草莓抗炭疽病的新种质资源筛选

草莓抗炭疽病的新种质资源筛选
曾蓉;张繁琴;高清华;陆金萍;戴富明
【摘要】Anthracnose is a main strawberry disease which has two different species, Colletotrichum gloeosporioid.es and Colletotrichum acutatum in Shanghai. In this study, fifty strawberry germplasms resisting the two pathogens with petiole inoculation were assessed There is great distinction among all germplasms. 103,117 exhibited high resistance to C. Acutatum and 104 showed high resistance to C. Gloeosporioid.es, but 76 had the high susceptibility to two pathogens. The strawberry germplasms were divided into two types: the first was identical resistance and the second was no-identical resistance. The former included 103,99,P14 of
89X103,117,with high resistance and 76 with low resistance,the second included 104 with the low resistance to C. Acutatum and high resistance to C. Gloeosporioides , P39 of IX103 with the high resistance to C. Acutatum and low resistance to C. Gloeosporioides.%草莓炭疽病是草莓生长的主要病害之一.其病原在上海有2种,分别为胶孢炭疽病菌(Colletotrichum gloeos porioides)和尖孢炭疽病(C.acutatum).本文通过叶柄接种法测定了50个不同的草莓种质材料分别对2种病原菌的抗性.结果表明,在测试的不同草莓种质资源中,对2种不同的炭疽病菌均存在明显的抗性差异,103、117对C.acutatum有较强的抗性,104对Cgloeosporioides有较强的抗性,而76对C.acutatum和
C.gloeosporioides均表现出较强的感病性.草莓组合/品种对2种炭疽病菌的抗性水平又可分成2种不同类型:第1种类型是对2种不同的炭疽病菌的抗性表现一致,如103、99、组合89×103 P14、117等对2种病原菌的抗性都很高,76对2种
病原菌抗性都很低；第2种类型是对2种炭疽病菌抗性表现不一致,104对
C.acutatum抗性较低而对C.gloeosporioides抗性较高,组合1×103 P39对C.acutatum抗性较高而对C.gloeosporioides抗性较低.
【期刊名称】《上海交通大学学报（农业科学版）》
【年(卷),期】2011(029)004
【总页数】4页(P28-31)
【关键词】草莓;种质;胶孢炭疽病菌;尖孢炭疽病菌;抗性
【作者】曾蓉;张繁琴;高清华;陆金萍;戴富明
【作者单位】上海市农业科学院植物保护研究所,上海201403;上海市设施园艺重点实验室,上海201403;上海市农业科学院植物保护研究所,上海201403;上海市农业科学院林木果树研究所,上海201403;上海市设施园艺重点实验室,上海201403;上海市农业科学院植物保护研究所,上海201403;上海市农业科学院植物保护研究所,上海201403;上海市设施园艺重点实验室,上海201403
【正文语种】中文
【中图分类】S436.68+4
草莓（Fragaria ananassa Duchesne）有“果中皇后”之称，营养丰富，经济价值很高。

我国夏季高温使得草莓炭疽病的发生危害非常严重［1-3］，而草莓种苗的调运使得草莓果实炭疽病的危害也有报导［1］。

危害草莓的炭疽病菌有3种：胶孢炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）、草莓炭疽病菌
（C.fragariae）和尖孢炭疽病（C.acutatum），这3个不同种的炭疽病菌均能侵
染危害草莓的根冠、匍匐茎、叶柄、叶片等部位，其中侵染危害草莓的叶柄、匍匐茎对草莓苗的繁殖影响尤为巨大［2］。

本文通过人工接种的方法对草莓育种材料的抗炭疽病性进行鉴定，为今后草莓抗炭疽病育种提供抗源材料。

1 材料和方法
1.1 炭疽病菌菌株
接种用的炭疽病菌菌株为96-11-14-02-01和2004-06-08-01。

其中96-11-14-02-01为胶孢炭疽病菌（C.gloeosporioides），2004-06-08-01为尖孢炭疽病（C.acutatum）。

1.2 接种体制备
病菌在马铃薯蔗糖琼脂培养基上，26℃、黑暗条件下培养4～5d后，用打孔器打小圆孔，造成许多伤口后继续26℃、光照培养，待在切口处出现大量的淡黄色粘状物（即分生孢子）后取出。

沾取黄色粘状物于无菌水中混匀，用血球计数板将孢子浓度调节至105个／mL。

1.3 抗源材料
50份草莓种质材料由上海市农业科学院林木果树研究所草莓组提供。

1.4 抗性鉴定
50份草莓种质材料分别种植于上海闵行华漕农科院大棚内，于4月上旬开始取健康植株第3张展开叶的叶片，切去复叶后，然后向离复叶方向剪取5cm长的叶柄作为接种材料。

