内含肽分离原理
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
内含肽分离原理
内含肽(intein)的分离原理基于其自切割特性。
内含肽能够在蛋白质中自行剪切,实现目标蛋白与亲和标签的分离。
通过基因工程技术,可以将亲和标签、内含肽及目标蛋白的基因序列连接在一起,在合适的宿主系统中表达出一个标签-内含肽-目标蛋白的三联体。
当这个“三元”融合蛋白复合物流经结合有几丁质的亲和纯化柱时,固定在树脂上的配体会吸附三联体的标签,从而截留融合蛋白。
随后,在某些简单的理化因素作用下(如pH、温度的变化或者巯基化合物的加入),该三联体从内含肽的N端或者C端发生自切割,释放目标蛋白。
而内含肽与CBD 的复合物会结合在亲和纯化柱上,使目的蛋白直接被洗脱下来。
以上内容仅供参考,建议查阅关于内含肽的文献或者咨询生物学家,以获取更准确的信息。