清华大学 圆二色谱课件

椭圆偏振光
（I）振幅、频率、相位完全相同，旋转方向相反的 左右旋圆偏振光合成平面偏振光 （II）两束振幅不同、但频率相同，旋转方向相反的 左右旋圆偏振光将合成椭圆偏振光
光活性（Optical activity）
平面偏振光经过光学活性介质后，如两圆偏振光振 幅相同（光吸收相同），但相位不同（传播速度不、 同），合成的平面偏振光的偏振面旋转一个角度α .
圆二色谱 Circular Dichroism (CD)
黄嘉欣
清华大学
2010.11.16
基本概念
• • • • • 平面偏振光 右旋偏振光 椭圆偏振光 光活性 圆二色性
平面偏振光（plane polarized light）
右旋偏振光
振幅保持不变，而方向周期变化，电 场矢量绕传播方向螺旋前进
• Acceptable: 1. Potassium Phosphate with KF, K2SO4 or (NH4)2SO4 as the salt. 2. Hepes, 2mM. 3. Ammonium acetate, 10mM.
• Avoid: Tris; NaCl; Anything optical active, e.g. Glutamate
蛋白芳香族氨基酸残基微环境
蛋白质中芳香氨基酸残基，如色氨酸(Trp)、 酪氨酸(Tyr)、苯丙氨酸(Phe)及二硫键处 于不对称微环境时， 在近紫外区250～ 320 nm，表现出 CD信号。
吸收值在0.6~1.2之间能获得好的信噪比，若 吸收值超过2，则数据变得不可靠。
溶剂吸收
Buffer Systems for CD Analyses
1、蛋白质二级结构 2、药物与蛋白二级结构的结合 3、蛋白质折叠 4、外界环境对蛋白质构象的影响 5、膜蛋白的二级结构和超二级结构
CD signal of a protein depends on its second structure
• 近紫外CD谱可作为一种灵敏的光谱探针， 反映Trp、Tyr和Phe及二硫键所处微环境的 扰动，能用来研究蛋白质三级结构精细变 化。 • VIP: 近紫外CD光谱测量所需蛋白质溶液的 浓度一般比远紫外CD测量高1～2个数量级.
圆二色性(circular dichroism）吸收
左右旋圆偏振光在介质中的传播速度不同，而且 吸收也不相同，通过介质后平面偏振光成为椭圆 偏振光
The peptide bond is inherently asymmetric & is always 用