新年利是——荧光定量PCR试剂系列之五:TaqManAssay搜索流程

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新年利是——荧光定量PCR试剂系列之五:TaqManAssay
搜索流程
经过前一讲的介绍,相信大家对TaqMan Assay都有了一定的了解。

但是新的问题产生了,TaqMan Assay种类繁多,数量巨大,我们如何快速地从多达上千万的assay中找到需要的那一个呢?在这一讲中,我们将为大家介绍TaqMan Assay的搜索流程。

一、首先,您需要打开赛默飞官网主页()(图1)。

将鼠标放在“Popular”标题上方,在弹出的下拉框中选择“TaqMan Real-Time PCR Assays”的选项(图1)。

图1. 赛默飞官网首页
二、点开后会弹出如下的“测定方法检索工具”的界面(图2)。

图2. TaqMan Gene Expression Assay搜索结果
1. 选择“Gene Expression”;
2. 选择“All Gene Expression Assays”,也可以根据具体需求选择非编码RNA(Noncoding RNA only),融合基因检测assay (Fusion)等;
3. 选择物种。

如果为人/小鼠/大鼠以外的物种,点击“More”进行选择;
4. 在“Enter target information”下的对话框中输入基因名称或缩写,或在“Enter Single Sequence”下的对话框中输入序列;
5. 如果要查询多个基因的assay,也可以点击“Enter/Upload Multiple Targets”进行批量搜索;
6. 点击“Search”,得到搜索结果。

三、搜索结果的详细页面如下图3。

1. 一个基因可能会有不止一个assay,每个assay都有一个特殊的“身份证号”—Assay ID。

而货号则代表了这类产品的包装规格,通过Assay ID + 货号的组合可以找到唯一对应的TaqMan Gene Expression Assay。

2. 点开“详细信息”(View Details)可以进一步查看RefSeq、检测区段、扩增子长度等信息。

如果没有特殊要求,可以选择标注有“Best Coverage”的assay。

3. 点击“相关试剂”(Related Reagents),可以查看其他相关试剂;
4. 点击“常用内参”(Controls),可以查看常用的内参。

图3. TaqMan Gene Expression Assay搜索结果
除了基因表达assay之外,我们常用的TaqMan Assay还涵盖了SNP、CNV、mutation和microRNA检测等方面的应用,可以通过类似的方法进行搜索。

TaqMan SNP Assay的搜索(图4):
1. 选择“SNP Genotyping”;
2. 选择“All SNP Genotyping”。

如果只需要搜索药物代谢酶相关基因上的SNP位点,可以选择“Drug Metabolism Assays”;
3. 选择物种(目前提供人及小鼠相关的assay);
4. 在“Enter target information”下的对话框中输入rs号或基因名称等关键词;
5. 如果要查询多个SNP位点的assay,也可以点击“Enter/Upload Multiple Targets”进行批量搜索。

6. 也可以根据染色体位置,在“What chromosome location are you trying to find?”下面的对话框中,按染色体编号及起止位置进行搜索;
7. 点击“Search”,得到搜索结果。

图4. TaqMan SNP Assay搜索界面
TaqMan Copy Number Assay的搜索(图5):
1. 选择“Copy Number”;
2. 选择“All Copy Number Assays”;
3. 选择物种(目前提供人及小鼠相关的assay);
4. 在“Enter target information”下的对话框中输入基因名称等关键词;
5. 如果需要查询多个Copy Number Assay,也可以点击“Enter/Upload Multiple Targets”进行批量搜索;
6. 也可以根据染色体位置,在“What chromosome location are you trying to find?”下方的对话框中,按染色体编号及起止位
置进行搜索;
7. 点击“Search”,得到搜索结果。

图5. TaqMan Copy Number Assay搜索界面
TaqMan Mutation Detection Assay的搜索方法(图6):
1. 选择“Mutation Detection”;
2. 根据实验所选用的平台选择“Digital PCR”或者“Real-Time PCR”;
3. 在“Enter target information”下的对话框中输入基因名称、COSMIC ID等关键词;
4. 如果要查询多个Mutation Assay,也可以点击“Enter/Upload Multiple Targets”进行批量搜索;
5. 点击“Search”,得到搜索结果。

图6. TaqMan Mutation Detection Assay搜索界面
TaqMan MicroRNA Assay的搜索(图7):
1. 选择“MicroRNA”;
2. 选择“TaqMan MicroRNA Assays”。

也可以根据实际需求,选择“TaqMan Advanced miRNA Assays”,“Ta qMan Pri-MicroRNA Assays”(前前体)等选项。

3. 选择物种;如果为人/小鼠/大鼠以外的物种,点击“More”进行选择;
4. 在“Enter target information”下的对话框中输入miRBase ID,miRBase Accession Number等关键词(如果有miRNA的成熟体序列,建议优先采用成熟体序列进行搜索);
5. 如果要查询多个miRNA的assay,可以点击“Enter/Upload Multiple Targets”进行批量搜索;
6. 也可以在“Enter Single Sequence”下方的对话框中输入miRNA的成熟体序列进行搜索;
7. 点击“Search”,得到搜索结果。

图7. TaqMan MicroRNA Assay搜索界面
好了,关于TaqMan Assay的搜索,我们就先介绍到这里。

最后再送给大家一个小贴士,如果在搜索框中不输入任何关键词,则可以查找到该类别下面的所有assay。

小伙伴们,还不快试试这个新技能?
如果经过了一番搜索之后,很遗憾,没有找到需要的assay。

大家也别沮丧,我们还准备了独门秘籍,那就是通过定制的流程得到专属于自己的TaqMan Assay。

关于这部分的内容,敬请期待我们后续的内容哦。

祝各位老师,2018年身体健康,阖家幸福。

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