大蒜素对小鼠胸腺T淋巴细胞亚群的影响

大蒜素对小鼠胸腺T淋巴细胞亚群的影响
韩贵芝;王文军;王裕康
【摘要】Objective To explore the effects of allicin on T lymphocyte subsets of thymus in mice.Methods Eighty healthy adult Kunming mice were randomly divided into 4 groups including control group and allicin Low-dose group,Mid-dose group,High-dose group.Each group of 20 mice were treated with allicin by ga-vage,0.1ml/(10g﹒bw)once every day for 14 days which were killed after a week.The thymus was collect-ed to content the organ index then making single cell suspensions.FCM was used to study the effects of alli-cin on the percentage of CD4 +,CD8 +,CD4
+/CD8+lymphocyte of thymus.Results The thymus index,thy-mus lymphocytes CD4 +T cells and CD8 +T cells of all dose groups and the control group mice were all sig-nificant differences (F=6.82,FCD4
+=14.12,FCD8 +=8.27,P<0.05).And they had significant difference a-mong the three dose and control groups by pairwise comparisons (P<0.05).It had no difference effects on the percentage of CD4 +/CD8 +lymphocyte of thymus(F=2.44,P>0.05).Conclusion The thymus index and thymus lymphocytes CD4 +T cells CD8 +T cells of all-dose group mice were increased in a dose-dependent effect in mice.Allicin has a positive regulation on the immunity of mice.%目的：探索大蒜素对小鼠胸腺淋巴细胞亚群分化的影响。

方法将80只清洁级昆明小鼠随机分为空白对照组和大蒜素低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组20只，每天灌胃1次，灌胃容量为0．1ml／10g，连续灌胃14 d。

1周后将小鼠处死，分离胸腺计算脏器指数并制取单细胞
悬液，用流式细胞仪检测分析大蒜素对各组小鼠胸腺淋巴细胞CD4＋T细胞、
CD8＋T细胞及CD4＋／CD8＋值的影响。

结果空白对照组和各剂量组小鼠的胸
腺指数、胸腺淋巴细胞CD4＋T细胞和CD8＋T细胞值有差异（ F＝6．82，
FCD4＋＝14．12，FCD8＋＝8．27，P＜0．05），经两两比较空白组、低剂量组、中剂量组与高剂量组4组之间小鼠的胸腺指数、胸腺淋巴细胞CD4＋T细胞
和CD8＋细胞值均有较显著差异（P＜0．05），各剂量组之间的CD4＋／CD8＋值无差异（F＝2．44，P＞0．05）。

结论大蒜素使小鼠的胸腺指数、胸腺淋巴细胞CD4＋T细胞和CD8＋T细胞比例均升高，且存在剂量依赖性，对小鼠免疫力
具有正向调节作用。

【期刊名称】《济宁医学院学报》
【年(卷),期】2016(039)002
【总页数】4页(P87-90)
【关键词】大蒜素;CD4 +T细胞;CD8 +T细胞;胸腺指数;CD4 +/CD8 +值
【作者】韩贵芝;王文军;王裕康
【作者单位】济宁医学院公共卫生学院，济宁272067;济宁医学院公共卫生学院，济宁 272067;济宁医学院公共卫生学院，济宁 272067
【正文语种】中文
【中图分类】R392.11
大蒜素是我国学者于1987年从大蒜中分离获得的有机含硫化合物，化学名称为二烯丙基三硫化物(DATS)，分子式为C6H10S3。

近年来研究发现大蒜素具有抗肿瘤、抑制各种肿瘤细胞的体外增殖，预防心脑血管疾病、抗衰老、抗微生物、抗溃疡、
提高机体免疫力等多种药理作用[1-2],且证明其作用机制主要是阻滞细胞周期和/或诱导细胞凋亡[3-4]。

有研究表明大蒜提取物能增强巨噬细胞的功能、使免疫器官
指数增加、对具有免疫抑制或免疫性肝损伤的小鼠具有免疫增强的作用[5-8]。

大
蒜素的不良反应较少，使用安全，对于提高人体免疫力具有重要意义。

然而，大蒜素对正常小鼠胸腺淋巴细胞亚群分化的影响研究较少。

淋巴细胞在机体免疫功能中主要发挥细胞免疫的作用，根据其表面所表达CD分子的不同，可分为CD4+T细胞和CD8+T细胞两大亚群；CD4+/CD8+值可以反映机体的免疫失调状况。

