基 上生长。
临床应用案例
MTB与NTM的鉴别诊断: 某院感染科病人,男 临床病症:发热1周,咳嗽,少量痰 检测结果:两次痰涂片〔+〕,两次TB-IGRA〔-〕,肺部X射线 无异常,后经菌培鉴定为菌培〔-〕 结果分析:痰涂片不能区分非结核分枝杆菌,造成假阳性,而 TB-IGRA与菌培结果相符,对结核分枝杆菌有很好的特异性。 临床诊断:鸟型分枝杆菌感染
➢ 定量考察
➢ ELISA检测平台定量考察效应T细胞受刺激后γ-干扰素释放 总量
国内外相关研究
TB-IGRA快速简便,是一种值得推广的检测方法:
张华,黄圣文,罗振元.结核分枝杆菌r-干扰素体外释放定量试验诊断结核感染的临床应用.中华医学院 感染学杂志 2009年第19卷第14期
国内外相关研究
国内文章
临床应用案例
肺结核辅助诊断: 某院呼吸科病人,男 临床病症:发热1周,咳嗽 检测结果:TB-IgG(-),TB-IGRA〔+〕T-N 的值是21.5pg/ml 结果分析:TB-IgG灵敏度低,易漏检。
临床应用案例
肺外结核辅助诊断: 某院感染科,女,75岁 临床病症:发热数日,胸痛,干咳 检测结果:X射线胸腔积液影像,积液涂片 〔-〕、积液培养〔-〕、TB-IGRA T-N 350pg/ml,积液单核细胞增多,血沉快
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使用抗TNF药物前排查结核的意义
发病率 /100.000 患者/年
100
136
80
发病率 /100.000 患者/年
60
40
20
0 抗TNF药物
14.4
英国普通人群
Dixon W G et al. Ann Rheum Dis 2010;69:522–528.
Tubach et al. Arthritis & Rheum 2009; 60: 1884-1894
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