在离复叶端用融化的固体蜡封住，用近叶端叶柄浸入孢子液中，5秒后取出，晾干。

在90mm×120mm保鲜盒内垫1层滤纸，加入无菌水湿润滤纸后加入长度适中的麦秆吸管，将接种晾干的叶柄搁置在麦秆吸管上，每个保鲜盒放置3个叶柄，每个种质材料设置3个重复。

26℃、黑暗条件下培养7d后，观察病菌在叶柄上的扩展长度。

2 结果与分析
2种不同的炭疽病菌接种分别接种共50种不同的草莓种质材料，其病斑扩展的长度如表1和表2所示。

表1 14种不同的草莓种质材料接种C.acutatum和C.gloeosporioides后的发病病斑长度Tab.1 The length of diseased lesions of 14strawberry germplasms inoculated with C.acutatum and C.gloeosporioides respectively（seven days post-inoculation）C.acutatum C.gloeosporioides组合／品种Combination／Cultivar平均病斑长度／cm Average lesion length标准差Standard deviation平均病斑长度／cm average lesion length标准差Standard deviation 1 1.2 0.34 1.7 0.59 2 1.4 0.31 1.9 0.38 33 2.5 0.87 1.4
0.35 34 1.6 0.31 2.3 0.94 41 1.0 0.27 1.6 0.63 44 2.0 0.55 2.2 0.75 89 1.0 0.82
1.6 0.39 104
2.0 0.78 0.1 0.00 106 2.3 0.86 2.4 0.63 103 0.8 0.32 1.3 0.39 90-15-1 1.1 0.40 1.3 0.39 77 1.5 0.21 1.8 1.12 99 1.0 0.82 0.8 0.60 157 1.3 0.84 1.8 0.98平均Average 1.5 1.8
表1中14个草莓材料接种C.acutatum后平均病斑长度为1.5cm，而接种
C.gloeosporioides后平均病斑长度为1.8cm；表2中36个草莓材料接种
C.acutatum后平均病斑长度为1.6cm，而接种C.gloeosporioides为2.8cm，说明C.gloeosporioides对草莓的致病力更强。

表2 36种不同的草莓种质材料接种C.acutatum和C.gloeosporioides后的发病病斑长度Table 2 The length of diseased lesions of 36 strawberry germplasms inoculated with C.acutatumand C.gloeosporioides respectively （seven days post-inoculation）注：- 没有鉴定Note：- “not identified”C.acutatum C.gloeosporioides组合／品种Combination／Cultivar平均病斑长度／cm Average lesion length标准差Standard deviation
平均病斑长度／cm Average lesion length标准差Standard deviaton 131×1
P3 1.4 0.42 - -P8 1.4 0.24 2.4 0.34 P9 1.3 0.19 2.3 0.27 P11 1.6 0.32 2.1 0.39 P14 1.1 0.16 - -P5 1.1 0.36 2.0 0.26 89×103 P1 1.7 0.28 2.5 0.06 P2 1.2 0.00 - -P3 1.3 0.22 - -P6 1.5 0.32 - -P10 1.2 0.20 2.3 0.21 P12 1.6 0.19 2.6 0.63
P13 1.3 0.26 - -P14 1.3 0.17 1.7 0.17 P18 2.4 0.53 - -P24 1.3 0.30 2.5 0.29
1×103 P39 1.2 0.26 3.0 0.51 P43 1.1 0.15 2.6 0.55 P49 2.2 0.57 2.4 0.27 P56 1.4 0.41 2.4 0.29 P17 1.3 0.32 2.4 0.61 P22 1.4 0.53 2.3 0.56 P12 1.5 0.47 2.5 0.46 P26 1.3 0.24 2.1 0.27 P3 1.1 0.26 - -P9 1.3 0.15 2.1 0.16 P2 1.5 0.65 2.3 0.17 P21 1.5 0.19 2.8 0.21 103×89P2 2.9 0.43 - -76 3.4 1.62 4.6 1.16 94 1.8 0.48 2.7 0.49 96 1.6 0.50 2.8 0.39 105 2.0 0.78 2.3 0.23 117 0.9 0.34 2.2 0.74 143 2.0 0.99 3.1 0.61久香Jiuxiang 2.0 0.42 3.6 1.13平均Average 1.6 2.8
在表1中，测定的14个草莓材料中103、99、89、41、90-15-1等对
C.acutatum侵染有很强的抗扩展能力，而33、104、106对C.acutatum 的抗扩展性较低；104对C.gloeosporioides有非常强的抗性，99和103对
C.gloeosporioides也表现出较强的抗性，而106、34对C.gloeosporioides的
抗性较差。

