磁处理对马尾松种子酶活性的影响

由活性氧等 自由基引起 的， 从而降低了膜 的流动性和柔韧性 。
另一方面， 由于植物体内存在许多保护酶类型 ， 如超 氧物歧化 酶 （Ｏ 、 Ｓ Ｄ） 过氧化氢酶 （ ＡＴ） Ｃ 、过氧化物酶（Ｏ 、 Ｐ Ｘ） 谷胱甘 肽还原酶 （ Ｒ） Ｇ 和抗坏血酸还原酶 （ ＡＫ） 以及其他还原性物
中： Ｏ Ｓ Ｄ总活性 以鲜 重酶单位每 １ｇ表示 ，比活力单位以酶 单位每 １ｍｇ蛋 白表示 ；Ａｃ 为对 照管的吸光度 ， 为样 品 Ｋ ＡＥ 管的吸光度 ，Ｖ为样品液总 体积 （ ｍＬ）Ｖ． ｒ 为测定时样品用 量 （ ｍＬ） ，Ｗ 为样 品重 （ ） ｇ ，蛋白质含量单位为 ｍｇ ｇ ／。 １３ ３ 过氧化氢酶 活性 测定 。每 次随机抽取 ３ ｇ ．． 马尾松种 子， 按试验设置 方法处理马 尾松种子 ， 每处 理重 复２ 次。量 取ｐ Ｈ７的磷 酸缓冲液 ５ ０ｍＬ，用少量缓冲液把材料研磨成 匀浆 ， 再洗入三 角瓶 中， 然后放在恒 温水浴锅中 （ Ｏ℃） ３ 浸
质， 它们都可清 除活性氧 ， 从而降低膜脂过 氧化 。种子在播前
进行预处理 ， 可使非休眠种子体内保护性酶含量增加 、 活性提
酶活性计算方法 ：以每 １ ｍｉ／ ｎ ｍｇ蛋 白过氧化 物酶增 加光
密度△ Ｏ． Ｄ值表示 ，即△ Ｏ． Ｄ／ （ ｍｇ蛋白 ・ ｉ 。 ｌ ｒ ｎ） ａ １３２ 超氧物歧化酶活性 测定 。ＮＢ 法 ： ．． Ｔ 参照Ｇａ ｎ ｐｉｓ ｉ ｏ ｌｉ ｎ ｔ 和 Ｒｅ 利用 Ｓ Ｄ抑制淡蓝 四唑 （ Ｂ ｉ ｓ Ｏ Ｎ Ｔ）在荧光下的还原作 用 ，３ｍＬ反应液含 １ ｌＬ甲硫氨酸 、６ ３ ｍｏ／ ３×１一 ｍｏ／ ０ ｌ Ｌ ＮＢ Ｔ、１ ３× ｉ ｍｏ／ ． ０ ｌ Ｌ核黄索、０ ０ ｌ Ｌ ｐ ． ．５ ｍｏ／ Ｈ７８的
高，从 而抑制膜脂 过氧化 ，有助 于种 子膜 系统 的修复… 。 磁处理 是指 利用适 当磁 场在播种前对种 子进行处理 ， 采
用适 当的磁 场强度处理种 子 ，能提高种 子体 内～ 些酶 的活
性， 改善种子 的播种 品质 ， 高苗木质量 Ｊ 提 。本文着 重研 究了磁 处理对 马尾松 种子体内酶活性 的影响， 测定 了处理前 后种子体 内超氧物歧化酶 、 过氧化氢酶 、 过氧 化物酶活性的 变化 ， 以期为林业生产提供可 靠的数据依据 。
酶和超氧物歧化酶 的活性在 ０． Ｔ、１ ｍｉ ３ ５ ｎ处理下效果最佳 ；磁 处理 对高活力 的马尾松种子 （ 发芽率为 ８ ％）体 内超 ３
氧物 歧化 酶 和过 氧化 氢酶 活性 有～ 定 的抑 制作 用 。 因 此 ，在一 定磁 场 强度 和处 理时 间范 围 内 ，磁处 理能 提高 中等 活力 的马 尾松 种 子体 内酶 活性 ，从 而 改善 种子 的播 种 品质 ，提 高 种子 利 用率 。 关键 词 ：马尾 松 ；磁 处 理 ；酶 活性 。过 氧化 物酶 ；超氧 物歧 化 酶 ；过氧 化 氢酶