本文研究不同剂量的大蒜素对各组小鼠胸腺淋巴细胞CD4+ T细胞、CD8+ T细胞及CD4+/CD8+值的影响。

健康清洁级昆明小鼠80只(由济宁医学院实验动物中心提供)，体重(20±2)g，雌
雄各半。

400目尼龙网、TD5M-WS多管架自动平衡离心机(上海卢湘仪离心机仪
器有限公司)、FASCalibur流式细胞仪(美国BD公司)。

大蒜素(吉安市青原区绿源天然香料油提炼厂)；Rat Anti-Mouse CD4 FITC标记
抗体(北京科悦达生物科技有限公司)；Rat Anti-Mouse CD8 PE-Cy5标记抗体(北京科悦达生物科技有限公司)；PBS缓冲液(北京Solarbio生物科技有限公司)。

采用统计分析软件SPSS 13.0进行数据处理。

分析各实验组和对照组之间的差异
用F检验，两两比较采用q检验，P<0.05具有统计学意义。

空白对照组和各剂量组小鼠的胸腺指数有差异(F=6.82，P<0.05)。

空白对照组、
低剂量组、中剂量组与高剂量组4组之间小鼠的胸腺指数经两两比较均有较显著
差异(P<0.05)，可以推断胸腺指数随大蒜素剂量增加存在剂量依赖性，结果见表1。

经统计学分析，空白对照组和各剂量组小鼠的CD4+T细胞和CD8+T细胞值有差异(FCD4+=14.12，FCD8+=8.27，P<0.05)，空白对照组、低剂量组、中剂量组与高剂量组4组之间小鼠的CD4+T细胞和CD8+T细胞值经两两比较均有较显著差异(q>q0.05(v，α)，P<0.05)，可以推断小鼠胸腺T淋巴细胞亚群CD4+T细胞
和CD8+T细胞值随大蒜素剂量增加存在剂量依赖性，各组样品的CD4+/CD8+
值无差异(F=2.44，P>0.05)。

结果见表2、图1。

大蒜具有多种药用、保健价值，被认为是免疫激发型中草药，可以诱生干扰素，抑制肿瘤坏死因子的生成，降低致癌物作用，有抗肿瘤、预防心脑血管疾病、抗衰老、抗微生物、抗溃疡、提高机体免疫力等多种药理作用[1-3]。

有研究表明大蒜提取
物能增强巨噬细胞的功能、使免疫器官指数增加、对具有免疫抑制或免疫性肝损伤的小鼠具有免疫增强作用[9-10]。

但是对免疫中枢器官胸腺及各淋巴细胞的分化还未见相关的报道。

本文采用不同剂量的大蒜素溶液对小鼠进行灌胃，建立不同剂量的动物模型，以探讨大蒜素对于胸腺以及胸腺淋巴细胞亚群分化的影响。

实验结果表明，各剂量组胸腺均较空白组有不同程度的增大，经统计学分析对照组和3个剂量组小鼠的胸腺指数有显著差异，经两两比较均有较显著差异，可以推
断胸腺指数随大蒜素剂量增加存在剂量依赖性，此研究结果表明大蒜素有刺激中枢免疫器官胸腺的发育的功能，使胸腺指数提高，提示大蒜素具有免疫激发性。

胸腺也是T细胞分化、发育和成熟的场所，免疫CD4+T细胞即辅助T细胞，具有协助体液免疫和细胞免疫的功能，也有部分细胞具有免疫抑制和细胞毒作用；CD8+T
细胞即细胞毒性T细胞，具有细胞毒作用，能够特异杀伤靶细胞。

对小鼠灌胃大
蒜素后，经检测小鼠胸腺免疫细胞CD4+T、CD8+T百分比含量均增加，提示一
定剂量的大蒜素可以促进胸腺淋巴细胞亚群的分化，提高两种T淋巴细胞的比例，增强体液免疫和细胞免疫的功能，加强免疫细胞对靶细胞的细胞毒作用，增强机体的免疫力。

经统计学比较空白对照组和各剂量组小鼠的CD4+T细胞和CD8+T细胞值有差异，经两两比较各组之间均有较显著差异，可以推断小鼠胸腺T淋巴细
胞亚群CD4+T细胞和CD8+T细胞值随大蒜素剂量增加存在剂量依赖性。

各组样品的CD4+/CD8+值无差异，表明小鼠的免疫功能处于稳态状态。

大蒜素作用机
制可能与刺激胸腺基质细胞分泌细胞因子或多种胸腺肽类分子有关，大蒜素对外周
血淋巴免疫细胞的影响有待于进一步的研究。

本研究为大蒜素的免疫机制的研究和对大蒜素作为免疫增强剂的开发和利用提供一定的参考。