血清肌酸激酶CK测定

血清肌酸激酶CK测定
1 检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理
德国临床化学学会(DGKC)和国际临床化学学会(IFCC)
肌酸激
推荐的连续监测法。

ADP + 磷酸肌酸肌酸 + ATP
己糖激酶(HK)
ATP + 葡萄糖 ADP + 葡萄糖-6-磷酸
(G6P-DH)
葡萄糖-6-磷酸+NADP+6-磷酸葡萄糖酸
+NADPH+H+
NADPH在340nm处有特异吸收，通过测定NADPH生成速率计算出CK活性。

3 标本：
3.1 病人准备：无特殊要求。

3.2 类型：血清或EDTA血浆。

3.3. 标本存放：稳定性：2～8℃保存稳定7天;15～25℃保
存稳定1天;-20℃保存稳定4周（避光保存）。

3天内的活性
损失：2～8℃保存24小时或18～22℃保存1小时至少损失
10%。

3.4 标本运输：常温条件下保存运输。

3.5 标本拒收标准：细菌污染的标本。

4 实验材料
4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司CK试剂盒（沪
食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）
4.1.1 试剂组成：
试剂1（R1）：
D-葡萄糖27mmol/L 咪唑缓冲液
60mmol/L
乙酸镁14mmol/L NADP 2.7mmol/L
N-乙酰半胱氨酸27mmol/L AMP 7mmol/L
试剂2（R2）：
磷酸肌酸 160mmol/L 6-磷酸葡萄糖脱氢酶≥
20KU/L
ADP 11mmol/L 己糖激酶≥
20KU/L
4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：2～8℃避光、密封的储存条件下，
试剂（盒）自生产之日起有效期为12个月。

试剂1 与试剂
2 启用后，在2～10℃避光的条件下可稳定20天。

4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，
或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使
用。

4.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠防腐剂。

不可入口！避免
接触皮肤及粘膜。

应采取必要的预防措施使用试剂。

4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的CK 校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器
AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪
6 操作步骤
6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。

6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。

7 质量控制
在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

8 计算方法
以CK复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。

9 参考值范围：（U/L）
成人：女性 26～140 U/L
男性 38～174 U/L
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。

根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。

我室参考值:0-160 u/L
10 临床意义
肌酸激酶（CK）主要由存在于肌肉中的同工酶（CK-M）和存在于脑中的同工酶（CK-B）组成。

在血清中CK形式为CK-MM，CK-MB，CK-BB和巨酶等的二聚物。

在心肌损伤或骨
骼肌疾病时可以观测到CK活力的升高。

CK和CK-MB一起检测有助于心肌梗死的诊断和监视。

11 操作性能
11.1试剂空白：a)试剂空白吸光度应不大于0.500；b)试剂空白吸光度变化率(△A/min)应不大于0.001。

11.2分析灵敏度：20U/L样本的吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.003。

11.3线性范围：试剂（盒）线性范围应覆盖[20～1000]U/L。

a) 线性相关系数（r）应不小于0.990；b) [≤30]U/L范围内的线性偏差应不超过±8.0U/L，[＞30]U/L范围内的线性偏差应不超过±10%。

11.4准确度：相对偏差（B）应不大于±10%。

11.5精密度：（1）重复性：变异系数（CV）应不大于5%；（2）批间差：相对极差（R）应不大于10%。

11.6稳定性：试剂（盒）在2～8℃贮存至12 个月末，试剂性能应符合试剂空白、分析灵敏度、线性范围、精密度（重复性）和准确度的要求。

12 超出范围结果处理
本法线性上限血清/血浆为1000U/L。

如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%的氯化钠溶液作1:4稀释，重新测定，结果乘以5。

13 病危报警值的处理
当血清CK测定值>1000U/L,在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。

14 方法局限性
14.1测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准、测定温度和测定时间的控制。

14.2样本中甘油三酯浓度≤1500mg/dL、胆红素浓度≤20 mg/dL、血红蛋白浓度≤50mg/dL时，对测定无干扰。

14.3试剂（盒）启用后，在2～10℃避光的条件下可稳定20天。

若试剂混浊，或以水为空白在波长340nm 处的吸光度值大于0.500，则不能使用。

15 补救措施
当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。

16 参考文献
16.1叶应妩，王毓山，申子瑜主编·全国临床检验操作规程·中华人民共和国卫生部医政司编·(第四版)
16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社，2012年第5版
16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版
16.4试剂说明书。