上海农业科技
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磁 处 理 对 马尾 松 种 子酶 活 性 的 影 响
许钧 鑫 吴 （上海 市金 山 区林 业站 １ 文 尹 中明 沈 霞。 ２ １９ ； ０ ５ ９ 上海 市林 业总站 ２ ０ ７ ） ０ ０ ２
摘 要 ：为研 究马 尾 松种 子 通 过磁 处理 后 其体 内酶 活性 的 变化 规律 ，为林 业 生 产提 供 可靠 的 数据依 据 ，对 ２ 种不 理 时 间进行 处理 ，测 定 了不 同处理 下马 尾松种子 体 内过氧 化物 酶 、超 氧物 歧 化酶 和 过 氧化 氢酶 的 活性 。结 果表 明，在 一 定磁 场 强度 和 处理 时 间范 围 内 ，磁处理 能 提高 中等活 力的 马尾松 种子 （ 发芽 率 为 ６ ％ ）体 内过氧 化物酶 、超 氧物 歧化 酶和 过 氧化 氢酶 括性 ，其中过氧 化物 ６
１ 材料与方法
ｉ Ｉ 试验 材料 ．
磷酸缓冲 液。取 ４ 支试管 ， 支为对照管 ， ２ ２ 另 支为 测试管 ，
对照管 中加入 ０ ０ ｌ Ｌ ｐ ． 的磷酸缓冲液１ ０ｕ 测 ．５ ｍｏ／ Ｈ７ ８ ０ Ｌ，
试管 中加入 Ｓ Ｄ粗提 液 １０ ｕ Ｏ ０ Ｌ，于 ２ ℃下 ，用 ４ ０ ０ｌ ５ ０ ｘ 光照 １ ｉ ５ ｒ ｎ，以 ＮＢ ａ Ｔ反应液为 空白调 零测定 ＯＤ ６ ５ 值 以 ０
种子在 发育过程 中达到生理成熟时 ， 其活力达到最高水
平， 以后随时间的延长 ， 活力逐渐下降。有关种子活力下降的 原 因很多， 近年来， 一些研 究认 为， 膜脂过氧化引起细胞 膜系 统受损是造成种子活力下降的关键因素 ，而膜脂过氧化又是
碎成匀浆 ， 冷冻离心 （０ ０ ｇ ２ ｎ， ４ ０ ） ０ ｍｉ 温度控 制在 ５ ℃， 取 １ｍＬ 清液用缓冲液稀释 １ 倍 。取稀释 液０ ５ ｍＬ加入 上 Ｏ ． 盐酸邻苯二胺 、 双氧水和 柠檬酸缓冲 液的混合液中， 用分 光 光度计 在 ５ ０ ｒ 波长下用 ５ ｎ 光径 比色杯进行 比色 ，１ ０ ｉ ｍ ｍ
Ｓ Ｄ抑制 Ｎ Ｔ光化还原 的 ５％为～ 个酶 活性 单位。公式计 Ｏ Ｂ ０ 算： Ｏ Ｓ Ｄ总活性 ＝ （ Ｋ ＡＥ Ａｃ— ）×Ｖ ×２ （ Ｋ×Ｗ ｒ， ／ Ａｃ ＸＶ＇ 式 ）
试验材料 ：中等 活力 （ 发芽率为 ６ ％）和高活力 （ ６ 发芽 率为８ ％） ３ 的马尾松 干种子 ， 由浙江 省林 木种苗管理站提供 ，
ａ ｎ读 次光密度 ， ｒｉ １ 连续 ５ ， 次 测定温度保持在 ２ ℃。酶蛋 ５ 白的测定 ：制作 ｌ ０ ｇ ｍＬ和 １０ ０ ｇ ｍＬ牛 ～１０ ｕ ／ ０ ～１０ ０ ｕ ／ 血清蛋 白的标 准曲线 ，取酶液 ０ １ｍＬ加入 ５ ｍＬ考马斯蓝 ． 溶液 中， 稳定后 比色。在标 准曲线上查蛋白含量。过氧化物