在14个草莓材料中103和99对2种病原菌均表现出较强的抗性，106对2种病原菌均表现出较低的抗性，而104则对C.acutatum 的抗性较差，
而对C.gloeosporioides抗性则很强（见图1）。

在表2中，测定的36个草莓材料中117、131×1P14、1×103P43、1×103P39、89×103P14等对C.acutatum侵染有较强的抗扩展能力，而76、103×89P2、
89×103P18对C.acutatum的抗性较低；89×103P14对C.gloeosporioides有
较强的抗性，而76、久香、143、1×103P39对C.gloeosporioides的抗扩展性
较差。

在36个草莓材料中89×103 P14对二种病原菌均表现出较强的抗性，76
对2种病原菌表现出较低的抗性，而1×103P39、117则对C.acutatum 的抗性
较强，而对C.gloeosporioides抗性则较低。

图1 叶柄接种法鉴定草莓对炭疽病的抗性注：草莓材料104，左边接种
C.acutatum，右边接种C.gloeosporioideFig.1 Resistance identification of strawberry germplasms Note：Strawberry line 104with stalk inoculation，the left ones inoculated with C.acutatumand the right ones inoculated with
C.gloeosporioides
3 结论与讨论
叶正文等［4］报道上海草莓炭疽病存在C.fragariae和C.acutatum2个种，但是其鉴定依据主要是病菌的培养性状和孢子形态。

任小杰等［1］、韩国兴等［2］、吴金平等［3］通过形态结合分子生物学方法分别对上海市郊、浙江建德、下沙及湖北武汉郊区等地苗期草莓炭疽病菌进行鉴定，均认为C.gloeosporioides是炭
疽病主要种类，而C.acutatum也分别在上海郊区草莓果实以及湖北武汉郊区
苗期草莓植株上零星发现。

长江中下游地区草莓繁苗期炭疽病危害最重的部位是匍匐茎、短缩茎和叶柄［2］，因此本文选用叶柄法对草莓种质材料进行抗炭疽病性的鉴定。

叶正文等［4］报道C.fragariae对草莓叶柄的致病性要强于C.acutatum，本文也得到了相似的结果，总体上C.gloeosporioides的致病力要强于C.acutatum。

C.fragariae的致病力强弱在抗、感草莓品种上表现是一致的，通过人工接种草莓
主栽品种的抗性表现与田间自然表现是一致的［4］。

已报道草莓对炭疽病抗性的鉴定主要是对单一种类的炭疽病菌，如叶正文等［4］评价了上海郊区草莓主栽品种对C.fragariae的抗性，而王丰等［5］报道了辽宁
地区主栽品种对C.gloeosporioides抗性，草莓品种间均存在明显的抗性差异。

本文评价了不同的草莓品种、种质材料分别对C.gloeosporioides和C.acutatum，结果表明，草莓种质材料对2种不同的炭疽病菌抗性均存在明显差异，但是除了
材料间抗性差异之外，同一草莓种质材料对2种炭疽病菌表现出2种不同的抗性反应类型：对2种炭疽病菌抗性表现一致即抗性表现均高或者表现均低，抗性表现相反即对一种炭疽病菌表现抗病而对另一种表现感病，这个现象值得关注，在今后的草莓抗炭疽病育种时需要考虑草莓抗源材料对多种炭疽病的广谱抗性问题。

【相关文献】
［1］任小杰，梁艳，陆金萍，等.上海地区草莓炭疽病病原鉴定［J］.植物病理学报，2008，38（3）：325-328.
［2］韩国兴，礼茜，孙飞洲，等.杭州地区草莓炭疽病病原鉴定及其对多菌灵和乙霉威的抗药性［J］.浙江农业科学，2009，（6）：1169-1172.
［3］吴金平，曾祥国，宋志红，等.草莓炭疽病病原菌的快速鉴定［J］.湖北农业科学，2010，49（10）：2437-2438.
［4］叶正文，郑宏清，童尧明，等.上海地区草莓炭疽病病原种类及品种抗性研究初报［J］.上海农业学报，1997，13（1）：75-80.
［5］王丰，马跃，高秀岩，等.草莓品种对炭疽病抗性的鉴定技术研究［J］.果树学报，2008，25（4）：542-547.。