题解答

1、蛋白质的分离
由于该抽体液中三种蛋白质有着较大的差异：单看等电点，A蛋白与其他两种蛋白相差大，从而可以采用等电点沉淀法将A蛋白分离出来；再看相对分子量，C蛋白与其他两种蛋白差别大，即可运用凝胶过滤的方法将B蛋白与C蛋白分离。

故实验法案如下：
①等电点沉淀法分离A蛋白
取适量的抽提液于pH=8.5的缓冲溶液中摇匀，随后用适当的转速对其进行离心，沉淀即为A蛋白，而上清液主要是B与C蛋白的混合液。

②、凝胶过滤发分离B蛋白与C蛋白
取上清液进行合理的凝胶过滤，由于大分子不能进入凝胶孔中而小分子会进入凝胶空中，从而使得大分子先于小分子被过滤出来，即最先得到B蛋白，随后得到C蛋白。

2、十六软脂酸的计算
解：
①1mol 16碳软脂酸完全转变成乙酰CoA则经7次β-氧化，结果生成：
7mol FADH2、7molNADH、8mol 乙酰CoA
②7mol FADH2与7mol NADH经电子传递系统产生：
7mol FADH2得到7×2mol ATP
7mol NADH得到7×3mol ATP
③8 mol 乙酰CoA经三羧酸循环将有：
8 mol 乙酰CoA得到8×12mol ATP
④脂肪酸活化需消耗2mol当量的ATP
故总的ATP的结果为：
7×2+7×3+8×12－2=129（mol）ATP
所以1mol 16碳软脂酸经过β氧化，三羧酸循环和电子传递系统后得到129molATP。

补充：
1mol 2N碳酸脂经经过β氧化，三羧酸循环和电子传递系统后得到ATP的个数计算式为:
①经β氧化后得到：
（N-1）mol FADH2，（N-1）mol NADH和N mol乙酰CoA
②经电子传递系统产生：
（N-1）mol FADH2得到：（N-1）×2 mol ATP
（N-1）mol NADH得到：（N-1）×3 mol ATP
③经三羧酸循环：
N mol 乙酰CoA得到N×12mol ATP
④脂肪酸活化需消耗2mol当量的ATP
故总的ATP的结果为：
（N-1）×2+（N-1）×3+N×12－2= 17N-7（mol）ATP
3、酶的比活力，回收率，纯化倍数的计算
解：
①由比活力公式：
比活力=活力U/mg蛋白
得：
经凝胶柱后的比活力=7.8/1.3=6.0 (U/mg)
②由回收率公式：
回收率=每次总活力/第一次总活力×100%
得：
经凝胶柱后的回收率=7.8/118.6×100%=6.58%
③有纯化倍数：
纯化倍数=每次比活力/第一次比活力，而第一次的比活力=118.6/465.6=0.255 (U/mg)
故经凝胶柱后纯化倍数为：
纯化倍数=6.0/0.255=24
因此，经凝胶柱后的比活力为6.0U/mg，回收率为6.58%，纯化倍数约为24。